专利名称：禽类加工中的微生物控制的制作方法禽类加工中的微生物控制本发明申请是申请号为02813135. 5 (PCT/US02/20236)，国际申请日为2002年6月25日的，发明名称为“禽类加工中的微生物控制”的发明申请的分案申请。禽类加工是其中微生物控制至关重要的领域。基于有关的加工性质，存在着许多禽类与各种病原体接触的机会，所述病原体是可移动细菌，例如大肠杆菌(Escherichiacoli)、肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurim)、空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)、结肠弯曲杆菌(Campylobactercoli)、红嘴El弯曲杆菌(Campylobacter lari)以及生物膜形式的病原体,例如单核细胞增多性李斯特杆菌(Listeria monocytogenes)、突光假单胞菌(Pseudomonas fIuorescens)、绿胺杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。据认为处理、加工和消除细菌感染的禽类是非常令人讨厌 的。因此，有人建议将某些氯基杀微生物剂尝试用于提供与禽类加工有关的适当卫生环境。不巧地是，虽然某些氯基杀微生物剂显示出一些效果，但它们具有多种严重缺点。其一是它们不如期望的那样有效。第二，它们易于产生臭味并且在许多情况下可对禽类畜体产生漂白作用，这种作用令消费者不喜爱。此外，由干与去除禽类内脏有关的粪便物质的传播，粪便细菌充斥。这种恶劣的条件结果导致洗涤水中、湿表面如切割表面、水槽表面和其它无论如何与这些洗涤水接触的下游设备上的高氮水平。不巧地是，某些氯类物质的氯基杀微生物剂易于与含氮物质反应形成氯胺，氯胺是催泪剂并对金属表面具有溶蚀性。事实上，含有含氮杂质的水洗涤槽中低至50ppm的氯就可产生エ厂工人无法忍受量的空气重播性催泪剂。此外，形成氯胺过程中氯的消耗导致杀生效果的明显丧失，因为氯胺不是杀生活性物质。显然，在禽类加工エ业中存在对ー种新的、更有效的、经济可行方式的微生物控制方法的需求。
本发明通过在禽类加工中和禽类加工中使用的设备、仪器、装置和/或水的消毒过程中以及/或者由禽类加工获得的(屠宰后)畜体和/或部分提供并利用某些高效的卤素基杀微生物剂满足了前述需求。本发明使用的杀微生物剂可由相对低成本的原料以直接加工的方式经济地制备，并且由于它们的效力，它们可提供在经济上符合エ业需求的微生物控制。在其一个实施方案中，本发明提供改进的禽类加工方法，该方法包括用卤素基杀微生物剂消毒这类加工中使用的设备、仪器、装置和/或水，以及/或者由这类加工方法获得的禽类的畜体和/或部分，所述杀微生物剂是(I) ー种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是(a)溴、氯或氯化溴，或者其任意两种或全部三种，和(b)水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在含水介质中的衍生产品；或者(II) ー种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少ー种1，3_ ニ卤代-5，5-ニ烷基こ内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中ー个卤原子是氯原子并且另一个是氯或溴原子，并且其中各个烷基独立地包含I至约4个碳原子；或者 (III) ー种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少ー种1，3- ニ溴-5，5-ニ烷基こ内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中的ー个烷基是甲基，另ー个烷基包含I至约4个碳原子；或者(IV) (I)、(II)和(III)的任意两种或多种的组合。上面(I)的衍生产品是ー种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液通过水中的溴、氯或氯化溴，或者其任意两种或全部三种，与水溶性来源的氨基磺酸根阴离子之间的反应形成和获得。包含100，OOOppm以上活性卤素的该类浓溶液可以商品名ATABROM 909杀生剂购自Albemarle Corporation。浓溶液，例如这种浓溶液可首先进一步用水稀释或者不经稀释地应用于禽类加工中使用的设备、仪器或者装置以及加入禽类加エ用水中。另ー方面，在应用于禽类畜体或其部分之前，这种浓溶液应用水或在水中进行稀释，例如通过将浓溶液加到冰水槽等中的水中。类似地，上面(II)和(III)的衍生产品是ー种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液通过将特定的1，3- ニ卤代-5，5- ニ烷基こ内酰脲溶于水中形成和获得。这类1，3_ ニ卤代-5，5_ ニ烷基こ内酰脲通常可以以固体和可由这类固体形成的浓缩水溶液形式购得，对于禽类加工中使用的设备、仪器或者装置，它们可以进ー步稀释或无需稀释并加到禽类加工用水中。但对于禽类畜体或其部分的应用，使用前应将该浓溶液进ー步用水稀释，或者应将选择的1，3- ニ卤代-5，5- ニ烷基こ内酰脲固体以无需形成中间较浓溶液而直接产生所需杀微生物剂剂量的比例加到水中。纯粹出于方便，当由氯化溴、溴和氯或者溴、氯和氯化溴以及氨基磺酸盐制成吋，下文中有时将上述(I)的杀微生物剂称为“氨基磺酸盐-稳定的氯化溴”，然而，从技术上说，含水介质中的实际化学物质大多不是氯化溴分子或氨基磺酸盐加成物或氯化溴的复合物。因此，命名“氨基磺酸盐-稳定的氯化溴”是指称这类组合物的简单的书记方式，并且该命名并非象征、表示或暗示该组合物的任何实际化学结构。在优选的实施方案中，用于上述加工的杀微生物剂是(A)溴基杀微生物剂，其包括ー种或多种活性溴类物质的高碱性杀微生物水溶液，所述溴类物质由水中溴或氯化溴、氯化溴和溴的混合物或者溴和氯的组合(其中氯的摩尔量等于溴的摩尔量或小于溴的摩尔量)与水溶性来源的氨基磺酸根阴离子的反应获得，或者(B)至少ー种1，3_ ニ溴-5，5- ニ烷基こ内酰脲的杀微生物水溶液，其中的一个烷基是甲基且另ー个烷基包含I至约4个碳原子；或者(C) (A)和(B) 二者的组合。因此，在本发明的实施方案中，将禽类加工中使用的设备、仪器、装置和/或水进行消毒，以及/或者将由这类加工方法得到的禽类畜体或其它部分进行消毒，“溴基”是指该段落的(A)、(B)或(C)中提及的任何杀微生物剂。实际上，使要消毒的表面与(A)、(B)或(C)的杀微生物水溶液接触，它们包含杀微生物有效量的杀微生物剂和/或其杀微生物水解产物。这类溴基杀微生物剂比氯基杀微生物剂能更有效地抗细菌和生物膜。此外，与氯基杀微生物剂相比，这些溴基杀微生物剂不易于产生臭味，因此基本避免了不期望的漂白活性。再者，虽然某些溴基杀微生物剂可能与含氮物质反应，例如存在于水中和与禽类加工有关的表面上，但得到的溴胺仍具杀微生物活性。因此，通过使用这些溴基杀微生物剂，这种副反应不会大大降低禽类加工器可利用的微生物学效力。再者，溴胺通常不表现出令加エ厂工人讨厌的性质，但在相同的条件下，由使用某些氯基杀微生物剂产生的氯胺易于成为高效催泪剂。如上所述，上面(I)的卤素基杀微生物剂是ー种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是溴、氯或氯化溴，或者其任意两种或全部三种，和水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在含水介质，如水中的衍生产品。同样，上面(A)的溴基杀微生物剂是ー种或多种活性溴类物质的杀微生物水溶液，所述溶液是溴或氯化溴、氯化溴和溴的混合物或者溴和氯的组合物(其中氯的摩尔量等于溴的摩尔量或小于溴的摩尔量)与水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在含水介质，如水中的衍生产品。为形成这些衍生产品，将形成衍生产品的组分一起加到含水介质，例如水中，当形成该产品时，通过使用无机碱如氢氧化钠使所述介质或水总是具有至少7的pH并且有效总是具有高于7，例如10-14的pH。当使用市售的该类产品(Stabrom 909 杀生剂；Albemarle Corporation),公认的水产品的 pH—般为 13-14。 同样，上面(II)的卤素基杀微生物剂是ー种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少ー种1，3_ ニ卤代-5，5- ニ烷基こ内酰脲在含水介质，如水中的衍生产品，其中ー个卤原子是氯原子且另ー个是氯或溴原子，并且其中的烷基如上所述。上面(II)的卤素基杀微生物剂中，优选的是ー种或多种活性卤素类物质的杀微生物溶液，该溶液是至少ー种1，3_ ニ齒代-5,5- ニ烧基こ内酰脲在含水介质,如水中的衍生产品,其中一个卤原子是溴原子且另ー个是氯原子(并且烷基如上所述)。上面(III)和上面(B)的溴基杀微生物剂是ー种或多种溴类物质的杀微生物溶液，该溶液是至少ー种I，3- ニ溴-5，5- ニ烷基こ内酰脲在含水介质，如水中的衍生产品，其中的烷基如上所述。当本段落中提及的1，3_ ニ卤代-5，5_ ニ烷基こ内酰脲溶于含水介质，如水中时，将发生转化，这样活性卤素(或溴)类物质将存在于所得溶液中。在许多情况下，通过将杀微生物剂本身(即以未稀释的形式)或者以其预先形成的浓溶液加到一次或多次禽类加工中正使用的水(如流入冰水槽的水或者已经存在于冰水槽中的水)中，以形成本发明的稀释的杀微生物水溶液，即用于本发明上述实施方案的杀微生物水溶液，将该溶液与要消毒的表面接触。或者，将预先形成的浓缩的杀微生物剂的水溶液直接应用于要消毒的表面(如切割案板或刀子的表面)，或者更通常地是将这类浓溶液与水混合形成较稀的杀微生物剂溶液，将该溶液应用于被消毒物的和/或加入禽类加エ操作中使用的水中。总之，本发明使用的这些实施方案的杀微生物水溶液可全部或部分用禽类加工操作中正使用的或者将要使用的水进行制备，或者可全部使用与禽类加工中使用的或将要使用的水分隔的水来制备。在各种情况下，无论如何，接触制得的杀微生物水溶液和/或将其应用于各种表面都将导致有效消毒。目前，用于实践本发明任意实施方案的最优选的溴剂杀微生物剂是水溶性1，3- ニ溴-5，5- ニ烷基こ内酰脲，其中的ー个烷基是甲基且另ー个烷基是包含I至约4个碳原子的烷基，其中，I，3- ニ溴-5，5- ニ甲基こ内酰脲是最优选的。由后续的说明和附录的权利要求书，本发明的各个实施方案和特征将更加清晰。
附图I是冰水槽的杀微生物处理对鸡皮上假单胞菌属细菌的生长的影响的图示说明。附图2是冰水槽的杀微生物处理对鸡皮上的全部需氧菌的生长的影响的图示说明。附图3是冰水槽的杀微生物处理对鸡皮上的假单胞菌属细菌的生长的影响的图示说明。附图4是冰水槽的杀微生物处理对鸡皮上的全部需氧菌的生长的影响的图示说明。 附图5和6涉及使用由氨基磺酸盐-稳定的氯化溴衍生的溴类物质根除生物膜和浮游生物形式的HPC细菌试验(异养培养皿计数(heterotrophic plate count))获得的结果的图示说明，溴在水中的浓度分别为O. 5ppm和2ppm。附图7和8涉及使用由氨基磺酸盐-稳定的氯化溴衍生的溴类物质根除生物膜和浮游生物形式的HPC细菌试验(异养培养皿计数)获得的结果的图示说明，溴在水中的浓度分别为4ppm和lOppm。附图9涉及使用由1，3- ニ溴-5，5- ニ甲基こ内酰脲衍生的溴类物质根除生物膜形式的HPC细菌试验(异养培养皿计数)获得的结果的图示说明，溴在水中的浓度为O. 5ppm 和 5ppm。附图10涉及使用由1，3_ ニ溴-5，5_ ニ甲基こ内酰脲衍生的溴类物质根除浮游生物膜形式的HPC细菌试验(异养培养皿计数)获得的结果的图示说明，溴在水中的浓度为
O.5ppm 和 5ppm。

公开内容均在此引作參考。应该清楚，甚至在使用氯化溴、氯化溴和溴的混合物或者溴和氯的组合物(其中氯的摩尔数等于溴的摩尔数或者小于溴的摩尔数)制备的杀微生物剂时，杀微生物剂是溴基的也通常如同大多数氯ー样，以氯化物盐如氯化钠形式終止，因为在加工中碱金属碱，如氢氧化钠一般用于使产物溶液的PH升高到至少为约13。因此，该产物溶液中的氯不是以重要的杀微生物剂形式存在。本发明使用的这些实施方案的另ー组卤素基杀微生物剂是ー种或多种N，N’ -卤代-5，5-ニ烷基こ内酰脲，其中ー个卤原子是氯且另ー个是溴或氯，并且其中的烷基各自独立地包含I至约4个碳原子。适合的该类化合物包括，例如下面的化合物1，3_ ニ氯-5，5_ ニ甲基こ内酸服、I, 3_ ニ氣_5，5_ ニこ基こ内酸服、I, 3_ ニ氣-5, 5_ ニ正丁基こ内酸服、1，3_ ニ氣-5-こ基_5_甲基こ内酸服、N, N’ -漠氣_5，5- ニ甲基こ内酸服、N, N’ -漠氯-5-こ基-5-甲基-こ内酰脲,N,N’-溴氯-5-丙基-5-甲基こ内酰脲、N,N’-溴氯_5_异丙基-5-甲基こ内酰脲、N，N’ -溴氯-5-丁基-5-甲基こ内酰脲、N，N’ -溴氯-5-异丁基-5-甲基こ内酰脲、N, N’ -溴氯-5-仲丁基-5-甲基こ内酰脲、N, N’ -溴氯-5-叔丁基-5-甲基こ内酰脲、N, N’ -溴氯-5，5- ニこ基こ内酰脲、以及前述任意两种或多种的混合物。N, N’ -溴氯-5,5-ニ甲基こ内酰脲可以以商品名Bromide 杀生剂(Great LakesChemical Corporation)购得。另ー组适合的溴氯こ内酰脲混合物是由主要的N, N’ -溴氯_5，5- ニ甲基こ内酰脲和少量(重量比)的1，3_ ニ氯-5-こ基-5-甲基こ内酰脲组成的混合物。后ー种混合物可在市场上以商品名Dantobrom 杀生剂(Lonza Corporation)购得。将本发明使用两种或多种前述的N，N’ -溴氯-5，5- ニ烷基こ内酰脲的混合物吋，该混合物中的单个杀生剂彼此可以以任意比例存在。应该清楚，关于N，N’的命名，比如N，N’ -溴氯-5，5-ニ甲基こ内酰脲是指该化合物可以是I-溴-3-氯_5，5- ニ甲基こ内酰脲，(2) I-氯-3-溴-5，5- ニ甲基こ内酰脲或
(3)I-溴-3-氯-5，5- ニ甲基こ内酰脲和I-氯-3-溴-5，5- ニ甲基こ内酰脲的混合物。另夕卜，应该可以想到，某些1，3_ ニ氯-5，5-ニ甲基こ内酰脲和1，3_ ニ溴-5，5-ニ甲基こ内酰脲可以以与(I)、⑵或⑶的混合物形式存在。更优选用于实践本发明的这些实施方案的系列是1，3_ ニ溴-5，5_ ニ烷基こ内酰脲的溴基杀微生物溶液，其中的一个烷基是甲基且另ー个烷基包含I-约4个碳原子。这些优选的杀生剂包括1，3_ ニ溴-5，5-ニ甲基こ内酰脲、1，3_ ニ溴-5-こ基-5-甲基こ内酰脲、I，3- ニ溴-5-正丙基-5-甲基こ内酰脲、I，3- ニ溴-5-异丙基-5-甲基こ内酰脲、I，3- ニ溴-5-正丁基-5-甲基こ内酰脲、I, 3- ニ溴-5-异丁基-5-甲基こ内酰脲、I, 3- ニ溴-5-仲丁基-5-甲基こ内酰脲、I，3-ニ溴-5-叔丁基-5-甲基こ内酰脲、以及它们的两种或多种的混合物。这些杀生剂中，基于成本效益的观点，I，3- ニ溴-5-异丁基-5-甲基こ内酰脲、I，3-ニ溴-5-正丙基-5-甲基こ内酰脲和I，3-ニ溴-5-こ基-5-甲基こ内酰脲分别是这组中优选的、更优选的和甚至更优选的。本发明使用的前述杀生剂的混合物中，优选 使用1，3_ ニ溴-5，5-ニ甲基こ内酰脲作为组分之一，其中1，3_ ニ溴-5，5-ニ甲基こ内酰脲和1，3_ ニ溴-5-こ基-5-甲基こ内酰脲是特别优选的。该组最优选的杀微生物剂是1，3- ニ溴-5, 5- ニ甲基こ内酰脲。该化合物可以以商品名Albrom IOOT杀生剂和Albrom 100PC杀生剂以片或颗粒形式购得(Albemarle Corporation)。当两种或多种前述的1，3- ニ溴-5，5- ニ烷基こ内酰脲杀生剂的混合物吋，该混合物中的单个杀生剂彼此可以以任意比例存在。制备1，3_ ニ溴-5，5-ニ烷基こ内酰脲的方法是已知的或者报道于文献中。如果需要，可将1，3_ ニ卤代_5，5-ニ烷基こ内酰脲溶于包含或不包水的适合的温和、无害的水溶性有机溶剂中，以形成可应用于设备、仪器或装置的表面的溶液。根据使 用的溶剂，表面可进ー步用清水洗涤以除去这类溶剂残留物。除了提高可加到溶液中的1，3_ ニ卤代-5，5-ニ烷基こ内酰脲的量以有助于浓溶液的形成外，还可例如在禽类加工的上述各处，当例如将这种浓溶液加到上述各处使用的加工用水中稀释时，其具有1，3 ニ卤代_5，5- ニ烷基こ内酰脲产生的杀微生物活性。本发明使用的这种水溶液可包含适合的少量的温和、无害的水溶性有机溶剂，至少在有关的剂量水平下，它们是无毒的，例如こ臆。在其中需要非常强的杀生活性的情况，例如定期清洗和消毒操作时，本发明的杀微生物剂的浓水溶液可直接应用于被病原性微生物感染的禽类加工设备、仪器和/或装置的表面。这类浓溶液可包含，例如高达150，OOOppm或160，OOOppm或更高含量的活性溴，和高达约66，667ppm或约71，Illppm的活性氯，它们的含量可通过淀粉_碘滴定进行測定。如果需要，可在直接应用于这种禽类加工设备、仪器和/或装置的表面之前，将部分这种浓溶液用任意适合量的水进行稀释，当然假定稀释过的溶液仍包含杀微生物有效量的活性溴类物质。此外，可加入本发明的浓溶液，这样用禽类加工操作中使用的加工水稀释的形式使用，所述加工水是例如流经水管的水、流入或存在于水槽中的水和喷洗设备用水。本发明实践中使用的杀微生物剂的量(浓度)将根据各种因素而有所不同，例如使用的特定杀微生物剂、在先杀微生物处理的性质和频率、存在的微生物种类和性质、微生物可利用的营养物的量和种类、清洁作用的性质和程度，如果有的话，还应结合杀微生物处理、被处理的微生物的表面或场合等。在任何情况下，将本发明的杀微生物有效量的杀微生物剂的稀释水溶液应用于微生物或使微生物与之接触。典型地是，稀释的溶液应包含杀微生物有效量的 2-1000ppm(wt/wt),优选 2_500ppm(wt/wt),更优选 25_250ppm(wt/wt)活性卤素，活性卤素可使用常规DH)测试方法进行測定。如果溶液中的实际活性卤素由活性氯组成，使用的稀释溶液的浓度优选比前述的范围的低限高至少2-3倍。在本发明使用1，3_ ニ溴-5，5-ニ烷基こ内酰脲的情况下，普通情况(例如洗涤硬表面，如桌面、墙面、地面、传送机械或其部件，如传送带或钩环、刀子和切割刀片)下使用的特别优选的范围是50-150ppm(wt/wt)的活性溴。当使用本发明的由至少ー种1，3-ニ溴-5, 5-ニ烧基こ内酰脲形成的水溶液接触禽类畜体或其可食用部分时，特别优选在洗涤或其它接触禽类畜体或其可食用部分的水中使用杀微生物有效量的活性溴，活性溴不会明显或相当可观地漂白畜体的皮肤或者用禽类，如胸脯肉和腿肉烹制的食品在感官味觉(organleptic taste)上具有负面影响。该量通常为O. 5-30ppm(wt/wt),优选为5_25ppm(wt/wt)活性溴,其含量可通过DH)测试方法进行測定。如果在这些畜体洗涤操作中使用氨基磺酸盐-稳定的氯化溴，认为也适用同样的范围。应该清楚，当认为必需或需要时，也可偏离前述范围，这种偏离也在本发明的实质范围内。因此，根据本发明的杀微生物剂被使用的方式，本发明杀微生物剂的杀微生物有效量可扩展到低至约2ppm，最高可达所使用的特定活性卤素杀微生物剂在使用这类活性卤素杀微生物剂的温度下的最高水中溶解度。从上面可以看出，无论是活性氯、活性溴或二者兼备，都存在两种不同类型的用于測定活性卤素含量的方法。对于測定接近超过约，例如500ppm或类似(wt/wt)活性溴，或者超过约IlOOppm活性氯的浓度，淀粉-碘滴定发是优选的方法。另ー方面，在浓度低于这些邻近区吋，常规的DH)测试方法更为适合，因为这种测试是设计用以测定非常低的活性卤素浓度的，例如从零至约ll_12ppm(wt/wt)的活性氯浓度或者从零至约5ppm(wt/wt)的活性溴浓度。事实上，在活性氯的实际浓度介于例如约ll_12ppm至约IIOOppm(wt/wt),或者在活性溴的实际浓度介于例如约5ppm至约IIOOppm(wt/wt)的情况下,在进行DF1D分析之前，测试样品一般用纯水稀释，以使实际浓度在活性氯的情况下降至4至ll-12ppm，在活性溴的情况下降至2至5ppm。因此，可见虽然在使用何种方法之间没有严格的必需遵守的浓度区分界限，但上面给出的大致数值范围代表了实际的大致区分界限，因为当使用DPD测试方法时，水稀释的较浓溶液的量随起始活性卤素浓度的增加而增加，当分析较浓的溶液时，使用淀粉-碘滴定法可方便地避免这种大量稀释。总之，对于适合的稀溶液，推荐使 用DH)测试方法，对于较浓的溶液，推荐使用淀粉-碘滴定法。用于测定活性卤素的淀粉-碘滴定法由来已久。例如Wi I Iard-Furman的Elementary Quantitative Analysis 的第 XIV 章(Third Edition, D. Van NostrandCompany, Inc. ,New York, Copyright 1933,1935,1940)描述了淀粉-碘滴定法。虽然使用淀粉-碘滴定法測定这类产品溶液中的活性卤素的标准定量分析步骤的细节可能随溶液的不同而不同，但由ー种标准步骤到另ー种标准步骤得到的结果一般是足够一致，不会产生任何结果不可靠的问题。推荐的淀粉-碘滴定法步骤如下将磁力搅拌器和50毫升冰醋酸放入碘烧瓶中。称重要測定活性卤素的样品(通常为约O. 2-0. 5g)并将其加到含こ酸的烧瓶中。然后往该烧瓶中加入水(50毫升)和碘化钾水溶液(15% wt/wt ;25毫升)。该烧瓶用水封塞塞住。将该溶液搅拌15分钟后，打开塞子并将塞子和密封区域用水冲洗到烧瓶中。将O. I标准的(normal)硫代硫酸钠填充到自动滴定管(Metrohm Limited)中。碘烧瓶中的溶液用0. I标准的硫代硫酸钠进行滴定；当观察到淡黄色时，加入I毫升lwt%淀粉水溶液，烧瓶中溶液的颜色由淡黄色变为蓝色。继续用硫代硫酸钠滴定直至蓝色消失。用样品的重量和滴定的硫代硫酸钠溶液的体积计算活性卤素的量。由此，不管实际的化学形式是什么，都可定量地測定水产品溶液中活性卤素，如活性氯或活性溴的量。用于测定低水平活性卤素的标准Dro测试以Palin在1974年发明的经典的测试方法为基础。參见 A. T. Palin, “Analytical Control of Water Disinfection WithSpecial Reference to Differential DPD Methods For Chlorine, Chlorine Dioxide,Bromine, Iodine and Ozone”, J. Inst. Water Eng. , 1974, 28,139。虽然存在 Palin 方法的各种现代化改进方法，但推荐的改进方法全面地记载在Hach Water Analysis Handbook,3rd edition, copyright 1997中。在该出版物的第379页呈现的Method 8167明确了测定“氯总量”(即活性氯)的方法。概括地说，“氯总量”的试验包括加入包含活性卤素的稀的水溶液样品、包含Dro指示剂粉末的粉末(即N，N’ - ニこ基ニ苯ニ胺)、KI和缓冲剂。存在的活性卤素类物质与KI反应，得到使Dro指示剂变为紅/粉色的碘类物质。顔色的強度取决于样品中存在的“氯总量”类物质(即活性氯)的浓度。该强度使用将强度读数转化为mg/L Cl2形式的“氯总量”数值的标准化比色计进行測定。如果存在的活性卤素是活性溴，将mg/L Cl2形式的结果除以2. 25，得到以mg/L Br2活性溴形式表示的結果。详细的DB)测试方法如下
I.为测定水中存在的响应“氯总量”试验的物质的量，应在采样的数分钟内对水样进行分析，并且优选在采样后立即进行分析。2.测定水样中存在的响应“氯总量”试验的物质的量的Hach Method 8167包括使用Hach Model DR 2010比色计。通过键控键盘上的“80”检索氯测定的贮存程序号，然后通过旋转仪器ー侧的刻度盘设定吸收波长为530nm。在观察下，两个相同的样品池用水填充到IOmL刻度。选择任意一个池为空白。向第二个池中加入DH)氯总量粉末系列(DB)Total Chlorine Powder Pillow)的内容。将这些振摇10-20秒进行混合,粉红色的呈现指示水中存在着对DPD “氯总量”测试试剂反应阳性的物质。按压键区的SHIFT TMER键，开始三分钟的反应时间。三分钟后，发出嘟嘟的信号指示反应完全。使用IOmL池上升管，使空白样品池进入Hach Model DR 2010的样品室，关闭保护栅以防止游走的光的作用。然后按压ZERO键。数秒后，显示器记录0. 00mg/L Cl20然后，从Hach Model DR 2010的池室中取出用于将仪器调零的空白样品并以测试样品替代，往测试样品中加入DPD “氯总量”测试试剂。然后与空白的操作一祥，关闭光栅并按压READ键。数秒内，显示器上显示出以mg/LCl2表示的結果。这种就是检测水样的“氯总量”水平。在本发明的实践中，可以以不同的方式使用杀微生物体系。例如，将本发明的杀微生物有效量的杀微生物剂，优选溴基杀微生物体系应用于要根除或控制微生物的场合，以使杀微生物体系与这些微生物接触。杀生有效量的杀微生物剂的水溶液的应用可通过倾倒、喷雾、湿擦、充溢和/或湿法擦拭被感染的或可能被感染的加工设备的表面或区域以及邻近区域，例如地面、墙面、桌面、传送设备、支柱、水管、水槽和下水道来进行。在适用和可能的情况下，将加工设备的部分浸入杀微生物剂的水溶液中，如果需要，可临时拆卸。应常规地进行这种应用，以足以确保被加工的禽类与危害性微生物，例如细菌和生物膜的接触被阻止达到可能的最大程度。为达到最佳结果，这些操作应与彻底清洁操作，例如洗涤、冲刷、刮擦以及其它除去可见或不可见的生物污染或生物膜的感染的操作结合。在微生物与杀微生物剂接触一段适当的时间，以确保渗入这些不同种类的微生物的多糖粘液和其它防御机制之后，整个消毒区域应进行清洗，例如以清水用水管浇，并且在使用前，清洗液本身优选使用本发明的附加的杀微生物剂，优选溴基杀微生物剂进行消毒。当然，接触时间根据清洁和消毒操作的频率和彻底性以及使用的特定杀微生物溶液的特性和浓度有所不同。一般来说，接触时间可以为大约数分钟至数小时，但应使用有效根除或控制禽类加工区域的微生物数量的任何时间，这也在本发明的范围内。另ー种应用本发明的这些实施方案的杀微生物有效量的固态杀微生物剂的方式是使要萃取到水流中的杀微生物剂流经水管并进入在禽类加工中使用的水槽或其它清洗装置。例如，将适合的固体形式的杀微生物剂，优选溴基杀微生物剂，如片、团块、丸或小块放入适合的有水流通过的进料装置中。水流通过杀微生物剂的床致使水流持续不断地溶解少量杀微生物剂，由此在水中提供杀微生物有效量的杀微生物剤。1，3_ ニ溴-5，5-ニ甲基こ内酰脲特别优选以这种应用方式来使用，因为其在室温下在水中具有较低的溶解度和较慢的溶解速率。这解释为需再次填充装置使其保持所述固体之前的较长的使用时间。例如，I，3-ニ溴-5，5 ニ甲基こ内酰脲在75 °F (约24°C)的水中的溶解度是405ppm(以Cl2表不)，而N, N’ -溴氯-5, 5- ニ甲基こ内酸胺及N, N’ -溴氯-5, 5- ニ甲基こ内酸服和1，3- ニ氯-5-こ基-5-甲基こ内酰脲的市售混合物在相同温度下的溶解度分别为890ppm和1905ppm( 二者均以Cl2表示)。具特别理想的成本-有效性和操作效率的并且高度优选的形成ー种或多种1，3- ニ溴-5，5- ニ烷基こ内酰脲(其中一个烷基是甲基且另ー个烷基包含I至约4个碳原子)，最优选1，3_ ニ溴-5，5-ニ甲基こ内酰脲(“ニ溴ニ烷基こ内酰脲”)的杀微生物水溶液的方式包括使水通过放置在罐、槽或其它类似容器(“池”)中的ー种或多种颗粒、小块、丸、片或其它非粉末状颗粒(“床”)形式的ニ溴ニ烷基こ内酰脲。槽的上部优选具有用于定期重新填充床内容物的可压カ密封的槽ロ(port)，并使水向上流经床的部分。更优选地，槽在向上方向延伸以使床的底部到顶部的长度长于从ー侧到另一侧的长度，这种向上的水流仅通过床的下部送入床向上流动，因此基本水平地通过设置在床和槽的下部和上部之间的槽ロ。由此，床的上部用作床内容物的储备供应，当床的下部被缓慢而搅拌均匀地溶入水流中时，所述储备供应的内容物在重力下自动填入床的下部。因此在该操作中，水流优选 至少是基本上连续流动，并且最优选是连续流动。生产颗粒、片或其它非粉末状的颗粒形式的I，3-ニ溴-5，5-ニ甲基こ内酰脲的方法详细记载于共同拥有的未审结的申请PCT/US01/01541、01/01545和01/01585，这些申请均于2001年I月17日提交，每个申请都要求了基于分别早期提交的相应的美国申请的优先权。用于制备这种颗粒、片或其它非粉末状颗粒形式的1，3 ニ溴-5，5-ニ甲基こ内酰脲的优良方法技术详细记载于共同拥有的未审结的申请PCT/US 01/01544中，该申请于2001年I月17日提交，要求了基于早期提交的相应美国申请的优先权。这些PCT和美国申请的公开内容再次均引作參考。在形成其杀微生物的水溶液时，特别优选与这类颗粒、片或其它非粉末状颗粒形式的这些ニ溴ニ烷基こ内酰脲结合使用的装置可购自 Neptune Chemical Pump Company (R. A. Industrie, Inc.的分支机构，Lansdale，PA 19446，“Bromine Feeders”Models BT-15、BT-40、BT-42、BT-80、BT_160、BT-270和BT-350)或者相当的设备。使用结合的Model BT-40与1，3-ニ溴-5，5-ニ甲基こ内酰脲Albrom 100杀生剂(可购自AlbemarleCorporation)获得了良好的结果。在这类装置中単独加入片或颗粒形式的这类杀微生物剂可提供长达五(5)个月的容器終端用水保持持续高效的杀微生物活性，而不需要重新填充。在本发明使用较易水溶的杀微生物剂的情况下，另ー种适合的使杀微生物剂与微生物接触的方法是将包含杀微生物有效量的杀微生物剂的水溶液泵入水管并且泵入禽类加工中使用的水槽或其它洗涤装置中，例如烫退槽和冰水槽中。这些方法的改进方法包括通过重力滴下作用使杀微生物剂的水溶液直接分批配送到加工禽类的水槽或其它容器中。本发明使用的另ー种应用模式包括用杀微生物剂的水溶液接触禽类本身，典型的是屠宰之前和之后立即应用。在根除禽类表面上的细菌的适合时间后，将禽类进行清洗以除去家禽本身暴露表面上的过量的杀微生物剂和杀灭的(dispatched)微生物群。屠宰后家禽的内部器官也可以采样相同的方式进行处理和清洗。以这种方式的杀微生物溶液的应用可以采取任意适合的形式，例如使用包含杀微生物有效量的杀微生物剂的水喷雾剂，或者将家禽或其内部器官浸入ー个或多个盛有杀微生物有效量的杀微生物剂的水槽中。优选使用两种或多种前述的本发明杀微生物剂的应用方法。因此，在本发明的这些实施方案的优选杀微生物剂的实施方案中，溴基杀微生物水溶液优选通过下列步骤应用(i)将禽类加工装置的至少部分(如果不是全部的话)与本发明的这些实施方案的杀微生物有效量的至少ー种杀微生物剂，优选溴基杀微生物剂的水溶液接触，以进行消毒或卫生处理，和(ii)在家禽分解之前和/或之后，优选之后，使禽类的暴露表面与本发明的这些实施方案的杀微生物有效量的至少ー种杀微生物剂的水溶液，优选溴基杀微生物剂的水溶液接触。在另ー个实施方案中，本发明的这些实施方案的杀微生物剂，优选溴基杀微生物的水溶液通过如下步骤应用(i)将禽类加工装置的至少部分(如果不是全部的话)与本发明的这些实施方案的杀微生物有效量的至少ー种杀微生物剂，优选溴基杀微生物剂的水溶液接触，以进行消毒或卫生处理，和(ii)将分解的家禽的可食用部分和/或内部器官与与本发明的这些实施方案的杀微生物有效量的至少ー种杀微生物剂的水溶液，优选溴基杀微生物剂的溶液接触。本发明的特别优选的加工方法是其中家禽是通过包括下列系列步骤进行加工的那些方法(a)将家禽悬挂到移动夹或钩环中，(b)使家禽昏迷，但不杀戮家禽，例如使用适当的气体，或者至少将家禽的头部与应用水的电休克接触以使家禽昏迷，例如将头浸入接有适合电流的水浴中使其昏迷，(C)在昏迷家禽的颈部，用刀或用机械切割装置自动切割颈 静脉和/或颈动脉，(d)从畜体放血，(e)用热水烫退禽鸟，如在烫退水槽中，以助羽毛的除去，(f)退去羽毛，(g)除去家禽的头和脚，(h)用刀子手工取出，或者用机械取内脏装置自动取出家禽的内脏，(i)从畜体分离内脏，(j)洗涤畜体，和(k)冷却畜体，例如在水中，如使畜体经过至少ー个或经常是两个冰水槽，或者通过空气冷却。烫退步骤填充在50-60°C的水中进行，为保持正常的黄色皮肤，较低的温度是优选的。对于火鸡和用尽的下蛋母鸡更经常地使用较高的温度。使用的冷却温度一般使畜体温度降至低于约4°C，出货的最终畜体的最終温度低达约_2°C。可包括其它步骤并且在某些情况下，可改变ー个或多个(a)至(j)的步骤或者步骤的顺序也可发生一定程度的变化，以适应特定的情況。可包括的额外步骤的实例包括检查步骤，例如由政府控制的职エ进行检查，和在水禽的情况下，浸入蜡中，以促进退羽毛的程度。检查通常在取出内脏步骤后进行，例如在从畜体分离内脏后。当加工水禽时，通常采用浸入蜡的步骤，水禽的羽毛通常较，例如鸡类难以除去。蜡的浸入一般在使用脱毛机后直接进行，脱毛机利用橡胶“手指”打退羽毛。蜡的浸入步骤通常包括将部分脱毛的畜体浸入槽中的熔融蜡中，使蜡在畜体上硬化，然后通过剥落蜡衣一井除去包埋在蜡中的羽毛。根据需要，在进行加工的下ー步骤，如除去头和脚之前，可以重复该操作。一种步骤顺序适当改变的示例是在步骤(d)之前进行步骤(g)，代替步骤(f)后的步骤。阅读了该说明书之后，其它适合的顺序的变化对于本领域普通专业技术人员而言是显而易见的，因此在此无需进ー步说明。在上述加工过程中，本发明的这些实施方案的杀微生物剂，优选本发明中使用的一种或多种适用的溴基杀微生物剂的杀微生物作用可用于操作中的各个适合的操作。例如，本发明的适用的杀微生物溶液可应用于使用的任何或所有加工设备，包括刀子、传送装置、空去皮槽的表面、脱毛装置(例如橡胶“手指”)、用于切割家禽或取出家禽内脏的洗涤和机械装置、所有与家禽的血和内脏接触的表面，包括桌面、传送带以及所有与分离其内脏后的畜体接触的表面。本发明适用的卫生处理溶液可通过浸溃、喷雾、充溢或任何其它确保杀微生物有效溶液与包含有害微生物，如细菌和/或生物膜(生物污染)的有害微生物或者与有害微生物接触的表面接触的方式应用。在上述加工过程中，可采用的本发明适用的杀微生物剂，优选本发明使用的ー种或多种适用的溴基杀微生物剂的杀微生物作用的另ー种方式包括将杀微生物有效量的杀微生物剂加到ー个或多个加工步骤中使用的水中。因此，烫退槽和/或冷却槽中的水可进行如此处理。另ー种方式包括将杀微生物有效量的杀微生物剂加到洗涤畜体和各个部位的内脏的水中，这些部位的部分被处理、分离和/或加工。根据需要，加工过程中这些不同部位的剂量水平可以相同或不同。下列非限制性实施例进ー步说明本发明的实践和优点。实施例I 进行对比试验，以测定在包含不同杀微生物剂组合物的标准I. 5小时冰水槽的水中浸溃期间对禽类畜体细菌(大肠杆菌属菌株)的作用。还研究了这些处理对残留的冰水槽水的影响。首先将畜体浸入包含IO4个大肠杆菌/升液体的温水浴中。然后将畜体浸入含标准有机液体(血液、脂肪、皮肤和肉类颗粒)并包含ー种试验的杀微生物组合物的冰水槽中。用整个鸟禽(内部和外部)的细菌总数测定各自杀微生物组合物的效力。测试的杀微生物组合物是 Aquatize 杀生剂(Bioxy Incorporated, 3733 National Drive, Suite115，Raleigh, NC 27612-4845)、次氯酸钠(Clorox 漂白剤)、溴化钠(呈40%水溶液形式)、组合的次氯酸钠与溴化钠、以及由氯化溴和氨基磺酸根阴离子制得的浓缩的碱性水溶液(SSBC) (Stabrom 909 杀生剂；Albemarle Corporation)。使用的试验进程和试验设计如下a)对于所有处理以常规方式处理总共190只鸡。毎次处理涉及使用10只鸡。b)制备包含姆毫升 5xl04 个 DelMarVa (Delaware Maryland farm area)野生大肠杆菌(Escherichia coli)菌株细菌的暖水浴(100 0F )。为每只鸡至少提供总共200mL水浴液体。c)将所有鸡(对照组和处理组)随机地浸入暖水浴中。将(屠宰后)畜体的内、外区域都浸入以确保完全覆盖。d)每ー独立的冰水槽(chill tank)水溶液(将普通自来水调节PH至8. 5，加入冰来产生< 45 0F的温度)包含每毫升2xl03个细菌。e)为每ー消毒处理制备冰水槽水溶液(每个至少750ml)，将每只鸡浸入I. 5小时。f)在I. 5小时冷却期间，每10分钟将鸡完全提出溶液并重新浸入溶液中。在
I.5小时冷却期后，将鸡从冰水中取出并使水流干30秒，然后迅速地(在5分钟内)置于包含400ml稀释的(Butterfield’ s磷酸盐稀释液)细菌收集品的无菌全鸡细菌分离器(stomacher)袋中。g)向每ー个包含在无菌细菌分离器袋中的畜体上添加稀释剂(400ml)，确保将稀释剂倒入腹腔内部。用摇动动作漂洗畜体内部和外部一分钟(ca. 35RPM)。最好用一只手抓住雏鸡畜体，用另ー只手抓住袋子的密封上部，然后摇动在18-24英寸的弧内做往复运动，确保漂洗所有畜体表面(内部和外部)。h)然后将漂洗液从每ー个细菌分离器袋中转入独立的样品瓶内，注意确保收集日期、收集时间和处理组这些信息与样品相符。将每个瓶子用石蜡膜密封并存储在冰箱中。
i)稀释液体使麦氏平板(MacConkey plate)上为25-250计数。在液体被稀释后，将O. Iml液体置于麦氏琼脂板上并测定细菌数目。如果在平板上25-250计数的目标没有达到，则再一次进行稀释且进行平板计数。j)在用于每ー处理的所有畜体都已浸过后，測定水样的细菌。k)计算每只鸡的总细菌数。使用的冰水由每升950ml自来水、50ml血、IOg基础腹部脂肪和IOg肉粒组成。为了形成用作试验细菌来源的细菌培养物，将在 BHI肉汤中的过夜培养物转移到新鲜的BHI肉汤中，并且在37°C保温I. 5小时来使种群密度达到每毫升约8xl06DFU (光密度在600nm, O. I)。在冷却前，向细菌溶液中加入水使其等于5xl04来提供水溶液来预浸泡所有的鸡。另外，在浸泡鸡的I. 5小时冷却期前，以每毫升冰水总共2xl03个的细菌量向冰水中加入另外的细菌。通过利用适合的无菌剥离溶液完全清洗整个畜体表面(内部和外部)，然后收集剥离溶液并将它们放置在平板上来进行细菌计数从而完成禽类畜体微生物污染測量。表I是受试组的试验设计表I


本发明提供了屠宰禽类的改进方法，包括将禽类畜体或其部分用水洗涤的步骤，将杀微生物剂以下列形式被引入所述水中(a)至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲，其中的一个烷基是甲基，另一个烷基包含1至4个碳原子，或者(b)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中的一个烷基是甲基，另一个烷基包含1至4个碳原子；或者(c)(a)和(b)二者；使该水中含有相当于10ppm Cl2到150ppm Cl2范围内的杀生物有效量的活性溴，并且该量不明显或不相当可观地漂白禽类的表皮或者不对肉的感官味觉具有明显或相当可观的负面影响。