专利名称：一种能在豆乳发酵过程中转化异黄酮的干酪乳杆菌的制作方法我国是大豆的故乡，豆制品品种多样化，有着很好的消费者接受度。豆乳含有丰富的低聚糖益生元，是乳酸菌生长良好的培养基。大豆异黄酮是非类固醇类的植物雌激素，是具有抗氧化作用的多酚类分子，能够抵抗激素依赖类的疾病，例如，乳腺癌、前列腺癌、减少绝经期症状、能够抵御心血管疾病和减轻骨质疏松病的病症。大豆及普通大豆产品的异黄酮以结合态的糖苷形式存在，不具有生物活性，只有 游离的异黄酮苷元才有生物活性。大豆经过乳酸菌的发酵，使结合态异黄酮转变为游离态的异黄酮苷元，同时大豆蛋白被降解为低分子的肽和氨基酸，有利于消化吸收，保健功能也大大增加。大豆异黄酮的生理功能的实现和微生物的活动是密不可分的。因此大豆异黄酮在加工、吸收和利用过程中的转化是其发挥生物学活性的前提。
本发明的主要目的是提供一种干酪乳杆菌菌株，该菌株在豆乳发酵过程中转化异黄酮的应用。本发明的主要技术方案是这样实现的一种能在豆乳发酵过程中转化为异黄酮的干酪乳杆菌，其特征在于所述的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei Zhang)是一株益生菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址北京市朝阳区北辰西路I号院3号，分类命名干酪乳杆菌Lactobacillus casei，保藏日期为2011年11月18 日，保藏号CGMCC No. 5469。所述的干酪乳杆菌可在豆乳发酵过程中使无活性的异黄酮转化为功能性活性异黄酮。所述的豆乳为大豆磨浆所得豆乳或大豆粉还原乳。本发明的有益效果是干酪乳杆菌Lactobacillus casei Zhang(保藏号CGMCCNo5469.)能在豆乳发酵过程中，显著增加活性异黄酮含量，使功能性活性异黄酮得到很好的转化。大豆磨浆豆乳中，添加1% -3%葡萄糖，95°C杀菌5min后，冷却至37°C，将Lactobacillus casei Zhang 按 5. OX 106cfu/mL 的接种量接种，摇勻，37°C恒温培养，至 pH值4. 5时停止发酵，制成发酵豆乳。I. 3异黄酮测定利用高效液相色谱法对豆乳样品发酵前后的异黄酮成分进行测定。样品处理条件为准确称取发酵豆乳样品10g，加SOmL提取液(甲醇水=4 : I), 65°C水浴 4h,冷却至室温下加 6mL 2mol/L 的 NaOH,摇床(200rpm/min)振荡 lOmin。取出后加4mL冰醋酸混匀，用提取液定容至IOOmL容量瓶中。定量滤纸过滤后，吸取20mL到5OmL量筒中，力口 16mL水,用甲醇补足5OmL0取4mL至IOmL离心管,7 000g, 5min离心,取清液经O. 45 μ m膜过滤待进样分析。色谱条件为流动相A 7jC 甲醇冰乙酸=88 10 2 ;流动相B :2%冰乙酸的甲醇溶液；流速0. 4mL/min ;紫外检测波长260nm ;柱温32°C ;进样量20 μ L。2 结果表I Lactobacillus casei Zhang发酵豆乳样品中异黄酮含量的测定结果单位μ g/mL黄豆甘黄豆黄甘染料木甘黄豆苷元黄豆黄素染料木素~73.75±18.20±105.57±3.33±1.27±2.54士 豆乳原样 3.440.744.200.010.010.26
77.16土13.03±109.55±7.86土1.49土14.76土
豆乳发酵后
2.130.484.140.450.023.12从表I中看出，经益生菌Lactobacillus casei Zhang发酵后的豆乳样品中，具有生理功能的黄豆苷元、黄豆黄素和染料木素含量均增加，其中，黄豆苷元和染料木素含量显著增加。大豆异黄酮中含有的染料木素，可以有效抑制肿瘤的生长，因为其具有抑制细胞生长的酵素，以及抑制不正常血管的增生作用，对促进人体健康十分重要。3 结论干酿乳杆菌Lactobacillus casei Zhang (保藏号 CGMCC Νο5469·)能在 乳发酵过程中，显著增加活性异黄酮含量，使功能性活性异黄酮得到很好的转化。


一种能在豆乳发酵过程中转化为异黄酮的干酪乳杆菌，其特征在于所述的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei Zhang)是一株益生菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏号CGMCC No.5469。所述的干酪乳杆菌可在豆乳发酵过程中使无活性的异黄酮转化为功能性活性异黄酮。所述的豆乳为大豆磨浆所得豆乳或大豆粉还原乳。