专利名称：用于降血糖、降血脂、控制糖尿病并发症的组合物的制作方法 在现代物质文明不断提高的同时，由于工作繁忙、运动减少、饮食营养物质组合失当、精神压力大等原因，导致人体代谢机能失调，使得糖尿病的发病率显著上升，严重危害人类健康。随着糖尿病的发展，体内代谢紊乱，如得不到很好地控制，可导致心脏、血管、肾、神经等组织器官的慢性并发症，以致最终发生肾功能衰竭、脑中风或心肌梗死，从而危及生命。目前对糖尿病治疗的许多中成药物，在控制血糖、有效调节代谢、保护胰岛细胞、抑制重要脏器功能异常等具有明显的缺陷、因而也就不能降低、延缓糖尿病病变的发展，这些药物持久使用，必然导致药物不良反应的发生和对机体的损害。
本发明目的是提供一种具有降血糖、降血脂、控制糖尿病并发症的组合物，且持久使用也不会引起对人的机体的明显损害。本发明的技术方案是一种用于降血糖、降血脂、控制糖尿病并发症的组合物，它由如下组份组成葛根、鱼腥草和鬼箭羽。葛根本组合物中的葛根总黄酮等对糖尿病、糖尿病引起的心、肾、视网膜及神经病变均有明显的效果，能扩张冠脉增加心脏血供，扩张脑血管改善脑循环，也能有效抑制人体内血小板聚集。鱼腥草具有良好的抗炎、调节免疫等药理作用，常用于治疗肾脏多种疾病，另外，鱼腥草也能促进胰岛组织再生，使受损的、衰老的细胞恢复活力。鬼箭羽鬼箭羽能延缓实验性2型糖尿病大鼠的体重增长，降低糖尿病大鼠空腹血糖，改善糖耐量，明显降低糖尿病小鼠的高、低切变率下的全血黏度、同时鬼箭羽有调节血脂代谢的作用，可明显增加卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)活性，延缓动脉粥样硬化病变作用，说明鬼箭羽对于糖尿病及其慢性并发症有积极的防治作用。
鱼腥草中的酚类物质(原儿茶酸、阿福豆甙和槲皮甙等)对多种有毒物质有抗毒作用，鬼箭羽中金丝桃甙以及葛根异黄酮类物质能较好地抑制眼醛糖还原酶和糖基化终产物的形成，这些有效物质的协同作用能较好的防止糖尿病多种并发症。
所述的组合物中各组份的重量配比是葛根15％-70％；鱼腥草15％-60％；鬼箭羽10％-70％。
优选各组份的重量配比是葛根20％，鬼箭羽25％，鱼腥草55％。
另一优选方案中各组份的重量配比是葛根60％，鬼箭羽15％，鱼腥草25％。
第三种优选方案中各组份的重量配比是葛根25％，鬼箭羽60％，鱼腥草15％。
其中，所述的葛根为葛根总黄酮、鱼腥草为鱼腥草总黄酮、鬼箭羽为鬼箭羽总黄酮。
所述的葛根总黄酮、鱼腥草总黄酮、鬼箭羽总黄酮为由原料葛根、鱼腥草、鬼箭羽三种组份按重量配比要求分别进行乙醇提取、凝絮剂除杂及大孔树脂吸附、分离、纯化后得到的三种提取物，所述的各提取物中总黄酮的总重量含量都为10-85％；其中，所述的乙醇提取为将原料放在浓度为5-95％的乙醇溶液中浸泡后得到的萃取液；所述的凝絮剂除杂是将凝絮剂与萃取液混合后凝絮沉淀，去除沉淀物得到的澄清溶液；所述的大孔树脂吸附、分离、纯化为用大孔树脂对所述的澄清溶液进行吸附得到提取物，再将所述的大孔树脂与提取物进行分离，干燥后得到含有总黄酮的提取物。
所述的乙醇提取是在温度为35-85℃的条件下进行的。
所述的葛根总黄酮、鱼腥草总黄酮、鬼箭羽总黄酮为由原料葛根、鱼腥草、鬼箭羽三种组份按所述的重量配比混合后，再依次进行乙醇提取、凝絮剂除杂及大孔树脂吸附、分离、纯化后得到的混合提取物，所述的混合提取物中总黄酮的总重量含量为10-85％；其中，所述的乙醇提取为将原料放在浓度为5-95％的乙醇溶液中浸泡后得到萃取液；所述的凝絮剂除杂是将凝絮剂与萃取液混合后凝絮沉淀，去除沉淀物得到澄清溶液；所述的大孔树脂吸附、分离、纯化为用大孔树脂对所述的澄清溶液进行得到提取物，再将所述的大孔树脂与提取物进行分离，干燥后得到含有总黄酮的提取物。
所述的乙醇提取是在温度为35-85℃的条件下进行的。
本发明的组合物可以制成药物或保健食品。
本发明的组合物的剂型是任何一种药剂学上的剂型，如胶囊、片剂、丸剂、颗粒剂、外用制剂、液体制剂、半固体制剂等。
本发明与现有技术相比具有下列优点1、该组合物降糖作用明确，能显著降低二型糖尿病升高的血糖，并促进受损β细胞的修复，逐渐恢复胰岛功能也能提高组织对胰岛素的敏感性，降低胰岛素的消耗，避免受损细胞的衰竭。
2、显著降低血脂，升高高密度脂蛋白胆固醇，增强对代谢的改善作用，也能保护内皮功能，抑制血小板聚集、减少心血管系统并发症。
3、显著抑制醛糖还原酶活性、降低糖基化血红蛋白、降低过氧化脂质，保护细胞膜功能，抑制由多种有害物质造成的对细胞、组织的损伤。

一种用于降血糖、降血脂、控制糖尿病并发症的组合物，它由下列重量配比的组份组成葛根15％-70％；鱼腥草15％-60％；鬼箭羽10％-70％。
推荐的配方1为各组份的重量配比是葛根20％；鱼腥草55％；鬼箭羽25％推荐的配方2为各组份的重量配比是葛根35％；鱼腥草45％；鬼箭羽20％。
推荐的配方3为各组份的重量配比是葛根60％，鱼腥草25％，鬼箭羽1 5％。
推荐的配方4为各组份的重量配比是葛根25％；鱼腥草15％；鬼箭羽60％上述的葛根为葛根总黄酮、鱼腥草为鱼腥草总黄酮、鬼箭羽为鬼箭羽总黄酮。
葛根总黄酮、鱼腥草总黄酮、鬼箭羽总黄酮可按重量配比分开单独提取，取上述重量配比的原料葛根、鱼腥草、鬼箭羽放入提取溶媒为5-95％的乙醇溶液中浸泡，提取温度为35-85℃，提取时间每次2小时，共提取3次得到萃取液，萃取液减压回收乙醇、用以下凝絮剂除杂(壳聚糖、ZTC 1+1天然澄清剂，101果汁澄清剂)、用以下大孔树脂柱(AB-8，NKA-II，NKA-9，D-101，DM-301，D-101-I和聚酰胺等)吸附、分离纯化，用2-8体积、5-95％的乙醇溶液洗脱，一般情况下分别用5％、25％、55％、75％、95％乙醇溶液进行梯度洗脱，洗脱液回收乙醇，经真空干燥或喷雾干燥得到分别含有总黄酮的三种提取物，每一种提取物中总黄酮含量需达10-85％。
当然，葛根总黄酮、鱼腥草总黄酮、鬼箭羽总黄酮也可按重量比混合后进行混合提取，取上述重量配比的原料葛根、鱼腥草、鬼箭羽，混合后放入提取溶媒为5-95％的乙醇溶液中浸泡，提取温度为35-85℃，提取时间每次2小时，共提取3次得到萃取液，萃取液减压回收乙醇、用以下凝絮剂除杂(壳聚糖、ZTC1+1天然澄清剂，101果汁澄清剂)、用以下大孔树脂柱(AB-8，NKA-II，NKA-9，D-101，DM-301，D-101-I聚酰胺等)吸附、分离纯化，用2-8倍体积、5-95％的乙醇溶液洗脱，一般情况下分别用5％、25％、55％、75％、95％乙醇溶液进行梯度洗脱，洗脱液回收乙醇，经真空干燥或喷雾干燥，得到含有总黄酮的混合提取物，混合提取物中总黄酮的含量需达10-85％。
以下是药理和临床试验部分资料试验例一对链脲霉素诱导2型糖尿病小鼠血糖血脂的影响1).2型糖尿病小鼠的诱导C57/6J纯系小鼠，雄性，初始体重14-16g，饲用高糖高脂饲料六周后，空腹24h，腹腔注射链脲霉素80mg/kg，5天后取空腹血糖≥11-20mmol/L的成模鼠进行试验，另取C57/6J小鼠12只饲以普通饲料作为正常对照。
2).取成模小鼠随机分组，12只/组，分为模型对照组、组合物高、低剂量试验组，另取普通饲料小鼠作为正常对照。组合物以20和10g/kg/d的剂量(以生药材计)连续口服给药20天(正常对照与模型对照给予相当体积蒸馏水)，试验当天空腹12h，给药后，即予以葡萄糖负荷口服2g/kg，经眼眶静脉丛取血，按试剂盒要求，分别测定糖负荷前、后不同时间的血糖、血清游离脂肪酸、糖化血红蛋白。
3).结果该组合物对链脲霉素诱导的2型糖尿病小鼠血糖异常升高有明显的降低作用，也能明显改善糖耐量，降低血清游离脂肪酸、糖化血红蛋白。分别见表1-1，表1-2。
表1-1 组合物对2型糖尿病小鼠空腹血糖、血清游离脂肪酸和糖化血红蛋白的影响(n＝12，M±S)

与模型对照比较，ap＜0.05，bp＜0.01。
表1-2 组合物对2型糖尿病小鼠糖负荷时血糖的影响(n＝12，M±S )

与模型对照比较，ap＜0.05，bp＜0.01。
试验例二1.对链脲霉素诱导2型糖尿病大鼠血糖血脂的影响1).2型糖尿病大鼠的诱导SD大鼠，雄性，体重65-80g，饲用高糖高脂饲料六周后，空腹24h，腹腔注射链脲霉素30mg/kg，5天后取空腹血糖≥11-20mmol/L的成模鼠进行试验。另取10只SD大鼠饲以普通饲料作为正常对照。
2).取成模大鼠随机分组，10只/组，分为模型对照组，组合物高、低剂量试验组，另取普通饲料大鼠作为正常对照。组合物以5和2.5g/kg/d的剂量(以生药材计)连续口服给药20天(正常对照与模型对照给予相当体积蒸馏水)，试验当天空腹12h，给药后，即予以葡萄糖负荷口服2g/kg，经眼眶静脉丛取血，按试剂盒要求，分别测定糖负荷前、后不同时间的血糖、血清胰岛素、血脂、卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性。
3).结果组合物明显减低糖尿病大鼠血糖，显著改善糖耐量，减轻胰岛素的过度释放，明显提高卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性，有效升高HDL2-C/HDL3-C的比值，分别见表2-1，2-2。
表2-1 组合物对2型糖尿病大鼠胰岛素和血糖的影响(n＝10，M±S)

与模型对照比较，ap＜0.05，bp＜0.01。
表2-2 组合物对2型糖尿病大鼠卵磷脂胆固醇酰基转移酶和血脂的影响(n＝10，M±S)

与模型对照比较，ap＜0.05，bp＜0.01。
试验例三2.对链脲霉素诱导2型糖尿病大鼠血管内皮功能的影响1)按照上述，在试验结束时，经颈动脉取血，用20u/ml肝素抗凝收集全血1ml，5μM的ADP作诱导剂，利用电阻法测全血血小板聚集率；用2％EDTA-Na2抗凝，收集血样2ml，制备血浆冻存待测6-酮-前列腺素F1α和血栓素B2，测定按试剂盒要求进行。
2)结果由表五可见，对于受试SD大鼠血浆中6-keto-PGF1α含量各组间差异不显著，但对于TXB2模型组比正常组、治疗组含量要高很多，差异显著，因而显著升高6-keto-PGF1α/TXB2比值。G4和Aspirin显著抑制内皮细胞损伤大鼠血小板聚集率，格列美脲对此作用不显著。
表3组合物对2型糖尿病大鼠血管内皮功能的影响(n＝10，M±S)

与模型对照比较，ap＜0.05，bp＜0.01。
试验例四组合物大鼠含药血清对H202造成内皮细胞氧化损伤的保护作用1.含药血清对H202造模后ECV304细胞活力的影响1)血清的制备取正常大鼠8只，随机分为两组，组间雌雄数目相同，一组灌胃给予中药复方40g生药/kg体重，另一组给予等剂量蒸馏水作对照，连续给药三天，每日给药一次，末次给予双倍剂量后1h，采血，37℃水浴促凝，分离各组大鼠血清，分别得到空白大鼠血清和含药大鼠血清。无菌滤过分装，两星期内使用。
2)实验方法取对数生长期的ECV304细胞，密度为1.0×105个/ml接种于96孔培养板，每组平行6孔，每孔100μl，于37℃，5％ CO2饱和湿度条件下培养，待细胞贴壁后弃去培养基，换以含适当浓度大鼠含药血清、空白大鼠血清或25μmol/L维E的DMEM培养基预孵育12h，再加入终浓度为500μmol·L-1的H2O2进行氧化损伤4h，损伤结束后，每孔加入10μl的0.5％MTT再孵育4h后，吸弃上清液，每孔加入150μl的DMSO充分溶解结晶物，以酶联免疫检测仪测定570nm处的光密度值。其中，空白大鼠血清和含药大鼠血清的添加量在同一组别相同，大鼠血清添加量设为2％、4％和8％三个剂量组。
3)结果MTT法测定表明，大鼠口服组合物的含药血清，对过氧化氢所造成的细胞损伤有良好的保护作用，且优于维生素E，，按下式计算细胞相对存活率细胞相对存活率(％)＝大鼠含药血清OD或大鼠血清对照OD/小牛血清对照组OD×100％。
见表4-1。
表4-1 组合物大鼠含药血清对ECV304细胞相对存活率的影响(n＝6，M±S)

与模型对照比较，ap＜0.05.bp＜0.01。
2.含药血清对H202造模后ECV304细胞MDA含量和SOD活力的影响按照上述方法复制H202损伤模型，以细胞裂解液测定细胞中MDA的含量，以造模后细胞培养上清液测定细胞SOD的活力大小。(n＝6)表4-2 组合物大鼠含药血清对ECV304细胞相对存活率的影响(n＝6，M±S)

注与大鼠血清对照组比较，ap＜0.05，bp＜0.0

本发明涉及一种用于降血糖、降血脂、控制糖尿病并发症的组合物，它由如下组份组成葛根、鱼腥草、鬼箭羽，其中各组份的重量配比为葛根15％－70％、鱼腥草15％－60％、鬼箭羽10％－70％，所述的葛根为葛根总黄酮、鱼腥草为鱼腥草总黄酮、鬼箭羽为鬼箭羽总黄酮；此组合物能显著降低二型糖尿病升高的血糖，提高组织对胰岛素的敏感性，并促进受损β细胞的修复；也能显著降低血脂，改善代谢的作用，并有效保护内皮功能，抑制血小板聚集、减少心血管系统并发症；降低过氧化脂质，保护细胞膜功能，抑制由多种有害物质造成的对细胞、组织的损伤。