专利名称：茵栀黄制剂及制备方法和质量控制方法茵栀黄制剂清热解毒，利湿退黄，有退黄疽和降低谷丙转氨酶的作用；用于湿热毒邪内蕴所致急性、迁延性、慢性肝炎和重症肝炎(I型)，也可用于其他型重症肝炎的综合治疗。茵栀黄制剂的市场需求量很大，目前主要的剂型有口服液、注射液等，但尚未有茵栀黄咀嚼片的文献报道或生产。咀嚼片是近年来发展起来的一种速效制剂，与普通片剂相比具有以下优点分散状态佳、崩解时间短、药物溶出迅速；吸收快、生物利用度高，服用方便，尤其适合老人及吞服困难的患者服用。因为咀嚼片需咬碎后吞服，其口感尤为重要，而且不易采用一般的包衣工艺防潮，所以其制备工艺存在一定的难度。另外，现有茵栀黄制剂的质量控制标准简单，产品质量不能得到全面有效地控制，从而影响了其临床疗效。
本发明的目的在于提供一种茵栀黄制剂及制备方法和质量控制方法，本发明在现有技术的基础上，通过工艺研究和筛选，制得的咀嚼片口感良好，服用方便，崩解时间短，吸收快、生物利用度高；并且研究制定了合理有效的质量控制方法，提高了茵栀黄制剂的质量控制标准。本发明是这样构成的按照重量组份计算它主要由茵陈提取物10-50、栀子提取物5-40、黄芩苷60-150、金银花提取物10-50及辅料制备而成。具体的说它主要由茵陈提取物30g、栀子提取物16g、黄芩苷100g、金银花提取物20g及辅料制备而成。本发明中所用的茵陈提取物、栀子提取物、黄芩苷和金银花提取物既可为市售，也可按下述方法制备茵陈提取物的制备取茵陈，加水煎煮1-5次，合并煎液，滤过，滤液浓缩至每1ml含生药0.5-5g，加乙醇使含醇量达50-85％，冷藏10-60小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药3-8g，再加乙醇使含醇量达60-95％，冷藏10-60小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药7-12g，加2-10倍量水，冷藏20-100小时，滤过，滤液浓缩成稠膏状，真空干燥，即得。栀子提取物的制备取栀子，粉碎成粗粉，加水煎煮1-5次，合并煎液，滤过，滤液浓缩至每1ml含生药0.5-3g，加乙醇使含醇量达50-85％，冷藏10-60小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药2-6g，加乙醇使含醇量达70-90％，冷藏10-60小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药3-10g，加2-10倍量水，冷藏10-60小时，滤过，滤液浓缩成稠膏，真空干燥，即得。黄芩苷的制备取黄芩，粉碎成粗粉，加水煎煮1-5次，合并煎液，滤过，滤液加热至80℃，加盐酸调节pH1～3，静置，滤过，沉淀物加水搅拌成糊状，加40％氢氧化钠调节pH至4～7，滤过，滤液加等量乙醇，加热至80℃，加盐酸调节pH至1～3，使黄芩苷析出，滤过，用乙醇洗涤，干燥，即得；本品含黄芩苷C21H18O11不得少于90.0％。金银花提取物的制备取金银花，加水煎煮1-5次，合并煎液，滤过，滤液浓缩至每ml含生药0.5-5g，冷至30～70℃，加20～40％氢氧化钙溶液调节pH至10-14，滤过，沉淀物加乙醇，静置，用50％硫酸调节pH值至1.0～5.0，滤过，滤液用40％氢氧化钠溶液调节pH值至5.0～7.0，回收乙醇，浓缩至干，即得。
本发明茵栀黄制剂的制备方法为取茵陈提取物、栀子提取物、黄芩苷、金银花提取物混合均匀后，加入甘露醇、蔗糖、淀粉、甜菊素、枸橼酸以及硬脂酸镁制备成茵栀黄咀嚼片。
具体的制备方法为取茵陈提取物、栀子提取物、黄芩苷、金银花提取物混合均匀后，按原料∶辅料＝0.5-3∶1-5的比例加入甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝1-10∶0.5-5∶0.5-5的混合物，再加入1-10‰甜菊素和0.5-5‰枸橼酸，混合均匀，50-95％乙醇润湿制软材，制粒，干燥，整粒，细粉加入0.1-1％硬脂酸镁，充分混合均匀，压片，包薄膜衣制成咀嚼片。
茵栀黄咀嚼片、胶囊剂和颗粒剂的质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查以及含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括对制剂中黄芩苷、茵陈提取物、栀子提取物和金银花提取物的薄层色谱鉴别；含量测定是对制剂中黄芩苷的含量测定。
黄芩苷的鉴别方法是以黄芩苷对照品为对照，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5为展开剂的薄层色谱法；茵陈提取物的鉴别方法是以茵陈对照药材为对照，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1-10∶1-10∶0.5-5为展开剂的薄层色谱法；栀子提取物的鉴别方法是以栀子苷对照品为对照，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5-20∶0.5-5∶0.5-5为展开剂的薄层色谱法；金银花提取物的鉴别方法是以绿原酸对照品为对照，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上层溶液为展开剂的薄层色谱法。
所述的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)取药物，加入50-90％乙醇超声提取10-100分钟，放冷，滤过，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗绿色斑点；(2)取药物，加水使溶散，加入稀盐酸，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取茵陈对照药材，加水煮沸3～30分钟，放冷，滤过，滤液加入醋酸乙酯，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1-10∶1-10∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％氢氧化钾乙醇溶液，置200-600nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点；(3)取药物，加水使溶散，加入稀盐酸，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液；取栀子苷对照品，加乙醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5-20∶0.5-5∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取药物，加水使溶散，加入稀盐酸，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液；取绿原酸对照品，加乙醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷10％硫酸乙醇液，晾干后再喷3％三氯化铁乙醇液，在110℃加热至斑点清晰后，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的红色斑点。
黄芩苷的含量测定方法是以黄芩苷对照品为对照，以甲醇或乙腈∶水∶磷酸＝20-60∶30-70∶0.1-2为流动相的高效液相色谱法。
所述含量测定方法为照中国药典高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇或乙腈∶水∶磷酸＝20-60∶30-70∶0.1-2为流动相；流速1.0ml/min；检测波长280nm；理论板数以黄芩苷峰计算不得低于2500；对照品溶液的制备取黄芩苷对照品，精密称定，加乙醇-水溶液溶解制成每1ml含黄芩苷20-100μg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本药物，精密称定，研细，取药粉10-50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加乙醇-水溶液80-90ml，超声提取10-30分钟后，放冷，加乙醇-水溶液至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-25μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂含黄芩苷C21H18O11应为标示量的90.0～110.1％。
所述质量控制方法包括性状对于咀嚼片为薄膜衣片，除去薄膜衣后显灰黄色至棕黄色；味甜、微苦；对于胶囊剂内容物为灰黄色至棕黄色颗粒；味甜、微苦；对于颗粒剂为灰黄色至棕黄色颗粒；味甜、微苦；鉴别(1)取药物，加入50-90％乙醇超声提取10-100分钟，放冷，滤过，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗绿色斑点；(2)取药物，加水使溶散，加入稀盐酸，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取茵陈对照药材，加水煮沸3～30分钟，放冷，滤过，滤液加入醋酸乙酯，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1-10∶1-10∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％氢氧化钾乙醇溶液，置200-600nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点；(3)取药物，加水使溶散，加入稀盐酸，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液；取栀子苷对照品，加乙醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5-20∶0.5-5∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取药物，加水使溶散，加入稀盐酸，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液；取绿原酸对照品，加乙醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷10％硫酸乙醇液，晾干后再喷3％三氯化铁乙醇液，在110℃加热至斑点清晰后，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的红色斑点；检查应符合中国药典附录各制剂项下有关的各项规定；药典高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇或乙腈∶水∶磷酸＝20-60∶30-70∶0.1-2为流动相；流速1.0ml/min；检测波长280nm；理论板数以黄芩苷峰计算不得低于2500；对照品溶液的制备取黄芩苷对照品，精密称定，加乙醇-水溶液溶解制成每1ml含黄芩苷20-100μg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本药物，精密称定，研细，取药粉10-50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加乙醇-水溶液80-90ml，超声提取10-30分钟后，放冷，加乙醇-水溶液至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-25μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂含黄芩苷C21H18O11应为标示量的90.0～110.1％。
为了确保本发明质量控制方法科学、合理、可行，申请人对方中各成分的鉴别和含量测定方法进行了研究，具体试验资料如下本制剂为咀嚼片，与普通片剂相比，服用更为方便，因咬碎后吞服，所以口感尤为重要。
一、辅料选择实验1、填充剂选择1.1填充剂种类的筛选可做为填充剂的辅料主要有蔗糖①、甘露醇②、淀粉③等，我们通过实验，以制得干颗粒的休止角、可压性及吸湿性做为指标，对上述辅料中的一种或几种进行筛选。
表1 填充剂种类的筛选


表中结果可见，蔗糖易吸湿、可压性较差，但其口感好，有一定的粘合性；甘露醇不易吸湿，口感甘而清凉，流动性较好，可作为主要填充剂，淀粉不易吸湿，也可调节片子硬度。所以我们选择三种辅料混合作为填充剂。
1.2处方筛选1.2.1在前期已确定辅料类别的基础上，考察A(填充剂)、B(润滑剂)、C(原料药与填充剂的用量比例)3个因素对片剂成型质量的影响，以确定该片剂处方中辅料的用量和配比。L9(3)4正交试验设计，以片剂的外观、重量差异、硬度，干颗粒的休止角、吸水率、粒度分布作为考察指标。
表2 因素水平表

注G为甘露醇，T为蔗糖，D为淀粉。
样品制备称取干膏粉与辅料，过80目筛，混合均匀，90％乙醇润湿制软材，20目筛网制粒，50～60℃干燥，16目筛整粒，细粉加入硬脂酸镁，充分混合均匀，压片。
1.2.2测定干颗粒的休止角、吸水率、粒度以及片剂的外观、重量差异、硬度，结果见下表。
表3 L9(3)4正交试验设计及结果


表4 各指标评分方法

1.2.3方差分析及结论结果见下表。
表5 方差分析表

1.2.4结果分析通过总评分考察，从表3中极差R值大小显示，各因素作用主次为A＞C＞B；方差分析结果表明A因素、C因素的影响均有显著性意义(P＜0.05)，B因素无显著差异(P＞0.05)，以A1C2B3组合为佳。
2、矫味剂的筛选咀嚼片必须具有较好口感，才易被病人接受。填充剂中已选用大量甘露醇，甘露醇味甜而清凉也是较好的矫味剂，但制成的颗粒甜味不够，须再加入少量甜味剂。茵栀黄口服液中也曾加入0.5‰枸橼酸，经过筛选，在此我们选用甜菊素与枸橼酸作为矫味剂。结果见下表。
表6 矫味剂的筛选

注+好，++较好，+++很好。
结果评价从表6结果可见，加入甜菊素3‰和1‰枸橼酸作为作矫味剂时，口感最佳。
二、质量标准研究(一)黄芩苷含量测定方法研究1、黄芩苷是本制剂中的主要有效成分，黄芩苷的含量测定方法中文献报道较多有分光光度法、高效液相色谱法等。经我们研究发现，本制剂采用分光光度法对制剂中黄芩苷进行含量测定，其专属性不强，误差大，测定结果不稳定，相对标准偏差较高效液相色谱法大，故本发明采用高效液相色谱法测定黄芩苷的含量，以下是本发明制剂采用高效液相色谱法与分光光度法测定结果比较高效液相色谱法和分光光度法测定结果(n＝5)

2、高效液相色谱法检测方法研究2.1超声提取溶剂考察取药物细粉约30mg，置100ml量瓶中，分别加甲醇、乙醇、70％乙醇约90ml，超声提取40分钟后，放冷，加溶剂至刻度，摇匀，滤过(0.45μm)，即得供试液，测定黄芩苷的含量。测定结果见下表。
不同提取溶剂对黄芩苷含量测定的影响(n＝2)


试验结果表明，甲醇作溶剂的黄芩苷提取率较高，但是考虑到乙醇较甲醇毒性小，且成本较低，所以选用乙醇作溶剂提取，最佳提取溶剂为70％乙醇。
2.2精密度试验精密吸取黄芩苷对照品溶液(60.0μg/ml)10μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，重复进样5次，平均峰面积为2127967.4，RSD为0.83％。表明精密度良好。
黄芩苷对照品溶液精密度试验

2.3重复性试验取药物细粉，按本发明中含量测定项下供试液的制备方法，分别制备5份供试液，进样，测定峰面积，黄芩苷平均含量为0.2049g/g，RSD为0.55％。表明重复性良好。
制剂供试品中黄芩苷的重复性试验

2.4稳定性试验取药物细粉，按本发明中含量测定项下供试液的制备方法制备供试液，分别于0、2、4、6、8小时测定其黄芩苷峰面积，平均峰面积为1980407，RSD为1.11％。表明供试品溶液中栀子苷在8小时内稳定。
制剂供试品中黄芩苷的稳定性试验

2.5回收率试验采用加样回收法，分别取本制剂(平均含量为0.2049g/g)适量，精密称定，置100ml量瓶中，精密加入黄芩苷对照品(含黄芩苷为0.2158mg/ml)溶液15ml，按质量标准草案，制成供试液。分别精密吸取10μl注入液相色谱仪，记录色谱，测定含量，计算回收率。平均回收率为99.07％，RSD为1.23％，证明该方法可行。
供试品溶液中黄芩苷测定回收率试验

(二)黄芩苷的薄层色谱研究以黄芩苷对照品鉴别方中黄芩苷。
对照品溶液制备方法取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液制备方法一取药物0.2g，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取按工艺制备的缺黄芩苷的阴性样品2g，同法制得阴性对照溶液。
供试品溶液制备方法二取药物，研细，加70％乙醇溶液100ml，超声提取20分钟后，放冷，滤过，即得；取按工艺制备的缺黄芩苷的阴性样品，同法制得阴性对照溶液。
展开剂选择以醋酸乙酯、丁酮、甲酸不同比例的混合溶液，醋酸乙酯、丁酮、甲酸、水不同比例的混合溶液为展开剂。
结果以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5为展开剂。按照方法二制备的供试品溶液，斑点分离好，方法重现性较好。最佳展开剂为醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1。另外，在研究过程中发现，点于以含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，斑点大多分离较差，主斑点拖尾严重；点于聚酰胺薄膜上斑点显色清晰，阴性无干扰，方法重现性好。
(三)茵陈的薄层色谱研究以茵陈对照药材鉴别方中茵陈提取物。
对照品溶液制备方法取茵陈对照药材3g，加水50ml，煮沸5～10分钟，放冷，滤过，滤液加醋酸乙酯10ml，同法制成对照药材溶液。
供试品溶液制备方法一取药物1g，研细，加醋酸乙酯10ml回流提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。取按工艺制备的缺茵陈的阴性样品2g，同法制得阴性对照溶液。
供试品溶液制备方法二取药物1g，研细，加水10ml使溶散，加稀盐酸1ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。取按工艺制备的缺茵陈的阴性样品2g，同法制得阴性对照溶液。
展开剂选择以石油醚(60～90℃)、醋酸乙酯、甲醇不同比例的混合溶液；以石油醚(60～90℃)、醋酸乙酯、丙酮不同比例的混合溶液为展开剂；以石油醚(60～90℃)、苯、丙酮不同比例的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％氢氧化钾乙醇溶液，置紫外光灯下检视。
结果以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1-10∶1-10∶0.5-5为展开剂。按照方法二制备的供试品溶液，斑点分离好，方法重现性较好。最佳展开剂为60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝5∶3∶2。
(四)栀子的薄层色谱研究以栀子苷对照品鉴别方中栀子提取物。
对照品溶液制备方法取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液制备方法一取药物1g，研细，加乙醚15ml，振摇10分钟，弃去乙醚液，残渣挥干，加醋酸乙酯15ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取按工艺制备的缺栀子的阴性样品2g，同法制得阴性对照溶液。
供试品溶液制备方法二取药物1g，研细，加水10ml使溶散，加稀盐酸1ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。取按工艺制备的缺栀子的阴性样品2g，同法制得阴性对照溶液。
展开剂选择以醋酸乙酯、丙酮、甲酸、水不同比例的混合溶液；以醋酸乙酯、甲酸、水不同比例的混合溶液；以醋酸乙酯、丙酮、醋酸乙酯、水不同比例的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，分别喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰及喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。
结果按照方法二制备的供试品溶液，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5-20∶0.5-5∶0.5-5为展开剂，展开，取出，凉干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰，该方法背景干扰小，斑点显色清晰，阴性无干扰，方法重现性好。最佳展开剂为醋酸乙酯∶甲酸∶水＝10∶2∶1。
(五)金银花的薄层色谱研究以绿原酸对照品鉴别方中金银花提取物。
对照品溶液制备方法取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液制备方法一取本药物1g，研细，加水10ml使溶散，加稀盐酸1ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。取按工艺制备的缺栀子的阴性样品2g，同法制得阴性对照溶液。
供试品溶液制备方法二取本药物1g，研细，加甲醇10ml，放置12小时，滤过，滤液浓缩至2ml作为供试品溶液。取按工艺制备的缺金银花的阴性样品2g，同法制得阴性对照溶液。
结果以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，分别以下面显色方式显色检视(1)置紫外光灯(365nm)下检视，方法一和方法二均有阴性干扰；(2)喷以10％硫酸乙醇液，在110℃加热后，方法一斑点颜色较淡，不清晰，不便检视，方法二背景干扰大，斑点不清晰；(3)喷以3％三氯化铁乙醇液，“方法一板”和“方法二板”均有阴性干扰；(4)先喷10％硫酸乙醇液凉干后再喷3％三氯化铁乙醇液，在110℃加热后，“方法一板”红色斑点清晰，阴性无干扰，“方法二板”在供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显不同颜色的斑点。
故选用供试品溶液制备方法一，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1-20∶0.5-10∶0.5-10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，显色方式为(4)先喷10％硫酸乙醇液凉干后再喷3％三氯化铁乙醇液，在110℃加热至斑点清晰后，日光检视。最佳展开剂为醋酸丁酯∶甲酸∶水＝7∶2.5∶2.5的上层溶液。
与现有技术相比，本发明所提供的咀嚼片分散状态佳、崩解时间短、药物溶出迅速；吸收快、生物利用度高；口感良好，服用方便，尤其适合老人及吞服困难的患者服用；本发明质量控制方法精密度高，重现性好，回收率高，提高了茵栀黄制剂的质量控制标准，可有效确保该制剂的临床疗效。
以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。

本发明的实施例2茵陈提取物50g、栀子提取物5g、黄芩苷60g、金银花提取物50g、甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝1∶5∶0.5(重量比)的混合物、甜菊素、枸橼酸、硬脂酸镁取茵陈提取物、栀子提取物、黄芩苷、金银花提取物混合均匀后，按原料∶辅料＝3∶1的比例加入甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝1∶5∶0.5的混合物，再加入10‰甜菊素和5‰枸橼酸，混合均匀，50％乙醇润湿制软材，制粒，干燥，整粒，细粉加入0.1％硬脂酸镁，充分混合均匀，压片，包薄膜衣制成咀嚼片。本产品嚼服，一次4片，一日3次。
本发明的实施例3茵陈提取物10g、栀子提取物40g、黄芩苷150g、金银花提取物10g甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝10∶0.5∶5(重量比)的混合物、甜菊素、枸橼酸、硬脂酸镁取茵陈提取物、栀子提取物、黄芩苷、金银花提取物混合均匀后，按原料∶辅料＝0.5∶5的比例加入甘露醇∶蔗糖∶淀粉＝10∶0.5∶5的混合物，再加入1‰甜菊素和0.5‰枸橼酸，混合均匀，95％乙醇润湿制软材，制粒，干燥，整粒，细粉加入1％硬脂酸镁，充分混合均匀，压片，包薄膜衣制成咀嚼片。本产品嚼服，一次4片，一日3次。
本发明的实施例4所述咀嚼片质量控制方法包括性状为薄膜衣片，除去薄膜衣后显灰黄色至棕黄色；味甜、微苦；鉴别(1)取本制剂或其内容物，精密称定，研细，取药粉约30mg，精密称定，置100ml量瓶中，加70％乙醇约90ml，超声提取20分钟后，放冷，加70％乙醇至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤过，取续滤液，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液4μl，对照品溶液2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗绿色斑点；(2)取本制剂或其内容物，研细，加水10ml使溶散，加稀盐酸1ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取茵陈对照药材3g，加水50ml，煮沸5～10分钟，放冷，滤过，滤液加醋酸乙酯10ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液2μl，对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝5∶3∶2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％氢氧化钾乙醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点；(3)取本制剂或其内容物，研细，加水10ml使溶散，加稀盐酸1ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取的供试品溶液及对照品溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝10∶2∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取本制剂或其内容物，研细，加水10ml使溶散，加稀盐酸1ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取绿原酸对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝7∶2.5∶2.5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷10％硫酸乙醇液，凉干后再喷3％三氯化铁乙醇液，在110℃加热至斑点清晰后，日光检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的红色斑点；检查应符合中国药典附录片剂项下有关的各项规定；含量测定照中国药典附录高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水∶磷酸＝47∶53∶0.2为流动相；流速1.0ml/min；检测波长280nm；理论板数以黄芩苷峰计算不得低于2500；对照品溶液的制备取黄芩苷对照品10.0mg，精密称定，置50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，精密量取15ml，置50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，制成每1ml含黄芩苷60.0μg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本制剂或其内容物，精密称定，研细，取药粉约30mg，精密称定，置100ml量瓶中，加70％乙醇约90ml，超声提取20分钟后，放冷，加70％乙醇至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤过，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂含黄芩苷C21H18O11应为标示量的90.0～110.1％。
本发明的实施例5所述胶囊剂质量控制方法包括性状内容物为灰黄色至棕黄色颗粒；味甜、微苦；鉴别(1)取药物，精密称定，研细，取药粉约30mg，精密称定，置100ml量瓶中，加90％乙醇约90ml，超声提取10分钟后，放冷，加90％乙醇至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤过，取续滤液，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液4μl，对照品溶液2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝10∶1∶5∶5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗绿色斑点；(2)取药物，研细，加水10ml使溶散，加稀盐酸1ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取茵陈对照药材3g，加水50ml，煮沸3分钟，放冷，滤过，滤液加醋酸乙酯10ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5μl，对照药材溶液5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝10∶1∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％氢氧化钾乙醇溶液，置200nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点；(3)取药物，研细，加水10ml使溶散，加稀盐酸1ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取1次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝20∶0.5∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取药物，研细，加水10ml使溶散，加稀盐酸1ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取3次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取绿原酸对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝20∶0.5∶0.5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷10％硫酸乙醇液，晾干后再喷3％三氯化铁乙醇液，在110℃加热至斑点清晰后，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的红色斑点。
检查应符合中国药典附录胶囊剂项下有关的各项规定；含量测定照中国药典附录高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈∶水∶磷酸＝20∶70∶0.1为流动相；流速1.0ml/min；检测波长280nm；理论板数以黄芩苷峰计算不得低于2500；对照品溶液的制备取黄芩苷对照品，精密称定，加90％乙醇溶液溶解制成每1ml含黄芩苷20μg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本药物，精密称定，研细，取药粉10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加90％乙醇溶液90ml，超声提取10-30分钟后，放冷，加90％乙醇溶液至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各25μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂含黄芩苷C21H18O11应为标示量的90.0～110.1％。
本发明的实施例6所述颗粒质量控制方法包括性状为灰黄色至棕黄色颗粒；味甜、微苦；鉴别(1)取药物，精密称定，研细，取药粉约30mg，精密称定，置100ml量瓶中，加50％乙醇约90ml，超声提取100分钟后，放冷，加70％乙醇至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤过，取续滤液，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液4μl，对照品溶液2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1∶10∶0.5∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗绿色斑点；(2)取药物，研细，加水50ml使溶散，加稀盐酸5ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取5次，每次40ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取茵陈对照药材5g，加水100ml，煮沸30分钟，放冷，滤过，滤液加醋酸乙酯10ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液3μl，对照药材溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮＝1∶10∶5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％氢氧化钾乙醇溶液，置600nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点；(3)取药物，研细，加水50ml使溶散，加稀盐酸5ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取5次，每次40ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝5∶5∶5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取药物，研细，加水50ml使溶散，加稀盐酸5ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取5次，每次40ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取绿原酸对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯∶甲酸∶水＝1∶10∶10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷10％硫酸乙醇液，晾干后再喷3％三氯化铁乙醇液，在110℃加热至斑点清晰后，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的红色斑点。
检查应符合中国药典附录颗粒剂项下有关的各项规定；含量测定照中国药典附录高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶磷酸＝60∶30∶2为流动相；流速1.0ml/min；检测波长280nm；理论板数以黄芩苷峰计算不得低于2500；对照品溶液的制备取黄芩苷对照品，精密称定，加30％乙醇溶液溶解制成每1ml含黄芩苷100μg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本药物，精密称定，研细，取药粉50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加30％乙醇溶液80ml，超声提取10分钟后，放冷，加30％乙醇溶液至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂含黄芩苷C21H18O11应为标示量的90.0～110.1％。
本发明的实施例7所述胶囊剂质量控制方法可以包括
性状内容物为灰黄色至棕黄色颗粒；味甜、微苦；鉴别(1)取本制剂或其内容物，精密称定，研细，取药粉约30mg，精密称定，置100ml量瓶中，加70％乙醇约90ml，超声提取20分钟后，放冷，加70％乙醇至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤过，取续滤液，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液4μl，对照品溶液2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗绿色斑点；(2)取本制剂或其内容物，研细，加水10ml使溶散，加稀盐酸1ml，加热至约80℃，放冷，滤过，滤液移置分液漏斗中，加醋酸乙酯提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取的供试品溶液及对照品溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲酸∶水＝10∶2∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查应符合中国药典附录胶囊剂项下有关的各项规定；含量测定照中国药典附录高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水∶磷酸＝47∶53∶0.2为流动相；流速1.0ml/min；检测波长280nm；理论板数以黄芩苷峰计算不得低于2500；对照品溶液的制备取黄芩苷对照品10.0mg，精密称定，置50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，精密量取15ml，置50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，制成每1ml含黄芩苷60.0μg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本制剂或其内容物，精密称定，研细，取药粉约30mg，精密称定，置100ml量瓶中，加70％乙醇约90ml，超声提取20分钟后，放冷，加70％乙醇至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂含黄芩苷C21H18O11应为标示量的90.0～110.1％。
本发明的实施例8所述咀嚼片质量控制方法可以包括
性状为薄膜衣片，除去薄膜衣后显灰黄色至棕黄色；味甜、微苦；检查应符合中国药典附录片剂项下有关的各项规定；含量测定照中国药典附录高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶磷酸＝60∶30∶2为流动相；流速1.0ml/min；检测波长280nm；理论板数以黄芩苷峰计算不得低于2500；对照品溶液的制备取黄芩苷对照品，精密称定，加30％乙醇溶液溶解制成每1ml含黄芩苷100μg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本药物，精密称定，研细，取药粉50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加30％乙醇溶液80ml，超声提取10分钟后，放冷，加30％乙醇溶液至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5祃，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂含黄芩苷C21H18O11应为标示量的90.0～110.1％。


本发明提供了一种茵栀黄制剂及制备方法和质量控制方法，它是用茵陈提取物、栀子提取物、黄芩苷、金银花提取物和适量甘露醇、蔗糖、淀粉的混合物以及甜菊素、枸橼酸、硬脂酸镁制备成咀嚼片；与现有技术相比，本发明所提供的咀嚼片分散状态佳、崩解时间短、药物溶出迅速；吸收快、生物利用度高；口感良好，服用方便，尤其适合老人及吞服困难的患者服用；本发明质量控制方法精密度高，重现性好，回收率高，提高了茵栀黄制剂的质量控制标准，可有效确保该制剂的临床疗效。