专利名称：治疗感染性疾病的药物、其制备方法及用途的制作方法治疗感染性疾病的药物、其制备方法及用途技术领 域本发明属于中药领域，涉及一种治疗感染性疾病的药物、其制备方法及用途。 下呼吸道感染性疾病，常见慢支炎、各种类型的肺炎、支气管扩张并感染、肺脓疡、 肺心病并肺部感染等，是呼吸系统常见病、多发病。在所有感染性疾病中发病率最高，即使 在抗菌药物开发突飞猛进的今天，其发病率、病死率依然居高不下。我国每年约有250万例 肺炎发生，12. 5万人(5%)因肺炎死亡。在美国，肺炎约占入院诊断的1/10，居死亡原因的 第五位。小儿肺炎为我国小儿第一位死亡原因，其死亡率占儿童死亡的1/5。据世界卫生 组织(WHO)统计，目前世界人口死亡原因中感染性疾病占1/3，而急性呼吸道感染(主要为 肺炎)死亡人数占其中的1/4，不少慢性疾病患者不是死于原发病，而是死于肺部感染。近 20年来，肺部感染的菌谱所发生的变化，已为大家所熟知，霉菌的继发亦引起临床医师的重 视。各种原因造成免疫缺陷患者的增加，使一些过去很少致病的病原体如卡氏肺囊虫和巨 细胞病毒，同样威胁患者生命，成了诊断和治疗中的难题。由于病原体的变迁，细菌耐药率 的上升，人口老化，免疫损害宿主的增多，重症监护医学的发展与机械通气应用的增多使得 目前呼吸道感染日益复杂化，尤其是2003年2月开始波及我国及东南亚和欧美各国的非典 型肺炎(SARS)以及2005年肆虐一时的禽流感，对呼吸系统感染控制提出一个新的极其严 峻的挑战。炎症反应是下呼吸道感染性疾病的核心环节，目前针对炎症反应引起的肺损伤主 要的治疗措施有(一 )抗生素目前针对病原体最主要的治疗方法是应用抗生素控制感染，临床针对不同的病原 体，常用的抗生素有内酰胺类(青霉素类和头孢菌素两大类)、喹诺酮类、大环内酯类、 氨基糖甙类等。( 二)糖皮质激素糖皮质激素(以下简称激素)具有减轻感染性和非感染性炎性反应，减少渗出，抑 制免疫反应，抗休克，抗毒素等药理作用，被应用于治疗炎症反应引起的肺损伤。(三)血管活性药物重症肺炎存在明显的肺微循环障碍，近年来血管活性药作为辅助用药在小儿重症 肺炎的治疗中取得明显的效果。常用的有血管紧张素转换酶抑制剂，通过抑制血管紧张素 转换酶，使血管紧张素II及醛固酮生成减少，从而扩张动脉，减少水钠潴留。同时抑制激肽 酶II的活性，使激肽降解减少，前列腺素(PGE2、PGI2)合成增加，后者可扩张静脉，改善肺微 循环。(四)炎症细胞因子拮抗剂在与炎症性肺损伤相关的细胞因子中最受关注和研究较多的是肿瘤坏死因子 (TNF)、IL-I β、IL-6和IL-8。当肺上皮和内皮受到直接或间接损伤时，这类细胞因子大量表达和分泌，通过激活中性粒细胞，使其渗出、聚集、与周围细胞发生粘附等作用而介导肺 损伤。细胞因子抗体、抑制剂及其受体的拮抗剂通过阻断细胞因子的上述作用，起到阻滞炎 症发生、发展的作用，从而发挥明显的临床疗效。(五)中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂中性粒细胞弹性蛋白酶能分解多种蛋白质包括细胞外基质成分、弹性蛋白、纤维 蛋白原、蛋白多糖和胶原质，并可损伤微血管内皮细胞导致肺水肿。因此，中性粒细胞弹性 蛋白酶是治疗肺部炎证损伤的一个靶点。(六)抗前列腺素类实验研究表明，在炎症反应的急性期，前列腺素产生增多主要依赖于环氧合酶 (COX)-2的合成。巨噬细胞被认为是C0X-2上调后产生前列腺素的主要源泉，而且COX催化 产生的前列腺素可诱导IL-6的表达，故选择性抑制C0X-2可以降低肺巨噬细胞的IL-6的 产生。另外，在角叉菜胶诱导产生的鼠皮下气肿模型和胸膜炎模型中，特异的C0X-2阻断剂 可成功地减轻炎症反应，提示C0X-2阻断剂可应用于治疗各种炎症而不产生有害副作用。(七)活性氧的相关治疗生物体内有氧化和抗氧化平衡关系，SOD、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶等是体内 重要的抗氧化剂。炎症反应时，大量氧自由基产生导致氧化和抗氧化平衡失调。外源性给 予SOD、CAT可减少02、H2O2的产生和纠正PGI2/TXA2平衡紊乱，减轻肺损伤。(八)中医中药治疗根据肺部感染性疾病的病理特点，中医药治疗的中心多集中于清热解毒的基础 上，重点防治痰热的危害。例如双黄连粉针剂由金银花、连翘、黄芩组成，现代药理研究证 实，该药有明显抗菌、抗病毒作用。近年来已被广泛应用于临床感染性疾病。通过病源学及 病理学方面的研究，提示该药对感染性疾患的作用是多方面的，不仅表现了对病毒、致病菌 有一定的抑制和杀灭作用，同时还有增强机体免疫力的作用，在抑制病毒，消除症状方面更 显其优点。从其药物组成来看，不仅适用于外感风热、风温的初期，而对多种温热病的实热 证均可使用。该针剂不仅可静脉给药，而且雾化吸入同样效果显著，可使药物直接作用于气 管或支气管粘膜，有利于消除炎性充血水肿，有较好的止咳祛痰作用。关于上述药物治疗的现状分析如下抗生素应用之初大大提高了人们对感染性疾病的治愈率，延长了人类的寿命。然 而，由于抗生素的长期不合理应用，现阶段出现了很多问题，除了抗生素本身的毒性反应 (如对神经系统、血液系统、肝、肾功能损害、胃肠道反应)、过敏反应、易造成二重感染外， 当前呼吸道感染治疗所面临的主要问题是细菌耐药情况越来越严重，越来越复杂。无论是 革兰氏阳性菌还是革兰氏阴性菌，我们都遇到了一些难对付的细菌，这些细菌有些至今无 可靠的治疗药物，而另外一些细菌的耐药性正以惊人的速度在增长，病原菌变迁给临床治 疗和康复带来了许多新难题。在SARS流行期间，激素强大的抗炎作用被用来防止机体对SARS病毒感染的过 度防御反应所致的组织损伤和器官衰竭，在降低病死率方面是较为成功的，但在挽救了很 多患者生命的同时，也带来了多方面的副作用，如SARS恢复期的骨坏死、二重感染、结核播 散、电解质紊乱以及糖尿病等，因此激素的应用，仍是一个有争议的问题。针对炎症级联反应病理环节研发的新药，如炎症细胞因子拮抗剂、中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂以及抗前列腺素类等，现在大多尚处于体外实验和动物实验阶段，仅有一 小部分药物进入临床研究。在最近10年内，国外学者对于拮抗炎症介质的治疗曾进行过 大规模、耗巨资、跨国度的多中心前瞻性临床试验，从已经完成的多项三期临床试验结果来 看，不能证明在缓解症状和降低病死率方面有益处。中医采用传统汤剂治疗该类疾病作了许多尝试，并对古方化裁基础上又有许多中 药颗粒剂、口服液以及静脉针剂问世，尽管有分型、分期、论治脏腑的不同，清热解毒仍为其 基本治则，但是清热解毒煎剂可使血液粘度升高，纤溶活性降低，这表明寒性的清热解毒药 对血液流动性和微循环产生不良影响和副作用。此外，中医治疗缺乏理论上的突破，中药复 方发挥疗效的有效成分、作用方式、途径和靶点等机理尚不十分清楚，且传统口服给药方式 收效慢，临床治疗中也只能将其纳入辅助用药的范围。所有这些方面都提示需要探寻更新的控制炎症的策略
本发明的一个目的是提供一种治疗感染性疾病的药物，通过改善炎症反应造成的 肺损伤而达到治疗作用。本发明的另一个目的是提供所述药物的制备方法及用途。本发明的目的是通过以下技术方案实现的本发明提供一种治疗感染性疾病的药物，所述药物包括以下成分黄芩、桅子、灯 盏细辛和胆酸。进一步，所述药物仅包含以下四味有效成分黄芩、桅子、灯盏细辛和胆酸。更进一步，所述的药物，其主要成分按重量份计包括黄芩(以黄芩苷计)60 120份、桅子(以桅子苷计)25 75份、灯盏细辛(以灯盏花乙素计)2 4份、胆酸25 75份。再进一步，优选地，所述的药物，其主要成分按重量份计包括黄芩(以黄芩苷 计)120份、桅子(以桅子苷计)25份、灯盏细辛(以灯盏花乙素计)4份、胆酸25份。本发明提供的所述药物选自如下的制剂注射剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、软胶囊 齐U、滴丸、口服液、散剂、丸剂。本发明还提供了所述药物的制备方法，包括以下步骤1)取黄芩加水提取三次，每次60min，滤过，收集滤液，合并，浓缩至原体积1/2左 右，加盐酸调节PH值至1 2，静置过夜，离心分离，沉淀物加水，加石灰水调pH值至7. 0， 滤过，收集滤液用盐酸调节PH值至1 2，静置过夜，离心分离，沉淀用乙醇洗涤，干燥，即得 黄芩苷；2)取桅子加水提取三次，每次60min，滤过，滤液浓缩，上树脂柱，用50%乙醇洗 脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，即得；3)取灯盏细辛加75%乙醇回流提取三次，每次2h，滤过，滤液回收乙醇，水沉，上 树脂柱，用水洗脱，收集洗脱液，浓缩，滤过，沉淀用10 %硫酸溶液调pH值至2. 0 2. 5，静 置，滤过，沉淀用乙醇、水洗至中性，干燥，用乙醇重结晶，干燥，粉碎，即得；(4)取以上步骤1)_3)所得三种提取物与胆酸混合均勻，按本领域常用的方法制 成制剂，优选地，所述胆酸为根据《中国药典》(2010年版二部)制备的熊去氧胆酸或根据 《国家药品标准》制备的猪去氧胆酸；5)取以上步骤1)-4)所得四种成份混合均勻，加辅料适量，用注射用水溶解，超滤，分装，制成注射剂；6)取以上步骤1)_4)所得四种成份混合均勻，加辅料适量，分别制成口服制剂。本发明还提供了所述药物在制备用于治疗下呼吸道感染性疾病的药物中的应用。进一步，所述下呼吸道感染性疾病选自慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张和/或 感染、肺脓疡、肺心病和/或肺部感染。本发明还提供了所述药物在制备用于抗微生物、抗炎/抗变态反应、清除氧自由 基和抗氧化损伤、调节免疫功能、抗凝血和抗血栓形成、改善微循环和/或保护血管内皮细 胞的药物中的应用。本发明还提供了所述药物在制备用于抗菌、抗流感病毒、镇咳和/或抗炎消肿的 药物中的应用。经大量现代药理学研究发现，本发明提供的药物中的成分对感染性疾病的多个病 理环节都有影响，不仅对病原微生物具有直接的抑制和杀伤作用，更重要的是药物对过度 的炎性反应具有抑制作用，该作用的实现体现在两个方面一是抗损伤作用，即抗微生物、 抗炎、抗变态反应、清除自由基和抗氧化等，也就是中医所谓的“驱邪”;二是促修复作用，即 通过调节免疫功能、保护受损的血管内皮细胞、改善微循环状态等增强机体的抗损伤能力， 促进组织修复，也就是中医所谓的“扶正”，体现了 “驱邪”和“扶正”的统一。中药在抗菌、 抗病毒方面远远不如西药抗生素，但中药的抗内毒素、抗炎、抗氧化以及增强机体免疫力的 功能，是抗生素所不具备的，这也正是中药抗感染的优势所在。本发明提供的治疗感染性疾病的药物，主要成分的配伍作用分析如下下呼吸道感染性疾病在临床上大多表现为发热、咳嗽、咳痰、胸痛或胸闷、气急或 气喘、或伴尿频、尿急、尿痛等，表现为热毒炽盛之象，因此清热解毒是该类疾病的经典治 法，然而，根据病变局部实变、水肿、糜烂、溃疡、缺血、血运障碍、组织变性、增生等病理改变 与血络瘀阻的现代病理学概念相似，将活血化瘀通络之法引入到呼吸系统感染性疾病的治 疗中。活血通络药物具有保护受损的内皮细胞、降低血液粘稠度，改善微循环的作用，有利 于渗出液的吸收和痰的排出，促进支气管肺组织功能的恢复，能够运用于呼吸道感染性疾 病的治疗。清热解毒煎剂与活血煎剂配伍对内毒素血症和非特异性炎症动物模型的作用为， 两类药配伍能使前列腺素E2、内毒素血浓度、全血还原粘度降低，伊文斯蓝渗出量减少，足 爪肿胀百分率下降，血浆皮质醇含量增加，纤溶活性增强。其中多数测定结果均优于两类单 独用药的动物模型组。由此证明，清热解毒煎剂与活血煎剂配伍后，更有利于解毒、消炎和 炎症的治疗[43]。同时由于活血药对清热解毒药其副作用有对抗作用，清热解毒活血煎剂可 使血液粘度降低，纤溶活性明显增强，因此，两类药合用可加速血液循环，以利毒素的清除， 减少清热解毒药的副作用。清热解毒药与活血化瘀配伍应用能增加生理情况下腹腔对细菌 吸收能力及腹膜炎情况下的吸收能力[44]。清热解毒药与活血化瘀药同用后产生的协同作 用还表现在抑制病毒性肺炎小鼠肺指数的升高，肺部病变的减轻，并能对抗病毒性肺炎家 兔的发热效应，控制炎性病灶，在降低血粘度，提高超氧化物歧化酶的活力方面也有协同作 用。因此，本发明提供的药物遵循中医药理论配伍而成，同时以研究实验和临床实践为基础 ，将清热解毒和凉血通络相结合，能有效阻抑下呼吸道感染性疾病炎症损伤级联反应。经过本发明人的大量实验验证，本发明药物各主要成分的抗炎症性损伤的药理作 用具体如下(一 )抗微生物作用黄芩含有的黄芩苷具有广谱的抗菌作用，如对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌与 肺炎链球菌等革兰氏阳性菌和脑膜炎奈瑟球菌、淋病奈瑟球菌等革兰氏阴性球菌有抑制作 用。黄芩苷与B-内酰胺类青霉素如羟氨苄青霉素合用能有效提高对耐青霉素酶金黄色葡 萄球菌的抗菌效价。黄芩苷还有抗肺炎衣原体和保护细胞作用。此外，黄芩苷在体外有较 好的抗白念珠菌作用桅子对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、卡他球菌、白喉杆菌、人型结核杆菌等具 有中等强度抗菌作用。其水浸液在体外能抑制各种皮肤真菌，水煎液在体外能杀死钩端螺 旋体及血吸虫，并且有抗埃可病毒的作用。胆酸也显示了对革兰氏阳性球菌较强的抑菌活性。( 二 )抗炎、抗变态反应作用黄芩苷、黄芩素及其它黄酮类化合物对多型变态反应有不同程度的抑制作用，尤 其对I型变态反应为强。黄芩抑制抗原与IgE结合，抑制肥大细胞释放组胺而成为较好的 临床抗变态反应剂。与变态反应有关的疾病最常见的是支气管哮喘，黄芩素对支气管过敏 性收缩及过敏性气喘均有缓解作用，并与麻黄碱有协同作用。桅子生品的抗炎作用最强，并具有抗过敏反应的作用。胆酸也具有抗炎、抗变态反应作用。(三)清除氧自由基和抗氧化损伤黄芩苷具有较强的自由基清除活性。灯盏花素同时具有清除氧自由基和抗氧化损伤的作用。牛黄具有抗氧化损伤的作用。(四)调节免疫功能黄芩苷对红细胞免疫粘附功能具有促进作用。桅子与当归组成的复方对与细胞免疫系统的机能失常有关贝切特氏综合征所表 现的口腔粘膜病变和外生殖器溃疡有效，且抑制IV型过敏性反应并对细胞免疫有抑制作用。(五)抗凝血和抗血栓形成黄芩素能抑制凝血酶及凝血酶受体紧张肽诱导的血纤维蛋白溶酶原激动剂抑制 因子-I(PAI-I)的生成。桅子甙具有抗血栓作用。灯盏花总黄酮在体外和体内对ADP、花生四烯酸(AA)或血小板活化因子(PAF)弓丨 起的血小板聚集均有明显抑制作用。灯盏花素既能影响内源性凝血途径，又能作用于外源 性凝血途径，其对血小板第3因子有较强的抑制作用，能减少凝血酶原转化为凝血酶，并能 显著增加纤维蛋白的纤溶活性。(六)改善微循环灯盏花素具有改善微循环的作用。(七)保护血管内皮细胞黄芩苷虽不能消除细菌内毒素(ET)所致的内皮细胞脱落现象的发生，但却很大 程度上保护内皮细胞间的细胞连接，减轻ET所致的胞浆疏松，线粒体肿胀和内质网扩张。桅子果实提取物(GFE)体外能增强内皮细胞的增殖。桅子果实水提取物可显著增 加细胞中DNA和蛋白质的合成。灯盏花素对血小板活化因子(P AF)致肺微血管内皮细胞损伤具有保护作用。灯盏 花素可抑制PAF诱导的肺微血管内皮细胞损伤。综上所述，本发明的有益效果如下本发明提供的治疗感染性疾病的药物，从中医络病理论出发，将中医宏观辨证与 西医微观辨病相结合，根据临床实践的基础上形成的中医理论_ “毒损肺络”病机理论，并 结合现代医学有关下呼吸道感染性疾病病理过程及治疗的研究成果，由黄芩、桅子、灯盏细 辛和胆酸配伍而成，针对感染性疾病的中心环节_炎症反应，清除炎症介质和自由基等有 害物质，改善局部微循环状态，从而减轻炎症病理损伤，同时具有调节整体内环境的作用， 能够有效治疗下呼吸道感染以及由感染诱发的急性肺损伤，且药效物质和作用机理相对清林 疋。

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中图1为RT-PCR扩增产物电泳图；图2为扩增熔解曲线图，其中，从左到右分别为TLR7、β-actin、Myd88、IRAK4、 P65、TRAF6。

实施例3鹿黄芩(以黄芩苷计)60mg、桅子(以桅子苷计)50mg、灯盏细辛(以灯盏花乙素 计)2mg、胆酸50mg按药品常用制备方法制备。制成的制剂用于药效学研究，能使肺灌洗液 中白细胞数显著降低。实施例4鹿黄芩(以黄芩苷计)60mg、桅子(以桅子苷计)25mg、灯盏细辛(以灯盏花乙素 计)2mg、胆酸50mg按药品常用制备方法制备。制成的制剂用于药效学研究，能使全肺泡灌 洗液肿瘤坏死因子显著降低。实施例5鹿黄芩(以黄芩苷计)120mg、桅子(以桅子苷计)50mg、灯盏细辛(以灯盏花乙素 计)4mg、胆酸75mg按药品常用制备方法制备。制成的制剂用于药效学研究，动物存活数最闻。实施例6鹿黄芩(以黄芩苷计)120mg、桅子(以桅子苷计)25mg、灯盏细辛(以灯盏花乙素 计)4mg、胆酸75mg按药品常用制备方法制备。制成的制剂用于药效学研究，能使肺指数显 著降低。实施例7鹿黄芩(以黄芩苷计)60mg、桅子(以桅子苷计)25mg、灯盏细辛(以灯盏花乙素 计)4mg、胆酸75mg按药品常用制备方法制备。制成的制剂用于药效学研究，能使肺勻浆中 NO浓度显著降低。实施例8和9研究了本发明提供的治疗感染性疾病的药物的抗病原微生物作用。 下呼吸道感染通常统称为肺部感染，病原微生物是引起各种肺部感染、炎症性疾病的主要 因素，主要有细菌，其次为病毒、支原体，偶有衣原体、立克次体等，在我国仍属细菌感染性 疾病高发的国家。病原微生物在肺内的生长繁殖，能造成多种组织损伤和功能活动的改变， 引起各种呼吸道症状，因此抑杀病原微生物对肺部感染的治疗具有重要意义。实施例8 体外抗菌作用(一)实验目的观察本发明药物体外对呼吸道感染常见细菌的抑杀作用，并采用试管稀释法测定 其最小抑菌浓度(MIC)。(二)实验材料1、实验用菌株实验所用菌株均为北京中医药大学基础医学院医学病原实验室提{共。金黄色葡萄球菌(简称“金葡”)(26102)乙型链球菌(简称“乙链”)(32204)枯草杆菌(简称“枯草”)(44813)大肠埃希菌(简称“大肠”)(44813) 铜绿假单胞菌(简称“绿脓”)(10104)白色念珠菌(简称“白念”)2、培养基营养肉汤、含血清营养肉汤、营养琼脂、真菌培养基，均为健力园医药公司提供。 3、药物实施例1提供的药物(以下简称“例1药物”)，颜色外观呈棕黄色，含 量17. 4mg/ml，批号=20060410 ；双黄连，600mg，批号0501004，哈药集团中药二厂；青霉素G钠，批号0503032，华业制药集团股份有限公司；硫酸链霉素，批号05111102，山东瑞阳制药有限公司。(三)实验方法1、菌液配制金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌分别接种于营养肉汤中；乙 型链球菌接种于血清肉汤中；白色念珠菌接种于真菌培养基中，37°C，18 24h培养后，将 培养18h的细菌用比浊法配制成1.5亿/ml的菌液，4°C保存(3天内使用)备用。2、药液配制用营养肉汤配制，药物原液浓度为例1药物，原液；双黄连，40mg/ml ；配好药物原 液4°C保存备用。药物的最终浓度例1药物(ml/ml) :0. 5、0. 25、0. 125,0. 0625,0. 0313,0 ； 双黄连为(mg/ml) :20、10、5、2· 5、1· 25、0· 625、0。3、试管法测定例1药物、双黄连及抗生素对不同细菌的最小抑菌浓度(MIC)每种待测药取8支试管，每支试管加入营养肉汤1ml，第1支试管加待测药原液 lml，混勻后取出Iml加入第2支，依次连续对倍稀，第7支为空白对照，第8支为实验菌对 照。液体总量为lml/管。药物最终浓度同2、药液配制。每管加入1.5亿/ml的菌液各 0.1ml。37°C，24h培养，观察结果，再将培养液转种至固体培养基上(金葡、枯草、大肠、绿 脓接种于普通平板，乙链接种于血平板，白念接种于虎红平板)，观察有无细菌生长，测出其 MIC。4、试管法测定例1药物与抗生素配伍对细菌的MIC 实验分2组进行，独立组检测抗生素单独对不同细菌的MIC ；伍用组检测例1药物 与抗生素伍用后对不同细菌的MIC。方法采用试管稀释法。独立组每种待测药取11支试管，每支试管加入液体培养基1ml，第1支加入待测药 原液1ml，混勻后取出Iml加入第2支试管，依次连续对倍稀释，第10支为空白对照，第11 支为菌株对照。液体总量为lml/管。药物最终浓度见表1。每管加入1.5亿/ml的菌液各 0.1ml。37°C，24h培养，观察结果。伍用组根据独立组得出的不同抗生素的MIC，除对照管外每支试管中加入0. 5ml 例1药物，抗生素最终浓度同独立组。方法同前。表1不同抗生素在试管内的最终浓度


本发明提供一种治疗感染性疾病的药物、其制备方法及用途，该药物由黄芩、栀子、灯盏细辛和胆酸配伍而成，针对感染性疾病的中心环节-炎症反应，清除炎症介质和自由基等有害物质，改善局部微循环状态，从而减轻炎症病理损伤，同时具有调节整体内环境的作用，能够有效治疗下呼吸道感染以及由感染诱发的急性肺损伤，且药效物质和作用机理相对清楚。