专利名称：治疗糖尿病的降糖甲制剂及其制备方法和质量控制方法降糖甲片收载于中华人民共和国卫生部药品标准，临床应用多年，组方严谨，配伍合理，已收入2004年国家基本药物目录，临床应用得到广大患者的认同和欢迎，具有坚实的临床基础，无毒副作用，疗效确切。通过市场调查，降糖甲片配合降糖药格列齐特片销售，可弥补西药不能缓解的消渴症状，市场潜力较大。但降糖甲片的质量控制标准简单，产品质量不易控制，加之片剂经过制粒、压片等工序，药物在体内的吸收要经过崩解、颗粒溶解等过程，药物吸收缓慢。
本发明的目的在于提供一种治疗糖尿病的降糖甲制剂及其制备方法和质量控制方法，本发明在现有降糖甲片的基础上进行研究和改进，将其制备成胶囊剂、颗粒剂、水丸或滴丸剂，药物吸收迅速，每次服用量减少；辅料用量少，生产工序简化，降低了生产成本；并提高了质量控制标准。本发明是这样构成的它是用黄芪642.6g、酒炙黄精642.6g、地黄642.6g、太子参642.6g和天花粉642.6g制成的胶囊剂、颗粒剂、水丸或滴丸剂。治疗糖尿病的降糖甲制剂的制备方法为取太子参129g粉碎成细粉，剩余的太子参与黄芪、黄精、地黄和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，第三次加6倍量水，煎煮1小时；合并煎液，滤过，滤液浓缩至约1050ml，加乙醇使含醇量为75％，搅匀，静置48小时，滤过，滤液浓缩至50℃热测相对密度为1.25～1.30的稠膏，加入太子参细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，加入适当辅料制成不同的制剂。降糖甲胶囊剂是这样制备的取太子参129g粉碎成细粉，剩余的太子参与黄芪、黄精、地黄和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，第三次加6倍量水，煎煮1小时；合并煎液，滤过，滤液浓缩至约1050ml，加乙醇使含醇量为75％，搅匀，静置48小时，滤过，滤液浓缩至50℃热测相对密度为1.25～1.30的稠膏，加入太子参细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，装肠溶胶囊，即得。降糖甲颗粒剂是这样制备的取太子参129g粉碎成细粉，剩余的太子参与黄芪、黄精、地黄和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，第三次加6倍量水，煎煮1小时；合并煎液，滤过，滤液浓缩至约1050ml，加乙醇使含醇量为75％，搅匀，静置48小时，滤过，滤液浓缩至50℃热测相对密度为1.25～1.30的稠膏，加入太子参细粉，1～4倍量的糊精、适量蛋白糖或甜蜜素、适量香精，制颗粒，干燥，包装，即得。降糖甲水丸是这样制备的取太子参129g粉碎成细粉，剩余的太子参与黄芪、黄精、地黄和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，第三次加6倍量水，煎煮1小时；合并煎液，滤过，滤液浓缩至约1050ml，加乙醇使含醇量为75％，搅匀，静置48小时，滤过，滤液浓缩至50℃热测相对密度为1.25～1.30的稠膏，加入太子参细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，用适量水泛制成丸，干燥，即得。
降糖甲滴丸剂这样制备取太子参与黄芪、黄精、地黄和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，第三次加6倍量水，煎煮1小时；合并煎液，滤过，滤液浓缩至约1200ml，加乙醇使含醇量为75％，搅匀，静置48小时，滤过，滤液浓缩至50℃热测相对密度为1.25～1.30的稠膏，加入PEG6000和PEG4000 500g～600g，滴制成丸，即得。
降糖甲制剂的质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查以及含量测定项目中的部分或全部，其中鉴别包括显微观察和对制剂中黄芪、黄精、太子参、天花粉的薄层色谱鉴别；含量测定是对制剂中黄芪所含黄芪甲苷的含量测定。
黄芪的鉴别方法是以黄芪对照药材为对照，以氯仿∶甲醇＝8.5∶0.5为展开剂的薄层色谱法；黄精的鉴别方法是以黄精对照药材为对照，以氯仿∶甲醇∶醋酸＝5∶4∶1为展开剂的薄层色谱法；太子参的鉴别方法是以太子参对照药材为对照，以氯仿∶甲醇∶14％氨水溶液＝2∶3∶1为展开剂的薄层色谱法；天花粉的鉴别方法是以天花粉对照药材为对照，以正丁醇∶乙醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶2∶3为展开剂的薄层色谱法。
具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)取本制剂，置显微镜下观察淀粉粒众多，单粒五类圆形及半圆形直径4～20μm，脐点呈裂缝状，偶见复粒，由2～3粒集成；导管主为螺纹及网状导管，直径10～22μm；(2)取装量差异项下的本制剂或其内容物1.5g，加醋酸乙酯20ml，加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇＝8.5∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碳酸钠试液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(3)取装量差异项下的本制剂或其内容物2g，加乙醇20ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮10ml使溶解，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取黄精对照药材2g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶醋酸＝5∶4∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％磷钼酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取装量差异项下的本制剂或其内容物3g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30毫升加热溶解，用乙醚提取3次，每次30ml；水层挥去乙醚，用水饱和的正丁醇提取3次，依次为40、30、20ml，合并正丁醇，加0.5毫升氨水，再以正丁醇饱和的水洗至中性，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取太子参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶14％氨水溶液＝2∶3∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％茚三酮溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(5)取装量差异项下的本制剂或其内容物2g，加甲醇25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取天花粉对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶乙醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶2∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％茚三酮溶液，105℃加热至斑点显色清晰；置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
黄芪中黄芪甲苷的含量测定方法是以黄芪甲苷对照品为对照，以乙腈∶水＝36∶64为流动相的高效液相色谱法。
具体的含量测定方法为照中国药典2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定系统适应用性试验用碳十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈∶水＝36∶64为流动相；用蒸发光散射检测器检测；理论塔板数按黄芪甲苷峰计应不低于6000；对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml含0.40mg的溶液，即得；
供试品溶液的制备 取装量差异项下的本制剂或其内容物6g，精密称定，置具塞三角烧瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，在250W、29～34kHz条件下超声处理1小时，放冷，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml，蒸干，残渣用加水饱和的正丁醇50ml溶解，以氨试液20ml洗涤，分取正丁醇液，蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至5ml，摇匀，即得；测定法精密吸取对照品溶液各10μl、20μl，供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法自然对数方程计算，即得；本胶囊剂每粒含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.13mg。颗粒剂每袋含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.2～0.4mg；水丸每1g含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.3mg；滴丸每1g含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.13mg。
本发明所述质量控制方法包括性状胶囊剂为肠溶胶囊剂，其内容物为棕色粉末；气微香，味甘苦；对于颗粒剂，药物为棕色颗粒；气微香，味甘苦；对于水丸，药物为棕黑色丸；气微香，味甘苦；对于滴丸剂，药物为深棕色丸；气微香，味甘苦；鉴别(1)取本制剂，置显微镜下观察淀粉粒众多，单粒五类圆形及半圆形直径4～20μm，脐点呈裂缝状，偶见复粒，由2～3粒集成；导管主为螺纹及网状导管，直径10～22μm；(2)取装量差异项下的本制剂或其内容物1.5g，加醋酸乙酯20ml，加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇＝8.5∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碳酸钠试液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(3)取装量差异项下的本制剂或其内容物2g，加乙醇20ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮10ml使溶解，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取黄精对照药材2g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶醋酸＝5∶4∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％磷钼酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)取装量差异项下的本制剂或其内容物3g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30毫升加热溶解，用乙醚提取3次，每次30ml；水层挥去乙醚，用水饱和的正丁醇提取3次，依次为40、30、20ml，合并正丁醇，加0.5毫升氨水，再以正丁醇饱和的水洗至中性，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取太子参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶14％氨水溶液＝2∶3∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％茚三酮溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(5)取装量差异项下的本制剂或其内容物2g，加甲醇25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取天花粉对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶乙醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶2∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％茚三酮溶液，105℃加热至斑点显色清晰；置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；检查应符合中国药典2000年版一部附录I各制剂项下有关的各项规定；含量测定照中国药典2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定系统适应用性试验用碳十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈∶水＝36∶64为流动相；用蒸发光散射检测器检测；理论塔板数按黄芪甲苷峰计应不低于6000；对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml含0.40mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取装量差异项下的本制剂或其内容物6g，精密称定，置具塞三角烧瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，在250W、29～34kHz条件下超声处理1小时，放冷，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml，蒸干，残渣用加水饱和的正丁醇50ml溶解，以氨试液20ml洗涤，分取正丁醇液，蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至5ml，摇匀，即得；测定法 精密吸取对照品溶液各10μl、20μl，供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法自然对数方程计算，即得；本胶囊剂每粒含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.13mg。颗粒剂每袋含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.2～0.4mg；水丸每1g含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.3mg；滴丸每1g含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.13mg。
本方中，黄芪味甘，微温，归肺、脾经。具有补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌、利水的功效，主治气血虚弱、自汗、久泻脱肛、子宫脱垂、肾炎浮肿、蛋白尿、糖尿病、慢性溃疡等症。黄精味甘，性微温，归脾、肺、肾经。补气养阴，健脾，润肺，益肾。具有很好的补肺，强筋骨，降血糖，填精髓，延缓人体衰老的作用。地黄性寒，味甘。归心、肝、肾经。清热凉血，养阴，生津；用于热病烦渴、发斑发疹、阴虚内热、吐血、衄血、糖尿病、传染性肝炎。太子参性平，味甘、微苦。归脾、肺经。具有益气健脾、生津润肺之功能。用于脾虚体倦、食欲不振、病后虚弱、气阴不足、自汗口渴、肺燥干咳。天花粉性微寒，味甘、微苦。归肺、胃经。具有清热生津、消肿排脓之功能。用于热病烦渴、肺热燥咳、内热消渴、疮疡肿毒。以上诸药合用，共奏补中益气，养阴生津之功。用于气阴两虚型消渴症(非胰岛素依赖型糖尿病)。
与现有技术相比，本发明药物吸收迅速，每次服用量减少，吸湿性小，稳定性好；生产工序简化，降低了生产成本；质量标准中增加了黄芪甲苷的含量测定及黄精、太子参、天花粉药材的薄层色谱鉴别，提高了降糖甲制剂的质量控制标准，从而有效确保了该制剂的临床疗效。
本申请人进行了一系列的试验研究，以优选、验证本发明药物制剂的制备工艺和质量控制方法，使其达到最佳效果。
实验例1制备工艺研究工艺条件的优选原片剂工艺中黄芪等四味药材加水煎煮提取，规定了煎煮次数，煎煮时间，但未明确加水量。在提取时间提取次数不变的情况下，申请人对加水量、药材吸水率等作单因素试验考察，并以黄芪甲苷转移率和总固体物收率为评价指标，对水煎煮工艺条件进行研究，以确定最佳提取工艺。
1.煎煮工艺研究1.1药材吸水率试验按处方比例称取1/15处方量药材4份，每份205.6g，分别加水6倍量(1233.6ml)浸没，于不同时间滤出浸泡液，直至吸水量不再增加为止，结果见表1。
表1药材吸水试验结果

结果表明，吸水率约为药材重量的200％，故第一次煎煮多加约2倍量的水。
1.2加水量的确定按处方1/10投料，照各试验号下的要求煎煮，浓缩为105ml。以加水量进行单因素考察，并以黄芪甲苷含量、总固体物收率为评价指标，筛选出最佳加水量，结果见表2。
1.2.1黄芪甲苷含量测定分析处方中君、臣药的有效成分，以君药黄芪中黄芪甲苷的转移率为指标，对加水量进行考察。黄芪甲苷含量测定方法照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。
样品处理 取样品溶液适量，置具塞三角烧瓶中浓缩近干，精密加甲醇50ml，称定重量，超声处理(250W，29～34kHz)1小时，放冷，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml，蒸干，残渣用加水饱和的正丁醇50ml溶解，以氨试液20ml洗涤，分取正丁醇液，蒸干，残渣用5％甲醇溶解并定容至5ml，摇匀，用0.45μm滤膜滤过，即得供试品溶液色谱条件 色谱柱迪马SB-C18(5μm，150×4.6 i.d.mm)，产品系列号8011091；流动相∶乙腈-水(36∶64)；流速0.7ml/min；温度30℃；蒸发光检测器条件空气1.6L/min；漂移管温度41℃；信号增益(Gain)1；闯击器(Impactor)开(ON)。
系统适用性试验 用碳十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(36∶64)为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论塔板数按黄芪甲苷峰计应不低于6000。
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
1.2.2总固体物测定 精密吸取药材煎煮浓缩液50ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，挥干，于105℃干燥3小时，移至干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算，即得。
表2加水量考察结果

50ml浓缩液相当于药材量146.86g，含黄芪药材30.60g，药材含黄芪甲苷0.054％。
从表2结果可见，煎煮三次，各次加水量分别为12，10，8倍与10，8，6倍对黄芪甲苷转移率和总固体物收率无明显影响。从节省工时，降低能耗的角度，选择2号试验的加水量方案，即药材加水煎煮三次，第一次加水10倍量，煎煮2小时(第一次多加2倍量水)，第二次加水8倍量，煎煮1小时，第三次加水6倍量，煎煮1小时。滤过，合并滤液，浓缩至1050ml，备用。
1.3浸膏得率及工艺稳定性考察分别取1、2、3倍处方量黄芪、黄精(酒炙)、地黄、太子参、天花粉三份，按优选的工艺进行提取，浓缩，干燥，考察黄芪甲苷转移率、收膏率及稳定性。试验结果表明黄芪甲苷平均转移率为67.17％，RSD＝3.92％；浸膏得率为10.24％，RSD＝3.50％。说明所选提取工艺稳定可行，结果见表3。
表3工艺稳定性验证试验

药材含黄芪甲苷0.054％，投料药材含黄芪20.84％，含黄芪甲苷理论量分别为0.347g，0.694g，1.041g。
2.太子参粉碎工艺2.1药材前处理 取太子参拣选除去杂质，称取处方比例量。
2.2粉碎过筛 药材粉碎成细粉(指能全部通过五号筛，并含能通过六号筛不少于95％的粉末)，筛分后的筛余料(“头子”)于80℃干燥后再粉碎、过筛，备用。
3.干燥工艺研究取1倍处方量的黄芪等四味药材，按拟订的煎煮工艺提取，浓缩，醇沉，浓缩至相对密度为1.28(50℃热测)，分为4份。分别加入太子参细粉32.25g，混匀，置不同条件下干燥，粉碎。取样测定黄芪甲苷含量，结果见表4。
表4不同干燥条件的比较


总药材3213g，煎煮药材量3084g，细粉129g，1/4＝32.25g。
干浸膏收率10.76％、10.70％、10.47％、10.35％，干浸膏重82.99g、82.50g、80.73g、79.82g。
药材含黄芪甲苷0.054％，每份含黄芪160.65g，黄芪甲苷理论量0.0868g。
试验结果表明，除100℃常压干燥黄芪甲苷损失率较高外，其余干燥条件对黄芪甲苷无明显影响。真空干燥时间短，样品质地疏松，易于粉碎。故选用60～80℃真空干燥。
实验例2成型工艺研究一、胶囊剂成型工艺(一)方中制备工艺为黄芪等四味药材煎煮提取，太子参部分药材细粉收膏，粉碎后填充胶囊。内容物的流动性对胶囊的填充有影响。通过测定粉末休止角，结果表明，粉末的流动性均较好，可直接填充胶囊，无需进行制粒。样品干燥后根据制成总量，再加适量(5g～10g)淀粉调节总量，以保证生药日服用量的一致。即药液浓缩至稠膏后加生药细粉收膏，混合，60～80℃减压干燥，粉碎，用适量淀粉调整总量至450g，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。
(二)处方量、日剂量、装量、规格的确定1处方量计算根据处方工艺条件筛选出的工艺数据计算处方量，并以原片剂处方量进行了比较。
1.1降糖甲片处方共含生药2142g，制成1000片，每1片含生药2.142g。1次6片，1日3次，每日服用生药量38.556g。
1.2降糖甲胶囊处方共含生药3213g，制成1000粒，每粒含生药3.213g。服用量1次4粒，1日3次，每日服用生药量38.556g。
两剂型每次和每日服用生药量相同。
1.3干浸膏根据试验结果，本制剂干浸膏平均收率为10.24％，得干膏粉3084×10.24％＝315.80g2制剂处方干浸膏粉315.8g
生药细粉 129g补加淀粉 5～10g共制1000粒(0.45g/粒)淀粉实际加入量可根据浸膏的实际收率进行调整，使总制备量为450g，以保证每日服用的生药量不变。
(三)粉末吸湿性考察将不同浓度的硫酸溶液置于干燥器中密封于25℃恒温干燥箱中放置24小时，即可获得不同的恒温恒湿的实验条件。精密称取经80℃恒温干燥3小时的降糖甲胶囊内容物(每份约2g)于恒重的称量瓶中，再将称量瓶置于上述恒温恒湿条件的干燥器中放置3天，取出，精密称重，计算出吸湿率，结果见表5。
表5样品吸湿率

以吸湿率为纵坐标，相对湿度为横坐标作图，得吸湿率曲线。
从吸湿率曲线可知，降糖甲胶囊临界相对湿度(CRH)约为55％。由此可确定本制剂的贮存条件。
(四)中试按本发明拟订的处方和制法，10倍处方量投料，对生产工艺中各项指标进行检测，以进一步考察本制剂制备工艺的合理性，试验结果表明，制备工艺路线合理，工艺条件符合工厂生产要求。
二、颗粒剂成型工艺(一)工艺研究 由制备工艺提取的清膏，加入适量糊精收膏，易干燥，干燥后干浸膏的吸湿性明显改善。本制剂为颗粒，需加入适量蔗糖、蛋白糖或柠檬酸作矫味剂。经试验制备800～1500g颗粒，以加入糊精300～1000g、2％的蛋白糖16～30g、柠檬酸5～20g、香精5～20ml为宜。采用不同浓度乙醇湿法制粒，结果制粒时的乙醇浓度低于75％时，难以制粒，成型后颗粒易结块，高于85％时颗粒成型不好，粒度不合格。故选75％乙醇润湿制粒，80℃真空干燥，即得。
(二)制剂处方干浸膏粉 414g
蛋白糖(2％) 16～30g糊精 300～1000g柠檬酸5～20g橘子香精 5～20ml共制800～1500g糊精实际加入量可根据浸膏的实际收率进行调整，以保证每日服用的生药量不变。
(三)颗粒吸湿性考察试验结果表明吸湿性与环境的相对湿度有关。相对湿度在70％以下时，未见明显吸湿。临界相对湿度为70％。因此，在生产过程中应将相对湿度控制在70％以下。
表6样品吸湿率

(四)中试按拟订的制备工艺生产三批(10倍处方量)，对生产工艺中各项指标进行检测，以进一步考核本制剂制备工艺的合理性，试验结果表明，该制备工艺路线合理，工艺条件符合工厂生产要求。
三、申请人同样对水丸和滴丸剂的成型工艺进行了试验研究，结果表明，本发明制成水丸时，不加入辅料的效果更好；而制成滴丸剂时，选用PEG6000和PEG4000作为基质的效果较好，且其最佳用量为500g～600g。
实验例3质量控制方法研究1.鉴别本制剂由黄芪、黄精(酒炙)、地黄、太子参、天花粉五味中药经提取而成。原质量标准中华人民共和国卫生部药品标准(中药成方制剂第八册104页)“降糖甲片”(标准号WS3-B-1570-93)中鉴别(1)为太子参生粉的显微鉴别，(2)、(3)分别为黄芪、黄精的薄层鉴别，为提高该制剂的质量标准，申请人对方中的其余药材均进行了薄层色谱鉴别研究。
1.1仪器及试药REPROSTAR3薄层色谱成像系统(瑞士GAMAG)；黄芪对照药材(批号0974-200106)、黄精对照药材(1341-200401)、太子参对照药材(批号1004-200203)、天花粉对照药材(批号1361-200401)。以上对照药材均购至中国药品生物制品鉴定所；乙醚、氯仿、冰醋酸、正丁醇、甲醇、乙醇等均为分析纯；硅胶G预制板(青岛海洋化工厂)；硅胶G薄层板(自制)。
1.2鉴别(1)同原标准。
(2)同原标准。
(3)同原标准。
(4)对方中太子参药材的薄层色谱鉴别供试品溶液的制备取降糖甲制剂或其内容物3g，加入甲醇50ml超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干。残渣加水50ml加热溶解，放冷后，转移至分液漏斗中。用乙醚提取5次，每次30ml，水层挥去乙醚，用水饱和的正丁醇提取3次(40，30，20ml)，合并正丁醇提取液，加0.5毫升氨水，再以正丁醇饱和的水洗至中性，水浴上蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。
对照药材溶液的制备取对照药材1g，同法制成对照药材溶液。
阴性对照溶液的制备取去除太子参的阴性制剂3克，同法制成阴性对照溶液。
薄层色谱层析条件硅胶G板，展开剂氯仿-甲醇-14％氨水溶液(2∶3∶1)，展开，取出，晾干，喷以5％茚三酮溶液，于105℃加热至斑点显色清晰。曾以正丁醇-乙酸乙酯-水-甲醇(4∶1∶5∶0.5)展开系统的多种比例进行展开，取出，晾干，分别于日光和365nm紫外灯下检视，经反复试验比较，以氯仿-甲醇-14％氨水溶液(2∶3∶1)为展开剂展开效果较好，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显紫红色的斑点，阴性对照无干扰，故该项鉴别列入本发明质量标准。
(5)对方中天花粉药材的薄层色谱鉴别供试品溶液的制备取降糖甲制剂样品2g，加甲醇25ml，超声提取30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。
对照药材溶液的制备取天花粉对照药材1g，同法制成对照药材溶液。
阴性对照溶液的制备取去除天花粉药材的阴性制剂2克，同法制成阴性对照溶液。
薄层色谱层析条件硅胶G板，展开剂正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水(8∶2∶2∶3)，显色剂5％茚三酮溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰。曾经用该展开系统的各种比例和不同的展开系统反复试验，结果以以上展开剂展开，色谱分离好，斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。故该项鉴别列入本发明质量标准。
2.检查 按照各制剂项下的有关规定(《中国药典》2000年版一部附录I)进行检查。检查指标、方法及结果见表7。
2.1水分 照《中国药典》2000年版一部附录IL胶囊剂项下相应方法检测。
2.2装量差异 照《中国药典》2000年版一部附录IL胶囊剂项下相应方法检测。
2.3崩解时限 照《中国药典》2000年版一部附录IL胶囊剂项下相应方法检测。
2.4微生物限度 照《中国药典》2000年版一部附录XIIIC的检查方法及胶囊剂微生物限度标准进行检查。
2.5重金属检查 照《中国药典》2000年版一部附录IX E项下重金属检查法(第二法)检查。
取本制剂或其内容物2g，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸1ml，使润湿，用低温加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5ml，蒸干除尽氧化氮，放冷，在500～600℃炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸2ml置水浴上蒸干，加水15ml，滴加氨试液至酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml，微热溶解，移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml，得样品管。另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液2ml(每1ml相当于10μg的Pb)，再用水稀释成25ml，得标准铅溶液管。依法检查，即得。
检测结果三批样品的样品管显示的颜色均浅于标准铅溶液管颜色，说明本制剂重金属含量低于百万分之十。故不列入本发明质量标准。
2.6砷盐检查 照《中国药典》2000年版一部附录ⅨF项下砷盐检查法(第一法)检查。
取本制剂或其内容物1g，加氢氧化钙0.5g，混匀，加水少量搅拌均匀，干燥，先用小火烧灼使炭化，再于500～600℃炽灼至完全灰化，加盐酸5ml，水21ml，得样品管。依法检查，即得。
检测结果三批样品的样品管所产生的砷斑颜色均浅于标准砷斑颜色，说明本制剂砷盐含量均低于百万分之二。故不列入本发明质量标准。
表7降糖甲制剂检查项目研究结果
由表7可知，上述批次降糖甲制剂样品的检查项目都在《中国药典》2000年版一部附录I所规定的范围之内。
3.含量测定 根据对方中各味药材的化学成分分析，申请人在试验中对方中黄芪所含黄芪甲苷的含量进行了测定，并对测定方法进行了研究。
3.1仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪，包括Agilent-G1312A二元泵，61315B二极管阵列检测器，G1313自动进样器，G1316A柱温箱，G1322A真空脱气机，Agilent-A.08.03[847]化学工作站；蒸发光散射检测器(美国奥泰ELSD 2000)；超声波清洗机(250W，29～34kHz；北京超声设备厂)。
3.2试药 乙腈(色谱纯)；水为重蒸水；黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所，含量测定用，批号0781-200109)。
3.3色谱条件 色谱柱迪马SB-C18(5μm，150×4.6 i.d.mm)，产品系列号8011091；流动相乙腈-水(36∶64)；流速0.7ml/min；温度30℃；蒸发光检测器条件空气1.6L/min；漂移管温度41℃；信号增益(Gain)1；闯击器(Impactor)开(ON)。
3.4系统适用性试验 分别取黄芪甲苷对照品溶液、制剂供试品溶液及缺黄芪药材的阴性对照溶液、空白溶剂注入液相色谱仪，记录色谱图。可见，黄芪甲苷的保留时间tR约为10.0分钟，即本试验条件下黄芪甲苷与其他组分分离完全。理论塔板数以黄芪甲苷峰计算为6000，黄芪甲苷与及其他组分峰的分离度大于1.5。故定理论板数以黄芪甲苷峰计，应不低于5000。
3.5检测器参数的选择 根据流动相种类和比例，通过观察在不同漂移管温度和不同空气流速进样时黄芪甲苷的信号强度，再结合基线噪音的情况，最后确定漂移管温度为41℃，空气流速为1.6L/min，信号增益(Gain)为1。
3.6黄芪甲苷对照品纯度检查 称取黄芪甲苷对照品适量，用甲醇配制成每1ml含1mg的对照品溶液，吸取该溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，用峰面积归一化计算黄芪甲苷含量为100.0％。
3.7线性关系考察3.7.1对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲苷对照品10.10mg，置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度、摇匀，即得浓度为0.404mg/ml的对照品溶液。
3.7.2标准曲线的绘制 分别精密吸取上述对照品溶液4、8、12、16、20、25μl，注入液相色谱仪，记录色谱，以峰面积为横坐标、进样量为纵坐标，结果发现，线性关系不好(γ＝0.99479)，而以峰面积的自然对数(lnA)和进样量的自然对数(lnM)进行线性回归计算，得线性回归方程lnM＝0.679825lnA-2.797564(r＝0.999955)，由于该回归方程不通过坐标原点，故正文采用外标两点法自然对数方程计算含量。线性范围1.616～10.100μg。
3.8供试品溶液的制备制剂中黄芪药材所含的黄芪甲苷为已提取出来的游离化合物，该类化合物只需用甲醇、乙醇等溶剂溶解即可，试验中，采用超声波提取，并分别考察了以不同浓度甲醇为提取溶剂、超声处理时间、净化方法等，结果以甲醇为溶剂，超声处理1小时的方法最为有效。
3.8.1供试品黄芪甲苷提取溶剂的选择以不同浓度的甲醇为溶剂，采用超声处理60min的方法提取制剂样品中黄芪甲苷，结果见表8。
表8制剂用不同提取方法的结果比较

从表8中可见，用50～100％甲醇超声处理50min后的结果基本一致，由于提取液在净化处理中需蒸干，故选用甲醇为提取溶剂。
3.8.2 超声处理时间考察 以甲醇为溶剂，考察不同超声处理时间的结果，见表9。
表9不同超声处理时间的结果比较

结果超声处理60分钟与90分钟结果基本一致，故选用超声处理60分钟。
3.8.3净化方法的考察 由于制剂成分复杂，直接用甲醇提取液进样测定，干扰黄芪甲苷的分离，将甲醇提取液蒸干后，残渣用水饱和的正丁醇溶解，用氨试液洗涤正丁醇液，除去干扰物质，经考察，用20ml氨试液洗涤一次后的供试品溶液不干扰黄芪甲苷的测定，且回收率好。
3.8.4供试品溶液的制备 取装量差异项下的本制剂或其内容物6.0g，精密称定，置具塞三角烧瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，超声处理1小时，冷后，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml，蒸干，残渣用加水饱和的正丁醇50ml溶解，以氨试液20ml洗涤，分取正丁醇液，蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至5ml，摇匀，即得。
3.8.5阴性对照液的制备 取缺黄芪药材的阴性对照品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。
3.9精密度试验 取对照品溶液(0.404mg/ml)10μl，重复进样5次，测定峰面积(结果见表10)，RSD＝1.05％。
表10黄芪甲苷的精密度试验

3.10重复性试验取供试品(20040701)，按本发明质量标准中供试品溶液的制备方法，制备3个不同浓度供试品溶液各3份，分别精密吸取10μl进样，测定峰面积，计算(结果见表11)，平均含量0.829mg/g，RSD＝0.99％，结果表明，重复性良好。
表11制剂供试品中黄芪甲苷的重复性试验

3.11稳定性试验取一供试品(20040701)，按本发明质量标准中供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，按规定的时间，精密吸取10μl进样测定(表12)，结果表明制剂供试品溶液中黄芪甲苷在8小时内稳定。
表12供试品中黄芪甲苷稳定性试验

3.11回收率试验 称取已测定含量的制剂(平均含量0.829mg/g)9份，分别按下表精密加入黄芪甲苷对照品适量，按本发明质量标准制备供试品溶液，分别精密吸取10μl进样，测定峰面积(结果见表13)，计算，黄芪甲苷的平均回收率为100.42％，RSD＝1.70％。
表13制剂供试品中黄芪甲苷的回收率试验

3.12样品测定 按本发明质量标准制备降糖甲制剂供试品溶液和对照品溶液，分别精密吸取供试品溶液10μl、对照品溶液10μl、20μl进样，记录色谱，测定峰面积，计算含量。
十批样品中黄芪甲苷的含量测定结果见表14。
表14降糖甲制剂中黄芪甲苷含量测定结果


3.14样品黄芪甲苷含量限度 从10批降糖甲胶囊中试样品测定结果可见，各批号样品中黄芪甲苷提取率均在50％以上，故制剂中黄芪甲苷提取率按不低于50％计。每1粒胶囊剂中黄芪甲苷含量限度计算如下黄芪甲苷含量限度＝制剂含黄芪药材(g)×黄芪药材含黄芪甲苷限度×提取率×片重(g)/制备量(g)＝642.6g×0.04％×50％×0.45g×1000/450g＝0.129mg/粒，故暂定本胶囊剂每粒含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于0.13mg。同样计算可得，颗粒剂每袋含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.2～0.4mg；水丸每1g含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.3mg；滴丸每1g含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.13mg。

本发明的实施例2黄芪642.6g、黄精(酒炙)642.6g、地黄642.6g、太子参642.6g、天花粉642.6g取太子参129g粉碎成细粉，剩余的太子参与黄芪、黄精、地黄和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，第三次加6倍量水，煎煮1小时；合并煎液，滤过，滤液浓缩至约1050ml，加乙醇使含醇量为75％，搅匀，静置48小时，滤过，滤液浓缩至50℃热测相对密度为1.25～1.30的稠膏，加入太子参细粉、2倍量的糊精和2％的蛋白糖20g，用75％乙醇润湿制颗粒，80℃真空干燥，包装，每袋装8g～15g，即得颗粒剂。本制剂口服，一次1～2袋，一日3次。
本发明的实施例3黄芪642.6g、黄精(酒炙)642.6g、地黄642.6g、太子参642.6g、天花粉642.6g取太子参129g粉碎成细粉，剩余的太子参与黄芪、黄精、地黄和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，第三次加6倍量水，煎煮1小时；合并煎液，滤过，滤液浓缩至约1060ml，加乙醇使含醇量为75％，搅匀，静置48小时，滤过，滤液浓缩至50℃热测相对密度为1.25～1.30的稠膏，加入太子参细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，用适量水泛制成丸，干燥，制成400g～500g，即得水丸。本制剂口服，一次1～2g，一日3次。
本发明的实施例4黄芪642.6g、黄精(酒炙)642.6g、地黄642.6g、太子参642.6g、天花粉642.6g取太子参与黄芪、黄精、地黄和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，第三次加6倍量水，煎煮1小时；合并煎液，滤过，滤液浓缩至约1200ml，加乙醇使含醇量为75％，搅匀，静置48小时，滤过，滤液浓缩至50℃热测相对密度为1.25～1.30的稠膏，加入PEG6000和PEG4000 500g～600g，滴制成丸，制成1000g，即得滴丸剂。本制剂口服，一次10～20粒，一日3次。
本发明的实施例5降糖甲制剂的质量控制方法包括性状胶囊剂为肠溶胶囊剂，其内容物为棕色粉末；气微香，味甘苦；对于颗粒剂，药物为棕色颗粒；气微香，味甘苦；对于水丸，药物为棕黑色丸；气微香，味甘苦；对于滴丸剂，药物为深棕色丸；气微香，味甘苦。
鉴别(1)取本制剂，置显微镜下观察淀粉粒众多，单粒五类圆形及半圆形直径4～20μm，脐点呈裂缝状，偶见复粒，由2～3粒集成；导管主为螺纹及网状导管，直径10～22μm；(2)取装量差异项下的本制剂或其内容物1.5g，加醋酸乙酯20ml，加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇＝8.5∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碳酸钠试液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
(3)取装量差异项下的本制剂或其内容物2g，加乙醇20ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮10ml使溶解，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取黄精对照药材2g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶醋酸＝5∶4∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％磷钼酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取装量差异项下的本制剂或其内容物3g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30毫升加热溶解，用乙醚提取3次，每次30ml；水层挥去乙醚，用水饱和的正丁醇提取3次，依次为40、30、20ml，合并正丁醇，加0.5毫升氨水，再以正丁醇饱和的水洗至中性，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取太子参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶14％氨水溶液＝2∶3∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％茚三酮溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(5)取装量差异项下的本制剂或其内容物2g，加甲醇25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取天花粉对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶乙醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶2∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％茚三酮溶液，105℃加热至斑点显色清晰；置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；检查应符合中国药典2000年版一部附录I各制剂项下有关的各项规定；含量测定照中国药典2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定系统适应用性试验 用碳十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈∶水＝36∶64为流动相；用蒸发光散射检测器检测；理论塔板数按黄芪甲苷峰计应不低于6000；对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml含0.40mg的溶液，即得；供试品溶液的制备 取装量差异项下的本制剂或其内容物6g，精密称定，置具塞三角烧瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，在250W、29～34kHz条件下超声处理1小时，放冷，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml，蒸干，残渣用加水饱和的正丁醇50ml溶解，以氨试液20ml洗涤，分取正丁醇液，蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至5ml，摇匀，即得；测定法 精密吸取对照品溶液各10μl、20μl，供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法自然对数方程计算，即得；本胶囊剂每粒含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.13mg；颗粒剂每袋含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.2～0.4mg；水丸每1g含黄芪以黄芪甲苷C41H68014计，不得少于0.3mg；滴丸每1g含黄芪以黄芪甲苷C41H68O14计，不得少于0.13mg。


本发明提供了一种治疗糖尿病的降糖甲制剂及其制备方法和质量控制方法，它是用黄芪642.6g、酒炙黄精642.6g、地黄642.6g、太子参642.6g和天花粉642.6g制成的胶囊剂、颗粒剂、水丸或滴丸剂。与现有技术相比，本发明药物吸收迅速，每次服用量减少，吸湿性小，稳定性好；生产工序简化，降低了生产成本；质量标准中增加了黄芪甲苷的含量测定及黄精、太子参、天花粉药材的薄层色谱鉴别，提高了降糖甲制剂的质量控制标准，从而有效确保了该制剂的临床疗效。