专利名称：胆清片在制备治疗高血脂、脂肪肝药物中的应用的制作方法 胆清片是由虎帐、竹叶柴胡、栀子、香附组成的纯中药制剂，具有清化湿热、疏肝利胆，用于慢性胆囊炎肝胆湿热症，对胆清片的研究已有文献报道。CN1269237A公开了胆清片的处方及其生产方法，它是选用一定重量比的虎杖、竹叶柴胡、栀子、香附为配方，并将竹叶柴胡、栀子、香附分别研磨成粗粉，经加水煎煮多次提取滤液，制成稠膏，虎杖采用乙醇加热回流提取数次，制成稠膏，将所制的各种稠膏合并干燥，制成粉，再加入赋形剂即可制成各种剂型的药。该产品具有清化湿热、疏肝利胆的作用，主治慢性胆囊炎肝胆湿热症，其疗效显著，主症起效快，具有改善全身症状明显的特点，其有效率可达95％以上。但到目前为止，尚未见有关胆清片用于治疗高血脂、脂肪肝的报道。
本发明的目的是提供胆清片的一种新的治疗用途，即胆清片在治疗心血管系统疾病高血脂的药物中的应用。本发明的另一个目的是提供胆清片的一种新的治疗用途，即胆清片在治疗脂肪肝的药物中的应用。胆清片是以疏肝利胆、清热利湿理论为依据，选用虎杖、柴胡、栀子等中药经水、醇处理后研制而成的纯中药复方制剂。具体制备方法参见中国专利申请CN1269237A。虎杖、竹叶柴胡、栀子、香附四味药，虎杖粉碎成粗粉，用70％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩成稠膏；竹叶柴胡等三味加水煎煮二次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏。合并稠膏，干燥，研成细粉，加入淀粉适量，混匀，制粒，压制成1000片，包薄膜衣，即得胆清片。通过新的药理实验研究结果表明胆清片具有治疗高血脂症、脂肪肝症的用途1、胆清片治疗高血脂的作用(1)对蛋黄乳致小鼠急性高脂血症的影响模型组血清TG及TC明显高于对照组，表明高脂血症造模成功；阳性对照非诺贝特及胆清片中、高剂量组，能明显降低蛋黄乳致急性高脂血症小鼠的血脂水平，使TC及TG显著下降。见表1表-1胆清片对蛋黄乳致小鼠急性高脂血症的影响(X±SD) 与空白组相比△P＜0.01；与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01(2)预防给药对大鼠高脂血症的影响模型组TC、TG、LDL-C明显高于对照组，表明实验造模成功；胆清片各剂量组能明显降低高脂血症大鼠的血清TC、TG及LDL-C，并能明显增加HDL-C。见表2
表-2胆清片预防给药对高脂血症大鼠血脂水平的影响(X±SD)

与空白组相比△P＜0.01；与模型组相比*P＜0.05，**P＜0.01胆清片能明显降低高脂血症大鼠血清及肝脏的MDA，高剂量组还能明显降低血清AST。见表3。
表-3胆清片对高脂血症大鼠肝脏功能的影响(X±SD)

胆清片高剂量组能明显降低高脂血症大鼠的肝脏TG，但对肝脏系数、肝脏TC及血清GLU无明显影响。见表4。
表-4胆清片对肝系数、肝脂及血糖的影响(X±SD)

与空白组相比△P＜0.01；与模型组相比*P＜0.01(3)治疗给药对脂肪乳剂致小鼠高脂血症的影响阳性对照非诺贝特及胆清片中、高剂量组，能明显降低脂肪乳剂致高脂血症小鼠的血脂水平，使TC及TG显著下降。见表5
表-5胆清片治疗给药对小鼠高脂血症的影响(X±SD)

与空白组相比△P＜0.05，△△P＜0.01；与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.012、胆清片治疗脂肪肝的作用。
(1)对四环素致小鼠急性脂肪肝的影响模型组动物肝脏的TG明显升高、TC明显下降；阳性对照非诺贝特、东宝肝泰及胆清片均能明显降低四环素所致急性脂肪肝小鼠肝脏的TG，对TC有明显调整作用。见表6表-6胆清片对四环素致小鼠急性脂肪肝的影响(X±SD)

与空白组相比△P＜0.01；与模型组相比*P＜0.05，**P＜0.01(2)对高脂饲料致大鼠脂肪肝的预防作用模型组TC、TG、LDL-C明显高于对照组，表明实验造模成功；胆清片各剂量组能明显降低高脂饲料致脂肪肝大鼠的血清TC、TG及LDL-C。见表7
表-7胆清片预防给药对高脂饲料致脂肪肝大鼠血脂水平的影响(X±SD)

与空白组相比△P＜0.05，△△P＜0.01；与模型组相比*P＜0.05，**P＜0.01模型组肝脏TG、TC和肝指数明显高于对照组，表明脂肪肝造模成功；胆清片预防给药能明显降低高脂饲料致脂肪肝大鼠肝脏的TG、TC和肝系数。见表8表-8胆清片预防给药对脂肪肝大鼠肝脂及肝系数的影响(X±SD)

与空白组相比△P＜0.01；与模型组相比*P＜0.05，**P＜0.01模型组肝脏SOD、GSH与空白组相比明显降低而MDA及血清ALT、AST明显升高；胆清片高剂量预防给药能明显增加高脂饲料致脂肪肝大鼠肝脏的GSH含量，明显降低肝脏的MDA和血清ALT及AST，但对SOD无明显影响。见表9表-9胆清片预防给药对高脂饲料致脂肪肝大鼠肝功能的影响(X±SD)

与空白组相比△P＜0.01；与模型组相比*P＜0.05，**P＜0.01(3)对高脂饲料致大鼠脂肪肝的治疗作用胆清片中、高剂量组能明显降低高脂饲料致脂肪肝大鼠的血清TC、TG、HDL-C及LDL-C。见表10表-10胆清片治疗给药对高脂饲料致脂肪肝大鼠血脂水平的影响(X±SD)

与空白组相比△P＜0.01；与模型组相比*P＜0.05，**P＜0.01模型组肝脏TG、TC和肝系数明显高于对照组，表明脂肪肝造模成功；胆清片治疗给药能明显降低高脂饲料致脂肪肝大鼠肝脏的TG，但对肝系数无显著影响。见表11表-11胆清片治疗给药对脂肪肝大鼠肝脏TG及指数的影响(X±SD)

与空白组相比△P＜0.01；与模型组相比*p＜0.05，**P＜0.01胆清片治疗给药能明显降低高脂饲料致脂肪肝大鼠肝脏的MDA和血清AST，明显提高肝组织中的SOD活性及GSH的含量。见表12
表-12胆清片治疗给药对高脂饲料致脂肪肝大鼠肝功能的影响(X±SD)

与空白组相比△P＜0.01；与模型组相比*P＜0.05，**P＜0.01病理学观察结果表明胆清片3个剂量组肝细胞脂肪变性的发生率低于模型组，其中以中、高剂量组为明显。胆清片3个剂量组肝细胞脂肪变性的程度与模型组相当。见表13表-13病理观察肝组织脂肪变性汇总表

半量化分级标准-表示未观察到肝细胞脂肪变性。±表示极少量的肝细胞脂肪变性或偶见。+表示脂肪变性的肝细胞数占肝小叶内肝细胞总数的25％-50％，病变轻微或少量。++表示脂肪变性的肝细胞数占肝小叶内肝细胞总数的50％-75％，，中度病变或多量。+++表示脂肪变性的肝细胞数占肝小叶内肝细胞总数的75％以上，脂肪变性肝细胞弥漫性分布遍布整个视野，重度病变或大量。
(4)对酒精性脂肪肝的影响模型组与空白组相比AST、AKP明显升高而Alb明显下降，表明酒精性肝损伤造模成功；胆清片1.28g/kg组能明显降低酒精性肝损伤大鼠的血清AST及AKP。见表14表-14胆清片对酒精致急性脂肪肝大鼠肝功能的影响(X±SD)


与空白组相比△P＜0.01；与模型组相比*P＜0.05，**P＜0.01模型组肝脏TG、肝系数及MDA明显高于对照组，而SOD、GSH明显降低；胆清片中剂量组能明显降低酒精致急性脂肪肝大鼠肝脏的TG、肝系数及MDA，低、中两个剂量组均能明显增加肝组织中的SOD活性和GSH的含量。见表15表-15胆清片对酒精致脂肪肝大鼠肝系数、肝脂和抗氧化功能的影响(X±SD)

与空白组相比△P＜0.05，△△P＜0.01与模型组相比*P＜0.05，**P＜0.01病理学观察结果表明胆清片中剂量组肝细胞脂肪变性的发生率低于模型组，低、中剂量组肝细胞脂肪变性的程度轻于模型组。非诺贝特组降脂肪肝的作用最明显。见表16表-16病理观察肝组织脂肪变性汇总表

半量化分级标准-表示未观察到肝细胞脂肪变性。±表示极少量的肝细胞脂肪变性或偶见。+表示脂肪变性的肝细胞数占肝小叶内肝细胞总数的25％-50％，病变轻微或少量。++表示脂肪变性的肝细胞数占肝小叶内肝细胞总数的50％-75％，，中度病变或多量。+++表示脂肪变性的肝细胞数占肝小叶内肝细胞总数的75％以上，脂肪变性肝细胞弥漫性分布遍布整个视野，重度病变或大量。
药效学研究结果表明，胆清片无论预防或治疗给药，均对多种高脂血症动物模型有显著降血脂作用，并在降血脂同时不增加肝脂或具有显著降肝脂作用，能明显降低造模动物肝脏的MDA和血清转氨酶。能明显降低多种脂肪肝动物模型的血脂和肝脏TG，明显增加肝脏的SOD和GSH，明显降低肝脏MDA和血清转氨酶。对多种急、慢性肝损伤模型具有明显保护作用，使血清ALT、AST、GGT及AKP显著下降，明显增加肝脏的GSH和减少HYP和MDA的生成。病理观察结果表明对高脂饲料和酒精所致脂肪肝有明显减轻作用，并可能具有一定抗肝纤维化的作用。上述研究结果为胆清片用于高脂血症和脂肪肝的治疗提供了实验依据。

实施例1胆清片用于制备治疗高脂血症的片剂虎杖、竹叶柴胡、栀子、香附四味药，虎杖粉碎成粗粉，用70％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩成稠膏；竹叶柴胡等三味加水煎煮二次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏。合并稠膏，干燥，研成细粉，加入淀粉适量，混匀，制粒，压制成1000片，包衣，即得胆清片。可用于治疗高血脂。
实施例2胆清片用于制备治疗脂肪肝的片剂虎杖、竹叶柴胡、栀子、香附四味药，虎杖粉碎成粗粉，用70％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩成稠膏；竹叶柴胡等三味加水煎煮二次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏。合并稠膏，干燥，研成细粉，加入淀粉适量，混匀，制粒，压制成1000片，包衣，即得胆清片。可用于治疗脂肪肝。


本发明提供胆清片在制药领域中的一种新用途，即胆清片在制备治疗高血脂、脂肪肝药物中的应用。