专利名称：N-(2,6-二苄氧基苯甲酰基)-n’-取代脲类化合物及其制备方法和用途的制作方法亲环素(Cyclophilin，CyP)的发现与命名起源于它对环孢素(Cyclosporin A, CsA)的高度亲合性，CsA是临床上广泛使用的一种免疫抑制药物(Handschumacher RE 等.Science，1984，226 :544-547)。CyP 是一个保守的蛋白质家族(Gothel SF, Marahiel MA. Cell Mo. Life Sci，1999，55 :423-436)，从低等原核生物到哺乳动物都有这类蛋白。该组蛋白的共同特征是具有肽脯氨酰顺反异构酶(P印tidyl-prolyl cis-trans isomerase, PPIase)活性(Takahashi N, Hayano Τ, Suzuki Μ. Nature，1989，337 :473-475)。依据相对分子量以及亚细胞定位等特征，目前已知人CyP家族有CypA、CypB, CypC和CypD等16种成员，人亲环素A(hCypA)是最重要的，也是研究最广泛的成员(Braaren D，Luban J. EMBO J, 2001, 20 :1300-1309)，它由165个氨基酸组成，相对分子量18，000，约占细胞蛋白总量的0. 0.4%，主要位于胞质内。除了作为CsA的体内结合蛋白，在体内外，hCypA都能结合蛋白质并催化加速它们的折叠、装配和转运，起分子伴侣的作用(Freskgard PO 等· Science, 1992,258 :466)。CypA包含八股反平行β片层，这些β片层组成一个桶状结构，在桶的上下口各有一段α螺旋将桶的两端封闭，CypA的配体结合口袋则位于该桶状结构的侧面(Kallen J 等.Nature，1991，；353 :276-279)，主要由两个大的亚口袋组成亚口袋A和亚口袋B。亚口袋 A 主要由 Thr73、Gly74、Asnl02、Alal03、Thrl07、Glyl09 JerllO 和 Glnlll 等残基组成， 它们大部分为亲水性残基；亚口袋B为一深的疏水性凹槽，主要由Wie60、Met61、Wiell3和 Leul22等残基组成。CypA与多种疾病密切相关，1993年，Luban等人发现CypA和CypB可以与I型爱滋病毒(HIV-I)的Gag蛋白特异性地结合，而CsA可以有效地抑制(iag-CypA之间的相互作用 (Luban J 等· Cell，1993，73 :1067-1078) ； 1994 年，Franke(Franke EK, Yuan HE. Nature, 1994,372 :359-362)和 Thali 等人(Thali M 等.Nature, 1994,372 :363-365)分别在 Nature上发表论文报道发现CypA特异性地掺入到HIV-I病毒颗粒中，阻断CypA的掺入， 抑制HIV-I的复制，这说明CypA与Gag蛋白的结合是功能相关的(Luban J. Cell, 1996, 87:1157-1159)。HIV-I的Gag蛋白为一个多蛋白，它在病毒组装、成熟和出芽过程中起着决定性作用(Gamble TR等.Cell，1996,87 :1285-1294)。CypA与Gag蛋白中的衣壳蛋白 (Capsid,CA ；231residues)区域相结合，通过这一作用，CypA被特异性地包裹进HIV-1病毒颗粒中。但CypA的缺失并不影响病毒的组装、出芽和成熟，它在HIV-I生命周期的早期(病毒逆转录开始之前)是必需的。因此，CypA可能在病毒进入宿主细胞后的脱壳(Uncoating)过程中发挥作用，帮助病毒核心发生解装配(Viral CA core disassembly) 0中国科学院上海药物研究所蒋华良等人(Luo C等.Biochem Biophys Res Commun, 2004, 321 =557-565)通过生物信息学的手段发现虽然SARS-CoV并不编码CA蛋白，但SARS-CoVN蛋白的Val235 ftx)369片断与HIV-ICA蛋白的N端结构域(残基1 151)具有较高的序列相似性(36. 7%),因此推测SARS-CoV N蛋白可能也与CypA发生相互作用。之后，蛋白-蛋白结合活性实验证实了这一假设=SARS-CoV N蛋白和CypA具有很高的亲和性，KD值约为6 160nM ；接下来的定点突变实验初步地确定了 SARS-CoVN蛋白的 Trp302 ftx)310片断为与CypA结合的区域。以上结果说明CypA很有可能参与SARS-CoV 的生命活动过程。hCypA与配体形成的复合物对多重神经元具有保护作用，对于损伤后的轴突、髓鞘均有显著的促再生作用(Yoshimoto T, Siesjo BK. Brain Res，1999，839 :283-291)。 Andreeva等证实CypA是一种氧化应激诱导分泌的生长因子，介导活性氧介质对细胞外信号调节激酶(ERKl/幻的激活和血管平滑肌细胞增殖，表明CypA在血管疾病发病机制中发挥重要作用(Andreeva L, Heads R, Green CJ. Int J Exp Path，1999，80 :305-315)。除了具有上述生理效应，hCypA关于免疫抑制方面的作用是研究的最深入的。目前公认的免疫抑制作用机制是hCypA与胞浆内的配体结合，形成的复合物然后与钙调磷酸酶(Calcineurin，CaN)结合并抑制 CaN 的磷酸化活性(Liu J等.Cell，1991，66 :807-815)。 CaN在淋巴细胞的活化过程中具有非常重要的作用，它通过脱磷酸化活化T细胞核因子 (Nuclearfactor of activated T cell，NF-AT)，使之活化而移位进入核内，然后参与IL-2 和其它一些因子的转录过程。抑制了 CaN的磷酸化活性就抑制了具有免疫作用的细胞因子的释放，从而发挥免疫抑制作用。鉴于CypA在多个生理途径中都发挥作用，因此有关它的抑制剂研究一直是个热点。按结构划分，CypA抑制剂分为三大类天然产物及其类似物、肽类及拟肽化合物和有机合成小分子化合物。为了克服天然产物的毒副作用，以及肽类化合物的易代谢性，寻找选择性高、活性强的有机合成小分子CypA抑制剂成为必然。目前已有多个研究组报道了几种结构类型的小分子CypA抑制剂。虽然CypA抑制剂的发现及其生物学用途已取得了较大进展，但CypA激动剂及其潜在的生物学用途一直是个空白，至今未见任何文献报道。鉴于CypA在多种人体生理和病理过程中广泛而重要的作用，通过开发CypA激动剂，联合已有的CypA抑制剂，可以开展对 CypA催化活性的正负调节作用研究，进一步深入有效的探索CypA介导的信号转导通路研在系统设计CypA抑制剂的过程中，发明人已经找到了一个N- (2，6_ 二苄氧基苯甲酰基)-N’ -取代脲化合物，运用合理药物设计方法针对此化合物进行结构修饰得到一类化合物，并测试了此类化合物在体外酶水平实验测试中激动CypA的活性。结果证明本申请的部分化合物具有较强的CypA激动活性。
本发明的一个目的是提供一种新型N- (2,6- 二苄氧基苯甲酰基)-N’ -取代脲类化合物，其结构通式如式I所示本发明涉及新型的N-(2，6-二苄氧基苯甲酰基)-N’-取代脲类化合物及其制备方法和用途。该类化合物的结构通式如式(I)所示，其中R1为C5～C25的环烃基、芳环基或杂环基，或取代的C1～C6直链或支链烷基(详见说明书)。目前研究表明亲环素A(Cyclophilin A，CypA)参与了人体多种生理和病理过程。因此，本发明所提供的化合物可在制备亲环素A(Cyclophilin A，CypA)激动剂或制备预防或治疗CypA介导的疾病的药物中得以应用。