专利名称：干粉纤维蛋白密封剂的制作方法WO 97/44015描述一种基于纤维蛋白原和凝血酶微粒的干粉纤维蛋白密封剂。这些微粒组合物的进一步优化的制剂描述于同在申请中的申请US 12/636,718中，该申请以引用的方式并入本文。在这个美国申请的实施例中，成分是通过喷雾干燥带有海藻糖的纤维蛋白原和带有海藻糖的凝血酶来制备。各种产品的主要粒径为最多50 μ m的直径。所述纤维蛋白密封剂(这些成分的掺混物)已被证明是一种易于使用，稳定并且有效的局部止血剂。所述产品可以不经复原就立即使用。一经与诸如血液的含水流体接触，暴露的活性凝血酶就将暴露的纤维蛋白原转化成不溶性纤维蛋白聚合体。发明_既述在本发明的第一方面中，提供一种新颖的纤维蛋白密封剂组合物，其为WO 97/44105中描述的并在同在申请的申请US 12/636,718中进一步优化的一般类型，并另外进一步包含添加剂材料。在本发明的第二方面中，提供一种纤维蛋白密封剂组合物，其包含含有纤维蛋白原的第一微粒、含有凝血酶的第二微粒的混合物，并且进一步包含添加剂材料。在本发明的第三方面中，提供一种纤维蛋白密封剂组合物，其包含含有纤维蛋白原和稳定赋形剂的第一微粒、含有凝血酶和稳定赋形剂的第二微粒的混合物，并且进一步包含添加剂材料。特别优选的稳定赋形剂是海藻糖。在本发明的第四方面中，提供一种纤维蛋白密封剂组合物，其包含含有纤维蛋白原的第一微粒、含有凝血酶的第二微粒的混合物，并且进一步包含添加剂材料，其中所述添加剂材料包含多孔和/或可溶性材料。在本发明的第五方面中，提供一种纤维蛋白密封剂组合物，其包含含有纤维蛋白原的第一微粒、含有凝血酶的第二微粒的混合物，并且进一步包含添加剂材料，其中所述添加剂材料包含中空和/或可溶性材料。在本发明的第六方面中，提供一种纤维蛋白密封剂组合物，其包含含有纤维蛋白原的第一微粒、含有凝血酶的第二微粒的混合物，并且进一步包含添加剂材料，其中所述添加剂材料包含生物相容的、吸水性材料。 在本发明的第七方面中，提供一种纤维蛋白密封剂组合物，其包含含有纤维蛋白原的第一微粒、含有凝血酶的第二微粒的混合物，并且进一步包含添加剂材料，其中所述添加剂材料包含生物相容的、遇水膨胀性材料。在本发明的第八方面中，提供一种纤维蛋白密封剂组合物，其包含含有纤维蛋白原的第一微粒、含有凝血酶的第二微粒的混合物，并且进一步包含添加剂材料，其中所述添加剂材料是呈以下形式纳米粒子、纳米纤维、纤维、粒子、颗粒、粉末、珠粒、微珠、微球、微囊或微粒。在本发明的第九方面中，提供一种纤维蛋白密封剂组合物，其包含含有纤维蛋白原的第一微粒、含有凝血酶的第二微粒的混合物，并且进一步包含添加剂材料，其中所述添加剂材料包含多糖。在本发明的第十方面中，提供一种纤维蛋白密封剂组合物，其包含含有纤维蛋白原的第一微粒、含有凝血酶的第二微粒的混合物，并且进一步包含添加剂材料，其中所述添加剂材料包含硅石。在第十一方面中，本发明提供一种自由流动的粉末，其包含根据本发明的组合物。在第十二方面中，本发明提供一种容器，其包含根据本发明的组合物。在第十三方面中，本发明提供一种试剂盒，其包含根据本发明的组合物，或根据本发明的容器，任选带有分配装置。在第十四方面中，提供一种治疗流血的方法，其包括施用有效量的本发明纤维蛋白密封剂组合物的步骤。在第十五方面中，本发明提供本发明组合物在制造用于预防、治疗和/或减轻病状(诸如伤口疗法和外科修复)的药物中的用途。所述添加剂材料可以担当载体或稀释剂，可以增强粉末流动和可润湿性，并且也可以具有提高流血伤口的液体吸收性的作用，从而降低局部组织液并且因此提高所述创伤中的凝血因子的相对浓度。因此，本发明提供本文中描述来实现任何这些目的的任何添加剂的用途。由此，所述纤维蛋白密封剂的有效性得以提高。本发明也提供一种在低纤维蛋白原含量下具有效力的纤维蛋白密封剂产品。发明详述可分别配制含纤维蛋白原和含凝血酶的可溶性微粒并且以稳定的干燥形式掺混在一起。随后，可按需要活化这种制剂，从而得到适用于伤口疗法和外科修复的纤维蛋白密封剂。本发明组合物可满足的主要目的是实现良好的流动性质、增强的可润湿性和增强的向活性部位的有效递送，以及只在所述部位而不在所述递送系统中的溶解性。所述纤维蛋白原和凝血酶可以从捐赠人的血液中分离得到或通过培养细胞或转基因动物或植物的重组DNA技术来制造。所述纤维蛋白原或凝血酶可以是全长的或其任何活性片段。所述微粒含有的纤维蛋白原的含量可以是约0. 1至50% w/w，优选约0. 5至20% w/w,以及5至10% w/w，或约 6. 5% w/w。所述微粒含有的凝血酶的含量可以是约10至20，000IU/g，优选约25至1000IU/ g，或 100 至 500IU/g,或约 270IU/g。诸如在微囊情况下，含有活性物的微粒和/或添加剂材料可以是固体或中空的。 包含纤维蛋白原或凝血酶的微粒可以通过本领域已知方法制备，例如按WO 92/18164、WO 96/09814、WO 96/18388或WO 97/44015的描述来制备。这些喷雾干燥和相关的粒子操作工艺使具有限定粒径分布(例如直径最多50μπι)的可溶性蛋白质微囊的生产成为可能。 例如，按那些文件的描述，所述微粒可以可再现的方式来生产，例如，其中90%或以上(按体积计)的尺寸最多30 μ m,例如10至20 μ m。这些粒子的易流动集聚体可以通过将在喷雾干燥器中的空气流动设置调整成逆流，或将多个喷雾器布置成“强制型初级集聚(forced primary agglomeration) ”机构来就地制造，本领域的技术人员对此会有所了解。此等集聚体的直径可以是50至1000 μ m或100至500 μ m，或125至250 μ m。可以分别配制含纤维蛋白原和含凝血酶的可溶性微粒并且按WO 03/037303的描述，在喷雾干燥设备内，通过使用多喷嘴喷雾器来掺混在一起。虽然制备干粉制剂的优选方法包括喷雾干燥，但也可以使用其它干燥技术来制备干粉制剂。适当的方法在本领域中是已知的并且包括流化床干燥和冷冻干燥，随后进行微粉化，或喷雾冷冻干燥。必要或希望时，微粒可以使用本领域已知的技术来灭菌。本发明的微粒优选通过喷雾干燥来制备。通常，在喷雾工艺期间使用利用压缩空气的2-流体喷嘴；这会引起中空微粒的生产。可以使用Niro Mobile Minor喷雾干燥器上的这种喷雾系统来制造的微粒最大粒径(X50，由Sympatec测量)是约30 μ m。本发明的微粒的优选X50值介于5与50 μ m之间，最优选介于10与20 μ m之间。然后，将固体或中空的含纤维蛋白原的微粒与固体或中空的含凝血酶的微粒以及如本文中所述的添加剂材料以任意顺序掺混，从而产生均质的掺混物。此种掺混可以使用低剪切或高剪切掺混，或本领域技术人员所知的任何其它技术来进行。本发明的第一或第二微粒可以通过喷雾干燥活性成分(即独自带有糖类的纤维蛋白原或凝血酶)的溶液来制备。一种替代工序包括共喷雾干燥，其中配制纤维蛋白原或凝血酶和另一种壳壁形成的材料，以得到活性成分被合并到所述粒子中的微粒。所述纤维蛋白原或凝血酶可以是全长的或其任何活性片段。这些片段是已知的； 参见Coller等人，J. Clin. Invest. 89 :546_555 (1992)。虽然纤维蛋白原原材料可以是冷冻溶液，但是可以使用在喷雾干燥之前需要复原的冻干粉末。适当的其它蛋白可以是天然存在的或通过培养细胞或转基因动物或植物的重组 DNA技术来制造。纤维蛋白原或凝血酶可以是全长的或其任何活性片段。它们可以担当 “壳壁形成的材料”，正如W092/18164中的描述，其中给出了多个实施例。一种优选材料是 HSA(人血清白蛋白)。例如，纤维蛋白原是单独喷雾干燥或是在不同量的诸如HSA(例如 1 1、1 3、3 1的纤维蛋白原HSA比例)的赋形剂和海藻糖存在下喷雾干燥。HSA的其它适当替代物包括表面活性剂，诸如Tween 20、Tween 80、Poloxamer 407或Poloxamer 188。钙离子(例如氯化钙)可以合并到凝血酶原材料中。或者，可以将氯化钙添加到加工后的微粒中。在本发明的优选实施方案中，添加剂材料是以离散粒子形式存在，它们与包含纤维蛋白原和凝血酶的微粒分开。因此，添加剂材料可以呈以下形式纳米粒子、纳米纤维、纤维、粒子、颗粒、粉末、珠粒、微珠、微球、微囊或微粒。在本发明的某些实施方案中，用于本发明的添加剂材料通常具有的平均粒径为10 至1000 μ m，或100至500 μ m，或125至250 μ m或可能为，例如10至40 μ m。添加剂可以包含一种材料或可以是材料的混合物。此添加剂材料可以担当活性材料(纤维蛋白原和凝血酶)的载体和/或稀释剂。可以具有前面段落中所叙述级别的粒径的粒子的形式存在的添加剂材料包括如下的添加剂生物相容的吸水性和/或遇水膨胀性材料、多糖、多孔和/或可溶性材料、中空和/或可溶性材料。在此类情况下，添加剂材料可以构成组合物重量的约1%、约2%、约3%、约4%、 约 5%、约 6%、约 7%、约 8%、约 9%、约 10%、约 11%、约 12%、约 13%、约 14%、约 15%、约 16 %、约 17 %、约 18 %、约 19 %、约 20 %、约 21 %、约 22 %、约 23 %、约 24 %、约 25 %、 约 26 %、约 27 %、约 28 %、约 29 %、约 30 %、约 31 %、约 32 %、约 33 %、约 34 %、约 35 %、 约 36 %、约 37 %、约 38 %、约 39 %、约 40 %、约 41 %、约 42 %、约 43 %、约 44 %、约 45 %、 约 46 %、约 47 %、约 48 %、约 49 %、约 50 %、约 51 %、约 52 %、约 53 %、约 54 %、约 55 %、 约 56 %、约 57 %、约 58 %、约 59 %、约 60 %、约 61 %、约 62 %、约 63 %、约 64 %、约 65 %、 约 66 %、约 67 %、约 68 %、约 69 %、约 70 %、约 71 %、约 72 %、约 73 %、约 74 %、约 75 %、 约 76 %、约 77 %、约 78 %、约 79 %、约 80 %、约 81 %、约 82 %、约 83 %、约 84 %、约 85 %、 约 86%、约 87%、约 88%、约 89%、约 90%、约 91%、约 92%、约 93%、约 94%、约 95%、约 96 %、约97 %、约98 %、约99 %，或之间的任何范围或数值。通常，在此类情况下的组合物将包含至少1 %，或至少5%或至少10% w/w的添加剂材料，并且最多60%、最多70%或最多80%的添加剂材料。因此，添加剂可以组合物的 1% (或 5%或 10%)至 80%，或 (或 5% 或 10%)至 70%，或 (或 5%或 10%) 至60% w/w的含量存在。在本发明的其它实施方案中，添加剂材料通常具有的平均粒径为约IOnm至 10 μ m,并且可以包含一种材料或可以是材料的混合物。可以具有前面段落中所叙述级别的粒径的粒子的形式存在的添加剂材料包括硅石，具体地说，是亲水性热解二氧化硅。 在此类情况下，添加剂材料可以构成组合物重量的约0. 001 %、约0. 01 %、约 0. 05%、约 0. 1%、约 0. 5%、约 1%、约 2%、约 3%、约 4%、约 5%、约 6%、约 7%、约 8%、约 9%、约 10%、约 11%、约 12%、约 13%、约 14%、约 15%、约 16%、约 17%、约 18%、约 19%、 约 20 %、约 21 %、约 22 %、约 23 %、约 24 %、约 25 %、约 26 %、约 27 %、约 28 %、约 29 %、 约 30 %、约 31 %、约 32 %、约 33 %、约 34 %、约 35 %、约 36 %、约 37 %、约 38 %、约 39 %、 约 40 %、约 41 %、约 42 %、约 43 %、约 44 %、约 45 %、约 46 %、约 47 %、约 48 %、约 49 %、 约 50 %、约 51 %、约 52 %、约 53 %、约 54 %、约 55 %、约 56 %、约 57 %、约 58 %、约 59 %、 约 60 %、约 61 %、约 62 %、约 63 %、约 64 %、约 65 %、约 66 %、约 67 %、约 68 %、约 69 %、 约 70 %、约 71 %、约 72 %、约 73 %、约 74 %、约 75 %、约 76 %、约 77 %、约 78 %、约 79 %、 约 80%、约 81%、约 82%、约 83%、约 84%、约 85%、约 86%、约 87%、约 88%、约 89%、约 90%、约 91%、约 92%、约 93%、约 94%、约 95%、约 96%、约 97%、约 98%、约 99%，或之间的任何范围或数值。通常，在此类情况下的组合物将包含至少0. 001%，或至少0. 01%或至少0. 05% w/w的添加剂材料，并且最多0. 1重量％、最多0. 5重量％或最多约1或2重量％的添加剂材料。因此，添加剂可以组合物的0.001% (或0.01%或0.05% )至1%，或0.001% (或 0. 01%或 0. 05% )至 0. 5%，或 0. 001% (或 0. 01%或 0. 05% )至 0. w/w 的含量存在。在本发明的其它方案中，添加剂材料不是固体、可溶性材料。多种材料适于用作生物相容的、吸水性和/或遇水膨胀性添加剂材料，以增强流动和可润湿性等。材料优选是不溶性或可非常缓慢溶解的。此类材料可以包括右旋糖苷聚合物，例如Sephadex，不同的粒径均可用；淀粉，包括羟乙基淀粉、支链淀粉衍生物、透明质酸和其酯；纤维素产品，诸如微晶纤维素(Avicel范围)、甲基纤维素、羧甲基纤维素、微粉纤维素或羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟乙基纤维素和可以单独或以混合物使用的其它材料，诸如交联的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。同样， 担当载体的适当添加剂材料包括聚乙二醇(PEG)，优选具有约1000的分子量；聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，优选具有约50，000的平均分子量；聚(丙烯酸)、聚丙烯酰胺、聚乙烯醇(PVA)、 聚(甲基乙烯基醚共聚马来酸酐)、聚(环氧乙烷)和右旋糖苷，通常具有约40，000的平均分子量。必要或希望时，本发明的微粒可以灭菌。适当技术的实例为无菌处理、电子束照射、Y-射线照射和环氧乙烷。在本发明的某些实施方案中，添加剂材料是硅石，优选亲水性硅石。此类硅石可以是硅胶、热解二氧化硅、硅粉、白炭黑(precipitated silicas)，或其混合物。适当的热解二氧化硅的实例包括(但不限于)Aerosil 90、130、150、200、300、380、R202、R805、 R812、R972、R974(Degussa Corporation, Ridgefield Park, N. J.)禾口CAB-O-SIL TS—720 和 M-5(Cabot Corporation, Tuscola, III·)。一般来说，Aerosil 200、Aerosil R974、 CAB-O-SIL TS-720和来自其它热解二氧化硅制造商的任何其它的一般等价产品都是优选的。众所周知，亲水AEROSIL 硅溶胶增加片剂崩解和活性成分释放的速率。硅溶胶担当了将水例如从消化液吸入片剂内部的“吸液芯(wick) ”。此外，由亲水AEROSIL 200 硅溶胶“包衣”的片剂成分更容易润湿并且膨胀更快(崩解剂)或溶解更快(活性成分)。 此类性质增强了本发明粉末纤维蛋白密封剂的可润湿性和溶解性。此外，已知此类硅石是担当助流剂，并且因此会增强此类粘性微粒的流动性、填充性和递送性。此外，已知此类硅溶胶是用于凝血的活化剂并且因此与纤维蛋白原和凝血酶成分协同作用(参见Margolis， “The Effect of Colloidal Silica on Blood Coagulation", Aust. J. Exp. Biol.,39, 249-258 页(1961))。组合物可以包含约0. 001至5% w/w，约0. 01禾Π 2% w/w，或约0. 01至0. 5% w/w的硅石。硅石可以仅与含纤维蛋白原的成分混合并且然后向其中添加含凝血酶的成分并进一步掺混，或反之亦然。硅石最优选是与预先掺混的第一和第二微粒掺混，成为最终步骤。 适当的掺混设备是本领域技术人员所知的。在又一个实施方案中，如在本文中定义，硅石可以与另一载体和/或添加剂材料合并存在。在本发明的其它实施方案中，添加剂是一种高度多孔和高度可溶性的交织丝状晶体，例如，山梨糖醇和/或甘露醇的交织丝状晶体。此类材料是以PARTECK SI和PARTECK M(Merck KGaA,Darmstadt,Germany)的名称出售。这些等级具有高的吸附容量并且因此适于与本发明的干粉纤维蛋白密封剂粉末组合物掺混，从而产生一种新颖的粉末，它通过使血液浸透所涂覆的粉末床层来降低起尘并且增强所述干粉纤维蛋白密封剂的可润湿性、溶解性和性能，并且因此避免在所述粉末界面处的单独凝结。添加剂材料可以作为单一成分或以组合形式存在于本发明的组合物中，并且可以存在于原材料中，或在掺混在一起之前添加到喷雾干燥凝血酶或纤维蛋白原成分中，或添加到最终掺混物中并经历进一步掺混。此种掺混可以使用低剪切或高剪切掺混、机械化学键接、杂化作用或本领域技术人员所知的任何其它技术来进行。虽然本发明的纤维蛋白密封剂中的微粒成分优选是水溶性的，并且微粒优选是通过喷雾干燥适当的溶液而获得，但是可获得的微粒可以是自由流动、离散并且大体上干燥或无水的，残留的含水量优选不大于约8% w/w的或约5% w/w，最优选不大于约3% w/w0 这意味着根据本发明的纤维蛋白密封剂的化合物并不是直到它们(例如)通过与伤口部位的液体进行接触而被润湿时才活化。活性成分因此可以作为干燥混合物来递送，尽管也设想过不同微粒的分开应用。含有活性物的微粒优选是非晶形的或在室温(例如25°C)下呈玻璃形式，以便稳定所截留的蛋白质以及使活性物处于如此迅速溶解的状态。按差示扫描量热法或调制差示扫描量热法的测量，含有活性物的微粒组合物优选呈现出大于约25°C， 或约30°C，或约40°C，或约50°C或以上的玻璃态转变温度。添加剂材料也可以是非晶形的或在室温(例如25V )下呈玻璃形式以便处于迅速溶解的状态。按差示扫描量热法或调制差示扫描量热法的测量，添加剂材料优选呈现出大于约25°C，或约30°C，或约40°C，或约 50°C的玻璃态转变温度。此玻璃态组合物使组合物能在环境温度或室温下(例如25°C )长期贮存，例如大于3个月或大于6个月，而不使活性显著地损失。添加剂材料也可以是结晶的或非晶形状态，但也可以是自由流动、离散并且大体上无水的，残留含水量优选不大于5% w/w，最优选不大于3% w/w。干粉纤维蛋白密封剂产品对大表面面积的应用情况可能具有特定的价值。这种应用情况包括诸如肝脏和脾脏等多种器官的外伤性损伤的外科手术和修复。另一个有益的应用情况是烧伤患者的皮肤移植，特别是如下情况在体外培养皮肤外皮层，然后转移到伤口部位。纤维蛋白密封剂在后一适应症中的用途可能对大面积烧伤的患者特别有效，为皮肤移植提供了一种生物相容的固着物(anchorage)。它也可以适用于局部溃疡的治疗。纤维蛋白密封剂粉末组合物可以使用同在申请的申请PCT/GB2009/051714的用于外科手术中的粉末递送装置来施用，所述申请以引用的方式并入本文。在粉末组合物的另一个提出方案中，粉末是含在溶解性材料的小袋或小包中。当所述小包放置在湿润组织上时，如在伤口或外科手术部位，所述小包的材料溶解从而使粉末从所述小包内部释放。附图简单说明图1展示说明本发明实用性的肝叶损伤(liver scallop injury)模型的照片。第一幅画面(a)展示造成的损伤，第二幅画面(b)展示施用的实施例1的本发明粉末，最后一幅画面(c)展示用纱布压30秒后的覆盖所述粉末的聚羟基乳酸片(Vicryl sheet)。图2是用于实施例2的改良的伯伊登室(Boyden chamber)设备的示意图。图3a)_h)展示用于实施例2的伯伊登室阵列在各个时间点的照片。本发明的优选实施方案的详细说明 现仅通过说明方式参考以下实施例来描述本发明。实施例1按同在申请的申请US 12/636，718中的描述来制备干粉纤维蛋白密封剂。简单地说，制备纤维蛋白原(ZLB，Marburg, Germany)和海藻糖(Pfanstiehl，Waukegan, IL, USA) 的中空球状粒子。所述粒子中的纤维蛋白原的浓缩是12% w/w。将凝血酶(SNBTS，Glasgow, Scotland)和海藻糖喷雾干燥以获得中空的粒子。凝血酶是以每克粒子1000IU的浓度存在。将所述粒子以1 1的比例掺混；所得粉末具有6% w/w浓度的纤维蛋白原和500IU/克的粉末。此掺混物称为参比粉末。为了制备本发明的混合物，将参比粉末进一步与流体吸收粒子(超细的S印hadexG200, GE Healthcare, Uppsala, Sweden) 1 lw/w 混合。超细的 S印hadex G200 具有 10-40 μ m的干燥珠粒尺寸。清楚地说，所得粉末由3% w/w的纤维蛋白原、250IU/克的凝血酶和50% w/w的S印hadex G200粒子组成。此掺混物称为本发明粉末。效力测试没有可用的用于测试止血剂效力的通用动物模型，因为伤口流血本身呈现出从高压的动脉损伤到大量渗血的不同的形式。大型动物模型(猪)是唯一代表人类状况的模型 (Pusateri等人(2003) J. Trauma 55 (3)，518-526)。在选定的动物模型中，本发明的粉末产品将要与市售的或研发中并且可能潜在地用于伤口应用的其它产品比较。为了模拟诱发不受控制的严重流血的肝脏的外伤性损伤，在猪的肝脏上造成肝叶损伤，通过以下进行用手术剪从所述肝脏切下4 X 5cm宽和1. 5-2cm深的切片(η = 2)。在这个工序期间切割的静脉或动脉都不予以包扎，并且所述动物在损伤造成之前已接受标准剂量的肝素约15分钟。使用“标准”方案来治疗一处损伤，在所述方案中，向伤口上倾洒6克参比粉末材料，用封口膜覆盖后，施压30秒。在除去所述封口膜期间，也除去了相当部分的粉末，并且在向所述伤口施用额外的1. 5-2克并用标准外科手术纱布施压。流血在2-3分钟内明显减慢，但完全止血消耗了约5分钟。第二处肝叶损伤是用6克本发明粉末来治疗，该粉末的吸收容量已提高，但仅含有一半量的纤维蛋白原和凝血酶。然后，用一片生物可降解的聚羟基乳酸片(Ethicon)覆盖所述粉末并且使用纱布施压30秒。所述纱布可以轻易除去并且聚羟基乳酸留在伤口上以防止扰动栓塞。没有观察到流血并且在1-1. 5分钟内实现完全止血 (参见图1)。只有S印hadex不能阻止动物的严重流血。本实验清楚地证明本发明粉末相对参比粉末的优势。在严重流血的伤口上施用等量的这些粉末时，对于本发明粉末来说在1. 5分钟内完全止血，而参比粉末能在5分钟内阻止流血，但只是在添加额外的粉末以后。这是令人惊讶的，因为本发明粉末同参比粉末相比仅含有一半浓度的纤维蛋白原和凝血酶。较低浓度的纤维蛋白原和凝血酶也暗示，本发明粉末同参比粉末相比，成本明显降低。实施例2为了制备本发明的其它组合物，使用轨道震荡器将来自实施例1的参比粉末 (“FC”)进一步与不同量的添加剂材料混合30秒或(对于较大批量来说)使用Turbula 低剪切掺混器混合10分钟，从而产生自由流动的粉末。选定以下添加剂材料，与所述参比粉末掺混，并且然后评价体外可润湿性1.溶解性、中空微粒-在玻璃态、喷雾干燥的海藻糖基质(“Alb”)中包含15% w/w白蛋白2.热解二氧化硅-Aerosil 200 ( "Aer")3.多糖-羟乙基淀粉(冻干的Voluven) ( “Vol，，)4.多孔、溶解性添加剂-Parteck SI 150 和 400 ( “Part SI 150” 和"Part SI 400”)5.多孔、可膨胀性和不溶性添加剂_超细的S印hadex 200G( “S印200G” )使用改良的伯伊登室开发了一种新颖的体外可润湿性试验。伯伊登室实质上是具有通过微孔膜分开的两个介质填充隔室的腔室(参见图2)。在常规用途中，将细胞放入上隔室中并且使其通过所述膜的气孔迁移到存在趋化剂的下隔室中。为达本研究的目的(可润湿性分析)，在环境温度下将下腔室填充蓝色染料的溶液，并且将测试粉末填充在上腔室中。将二十四个这样的腔室以4X6阵列布置，并用于研究测试粉末的特性，所述测试粉末是以在表1中罗列的方式布置，表中指定了在各腔室中粉末的总重量和各腔室中添加剂的百分比。可见，B行是A行的重复，D行是C行的重复。表 一种纤维蛋白密封剂，其包含含有纤维蛋白原的第一微粒、含有凝血酶的第二微粒的混合物，和添加剂材料。所述添加剂材料可以是颗粒，并且可以是例如生物相容的、吸水性材料，生物相容的、遇水膨胀性材料，生物相容的、水不溶性材料，多糖或硅石。