专利名称：用于治疗子宫内膜异位的n-乙酰基-l-半胱氨酸的制作方法子宫内膜异位是引起美国妇科住院治疗的第三大原因，且估计影响着一千四百万欧洲女性。常用于表示子宫内膜异位发病率的数据有所有育龄女性的5-10%和所有女性的30-40%具有不孕问题。该疾病特征在于，子宫腔外存在组织结构与子宫内膜(在哺乳动物子宫内衬垫的膜)相同的组织。该错位组织发展为生长物或损伤(也称植入物或结节(nodule))，其对于月经周期的响应与子宫内膜组织的方式相同每个月该组织形成、破坏和脱落。月经期间血液从子宫流出，而从子宫内膜生长物脱落的血液和组织没有流出的通道。这导致内出血、血管和损伤组织的破坏，以及所引起的慢性炎症。子宫内膜异位的两种最常见症状是疼痛和不孕。症状可包括痛经，即经期前后的疼痛，以及性交期间或之后的疼痛；骨盆慢性疼痛或腰背、肠疼痛；经期量过多或经期延长(heavy menstrual periods),或经期之间的滴血和出血；经期期间肠运动疼痛或小便潘痛；不孕。子宫内膜异位的病因目前仍为未知，且一些理论提出了异位迁移和子宫内膜细胞的植入的原因。目前的理论将子宫内膜异位的发生与原始组织(正常位置的子宫内膜)本身状况的改变联系起来。目前本领域内越来越认可的是由于正常位置的子宫内膜细胞的紊乱而引起的子宫内膜瘤的不受控制的迁移、植入和生长所引起。目前尚不能治愈子宫内膜异位。存在多种治疗选择，且有办法将该病症引起的症状最小化。除了用镇痛药治疗疼痛，子宫内膜异位的治疗主要涉及卵巢的雌激素分泌功能抑制，因此涉及对多种实体的激素治疗，直至在很多重症病例中引起绝经。用手术的办法除去位于直肠阴道隔或在其他位置(即膀胱和肠)的子宫内膜瘤、粘着、腹膜植入和深度损伤，并减轻疼痛。然而，药物和手术治疗后都会复发。患有子宫内膜异位的年轻女性们通常面临着关系到未来生育的艰难抉择。意在抑制卵巢功能的激素治疗，与妊娠是不相容的。N-乙酰基-L-半胱氨酸(本文称为NAC)是一种公知的药物，其主要在对乙酰氨基酚中毒的治疗中用作溶粘蛋白剂。近年来，其也公认具有其他有益性质，例如作为抗炎和抗增殖药物，且已建议用于治疗多种不同病症和症状，例如精神分裂症、糖尿病和癌症。在此前的探索潜在的与子宫内膜异位相关的分子机制的研究中，已表明子宫内膜异位之中细胞增殖率的增加，可能是由自由基或ROS引起的子宫内膜异位的组织的氧化应激所导致。因此已表明对于子宫内膜异位的新的治疗策略可基于抗氧化剂和ROS清除剂，例如NAC。现有技术 Charlotte NgO 等人提出(The American Journal of Pathology (2009),Vol. 175,No. 1，第225-234页)，氧化应激可能引起或加强子宫内膜异位之中子宫内膜异位的细胞的增殖。因此建议将抗氧化剂(例如NAC)用于治疗子宫内膜异位。对于子宫内膜异位患者的原发细胞系以及植入人源子宫内膜异位组织的小鼠模型的研究发现，NAC消除了氧化应激的征兆，并增加了各模型中的增殖。因此建议将抗氧化剂例如NAC用于子宫内膜异位的安全和有效的治疗。Nastaran Foyouzi 等人还指出(Fertility and Sterility (2004), Vol. 82,Suppl.3，第1019-1022页)，抗氧化剂例如NAC可用于治疗子宫内膜异位。该文章公开了一项体外研究，其中用不同抗氧化剂例如NAC处理分离自健康受试者以及子宫内膜异位患者的细胞。所有抗氧化剂均抑制了子宫内膜间质细胞的增殖。在Yan Wo 和 Sun-Wei Guo(Gynecologic and Obstetric Investigation (2006),Vol.62, No. 4,第 193-205 页；European Journal of Obstetrics & Gynecology and、Reproductive Biology, (2008)，Vol. 137，第 198-203 页);专利文献 US2007/0287676A1)的研究中，对于永生的人子宫内膜间质细胞中NAC对于增殖和细胞周期终止的作用进行了研究并与其他用于治疗子宫内膜异位的物质相比较。表明NAC对增殖和细胞周期终止均具有一定作用，尽管与组蛋白脱乙酰基酶抑制剂相比并未达到所声称的作用。在S.Estany等人(Journal of reproductive Immunology (2007) ,Vol. 75,第 1-10页)的研究中表明，通过防止H2O2诱导的细胞毒性，NAC和其他抗氧化性物质对于培养中的子宫内膜细胞的抗氧化活性增加了被氧化细胞的活力。其他相关文献包括US2003/0190381A1，W02004/096206A2, US6239137B1,US2003/0119875A1,US2004/0014672A1 和 W02005/048822A2。其他公开NAC在癌症治疗中分子作用的背景技术包括T.Parasassi，等人(CellDeath and Differentiation (2005) ,Vol. 12,No. 10,第 1285-1296 页)；Ε· K. Krasnowska 等人(Free Radicals Biology and Medicine 2008,45 (11):1566-72)和A. C. Gustafsson等人(BMC Cancer(2005),5:75)。发明目标据本发明者所知，NAC治疗子宫内膜异位的临床结果在现有技术中尚未确定，对于治疗子宫内膜异位或将NAC用于治疗与子宫内膜异位相关的适应症也没有提出一个有效的剂量治疗方案。因此本发明的一个目标在于提供解决上述问题的方案，即提供含N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)的药物组合物用于治疗在人和哺乳动物中的子宫内膜异位和与子宫内膜异位相关的适应症。本发明的一个方面是提供含N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)的药物组合物，其以有效剂量治疗方案而使用，用于在哺乳动物(包括人)中治疗子宫内膜异位和与子宫内膜异位相关的症状。
前文已表明，NAC可用于新的子宫内膜异位治疗策略中，该策略是基于将其用作抗氧化剂和ROS清除剂。本发明的发明者已表明，NAC诱导分子和细胞的变化，其不仅抑制了增殖，也引起患病组织向正常组织分化。这些发现引领本发明的发明者提出了在人或哺乳动物患者中治疗子宫内膜异位和与子宫内膜异位相关的适应症的新的NAC处方。此外提供了在子宫内膜异位的治疗中NAC的有效剂量范围。在本发明的一个实施方案中，所述进行处方的治疗方案可用于例如控制疼痛症状(痛经、性交困难和非周期性慢性骨盆痛)的频率和强度，减小子宫内膜异位损伤的尺寸并最终使之消失，减少手术后复发和/或提高生育能力。该治疗基本无副作用，且特别是该治疗不妨碍妊娠。本发明提供含N-乙酰基-L-半胱氨酸的药物组合物，其用于治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物(包括人)，其中所述组合物用于脉冲式或间歇式口服给药，给药时间周期为两个月或两个月以上，N-乙酰基-L-半胱氨酸在给药日的剂量为20至90mg/kg/天。在一个实施方案中，本发明提供含N-乙酰基-L-半胱氨酸的用于上述用途的药物组合物，其中所述组合物用于连续给药3-5天然后中断2-4天。在另一实施方案中，所述含N-乙酰基-L-半胱氨酸的药物组合物用于连续给药1-3天，然后中断1-2天。·在一个实施方案中，本发明提供含N-乙酰基-L-半胱氨酸的用于上述用途的药物组合物，其中所述组合物在给药日以30至60mg/kg/天的N-乙酰基-L-半胱氨酸的剂量给药。在另一实施方案中，所述药物组合物在给药日以30至45mg/kg/天的N-乙酰基-L-半胱氨酸的剂量给药。在一个实施方案中，本发明提供含N-乙酰基-L-半胱氨酸的用于上述用途的药物组合物，其中所述药物组合物避光保存(protected from light)。在另一实施方案中,所述药物组合物为水溶性片剂。在又一实施方案中，所述药物组合物含有碳酸氢钠。在一个实施方案中，所述药物组合物为缓释制剂和/或胃保护制剂。在一个实施方案中，本发明提供含N-乙酰基-L-半胱氨酸的药物组合物，其用于治疗由子宫内膜异位引起的疼痛。在另一实施方案中，所述药物组合物用于治疗由子宫内膜异位引起的不孕。在又一实施方案中，所述药物组合物用于在腹腔镜检查或手术之前预先治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物。在一个实施方案中，所述药物组合物用于在腹腔镜检查或手术后治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物以防止复发。在一个方面中，本发明提供治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物的方法，其包括将含N-乙酰基-L-半胱氨酸的药物组合物口服给药于所述哺乳动物，采用脉冲式或间歇式剂量治疗方案，给药时间周期为两个月或两个月以上，N-乙酰基-L-半胱氨酸在给药日的剂量为20至90mg/kg/天。在所述方法的一个实施方案中，连续给药所述药物组合物3-5天然后中断2-4天。在另一实施方案中，连续给药所述药物组合物1-3天，然后中断1-2天。在所述方法的一个实施方案中，在给药日N-乙酰基-L-半胱氨酸的剂量为30至60mg/kg/天。在所述方法的另一实施方案中，在给药日N-乙酰基-L-半胱氨酸的剂量为30 至 45mg/kg/ 天。在一个实施方案中，该方法用于治疗子宫内膜异位引起的疼痛。在其他实施方案中，该方法用于治疗子宫内膜异位引起的不孕，用于在腹腔镜检查或手术之前预先治疗患有子宫内膜异位的哺乳动物，或用于在腹腔镜检查或手术之后的治疗以防止子宫内膜异位损伤的复发。
下文将参照附图更详细地阐释本发明，其中
图I表明NAC对于小鼠中子宫内膜异位损伤生长的抑制作用，如实施例I所述。显示植入后21天每份对照(n=10)和经NAC治疗的(n=10)动物的平均总重及其标准误差。显著性P〈0.05。在直方图上方的插图中，显示对照(A)和经NAC治疗的(B)病例繁殖的子宫内膜瘤的分别的图像。条1cm。图2A表示半定量RT-PCR的分别的凝胶，如实施例I所述。图2B表明在经NAC治疗的小鼠的包囊(cyst)中C0X-2和MMP-9表达减少，如实施例I所述。显示5例对照和5例经NAC治疗的小鼠的平均半定量RT-PCR值及其标准误差。图3表示E-钙粘蛋白在经NAC治疗的小鼠的包囊中的重新定位，如实施例I所述。显示对照(A和B)和经NAC治疗的小鼠(C和D)的子宫内膜瘤E-钙粘蛋白免疫染色的分别的图像。在对照样品中，整个上皮细胞的细胞质中可观察到弥散性褐色斑点，而在经NAC治疗的样品中该斑点限制于细胞-细胞相接触的水平。初始放大40倍。图4表明在经NAC治疗的动物的包囊中Cox-2染色减少,如实施例I所述。显示对照小鼠(A-C)和经NAC治疗的小鼠(D-F)的包囊免疫组织化学染色的分别的图像。在对照样品中，在一些区域检测到存在明显的褐色斑点，而这在经NAC治疗的样品中几乎检测不到。初始放大40倍。图5表示在经NAC治疗的动物的包囊中Ki-67染色减少，如实施例I所述。显示对照小鼠(A-C)和经NAC治疗的小鼠(D-F)的包囊的免疫组织化学染色的分别的图像。箭头指向染色的增殖细胞。初始放大40倍。图6为现有技术的图示，表示用NAC治疗增殖细胞时的若干作用机理，以癌细胞为例。这些机理集中于细胞终末分化。本发明的实施例也显示了当根据本发明的NAC用于治疗子宫内膜异位时，会产生至少一些所述作用。图7报道了对总计64位女性(33位经NAC治疗，31位为未治疗的对照)进行的临床前研究结果。NAC治疗三个月后，通过超声测量最大直径来测量包囊尺寸的改变。图7A表示经治疗的患者和对照中包囊尺寸的绝对数值的变化。图7B表明包囊尺寸的百分比变化。发明详述NAC 概述N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)是一种公知的低分子量药物，化学式为


本发明涉及在人或哺乳动物患者中治疗子宫内膜异位和与子宫内膜异位相关的适应症的新的NAC处方。此外在子宫内膜异位的治疗中提供了NAC的有效给药治疗方案。在本发明的一个实施方案中，所述建议的治疗方案可用于例如控制疼痛症状(痛经、性交困难和非周期性慢性骨盆痛)的频率和强度，减小子宫内膜异位损伤的尺寸并最终使之消失，减少手术后复发和/或提高生育能力。该治疗基本无副作用，且特别是该治疗不妨碍妊娠。