包含用于使赭曲毒素去毒的酰胺酶的食品添加剂制作方法

于书坤, C.H.波尔森, S.达尔斯加尔德, 王华明, I.尼科莱夫

2013年7月17日

2011年9月6日

2010年9月6日

杜邦营养生物科学有限公司

A23L1/03GK103209597SQ201180042549

赭曲 酰胺 毒素 包含 用于

1.一种分离的酰胺酶，其能够降解赭曲毒素2.根据权利要求1所述的酰胺酶，其中所述赭曲毒素是赭曲毒素A3.根据权利要求1或权利要求2所述的酰胺酶，其中所述酰胺酶包含如下氨基酸序列基序中的至少一个,优选至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个，更优选九个1)x_P_G_x_x_D_x_H_x_H_x_xG；2)G-x-T；3)G-x-x-x-G-P；4)G-H-x-D；5)D_G_x_x_x_C_x_x_x_x_R_x_x_x_R_x_x-A_x_x_I_K；6)G-G-V-x-S-x-x-D-x-P；7)V_x-A_H_x_x_G_x_x_G；8)H-x-x-x-x-D； 9)G-V-x-1-x-x-G-T-D4.根据权利要求中I至4中任一项所述的酰胺酶，其中所述酰胺酶具有Tim桶结构，所述桶结构包括包含6个组氨酸残基、I个赖氨酸残基和I个天冬氨酸残基的活性位点，其中当将所述酰胺酶和SEQ ID NO I的三级结构相比较时所述活性位点中的所述氨基酸残基对应于 SEQ ID NO 1的位置11111、11113、11191、1(246、11287、11289、11307 和03785.根据任一前述权利要求所述的酰胺酶，其中所述酰胺酶是至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少97%或至少99%纯的6.根据任一前述权利要求所述的酰胺酶，其中所述酰胺酶是在PH3-9和21-40°C下温育时可降解赭曲毒素的酰胺酶7.根据任一前述权利要求所述的酰胺酶，其中所述酰胺酶包含具有SEQID NO 1、SEQID NO3 或 SEQ ID NO5-11、13、14 或 15 中任一者的序列，或具有与 SEQ ID NO 1、SEQ IDNO3 或 SEQ ID NO5-ll、13、14 或 15 中的任一者具有至少 70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多肽序列，或与SEQ ID NOUSEQ ID N03或SEQ ID NO5-11、13、14或15相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多肽8.根据任一前述权利要求所述的酰胺酶，其中所述酰胺酶包含具有SEQID NO1或SEQ ID NO 3 的序列或具有与 SEQ ID NO1 或 SEQ ID NO 3 具有至少 70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多肽序列，或者与SEQ ID NO1或SEQ ID N03相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多肽；或由包含SEQ ID NO2的序列或包含与SEQ IDNO2具有至少70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多核苷酸，或由于遗传密码子的简并性而与SEQ ID N02不同的多核苷酸表达所产生的多肽；或由与SEQ ID N02相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多核苷酸，或在严格条件下杂交至SEQ ID N02的互补序列或杂交至与所述互补序列具有至少70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的序列表达所产生的多肽9.根据任一前述权利要求所述的酰胺酶，其中在pH7.0和40°C下所述酰胺酶每毫克蛋白质每分钟水解约至少100、至少200、至少300、至少400至约900纳摩尔赭曲毒素A10.一种饲料或食品添加剂，其包含能够降解赭曲毒素的酰胺酶11.根据权利要求10所述的饲料或食品添加剂，其中所述赭曲毒素是赭曲毒素A12.根据权利要求10或权利要求11所述的饲料或食品添加剂，其中所述酰胺酶是分离的13.根据权利要求10至12中任一项所述的饲料或食品添加剂，其中所述酰胺酶包含如下氨基酸序列基序中至少一个，优选至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个，更优选九个1)x_P_G_x_x_D_x_H_x_H_x_xG；2)G-x-T；3)G-x-x-x-G-P；4)G-H-x-D；5)D_G_x_x_x_C_x_x_x_x_R_x_x_x_R_x_x-A_x_x_I_K；6)G-G-V-x-S-x-x-D-x-P；7)V_x-A_H_x_x_G_x_x_G；8)H-x-x-x-x-D；9)G-V-x-1-x-x-G-T-D14.根据权利要求10至13中任一项所述的饲料或食品添加剂，其中所述酰胺酶具有Tim桶结构，所述桶结构包括包含6个组氨酸残基、I个赖氨酸残基和I个天冬氨酸残基的活性位点，其中当将所述酰胺酶和SEQ ID NO1的三级结构相比较时所述活性位点中的所述氨基酸残基对应于 SEQ ID NOl 的位置 H111、H113、H191、K246、H287、H289、H307 和 D37815.根据权利要求10至14中任一项所述的饲料或食品添加剂，其中所述酰胺酶是至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少97%或至少99%纯的16.根据权利要求10至15中任一项 所述的饲料或食品添加剂，其中所述酰胺酶是在PH3-9和21-40°C下温育时可降解赭曲毒素的酰胺酶17.根据权利要求10至16中任一项所述的饲料或食品添加剂，其中所述酰胺酶包含具有 SEQ ID NO U SEQ ID NO 3 或 SEQ ID NO 5-11、13、14 或 15 中任一者的序列，或具有与 SEQ ID NO USEQ ID NO 3 或 SEQ ID NO 5_11、13、14 或 15 中的任一者具有至少70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多肽序列，或者与SEQ ID NO 1、SEQ ID NO 3或SEQ ID NO 5-11、13、14或15相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多肽18.根据权利要求10至17中任一项所述的饲料或食品添加剂，其中所述酰胺酶包含具有 SEQ ID NO I 或 SEQ ID NO 3 的序列或具有与 SEQ ID NO I 或 SEQ ID NO 3具有至少70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多肽序列，或者与SEQ ID NO I或SEQ ID NO 3相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多肽；或由包含SEQ IDNO 2的序列或包含与SEQ ID NO 2具有至少70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多核苷酸，或由于遗传密码子的简并性而与SEQ ID NO 2不同的多核苷酸表达所产生的多肽；或由与SEQ ID NO 2相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多核苷酸，或在严格条件下杂交至SEQ ID NO 2的互补序列或杂交至与所述互补序列具有至少70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的序列表达所产生的多肽19.根据权利要求10至18中任一项所述的饲料或食品添加剂，其中在pH7.0和40°C下所述酰胺酶每毫克蛋白质每分钟水解约至少100、至少200、至少300、至少400至约900纳摩尔赭曲毒素A20.根据权利要求10至19中任一项所述的饲料或食品添加剂，其中所述酰胺酶是重组的21.根据权利要求10至20中任一项所述的饲料或食品添加剂，其包含能够表达所述酰胺酶的重组细胞或孢子22.根据权利要求21所述的饲料或食品添加剂，其中所述细胞选自大肠杆菌、链霉菌属、汉逊酵母属、木霉属(特别是里氏木霉)、芽孢杆菌属、乳杆菌属、曲霉属(特别是黑曲霉)、植物细胞和/或牙抱杆囷属、木霉属或曲霉属的抱子23.根据权利要求10至22中任一项所述的饲料或食品添加剂，其还包含至少一种生理上可接受的载体24.根据权利要求23所述的饲料或食品添加剂，其中所述生理上可接受的载体选自如下物质中的至少一种麦芽糖糊精、石灰石(碳酸钙)、环糊精、小麦、麦麸或小麦组分、稻米或米糠、蔗糖、淀粉、Na2SO4、滑石粉和PVA以及它们的混合物25.根据权利要求10至24中任一项所述的饲料或食品添加剂，其中所述饲料包含一种或多种另外的酶26.根据权利要求25所述的饲料或食品添加剂，其中所述一种或多种另外的饲料用酶选自涉及蛋白质降解的酶，包括羧肽酶，优选羧肽酶A、羧肽酶Y，黑曲霉天冬氨酸蛋白酶PEPAa、PEPAb, PEPAc和PEPAd，弹性蛋白酶、氨基肽酶、胃蛋白酶或胃蛋白酶样蛋白酶、胰蛋白酶或胰蛋白酶样蛋白酶，和细菌蛋白酶，包括枯草杆菌蛋白酶及其变体，涉及淀粉代谢、纤维降解、脂质代谢的酶，涉及糖原代谢的蛋白质或酶，淀粉酶、阿拉伯糖酶、阿拉伯呋喃糖酶、过氧化氢酶、纤维素酶、几丁质酶、凝乳酶、角质酶、脱氧核糖核酸酶、表异构酶、酯酶、-半乳糖苷酶、葡聚糖酶、葡聚糖裂解酶、内切葡聚糖酶、葡糖淀粉酶、葡萄糖氧化酶，-葡糖苷酶，包括3 -葡糖苷酶，葡糖醛酸酶、半纤维素酶、己糖氧化酶、水解酶、转化酶、异构酶、脂解酶、漆酶、裂解酶、甘露糖苷酶、氧化酶、氧化还原酶、果胶酸裂解、果胶乙酰酯酶、果胶去聚合酶、果胶甲酯酶、果胶分解酶、过氧化物酶、酚氧化酶、植酸酶、多聚半乳糖醛酸酶、蛋白酶、鼠李-半乳糖醛酸酶、核糖核酸酶、非洲甜果素、转移酶、转运蛋白、转谷酰胺酶、木聚糖酶、己糖氧化酶(D-己糖02_氧化还原酶，EC 1.1.3.5)、酸性磷酸酶和/或其他酶或它们的组合27.一种饲料或食品材料，其包含根据权利要求10至26中任一项所述的饲料添加剂28.—种饲料或食品，其包含根据权利要求27所述的食品或饲料材料29.根据权利要求28所述的饲料，其包含一种或多种选自如下的饲料材料a)谷类，例如小粒谷物(如小麦、大麦、裸麦、燕麦以及它们的组合)和/或大粒谷物如玉蜀黍或高粱；b)来自谷类的副产物，例如玉米蛋白粉、干酒糟及可溶物(DDGS)、麦麸、小麦粗粉、小麦次粉、米糠、稻壳、燕麦壳，棕榈仁和柑橘渣；c)青贮饲料；d)得自如下来源的蛋白质例如大豆、向日葵、花生、羽扇豆、豌豆、蚕豆、棉花、卡诺拉、鱼粉、干血浆蛋白、肉和骨粉、马铃薯蛋白、乳清、干椰肉、芝麻；e)从植物和动物来源获得的油和脂肪；f)矿物质和维生素30.根据权利要求28所述的食品，其中所述食品包含谷类，例如玉米、小麦、大麦、高粱、谷类产品，例如粥、面、面包或蛋糕、咖啡、可可、酒、啤酒、干豆、调味料、干果、葡萄汁、奶、奶制品如奶酪、肉或肉制品31.根据权利要求28至30中任一项所述的饲料或食品,其以约0.0Olmg/kg至约IOg/kg饲料/食品的水平包含所述酰胺酶32.根据权利要求28至31中任一项所述的饲料，其用于单胃动物，优选选自禽、猪、家养宠物、鱼、贝类和甲壳类的单胃动物消费33.一种制备根据权利要求28至32中任一项所述的食品或饲料的方法，其包括向食品或饲料材料添加根据权利要求10至27中任一项所述的食品或饲料添加剂34.一种制备根据权利要求10至27中任一项所述的食品或饲料添加剂的方法，其包括将所述酰胺酶与至少一种生理上可接受的载体混合35.根据权利要求34所述的方法，其中所述至少一种生理上可接受的载体选自如下物质中的至少一种麦芽糖糊精、石灰石(碳酸钙)、环糊精、小麦、麦麸或小麦组分、稻米或米糠、蔗糖、淀粉、Na2SO4、滑石粉、PVA以及它们的混合物36.根据权利要求34或权利要求35所述的方法，其包括均化所述食品或饲料添加剂的额外步骤37.根据权利要求34至36中任一项所述的方法，其包括将所述食品或饲料添加剂制粒的额外步骤38.一种组合物，其包含赭曲毒素污染的材料和赭曲毒素降解酰胺酶39.根据权利要求38所述的组合物，其中所述酶为赭曲毒素A降解酰胺酶40.根据权利要求38或权利要求39所述的组合物，其中所述材料污染有赭曲毒素A和/或赭曲毒素B41.根据权利要求38至40中任一项所述的组合物，其中所述酰胺酶是分离的42.根据权利要求38至41中任一项所述的组合物，其中所述酰胺酶包含如下氨基酸序列基序中的至少一个，优选至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个，更优选九个43.根据权利要求38至42中任一项所述的组合物，其中所述酰胺酶具有Tim桶结构，所述桶结构包括包含6个组氨酸残基、I个赖氨酸残基和I个天冬氨酸残基的活性位点，其中当将所述酰胺酶和SEQ ID NO1的三级结构相比较时所述活性位点中的所述氨基酸残基对应于 SEQ ID 勵1的位置11111、11113、11191、1(246、11287、11289、11307 和037844.根据权利要求38至43中任一项所述的组合物，其中所述酰胺酶是至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少97%或至少99%纯的45.根据权利要求38至44中任一项所述的组合物，其中所述酰胺酶包含具有SEQIDNOUSEQ ID N03或SEQ ID NO5-11、13、14或 15 中任一者的序列，或具有与SEQ ID NO USEQ ID N03 或 SEQ ID N05_ll、13、14 或 15 中的任一者具有至少 70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多肽序列，或者与SEQ ID N0USEQ ID N03或SEQ ID N05_ll、13、14或15相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多肽46.根据权利要求38至45中任一项所述的组合物，其中所述酰胺酶包含具有SEQID NO1 或 SEQ ID NO 3 的序列或具有与 SEQ ID NO1 或 SEQ ID NO 3 具有至少 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、90%、95%、98%、99% 同一1注的序列的多肽序列，或者与 SEQID N01或SEQ ID N03相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多肽；或由包含SEQID NO 2 的序列或包含与 SEQ ID NO 2 具有至少 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多核苷酸，或由于遗传密码子的简并性而与SEQ ID N02不同的多核苷酸表达所产生的多肽；或由与SEQ ID NO2相差一个或多个核苷酸添加、缺失和/或置换的多核苷酸表达所产生的多肽；或由在严格条件下杂交至SEQ ID N02的互补序列或杂交至与所述互补序列具有至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一丨丨生的序列的多核苷酸表达所产生的多肽47.根据权利要求38至46中任一项所述的组合物，其中在pH7.0和40°C下温育时所述酰胺酶每毫克蛋白质每分钟水解约至少100、至少200、至少300、至少400至约900纳摩尔赭曲毒素A48.根据权利要求38至47中任一项所述的组合物，其中所述酰胺酶是重组的49.根据权利要求38至48中任一项所述的组合物，其包含能够表达所述酰胺酶的重组细胞50.根据权利要求49所述的组合物，其中所述细胞选自大肠杆菌、链霉菌属、汉逊酵母属、木霉属(特别是氏木霉)、芽孢杆菌属、乳杆菌属、曲霉属(特别是黑曲霉)、植物细胞和/或芽孢杆菌属、木霉属或曲霉属的孢子51.根据权利要求38至50中任一项所述的组合物，其包含一种或多种另外的酶52.根据权利要求51所述的组合物，其中所述一种或多种另外的酶是选自如下的饲料或食品酶涉及蛋白质降解的酶，包括羧肽酶，优选羧肽酶A、羧肽酶Y，黑曲霉天冬氨酸蛋白酶，优选PEPAa、PEPAb, PEPAc和PEPAd，弹性蛋白酶，氨基肽酶，胃蛋白酶或胃蛋白酶样蛋白酶、胰蛋白酶或胰蛋白酶样蛋白酶，和细菌蛋白酶，包括枯草杆菌蛋白酶及其变体，以及涉及淀粉代谢、纤维降解、脂质代谢的酶、涉及糖原代谢的蛋白质或酶、淀粉酶、阿拉伯糖酶、阿拉伯呋喃糖酶、过氧化氢酶、纤维素酶、几丁质酶、凝乳酶、角质酶、脱氧核糖核酸酶、表异构酶、酯酶、-半乳糖苷酶、葡聚糖酶、葡聚糖裂解酶、内切葡聚糖酶、葡糖淀粉酶、葡萄糖氧化酶，-葡糖苷酶，包括3 -葡糖苷酶，葡糖醛酸酶、半纤维素酶、己糖氧化酶、水解酶、转化酶、异构酶、脂解酶、漆酶、裂解酶、甘露糖苷酶、氧化酶、氧化还原酶、果胶酸裂解、果胶乙酰酯酶、果胶去聚合酶、果胶甲酯酶、果胶分解酶、过氧化物酶、酚氧化酶、植酸酶、多聚半乳糖醛酸酶、蛋白酶、鼠李-半乳糖醛酸酶、核糖核酸酶、非洲甜果素、转移酶、转运蛋白、转谷酰胺酶、木聚糖酶、己糖氧化酶(D-己糖02_氧化还原酶，ECl.1.3.5)、酸性磷酸酶和/或其他酶或它们的组合53.根据权利要求51或52所述的组合物，其还包含选自霉菌毒素降解酶例如黄曲霉毒素去毒酶、玉米赤霉烯酮酯酶、玉米赤霉烯酮内酯酶、伏马毒素羧基酯酶、伏马毒素氨基转移酶、氨基多元醇胺氧化酶、脱氧瓜萎镰菌醇环氧化物水解酶中的至少一者、霉菌毒素降解微生物例如枯草芽孢杆菌或吸收剂(即霉菌毒素结合剂)，包括至少一种聚合物，例如微生物细胞壁或诸如膨润土之类的无机物质54.根据权利要求38至53中任一项所述的组合物，其中所述组合物是饲料组合物、发酵液或废水55.根据权利要求38至54中任一项所述的组合物,其以约0.0Olmg/kg至约10g/kg的水平包含所述酰胺酶56.一种减少材料的赭曲毒素污染的方法，其包括向所述材料添加赭曲毒素降解酰胺酶57.根据权利要求56所述的方法，其中所述酶是赭曲毒素A降解酶58.根据权利要求56或权利要求57所述的方法，其中所述材料污染有赭曲毒素A和/或赭曲毒素B59.根据权利要求56至58中任一项所述的方法，其中所述酰胺酶是分离的60.根据权利要求56至59中任一项所述的方法，其中所述酰胺酶包含如下氨基酸序列基序中的至少一个,优选至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个，更优选九个61.根据权利要求56至60中任一项所述的方法，其中所述酰胺酶具有Tim桶结构，所述桶结构包括包含6个组氨酸残基、I个赖氨酸残基和I个天冬氨酸残基的活性位点，其中当将所述酰胺酶和SEQ ID NO1的三级结构相比较时所述活性位点中的所述氨基酸残基对应于 SEQ ID 勵1的位置11111、11113、11191、1(246、11287、11289、11307 和037862.根据权利要求56至61中任一项所述的方法，其中所述酰胺酶是至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少97%或至少99%纯的63.根据权利要求56至62中任一项所述的方法，其中所述酰胺酶包含具有SEQIDN0USEQ ID N03或SEQ ID NO5-11、13、14或 15 中任一者的序列，或具有与SEQ ID NO USEQ ID N03 或 SEQ ID NO5-11、13、14 或 15 中的任一者具有至少 70%、75%、80%、90%、95%、.98%、99%同一性的序列的多肽序列，或者与SEQ ID NO 1、SEQ ID NO 3或SEQ ID NO 5-11、.13、14或15相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多肽64.根据权利要求56至63中任一项所述的方法，其中所述酰胺酶包含具有SEQIDNO1 或 SEQ ID NO 3 的序列或具有与 SEQ ID NO1 或 SEQ ID NO 3 具有至少 10%、20%、30%、.40%、50%、60%、70%、75%、80%、90%、95%、98%、99% 同一1性的序列的多肽序列，或者与 SEQ IDNO1或SEQ ID NO 3相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多肽序列；或由包含SEQ ID NO 2 的序列或包含与 SEQ ID NO 2 具有至少 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多核苷酸，或由于遗传密码子的简并性而与SEQ ID NO2不同的多核苷酸表达所产生的多肽；或由与SEQ ID NO2相差一个或多个核苷酸添加、缺失和/或置换的多核苷酸表达所产生的多肽；或由在严格条件下杂交至SEQ ID NO2的互补序列或杂交至与所述互补序列具有至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多核苷酸表达所产生的多肽65.根据权利要求56至64中任一项所述的方法,其中在pH7.0和40°C下温育时所述酰胺酶每毫克蛋白质每分钟水解约至少100、至少200、至少300、至少400至约900纳摩尔赭曲毒素A66.根据权利要求56至65中任一项所述的方法，其中所述酰胺酶是重组的67.根据权利要求56至66中任一项所述的方法，其包含能够表达所述酰胺酶的重组细胞68.根据权利要求67所述的方法，其中所述细胞选自大肠杆菌、链霉菌属、汉逊酵母属、木霉属(特别是氏木霉)、芽孢杆菌属、乳杆菌属、曲霉属(特别是黑曲霉)、植物细胞和/或芽孢杆菌属、木霉属或曲霉属的孢子69.根据权利要求56至68中任一项所述的方法,还包括添加一种或多种另外的酶70.根据权利要求69所述的方法，其中所述一种或多种另外的酶是选自涉及蛋白质降解的酶，包括羧肽酶，优选羧肽酶、羧肽酶Y，黑曲霉天冬氨酸蛋白酶PEPAa、PEPAb, PEPAc和PEPAd，弹性蛋白酶，氨基肽酶，胃蛋白酶或胃蛋白酶样蛋白酶、胰蛋白酶或胰蛋白酶样蛋白酶，和细菌蛋白酶，包括枯草杆菌蛋白酶及其变体，以及涉及淀粉代谢、纤维降解、月旨质代谢的酶、涉及糖原代谢的蛋白质或酶、乙酰酯酶、氨基肽酶、淀粉酶、阿拉伯糖酶、阿拉伯呋喃糖酶、过氧化氢酶、纤维素酶、几丁质酶、凝乳酶、角质酶、脱氧核糖核酸酶、表异构酶、酯酶、-半乳糖苷酶、葡聚糖酶、葡聚糖裂解酶、内切葡聚糖酶、葡糖淀粉酶、葡萄糖氧化酶，-葡糖苷酶，包括3 -葡糖苷酶，葡糖醛酸酶、半纤维素酶、己糖氧化酶、水解酶、转化酶、异构酶、脂解酶、漆酶、裂解酶、甘露糖苷酶、氧化酶、氧化还原酶、果胶酸裂解、果胶乙酰酯酶、果胶去聚合酶、果胶甲酯酶、果胶分解酶、过氧化物酶、酚氧化酶、植酸酶、多聚半乳糖醛酸酶、蛋白酶、鼠李-半乳糖醛酸酶、核糖核酸酶、非洲甜果素、转移酶、转运蛋白、转谷酰胺酶、木聚糖酶、己糖氧化酶(D-己糖02_氧化还原酶，ECl.1.3.5)、酸性磷酸酶和/或其他酶或它们的组合71.根据权利要求69或70所述的方法，其还包含选自霉菌毒素降解酶例如黄曲霉毒素去毒酶、玉米赤霉烯酮酯酶、玉米赤霉烯酮内酯酶、伏马毒素羧基酯酶、伏马毒素氨基转移酶、氨基多元醇胺氧化酶、脱氧瓜萎镰菌醇环氧化物水解酶中的至少一者、霉菌毒素降解微生物例如枯草芽孢杆菌或吸收剂(即霉菌毒素结合剂)，包括至少一种聚合物，例如微生物细胞壁或诸如膨润土之类的无机物质72.根据权利要求56至71中任一项所述的方法，其中所述组合物是饲料组合物、发酵液或废水73.根据权利要求56至72中任一项所述的方法,其以约0.001mg/kg至约10g/kg的水平包含所述酰胺酶74.—种饲料材料，其可通过根据权利要求56至73中任一项所述的方法获得75.—种增加动物的生长速率和/或健康的方法，其包括给所述动物饲喂有效量的根据权利要求28至32中任一项所述的饲料76.—种重组细胞或孢子，其编码可降解赭曲毒素的酰胺酶77.根据权利要求76所述的细胞或孢子，其中所述酰胺酶可降解赭曲毒素A78.根据权利要求76或权利要求77所述的细胞或孢子，其中所述酰胺酶是重组的79.根据权利要求76至78中任一项所述的细胞或孢子，其中所述酰胺酶是分离的80.根据权利要求76至79中任一项所述的细胞或孢子，其中所述酰胺酶包含如下氨基酸序列基序中的至少一个，优选至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个，更优选九个81.根据权利要求76至80中任一项所述的细胞或孢子，其中所述酰胺酶具有Tim桶结构，所述桶结构包括包含6个组氨酸残基、I个赖氨酸残基和I个天冬氨酸残基的活性位点，其中当将所述酰胺酶和SEQ ID NO1的三级结构相比较时所述活性位点中的所述氨基酸残基对应于 SEQ ID NO1 的位置 H111、H113、H191、K246、H287、H289、H307 和 D37882.根据权利要求76至81中任一项所述的细胞或孢子，其中所述酰胺酶是至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少97%或至少99%纯的83.根据权利要求76至82中任一项所述的细胞或孢子，其中所述酰胺酶包含具有SEQID NO 1、SEQ ID NO3 或 SEQ ID NO5-11、13、14 或 15 中任一者的序列，或具有与 SEQ IDNO 1、SEQ ID NO3 或 SEQ ID NO5-11、13、14 或 15 中的任一者具有至少 70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多肽序列，或者与SEQ ID NO 1、SEQ ID N03或SEQ IDNO5-11、13、14或15相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多肽84.根据权利要求76至83中任一项所述的细胞或孢子，其中所述酰胺酶包含具有SEQ ID NO1 或 SEQ ID NO3 的序列或具有与 SEQ ID NO1 或 SEQ ID N03 具有至少 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、90%、95%、98%、99% 同一性的序列的多肽序列，或者与SEQ ID NO1或SEQ ID NO 3相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多肽序列；或由包含SEQ ID NO2的序列或包含与SEQ ID NO2具有至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多核苷酸，或由于遗传密码子的简并性而与SEQID NO2不同的多核苷酸表达所产生的多肽；或由与SEQ ID NO2相差一个或多个核苷酸添力口、缺失和/或置换的多核苷酸表达所产生的多肽；或由在严格条件下杂交至SEQ ID NO 2的互补序列或杂交至与所述互补序列具有至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多核苷酸表达所产生的多肽85.根据权利要求76至84中任一项所述的细胞或孢子，其中所述细胞选自大肠杆菌、链霉菌属、汉逊酵母属、木霉属(特别是氏木霉)、芽孢杆菌属、乳杆菌属、曲霉属(特别是黑曲霉)、植物细胞和/或牙抱杆囷属、木霉属或曲霉属的抱子86.根据权利要求3所述的酶、根据权利要求13所述的饲料或食品添加剂、根据权利要求42所述的组合物、根据权利要求60所述的方法或根据权利要求80所述的细胞或孢子，其中所述基序包含87.根据权利要求86所述的酶、饲料或食品添加剂、组合物、方法或者细胞或孢子，其中所述基序包含88.—种饲料或食品添加剂，其包含基本上如本文所述的酰胺酶89.—种饲料或食品，其包含基本上如本文所述的饲料添加剂90.一种制备饲料或食品 的方法，所述饲料或食品基本上如本文所述

本发明涉及使霉菌毒素去毒的方法更具体地讲，本发明涉及酰胺酶和包含至少一种用于使赭曲毒素(尤其是赭曲毒素A)去毒的酰胺酶的饲料和/或食品添加剂