治疗虚弱的方法

H·J·克卢斯特博尔, M·普林斯

2012年4月18日

2010年8月23日

2009年8月24日

奥根尼克斯特研究公司

A61P19/10GK102421450SQ201080020393

虚弱 治疗

1.一种治疗老年患者虚弱的方法，尤其是60岁或年龄更大的患者，其特征在于，该方法包括将合成代谢类固醇和维生素D化合物的组合进行有效剂量的肠外相伴给药2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，至少每月，优选每周进行给药3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，给药至少进行三个月，优选为六个月的时间4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述合成代谢类固醇选自由二乙诺酮、羟甲烯龙、氧甲氢龙、诺龙和这些化合物的酯构成的组，优选为葵酸诺龙5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述维生素D化合物选自由钙化醇、胆钙化醇、钙二醇、骨化三醇、度骨化醇和钙泊三醇构成的组6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，通过肠外注射单个制剂进行给药，该单个制剂包含合成代谢类固醇和维生素D化合物，优选为葵酸诺龙和胆钙化醇的组合7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述单个制剂包括5毫克到600毫克剂量的葵酸诺龙和17. 5微克到15毫克剂量的胆钙化醇8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法作为虚弱老年人的恢复加强疗法，尤其是在住院治疗或手术后9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述老年患者为65岁或年龄更大10.一种药物组合物，其特征在于，该药物组合物包含在适于肠外给药的载体液体中的合成代谢类固醇和维生素D化合物11.根据权利要求10所述的药物组合物，其特征在于，所述合成代谢类固醇选自由羟甲烯龙、氧甲氢龙、诺龙和这些化合物的酯构成的组，优选为葵酸诺龙12.根据权利要求10或11所述的药物组合物，其特征在于，所述维生素D化合物选自由钙化醇、胆钙化醇、钙二醇、骨化三醇、度骨化醇和钙泊三醇构成的组13.根据权利要求10到12中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括5毫克到600毫克的葵酸诺龙和17. 5微克到15毫克的胆钙化醇14.根据权利要求10到13中任一项所述的药物组合物，用于预防虚弱，尤其作为没有虚弱处于非少肌症状态的人的恢复加强辅剂15.根据权利要求10到14中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述载体液体选自由花生油、棉花籽油和芝麻油构成的组16.一种用于液体的肌肉内给药的注射装置，其特征在于，所述液体为根据权利要求 10到15中任一项所述的组合物17.—种组合物，其特征在于，该组合物包括合成代谢类固醇和维生素D化合物，用于治疗老年患者的虚弱，尤其是60岁或年龄更大的患者，包括将合成代谢类固醇和维生素D 化合物的组合进行有效剂量的肠外相伴给药18.根据权利要求17所述的组合物，其特征在于，至少每月，优选每周进行给药19.根据权利要求17或18所述的组合物，其特征在于，给药至少进行三个月，优选为六个月的时间20.根据权利要求17到19中任一项所述的组合物，其特征在于，所述合成代谢类固醇选自由羟甲烯龙、氧甲氢龙、诺龙和这些化合物的酯构成的组，优选为葵酸诺龙21.根据权利要求17到20中任一项所述的组合物，其特征在于，所述维生素D化合物选自由钙化醇、胆钙化醇、钙二醇、骨化三醇、度骨化醇和钙泊三醇构成的组22.根据权利要求17到21中任一项所述的组合物，其特征在于，通过肠外注射单个制剂进行给药，该单个制剂包括合成代谢类固醇和维生素D化合物，优选为葵酸诺龙和胆钙化醇的组合23.根据权利要求22所述的组合物，其特征在于，所述单个制剂包括5毫克到600毫克剂量的葵酸诺龙和17. 5微克到15毫克剂量的胆钙化醇24.根据权利要求17到23中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物作为虚弱老年人的恢复加强辅剂，尤其是在住院治疗或手术后25.将合成代谢类固醇，优选为葵酸诺龙，和维生素D化合物，优选为胆钙化醇，用于生产肠外组合物，该肠外组合物用于根据权利要求1到9中任一项所述的治疗方法

本发明涉及治疗老年患者虚弱的方法本发明还涉及用于这种方法的药物组合物本发明尤其涉及用于虚弱老年人的恢复加强疗法

本发明涉及虚弱治疗，此发明中尤其参照上述的定义(Fried等2001)来定义术语 “虚弱”待治疗的患者通常是老年男性和女性，通常年龄为60岁或更大更具体地说，待治疗的老年患者年龄为65岁或更大广义上来讲，本发明基于目前针对特定虚弱症状的零碎研究不足以引起实际治疗的共识本发明旨在通过特定给药路径的活性物质的审慎结合提供这样一种疗法不希望束缚于理论，发明人相信将合成代谢类固醇，优选为葵酸诺龙，和维生素D化合物，优选为维生素D3(胆钙化醇)结合进行肠外给药的功效基于两个化合物之间的协同效应，尤其基于肌肉质量和肌肉功能该观念是基于两个化合物的受体的分子作用以及两个化合物可在成肌细胞/卫星细胞中激活的路径雄性激素受体和维生素D受体均属于核转录因子家族， 但是它们各自作用的方式有很大不同已知维生素D受体与细胞增生和分化有关，该雄性激素受体与细胞增长有关因此，认为两者相结合可较好地刺激肌肉细胞增长而且，认为合成代谢类固醇与维生素D化合物进行相伴给药，可积极地影响维生素D受体活动并且维生素D积极地影响了神经肌肉系统本发明包括将合成代谢类固醇和维生素D化合物进行有效剂量的肠外相伴给药 在本领域中术语“相伴给药”能够被很好地理解，该术语通常指同时或基本上同时进行两种活性物质的给药在本发明中，这意味着在相同的时间段内将这两种化合物都进行给药因此，如果其中一种化合物每天给药，那么另一种化合物也应每天给药，且都在同一天给药 如果其中一种化合物每周给药，那么另一种化合物也应每周给药，且都在同一周给药如果其中一种化合物每月给药，那么另一种化合物也应每月给药，且都在同一个月给药应当理解的是术语“天”、“周”和“月”不必要指日历中的天、周或月，而是指具有各个长度的时间段优选地，直接将这两种化合物连续给药，更优选同时给药最优选地，通过包含这两种化合物的单个组合物实现同时给药在本技术领域中术语“肠外给药”能够被很好地理解，该术语通常指除通过消化系统外的所有给药路径，包括但不限于肌肉内、静脉内、皮下、经皮、透粘膜(transmucosal) 或吸入给药在本发明中，肠外给药优选为肌肉内或皮下注射给药鉴于要治疗的患者群体为老年人，最优选的给药路径是皮下注射老年人通常的特征在于肌肉少(尤其如果具有虚弱症状)另一方面，他们普遍皮肤面积相对较大、褶皱多因此，尤其在治疗虚弱时，与肌肉内注射相比，皮下注射特别的优势在于更容易实施并且带给患者的痛苦更少将化合物以有效剂量给药，在本技术领域中术语“有效剂量”能够被很好地理解 在药理学中，有效剂量为产生药物理想效果的中等剂量，通常基于分析针对药物的剂量反应关系来决定有效剂量在一半参加试验的人数中产生理想效果的剂量为ED-50，并且这通常被认为是有效剂量在本发明的上下文中，如果该剂量用于缓和多种(例如两种或更多种)虚弱的症状，那么就认为该剂量为有效剂量优选的有效剂量用于治疗虚弱症状，这可通过合适的生物标记和/或合适的临床终点(endpoint)评估在本发明的上下文中，术语 “有效剂量”指两种活性物质相结合的剂量针对男性和女性患者，有时可选择不同的有效剂量和剂量间隔比如同化性类固醇剂量在男性中可更高，另外，女性患有虚弱的年龄普遍低于男性，可能需要常规剂量的更长时间的治疗，而男性变虚弱的年龄更高，需要时间短和力度更高的恢复加强疗法本发明活性物质的组合包括合成代谢类固醇，在本技术领域中术语“合成代谢类固醇”被理解一类与荷尔蒙睾酮相关的类固醇激素为了回顾合成代谢类固醇，可参考 A.T. Kicman 在 British Journal of Pharmacology Q008) 154，502-521 (英国药理学杂志 2008年第1 期第502-521页)中的描述合成代谢类固醇通常具有重叠的合成代谢和雄性激素效应，因此有时用合成代谢-雄性激素类固醇綱表示合成代谢-雄性激素类固醇中雄性激素与合成代谢比例是决定这些化合物临床应用的重要因子应当理解的是， 在本发明中，促进肌肉细胞增长的合成代谢(肌肉营养(myotrophic))效应最好优于雄性激素效应在这方面，合成代谢类固醇优选地选自由二乙诺酮、羟甲烯龙、氧甲氢龙、羟甲烯龙、诺龙及这些化合物的酯构成的组，用于本发明的优选的合成代谢类固醇为诺龙或其酯， 最优选为葵酸诺龙根据本发明，葵酸诺龙优选每月给药一次，更优选每三周给药一次，最优选每周给药一次(优选地通过肌肉内注射，更优选地通过皮下注射)每个时间间隔给药的总剂量通常从每月15毫克，优选为每月25毫克，变化到每月600毫克，优选为每月400毫克在根据本发明治疗虚弱时，剂量最好不要太低鉴于不可避免的雄性激素效应，剂量最好也不要太高尽可能低和必要时尽可能高的优选的剂量为每周5毫克，优选为每周10毫克到每周150毫克，优选为每周50毫克，或者每月20毫克，优选为每月40毫克到每月600毫克， 优选为每月200毫克如果使用另一种合成代谢类固醇，优选的剂量范围等于上述提到的葵酸诺龙的剂量范围本领域的技术人员知道如何计算不同的合成代谢类固醇之间的剂量转换本发明的活性物质的组合包括维生素D化合物在本发明的上下文中，术语“维生素D化合物”指维生素D和维生素D的各种形式、以及维生素D的前体和类似物，这类化合物在本技术领域中是熟知的优选地，维生素D化合物是维生素D的普通形式之一，并选自由钙化醇、胆钙化醇、钙二醇、骨化三醇、度骨化醇和钙泊三醇构成的组用于本发明的维生素D最优选的形式为胆钙化醇(维生素D3)在本发明中，维生素D给药的剂量力度最好达到使血浆水平高于与维生素D缺乏相关联的血浆水平通常将维生素D缺乏定义为25-羟基维生素D血浆浓度低于20ng/ mL(50nmol/L)大于140nmol/L的血浆浓度已经与副作用相关联因此选择维生素D化合物的优选剂量以使血浆水平在50-70nmol/L和140nmol/L之间根据本发明，优选的维生素D化合物胆钙化醇优选每个月给药一次，更优选每三周给药一次，最优选每周给药一次(最优选通过肌肉内注射)胆钙化醇的剂量范围为与每天口服剂量100-4000IU等效的肠外给药剂量或者每周或每月相应的剂量然而，与 600000IU(15毫克)的胆钙化醇肌肉内注射一样高的肠外剂量也是可能的上述的化合物优选地包含在用于肠外给药的单个药物组合物中更优选地，这是指包含在适于肠外给药的载体液体中的合成代谢类固醇和维生素D化合物(优选为葵酸诺龙和胆钙化醇的组合)的药物组合物该载体液体优选为油，更优选地选自由花生油、棉花籽油和芝麻油构成的组不希望束缚于理论，发明人相信合成代谢类固醇和维生素D化合物(特别是葵酸诺龙和胆钙化醇)具有油溶性，可对基于油的注射制备的稳定性产生相互有利的效果而且，在单个注射组合物制备时，这两个化合物的结合有助于相伴给药，对患者的侵害更小， 并且能够更好地符合这两种药物的给药方案应当理解的是，本发明的药物组合物可包括通常用于这种制剂的其他赋形剂本领域技术人员熟知用于肠外剂量形式的赋形剂、添加剂、佐剂等等，在此不进行说明在治疗虚弱时，本发明的组合物通常给药至少3到12个月，优选为4到8个月，最优选为6个月本发明提供了一种治疗老年患者虚弱的新的医疗干预当这种虚弱治疗没有先例时，发明人相信(不希望束缚于理论)本发明的医疗干预进一步有益这尤其指上述的转折点，在该转折点患有虚弱的老年患者住院治疗后不再能够保持独立延长在疗养院停留时间，同时进行适当的身体和心理疗法，这固有地剥夺了这些患者防止螺旋式下跌的重要方式，即独立生活，一天又一天有规律地进行身体和心理活动在这方面，本发明基于对处于该转折点的患者进行充分的医疗干预不仅可治疗虚弱本身的状况，而且用于支撑患者保持独立并重获身体和心理活动这一思想为了这样支持这些患者改善身体，本发明也提供了用于虚弱的老年人的恢复加强疗法，尤其是在住院治疗或手术后在本发明的这个方面，以相对较高的频率(优选为每周)及相对较高的剂量给药这两个活性物质(优选为葵酸诺龙和胆钙化醇)一段时间，该段时间足够长以提供所需要的药理作用，并且足够短以致感觉上为短期加强疗法(以重获独立)而非永久药疗 (这反映了慢性疾病)加强疗法优选的持续时间为4-8个月，优选为6个月本发明也涉及预防住院治疗后容易变虚弱的患者的虚弱通常，这些患者并非少肌症状态，其免疫功能下降每次给药时最好使用包括这两个化合物的单个药物组合物进行上述的加强疗法本领域技术人员熟知本发明中使用的用于这些化合物肠外给药的装置基于已知的硬件，这样本发明也涉及用于液体的肌肉内给药的注射装置，其中，该液体为如上所述根据本发明的组合物下文参考下面非限制性的实例和附图进一步说明本发明这些实例为体外研究，证明了诺龙和1 α，25- 二羟维生素D3对肌肉卫星细胞增生具有协同作用，从而对肌肉质量也具有协同作用本发明相应地旨在减少用于人体的葵酸诺龙的剂量，以在采用组合物和单独使用葵酸诺龙时对肌肉质量和/或功能产生相同的影响，这用于达到更好的安全性实例 1材料和方法从ftOmoCell公司(德国海德堡)获得了不同的两批人类骨骼肌细胞或卫星细胞(从33岁健康女性身上获得的hSkMCl和从64岁健康女性身上获得的hSkMC2)，并根据供应商提供的说明在培养瓶中进行培养将细胞收集并存储在液氮中直到用于实验，细胞传代次数(passage number)高于15时不使用这些细胞实验中，在37°C、5 % CO2条件下以3500-7000细胞/平方厘米的密度使用M孔板(Costar公司)在加入5%木炭 (Sigma-Aldrich公司)处理的胎牛血清(FBS)(德国PAA))的基础培养基(PromoCell公司)中培养细胞直到80%融合从Sigma-Aldrich公司可买到诺龙、睾酮和1 α，25- 二羟维生素D3受体研究中，将这些细胞在另外加入ΙμΜ和10 μΜ的诺龙(葵酸诺龙的活性代谢物)或InMUOnM和IOOnM的1 α，25- 二羟维生素D3的条件下培养5天随后通过流式细胞术可视化的雄性激素和维生素D受体染色协议来自于Krishan等Q000) 和Folgueira等Q000)公布的协议产生最好的染色图案的方法包括福尔马林固定 (formalin-fixation)，随后是吐温(Tween) 20透化作用和使用未标记的第一抗体(抗雄激性素受体(Epitomics (宜百康)公司)和抗维生素D受体(GeneTex公司))和荧光团标记的第二抗体(PE结合的山羊抗大鼠IgG，用于给维生素D受体染色，以及FITC结合的山羊抗兔，用于给雄性激素受体染色，二者均由Rockland提供)进行双染色使用这两个第二抗体的染色仅仅用作背景通过使用含血清缓冲剂进行培养阻断Fc受体所有的解决方法进一步包含吐温20 (Sigma-Aldrich公司)作为清洁剂，以在整个染色实验中保持细胞的透化状态通过确定细胞染色的强度和细胞染色的百分比，比较非刺激和刺激细胞中的染色使用双色流式细胞仪(贝克曼库尔特(Beckman Coulter)型FC500Cytomics)进行测量在使用和不使用荷尔蒙处理情况下确定超过标记的设定点(以用于背景染色)的染色细胞的百分比的增加增生研究中，采用单独的IOOnM和IOOOnM的诺龙或IOnM和IOOnM的1 α，25- 二羟维生素D3和这二者的组合将细胞培养8天在第1、第4和第7天更换介质和荷尔蒙 使用刃天青试验测量增生(Mern-Mraeter等2008)使用学生t检验进行增生数据的统计分析实例2受体研究诺龙和1 α，25-二羟维生素D3对细胞的作用取决于它们同源受体的存在，因此我们研究了人类骨骼肌细胞中的雄性激素和维生素受体的存在图1和图2显示了诺龙和 Ια,25- 二羟维生素D3对细胞百分比的影响，在这些细胞中，与单独使用第二抗体染色相比，表达雄性激素和维生素D受体具有变化在hSkMC2细胞中，曝露于诺龙和1 α，25- 二羟维生素D3之后观察具有阳性雄性激素和维生素D受体的细胞数量的增加柱状图也显示了在荷尔蒙处理之前细胞已经包含该受体时，细胞中染色强度增加，这表示每个细胞的受体数量增加这些结果表示更多的细胞变成阳性雄性激素受体，也表示在处理前细胞为阳性受体时，每个细胞的受体数量增加较少提及对hSkMCl细胞的影响(未显示数据)这些受体研究显示雄性激素和维生素D受体存在于人类骨骼肌细胞中，并显示诺龙和Ia，25_ 二羟维生素D3刺激各自受体的表达实例3增生研究实例1中显示了这两个化合物增加了雄性激素受体和维生素D受体阳性细胞的百分比，这表示更多的细胞潜在地响应该处理人类骨骼肌细胞的增生作为响应参数，以检测诺龙和1 α，25-二羟维生素D3的结合是否对肌肉质量具有协同效应图3显示了，(a)对于hSkMCl细胞，单个化合物对增生没有影响，但是当Ia， 25- 二羟维生素D3与诺龙组合时，所试验的所有4个组合均对增生有明显的影响(除了明显为P < 0. 05的IOOnM诺龙加上IOOnM 1 a，25- 二羟维生素D3，P < 0. 001)对于(b) hSkMC2细胞，Ia ,25- 二羟维生素D3的浓度在增生过程中增加，并且与对照相比，这4个组合再次显示了明显的影响(除了明显为P <0.001的IOOnM诺龙加上IOnM 1 a，25-二羟维生素D3，P < 0.05)下面的表1显示了用于各种处理的基于对照的百分比的增加对于hSkMCl细胞，所有组合的增加超过了该组合中单个化合物的增加的总和这证明了诺龙和1 α，25_ 二羟维生素D3的组合对人类骨骼肌细胞的协同效应对于hSkMC2细胞，在四个试验组合的三个中观察到协同效应表 1 与对照相比，单独通过诺龙和1 α，25-二羟维生素D3(dhvit D3)和通过这两种化合物的组合，人类骨骼肌细胞(hSkMCl和hSkMC2)增生的百分比增加(％ Δ)Σ表示与各种组合中所用的诺龙和dhvit D3相同时，采用单个诺龙的％ Δ和单个dhvit D3的％ Δ 的和