专利名称：低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌及分离培养方法低温对生物处理能力产生重大影响的原因是由于温度的降低影响了微生物的生长及代谢并使污水处理系统中微生物群系发生了改变。在温度下降过程中，中温菌的代谢活性逐渐下降，到一定温度时便失去活性，而适于低温环境的低温微生物的数量由于自身的生理特性及各种生态因子的抑制作用，在数量上无法达到优势菌群的地位，从而导致污水处理厂冬季出水水质下降。因此亟需一种能在低温好氧条件下去除污水中亚硝酸盐氮的菌株。
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌。本发明的第二个目的是提供一种去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌的用途。本发明的第三个目的是提供一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌的分离培养方法。本发明的技术方案概述如下一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌(Iihodococcus sp.)硝深-lCGMCCNo. 5277，其具有在低温好氧条件下去除污水中亚硝酸盐氮的能力。一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌(Iihodococcus sp.)硝深-lCGMCCNo. 5277在低温好氧条件下去除污水中亚硝酸盐氮的用途。所述低温优选8 12°C。低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌的分离培养方法，包括如下步骤(1)将10 20mL污水处理厂曝气池污泥接种至装有250mL硝酸细菌培养液的锥形瓶中，所述硝酸细菌培养液中的亚硝酸钠中氮浓度为50mg/L，在8 12°C，摇床转速为 120 140rpm摇床中驯化，待亚硝酸盐氮降解率达到80 90%时，静置，去除上清液，将锥形瓶底部的污泥接种至装有250mL第二种硝酸细菌培养液中，所述第二种硝酸细菌培养液中的亚硝酸盐氮浓度为150mg/L，在8 12°C，在转速为120 140rpm的摇床中驯化，待亚硝酸盐氮降解率达到80 90%时，即得到含有耐低温细菌的硝酸细菌培养液；(2)取IOmL步骤(1)获得的培养液，加入己装有90mL灭菌蒸馏水和20 30粒灭菌玻璃珠的250mL锥形瓶中，振荡10 30min，使细菌细胞充分释放到上清液中；静置20 40min，取ImL上清液加入装有9mL无菌蒸馏水的试管中，得到10_2的菌悬液，按上述方法依次做系列稀释，一直做到10_8为止；(3)选取梯度为10_5 10_8的菌悬液，分别取ImL接种于硝酸细菌固体培养基，每个稀释度做3个平行样，编号；10°C在有氧的条件下保湿培养2 3周；(4)从步骤(3)中的硝酸细菌固体培养基平板中挑选菌落大，形态不同的单菌落， 在硝酸细菌固体培养基平板中再次划线分离，重复平板划线分离3-4次，使平板上的菌落在显微镜中的形态相同，单一，大小相似即为单菌落，命名为硝深-1，经鉴定为低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌(Rhodococcus sp.)。所述硝酸细菌培养液由下述组分组成=NaNO2 0. 25g、乙酸钠2g、MgS047H20 0. 05g、 K2HPO4 0.2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 O.Olg、FeSO4 0. 01g、加蒸馏水至 1000mL。所述第二种硝酸细菌培养液由下述组分组成=NaNO2 0. 74g、乙酸钠2g、 MgS047H200. 05g、K2HPO4 0. 2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. 01g、FeSO4 O.Olg、加蒸馏水至 1000mL。所述硝酸细菌固体培养基由下述组分组成=NaNO2 0. 5g、乙酸钠2g、 MgS047H200. 05g、K2HPO4 0. 2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. 01g、FeSO4 0. 01g、琼月旨 20g、加蒸馏水至1000mL。实验结果表明尽管受到低温环境的明显抑制，投加本发明的一种去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌(Rhodococcus sp.)硝深-ICGMCC No. 5277，在低温下，特别是在8_12°C 的条件下，对污水中亚硝酸盐氮去除有明显的强化作用，接种本发明的红球菌与未接种菌的污水进行比较，亚硝酸盐氮去除率提高了约为10%。图1为低温好氧条件下去除污水中亚硝酸盐氮的一种去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌的驯化分离培养流程图。图2为硝深-1对亚硝酸盐氮去除试验。(4)从步骤(3)中的硝酸细菌固体培养基平板中挑选菌落大，形态不同的单菌落， 在硝酸细菌固体培养基平板中再次划线分离，重复平板划线分离3次，使平板上的菌落在显微镜中的形态相同，单一，大小相似即为单菌落，命名为硝深-1，经鉴定为低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌(Rhodococcus sp.)。各实施例中所采用的硝酸细菌培养液由下述组分组成=NaNO2 0. 25g、乙酸钠2g、 MgS047H20 0. 05g、K2HPO4 0. 2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. Olg、FeSO4 0. Olg、加蒸馏水至 1000mL。第二种硝酸细菌培养液由下述组分组成=NaNO2 0. 74g、乙酸钠2g、MgS047H20 0. 05g、K2HPO4 0.2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. Olg、FeSO4 0. Olg、加蒸馏水至 IOOOmL0硝酸细菌固体培养基由下述组分组成=NaNO2 0. 5g、乙酸钠2g、MgS047H20 0. 05g、 K2HPO4 0.2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. Olg、FeSO4 0. Olg、琼脂 20g、加蒸馏水至 IOOOmL0本发明的红球菌(Iihodococcus sp.)具有以下微生物学特性1.形态学特性在显微镜下观察，为球状，直径为0. 7 μ m ；在硝酸细菌培养基上形成米黄色菌落。2.培养学特性在10°C下，在硝酸细菌固体培养基中培养时，本发明的Iihodococcus sp.菌株具有以下特性。表面较光滑，干燥，边缘整齐规则，个体微小呈圆形，菌体呈米黄色。3.生理特性好氧条件下去除污水中亚硝酸盐的革兰氏阳性细菌，接触酶阴性、甲基红试验阴性、不水解淀粉、不液化明胶、产生吲哚、生长PH值为6 8，生长温度5 30°C。


本发明公开了一种低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌及分离培养方法，低温条件下去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌(Rhodococcus sp)硝深-1CGMCC No.5277，其具有在低温好氧条件下去除污水中亚硝酸盐氮的能力。实验结果表明尽管受到低温环境的明显抑制，投加本发明的一种去除污水中亚硝酸盐氮的红球菌(Rhodococcus sp)硝深-1CGMCCNo.5277，在低温下，特别是在8-12℃的条件下，对污水中亚硝酸盐氮去除有明显的强化作用，接种本发明的红球菌与未接种菌的污水进行比较，亚硝酸盐氮去除率提高了约为10％。