乳酸-纳米氧化锌抑菌复合物的制作方法[0002]乳酸是一种常见的有机酸，可以通过发酵法及化学合成法制备。乳酸具有有很强的防腐保鲜功效，可用在果酒、饮料、肉类、食品、糕点制作、蔬菜(橄榄、小黄瓜、珍珠洋葱)腌制以及罐头加工、粮食加工、水果的贮藏，具有调节PH值、抑菌、延长保质期、调味、保持食品色泽、提高产品质量等作用；乳酸的酸味适中，可以作为软饮料的首选酸味剂；乳酸作为天然的酸味调节剂，在面包、蛋糕、饼干等焙烤食品用于调味和抑菌作用，并能改进食品的品质，保持色泽，延长保质期。现代实验研究表明乳酸具有抑制病原微生物的作用。乳酸在制成药物抑菌剂时， 一次用量大，浓度高，且长期使用影响人体健康。
[0003]针对乳酸抑菌制剂一次用量大，浓度高和长期使用影响人体健康问题，本发明人经过大量实验，发现纳米氧化锌能有效增强乳酸溶液抑菌性能，减少乳酸的用量，降低乳酸的浓度，且采用两种低剂量的抑菌组合物，降低微生物产生耐药性的几率，更加的安全高效。本发明的目的在于提供一种乳酸-纳米氧化锌抑菌复合物，减少乳酸抑菌剂一次的用剂量及浓度和降低药品对人体的毒性。[0004]本发明提供如下的技术方案: 乳酸-纳米氧化锌抑菌复合物，含有乳酸，纳米氧化锌。[0005]抑制大肠杆菌0157时，乳酸的浓度为0.0075mol/L,纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL,纳米氧化锌颗粒粒径为200nm。[0006]抑制腊样芽孢杆菌时,乳酸的浓度为0.0065mol/L,纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL,纳米氧化锌颗粒粒径为200nm。
[0007]抑制沙门氏菌时，乳酸的浓度为O 0.006mol/L,纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL,纳米氧化锌颗粒粒径为200nm。
[0008]抑制金黄色葡萄球菌时，乳酸的浓度为0.032mol/L,纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL,纳米氧化锌颗粒粒径为200nm。
[0009]本发明还涉及，
所述抑菌组合物在制备抑制大肠杆菌0157药物中的应用。
[0010]所述抑菌组合物在制备抑制腊样芽孢杆菌药物中的应用。
[0011 ] 所述抑菌组合物在制备沙门氏菌药物中的应用。
[0012]所述抑菌组合物在制备抑制金黄色葡萄球菌药物中的应用。
[0013]本发明的有益效果是:纳米氧化锌能有效增强乳酸溶液抑菌性能，减少乳酸的用量，降低乳酸的浓度，且采用两种低剂量的抑菌组合物，降低微生物产生耐药性的几率，更加的安全高效。
[0014]实施例1
1，低浓度乳酸稀释液制备包括如下步骤:取分析纯乳酸作为原始液，用灭菌后的蒸馏水连续稀释，依次得到不同浓度乳酸溶液。纯乳酸的浓度为12.08mol/L。
[0015]2，纳米氧化锌胶体溶液的制备:取上海阿拉丁有限公司生产的纳米氧化锌0.01g溶于ImL的蒸懼水中，震荡混匀得到10mg/mL的纳米氧化锌胶体溶液,粒径为200nm。
[0016]3，乳酸-纳米氧化锌的联合抑菌作用 a细菌的培养
挑取LB琼脂培养基上的大肠杆菌0157的单菌落于IOmL LB肉汤培养基中，置于37°C培养箱中培养12 h，再按I %的接种量接种于5 mL的LB肉汤培养基中，37°C培养5h后，取I mL上述菌液用IxPBS水连续稀释2个梯度，最终的菌液大约为106CFU/mL。
[0017]b乳酸与纳米氧化锌在抑菌性能上的协同作用
分别取900 μ L上述已稀释好的菌液于1.5mL离心管中，分别加入100 μ L不同的抑菌剂 (具体见表一)。置于37°C下培养5h，每组平行3次。
[0018]C平板计数
将各组待测液用IxPBS连续稀释4个梯度，10_2、10_3、10_4各取出IOy L于LB平板上。平板吹干后，37°C下 倒置培养12h，长出菌落后计数，以30-300个菌落形成单位(CFU)为有效的计数范围。
[0019]实验结果如下:
表一