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基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果检测方法

  • 专利名称
    基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果检测方法
  • 发明者
    任信, 朱小卫, 朱建华
  • 公开日
    2012年7月18日
  • 申请日期
    2012年3月6日
  • 优先权日
    2012年3月6日
  • 申请人
    中华人民共和国吴江出入境检验检疫局
  • 文档编号
    C12Q1/18GK102586396SQ20121005632
  • 关键字
  • 权利要求
    1.基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果检测方法,其特征在于,包括以下步骤步骤I)制备试样将样品剪成圆形,正反两面均在紫外下照射30min灭菌;步骤2)制备2,3,5-氯化三苯基四氮唑固体培养基用常规培养基配制方法配制固体培养基,按2/100000加入2,3,5-氯化三苯基四氮唑, 后塞上棉塞,121 °C,灭菌20min ;步骤3)制备2,3,5-氯化三苯基四氮唑半固体培养基用常规培养基配制方法配制半固体培养基,按2/100000加入2,3,5-氯化三苯基四氮唑,后塞上棉塞,121 °C,灭菌20min ;步骤4)制备接种菌悬液取培养好的菌悬液各O. 5ml加入4. 5ml灭菌的生理盐水试管中,即稀释至KT1的浓度, 充分混匀后取KT1浓度的菌悬液O. 5ml加入另一只4. 5ml灭菌的生理盐水试管中,即稀释至10_2的浓度,依次类推,直至稀释至10_5的浓度的接种菌悬液;步骤5)检测操作5.I)向已灭好菌的平皿中倒入2,3,5-氯化三苯基四氮唑固体培养基60 80ml,待凝固时,无菌镊子放入无菌玻璃杯,放入试样,功能面朝下,用镊子轻压试样,使其紧贴于培养基表面;每样均做4 6个平行;5.2)取制备好的接种菌悬液O. Iml加到试样表面,37°C ±1°C培养Ih ;5.3)取O. 3ml O. 6ml半固体2,3,5-氯化三苯基四氮唑培养基加入试样表面,将试样均勻覆盖,盖上皿盖;5.4)倒置平皿,于生化培养箱中培养,其中,大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌 37 0C ± 1°C培养18 24h ;白色念珠菌28± 1°C培养24 48h ;5.5)于体式显微镜或显微镜下观察菌落生长情况;步骤6)评价与报告试样抑菌率按下式(I)计算Xa-XbY=-X 100%Xa X(I)式中=Y为抑菌率,100% ;Xa为未经抗菌处理试样菌落数平均值,单位为cfu ;Xb为抗菌处理试样菌落数平均值,单位为cfu2.根据权利要求I所述的基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果检测方法,其特征在于, 所述菌悬液的制备方法如下从保存于4°C冰箱的菌种斜面中取一接种环菌,在平板培养基上划线,37°C ±1°C,培养18 24h ;取液体培养基20ml放入IOOml三角瓶中;用接种环从已培养18 24h的平皿中挑取一个典型的菌落,接种到液体培养基中,37°C ± 1°C,130r/ m振荡培养18 20h,即为菌悬液
  • 技术领域
    本发明涉及一种测试方法,具体的涉及一种基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果检测方法
  • 背景技术
  • 专利详情
  • 全文pdf
  • 权力要求
  • 说明书
  • 法律状态
专利名称:基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果检测方法人类的生活环境中存在着大量肉眼看不见的微生物,包括各种各样的细菌和真菌。在一般情况下,人们皮肤上的一些常驻菌起着保护皮肤免受致病菌危害的作用,但一旦机体免疫力下降,加上脱落的皮屑、分泌的汗液以及适宜的温湿度又能为细菌的繁殖提供良好的环境,它们中的少量致病菌就会大量繁殖,造成皮肤上菌群生态平衡的失调,侵入皮肤引起疾病。皮革制品作为消费量最大的革制品,由于汗和灰尘等原因,更利于真菌的滋生,因此,皮革制品像纺织品和公用设施等一样,在使用过程中也需要赋予抗菌性,以抑制细菌等的生长,阻断疾病的传播。目前,皮革制品的抗菌性能研究较少,同时缺少较好的抑菌效果检测方法。但随着人们生活水平的提高,对皮革产品不仅要求防水、防污、耐光可洗,也像纤维制品一样,要求赋予皮革抗菌功能。
为克服现有技术中不足,本发明的目的在于提供一种基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果检测方法,该检测方法操作简单,结果准确,重复性好,具有较高应用价值。为实现上述技术目的,达到上述技术效果,本发明采用了以下技术方案基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果检测方法,其包括以下步骤步骤I)制备试样将样品剪成圆形,正反两面均在紫外下照射30min灭菌;步骤2)制备2,3,5-氯化三苯基四氮唑固体培养基用常规培养基配制方法配制固体培养基,按2/100000加入2,3,5_氯化三苯基四氮唑,后塞上棉塞,121 °C,灭菌20min ;步骤3)制备2,3,5-氯化三苯基四氮唑半固体培养基用常规培养基配制方法配制半固体培养基,按2/100000加入2,3,5-氯化三苯基四氮唑,后塞上棉塞,121 °C,灭菌20min ;步骤4)制备接种菌悬液取培养好的菌悬液各O. 5ml加入4. 5ml灭菌的生理盐水试管中,即稀释至KT1的浓度,充分混匀后取 ο—1浓度的菌悬液O. 5ml加入另一只4. 5ml灭菌的生理盐水试管中,即稀释至10_2的浓度,依次类推,直至稀释至10_5的浓度的接种菌悬液;步骤5)检测操作5.1)向已灭好菌的平皿中倒入2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑固体培养基60 80ml,待凝固时,无菌镊子放入无菌玻璃杯,放入试样,功能面朝下,用镊子轻压试样,使其紧贴于培养基表面;每样均做4 6个平行;5. 2)取制备好的接种菌悬液O. Iml加到试样表面,37°C ±1°C培养Ih ;5. 3)取O. 3ml O. 6ml半固体2,3,5_氯化三苯基四氮唑培养基加入试样表面,将试样均匀覆盖,盖上皿盖;5.4)倒置平皿,于生化培养箱中培养,其中,大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌37 °C ± 1°C培养18 24h ;白色念珠菌28± 1°C培养24 48h ;5. 5)于体式显微镜或显微镜下观察菌落生长情况;步骤6)评价与报告试样抑菌率按下式(I)计算本发明公开了一种基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果检测方法,其包括以下步骤1)制备试样;2)制备2,3,5-氯化三苯基四氮唑固体培养基;3)制备2,3,5-氯化三苯基四氮唑半固体培养基;4)制备接种菌悬液;5)检测操作;6)评价与报告。本发明的基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果检测方法解决了菌落较小、样品不透明、不易观察和记录的缺点;检测方法操作简单,结果准确,重复性好,具有较高应用价值。


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