专利名称：一种治疗慢性乙型肝炎的制剂的制作方法 中西医对乙型肝炎的认识是一致的。乙型肝炎的病原体是乙肝病毒，病毒清除和 发病机制与机体对病毒抗原的免疫应答相关，慢性乙型肝炎表现为机体免疫功能低下，乙 肝病毒携带者表现为机体免疫耐受。中医认为，乙肝病毒是一种具有湿热性质的疫毒之邪， 是乙型肝炎的致病因素，然而毒邪是否致病，在一定程度上取决于人体正气的强弱。治疗 上，一是扶正，“正气存内，邪不可干”，以健脾补肾为要；二是祛邪，“邪去才能正安”，以清热 利湿解毒为祛邪之要。本发明的另一个目的是提供一种制备上述制剂的方法。 为了达到上述目的，本发明采用以下方案一种治疗慢性乙型肝炎的制剂，其特征在于按重量份由以下原料药制成发明内容 本发明的目的是为了克服现有技术中的不足之处，提供-肝炎的制剂； 白花蛇舌草300蒲公英200虎杖150田基黄200黄芪200五味子150丹参200赤芍200甘草100。本发明制备如上所述的一种治疗慢性乙型肝炎的制剂的方法，其特征在于包括以 下步骤按比例称量上述各原料药；加水煎煮二次，第一次煎煮2小时，第二次煎煮1小时， 合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，静置M小时，取上清液，加入尼泊金、苯甲酸钠适量，制 成1000ml,即得。
为了解该药的体外抗乙型肝炎病毒的作用，本发明以HBV转染的人肝癌细胞 (HepG2) 2215细胞株为靶细胞，拟通过体外细胞培养实验观察其对HBV分泌HBsAg和HBeAg 的抑制作用。
1材料与方法
1.1实验试剂与仪器
本发明制剂为水煎提取液，800C间歇灭菌3天，每次30min，离心2000rpm，取上清， 分装无菌管，-4°C冻存备用。2215细胞是HBVDNA传染人类肝癌细胞株!1印(；2所建立的细胞 株，来自广州空军医院病毒室。DMEM培养基(美国Gibco公司)，胎牛血清(美国Gibco公 司)，MTT (美国Sigma公司，使用时用PBS配制成0. 4mg/mL的浓度)，G418 (美国Sigma公 司)，胰蛋白酶(Serra公司)，CO2培养箱(德国SHEL B公司)，细胞培养板(美国Corning 公司)，酶联免疫检测仪(美国EXL-800型)。
1. 2实验方法
1. 2. 1细胞培养
采用DMEM培养液(含有10 %胎牛血清，380ug/mLG418，0. 03 % L-谷氨酰胺， 100IU/mL青霉素，100IU/mL链霉素)置37°C，5 % CO2孵育箱中培养。在长满2215细胞的 培养瓶内加0.25%胰酶37°C消化:3min，加培养液吹打，1 3传代，10天长满。取生长良好 状态的2215细胞，配制成5000个/mL的细胞悬液，接种于96孔细胞培养板，每孔IOOul，每 个稀释度3个复孔，设细胞对照。5天后收集上清检测HBsAg、HBeAg，余下细胞检测细胞存 活率。
1. 2. 2细胞存活率检测
参照建立的MTT法测定细胞存活率，吸去96孔板培养液，加入0. 4mg/mL的MTT液 IOOul/孔，37°C孵育4h，吸弃上清液，加入IOOul的DMSO溶解，用酶联免疫检测仪于490nm 波长检测，并按公式计算细胞存活率=(给药组OD均值-空白对照OD值)/(细胞对照OD 值-空白对照OD值)X 100%，用Reed-Muench法计算药物对细胞的半数有毒剂量TC5(1。
1. 3上清液中HBsAg、HBeAg的检测
采用上海科华生物科技有限公司的HBsAg、HBeAg检测试剂盒检测，具体操作方法 按说明书所示方法进行，并按以下公式计算药物对抗原的抑制率。药


本发明公开了一种治疗慢性乙型肝炎的制剂，其特征在于按重量份由以下原料药制成白花蛇舌草200～400；蒲公英100～300；虎杖50～250；田基黄80～300；黄芪100～300；五味子50～250；丹参100～300；赤芍100～300；甘草30～150。本发明制备治疗慢性乙型肝炎的制剂的方法，其特征在于包括以下步骤按比例称量上述各原料药；加水煎煮二次，第一次煎煮2小时，第二次煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，静置24小时，取上清液，加入尼泊金、苯甲酸钠适量，制成1000ml，即得。本发明的目的是为了克服现有技术中的不足之处，提供一种能有效治疗慢性乙型肝炎的制剂；本发明的另一个目的是提供一种制备上述制剂的方法。