一种具有广谱抗菌活性的芽孢杆菌的制作方法[0002] 芽孢杆菌（Bacillus)，细菌的一科，能形成芽孢（内生孢子）的杆菌或球菌。包括 芽孢杆菌属、芽孢乳杆菌属、梭菌属、脱硫肠状菌属和芽孢八叠球菌属等。它们对外界有害 因子抵抗力强，分布广，存在于土壤、水、空气以及动物肠道等处。芽孢杆菌（bacillus)杆 菌科的一属细菌。[0003] 目前因滥用抗生素导致耐药致病菌株的大量增加等问题已引起人们的高度重视。 所以，寻找抗生素替代品迫在眉睫。抗生素是某些微生物通过酶促反应将初级代谢产物转 变为结构性的次生代谢产物，诸如短杆菌肽等通过酶促反应把氨基酸转变为结构复杂的化 合物。而Nisin(乳酸链球菌素）等细菌素则需要通过核糖体来合成，从而是真正的蛋白 类物质。细菌素与抗生素的根本差别是：大部分细菌素只对近缘关系的细菌有损害作用，且 具有无毒、无副作用、无残留、无耐药性，同时也不污染环境等优点。[0004] 使用微生态制剂解决抗生素问题，已经从机理上得到证明：有益微生物在其生长 代谢过程中，会产生多种抑菌物质，主要包括芽孢杆菌类产生的抗菌肽、乳酸菌类生成的细 菌素等。有益菌通过这些物质一方面抑制如大肠杆菌、沙门氏菌等的生长，另一方面为自身 的活化、定植提供有利条件。[0005] 枯草芽孢杆菌所产的枯草菌素具有抑制一些革兰氏阳性菌，不产生耐药性，无残 留，不污染环境等优点，因此，枯草芽孢杆菌代谢产物作为抗生素的替代品，其研究和开发意 义重大，市场前景广阔。目前，现有的枯草芽孢杆菌存在以下缺陷：具有抑菌活性的代谢产物 的产量不高，抑菌能力一般，抑菌谱较窄，急需光谱且抑菌活性较高的枯草芽孢杆菌菌种。
[0006] 本发明的目的在于提供一种具有广谱抗菌活性的芽孢杆菌，是来源于贝类的新 种，能够产生具有较强的广谱抗菌作用，对多种致病菌具有较好的抑制作用的抑菌物质，为 开发新的抗菌药物提供了可能。[0007] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是： 一种具有广谱抗菌活性的芽孢杆菌，该菌株命名为5/7. DK1-SA11，已于2013 年11月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO :M 2013589。[0008] -种具有广谱抗菌活性的芽孢杆菌用于生产抑菌物质的用途。[0009] -种具有广谱抗菌活性的芽孢杆菌用于生产微生物生态制剂的用途。
[〇〇1〇] 本发明的有益效果是：本发明的具有广谱抗菌活性的芽孢杆菌能够产生具有较强 的广谱抗菌作用，对多种致病菌具有较好的抑制作用的抑菌物质，为开发新的抗菌药物提 供了可能。


[0011] 图1是本发明菌株DK-SA11的显微放大图。
[0012] 图2是本发明菌株DK-SA11和相近菌株的RecA基因序列进行同源性比对构建的 系统进化树。
[0013] 下面通过具体实施例，并结合附图，对本发明的技术方案作进一步的具体说明。
[0014] 本发明中，若非特指，所采用的原料和设备等均可从市场购得或是本领域常用的。 下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。
[0015] 实施例： 一种具有广谱抗菌活性的芽孢杆菌，该菌株命名为5/7. DK1-SA11，已于2013 年11月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO :M 2013589。
[0016] 本发明的菌株DK1-SA11生理生化特征为：革兰氏阳性菌，杆状(见附图1)，大部分 连成串，内含芽孢，长度在20-30微米之间，运动，耐盐高达16%，高盐浓度下可呈现丝状生 长，55°C生长停止，pH4-ll均可生长，pH7为最适pH。在2216E琼脂培养基上培养，菌落圆 形，不透明，具有运动性。
[0017] 根据伯杰氏细菌鉴定手册第九版，本发明的菌株DK1-SA11的形态和生理生化特 征均不同于已知菌，是从海洋环境分离出的新种。
[0018] 通过API细菌鉴定系统，及recA、gyrA和gyrB基因序列分析，对DK1-SA11菌种 进行生化和分子鉴定，API 20E (市售试剂盒），API coryne (市售试剂盒)，API 50CHB (市 售试剂盒）和API ZYM (市售试剂盒）的API试剂盒生化鉴定结果（见表1)和recA，gyrA 和gyrB基因的系统进化分析得知DK1-SA11为一株新菌株，不属于短杆菌属。利用序列分 析发现DK1-SA11菌株与枯草芽孢杆菌斯皮兹仁亚种相应核苷酸序列具有很高的同源性， 其序列相似性为96-99. 9%。
[0019] 表1 API试剂盒鉴定结果