对产β－内酰胺酶耐药菌株有协同作用的抗菌素组合物制作方法

钟裕国, 李相才, 阴国钺, 蒋学华

2003年3月26日

2002年10月28日

2002年10月28日

钟裕国, 李相才, 阴国钺

A61K31/549GK1404834SQ0213397

内酰胺酶 对产 菌株 耐药 协同

1.一种对产β-内酰胺酶耐药菌株有协同作用的抗菌素组合物，其特征是它由第三代头孢类抗生素头孢曲松钠与β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦钠所组成，头孢曲松钠与舒巴坦钠是按头孢曲松无水物与舒巴坦无水物的重量计以1∶1-8∶1的比例混合制成复方制剂

本发明涉及一种对产β-内酰胺酶耐药菌株具有增效协同作用的抗菌素组合物，该组合物是由第三代头孢菌素头孢曲松钠与β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦钠配伍组成的复方制剂头孢曲松系上世纪八十年代上市的半合成第三代头孢菌素，具有长效、广谱、对革兰氏阴性菌有强效的特点本品对革兰氏阴性，阳性需氧菌和某些厌氧菌具有广谱抗菌活性；对奇异变形杆菌、流感及副流感杆菌、肺炎双球菌、淋球菌、大肠杆菌、肺炎杆菌、产气杆菌、弗氏枸橡酸杆菌、吲哚阳性变形杆菌、沙雷氏菌等革兰氏阴性菌特别有效；对肺炎球菌、溶血性链球菌、金葡菌、溶血性溶球菌等革兰氏阳性菌也有较强的抗菌活性，对绿脓杆菌的抗菌活性为羧苄青霉素的8倍头孢曲松钠上市以来，由于其优点突出，逐渐成为β-内酰胺酶类抗生素中最畅销的品种之一，1997年世界销售额达10.1亿美元，成为本类抗生素单品种销售额之首，据我国十大医院统计，1997年、1998年均为购入抗生素之首，分别占抗生素购入金额的14.2％和16.6％(见文献1)由于大量的广泛临床应用，导致对头孢曲松的耐药菌株迅速增加，由八十年代中期的＜3％上升到九十年代末期的20％左右(见文献2)，这是近年来头孢曲松临床疗效下降的重要原因细菌产生耐药的机理以细菌产生β-内酰胺酶水解酶为主，该酶能使青霉素类和头孢菌素类抗生素的β-内酰胺酶环水解而失效针对日益严重的耐药菌株感染问题，医药学家采取的主要对策之一就是将β-内酰胺酶抗生素与β-内酰胺酶抑制剂按最佳比例配伍成复方制剂目前已先后上市的舒巴坦与抗生素的复合制剂有氨苄青霉素/舒巴坦、羟氨苄青霉素/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、舒他西林甲磺酸盐、美洛西林/舒巴坦等(见文献3)目前国内外尚未见有将头孢曲松与舒巴坦制成复方制剂作为新药上市和临床应用的报道与本发明相关的文献报道如下(1)于文州，段大成.对我国β-内酰胺类抗生素发展的建议及十大城市用药情况分析国外医药抗生素分册，22(4)145-157，2001(2)张永龙，李家泰.舒巴坦与第三代头孢菌素联合对第三代头孢耐药菌的体外抗菌作用的研究中国临床药理杂志，16(5)323-326，2000(3)张健民，陈佩珍.舒巴坦与舒巴坦复合制剂中国制药信息，15(5)1-8，1999本发明的目的在于提供一种抗β-内酰胺酶的抗菌素复合物，既可保护头孢曲松钠不受细菌产生的β-内酰胺水解酶破坏，又可增强抗菌活性，临床上用于治疗耐药菌株感染，起到显著的协同增效作用本发明的组合物及其制备将注射用的头孢曲松钠和注射用的舒巴坦钠，在符合GMP制备的条件下，头孢曲松钠与舒巴坦钠分别按无水头孢曲松和无水舒巴坦重量计以1∶1-8∶1的比例混合，按中国药典规定的粉针剂或冻干剂的质量要求和技术规范进行操作，制备出对产β-内酰胺酶耐药菌株有效的复方头孢曲松钠/舒巴坦钠制剂本发明的优点1.注射用头孢曲松钠/舒巴坦钠复方制剂对产β-内酰胺酶的耐药菌株具有十分显著的协同增效作用，能明显增强体外抗菌作用和动物体内抗感染作用2.本复方制剂显著的扩大其抗菌谱，可扩展临床应用范围3.本复方制剂有效的解决细菌耐药性问题，可增强临床疗效4.本发明具有制备程序和工艺科学化和规范化的特点，易于实现工业化生产实施例实施例1注射用头孢曲松钠/舒巴坦钠(1.0g/1.0g；1∶1，均按无水物计)粉针剂在符合GMP的条件下，分别取注射用头孢曲松钠和注射用舒巴坦钠按其含量换算后，以头孢曲松无水物与舒巴坦无水物为1∶1(重量比)的比例按无菌操作的技术规范于混料器中混合均匀，计算平均装量，在超净工作台内(局部100级)分装入灭菌的玻瓶中，上塞、压盖、贴签得头孢曲松钠/舒巴坦钠(1∶1)粉针剂实施例2注射用头孢曲松钠/舒巴坦钠(1.0g/1.0g；1∶1，均按无水物计)冻干剂在符合GMP的条件下，分别取注射用头孢曲松钠和注射用舒巴坦钠按其含量换算后，以头孢曲松无水物与舒巴坦无水物1∶1(重量比)溶于其8倍量的注射用水中，用0.32μm微孔滤膜过滤除菌后，装盘，以1℃/min降温预冻，直至温度降至-35℃维持2小时，在冷凝-32℃，干燥箱真空度200pa条件下，以5℃/小时速率升温至温度达-5℃时，维持20小时，而到升温至10℃，维持10小时然后上塞、压盖、贴签得头孢曲松钠/舒巴坦钠(1∶1)冻干剂实施例3注射用头孢曲松钠/舒巴坦钠(1.0g/0.5g；2∶1)粉针剂按实施例1的操作程序及工艺制成头孢曲松钠/舒巴坦钠(2∶1)复方粉针剂实施例4注射用头孢曲松钠/舒巴坦钠(1.0g/0.5g；2∶1)冻干剂按实施例2的操作程序及工艺制成头孢曲松钠/舒巴坦钠(2∶1)复方冻干剂实施例5注射用头孢曲松钠/舒巴坦钠(1.0g/0.25g；4∶1)粉针剂按实施例1的操作程序及工艺制成头孢曲松钠/舒巴坦钠(4∶1)复方粉针剂实施例6注射用头孢曲松钠/舒巴坦钠(1.0g/0.25g；4∶1)冻干剂按实施例2的操作程序及工艺制成头孢曲松钠/舒巴坦钠(4∶1)复方冻干剂实施例7注射用头孢曲松钠/舒巴坦钠(1.0g/0.125g；8∶1)粉针剂按实施例1的操作程序及工艺制成头孢曲松钠/舒巴坦钠(8∶1)复方粉针剂实施例8注射用头孢曲松钠/舒巴坦钠(1.0g/0.125g；8∶1)冻干剂按实施例2的操作程序及工艺制成头孢曲松钠/舒巴坦钠(2∶1)复方冻干剂本发明不限于上述实施例的特定复方比例本发明复方制剂经体外抗菌试验和动物体内抗感染试验证明，其体外抗菌活性和体内对感染动物的治疗作用均较单用头孢曲松钠为优，两者配伍应用具有显著的协同增效作用复方头孢曲松钠/舒巴坦钠组合物体外抗菌作用试验和动物体内抗感染试验，结果见表1、2、3一、动物体内抗感染试验头孢曲松/舒巴坦对2种实验菌感染小鼠败血症的体内保护实验结果表1.头孢曲松/舒巴坦对金黄色葡萄球菌感染小鼠败血症的体内保护实验结果感染细菌药物 剂量 每组存活数(存活率) ED5095％可信限(感染菌)(mg/kg) 动物数 (％) (mg/kg)(cfu/mouse) (只)金葡球菌 头孢曲松 60 10 8(80％) 31.5319.90-49.942001-m148 42 10 6(60％)(4.3×104) 29.4 10 5(50％)20.5810 4(40％)16.4110 1(10％)舒巴坦 500 10 6(60％) 401.90 236.91-681.79350 10 4(40％)245 10 3(30％)171 10 1(10％)120.05 10 0(0％)头孢曲松/舒巴坦钠 25 10 10(100％) 8.61 5.94-12.481∶1 17.5 10 9(90％)12.2510 7(70％)8.57510 6(60％)6.0025 10 2(20％)头孢曲松/舒巴坦钠 25 10 10(100％) 9.57 6.48-14.132∶1 17.5 10 8(80％)12.2510 6(60％)8.57510 5(50％)6.0025 10 2(20％)头孢曲松/舒巴坦钠 30 10 10(100％)4∶1 21 10 7(70％) 12.187.76-19.1314.7 10 5(50％)10.2910 4(40％)7.2 10 3(30％)头孢曲松/舒巴坦钠 40 10 9(900％)22.0315.12-32.098∶1 28 10 6(60％)19.6 10 4(40％)13.7210 2(20％)9.64 10 1(10％)表2.头孢曲松钠/舒巴坦钠对克雷伯肺炎杆菌感染小鼠败血症的体内保护实验结果细菌 药物剂量 每组 存活数 ED5095％可信限感染菌量(mg/kg) 动物数 (存活率) (mg/kg)(cfu/mouse)(只) (只)克雷伯 孢曲松180 10 9(90％) 99.12 68.05-144.38肺炎杆菌 126 10 6(60％)2002-1279 88.2 10 4(40％)(5.6×104)61.7410 2(20％)43.2210 1(10％)舒巴坦500 10 6(60％) 452.51260.76-785.25350 10 3(30％)245 10 1(10％)171 10 1(10％)头孢曲松/舒巴坦钠 120.05 10 0(0％)46.61 30.36-71.551∶1 80 10 8(80％)56 10 6(60％)39.2 10 4(40％)27.4410 2(20％)头孢曲松/舒巴坦钠 19.2110 1(10％) 47.24 34.20-65.262∶1 80 10 9(90％)56 10 6(60％)39.2 10 3(30％)27.4410 2(20％)19.2110 0(0％)4∶1 100 10 9(90％) 53.15 838.86-72.7170 10 7(70％)49 10 5(50％)34.3 10 2(20％)24.0110 0(0％)8∶1 150 10 10(100％) 78.10 57.77-105.59105 10 7(70％)73.5 10 4(40％)51.4510 1(10％)36.0210 1(10％)二、体外抗菌作用试验表3.不同配比头孢曲松钠/舒巴坦钠对230株临床分离产酶菌MIC50和MIC90值结果细菌株数药名 MIC range Mode MICMIC50MIC90(mg/L) (mg/L) (mg/L) (mg/L)金黄色葡萄球菌 20 CTX 4-256 8 8 128(产酶)SBT 32-512 512256 5121∶11-128 2 4 162∶11-256 2 4 164∶11-128 2 2 168∶11-256 2 4 32表皮葡萄球菌 14 CTX 16-128 64 64 64(产酶) SBT 128-512512512 5121∶14-64 32 16 322∶12-32 32 16 324∶12-32 32 16 328∶18-64 32 32 64化脓性链球菌 14 CTX 0.125-32 0.25 2 32SBT 16-512 16 16 5121∶10.008-44 0.2542∶10.008-40.008 0.062 44∶10.008-42 0.062 28∶10.008-88 0.5 8肺炎链球菌 14 CTX 4-32 8 8 16SBT 2-16 16 16 161∶10.008-0.5 0.25 0.125 0.252∶10.008-0.5 0.50.125 0.54∶10.008-0.5 0.125 0.125 0.58∶10.008-20.25 0.251嗜血流感杆菌 14 CTX 2-16 4 4 8(其中产酶菌7株) SBT 2-16 4 4 161∶10.008-0.5 0.25 0.062 0.252∶10.008-0.5 0.008 0.062 0.254∶10.008-0.5 0.008 0.031 0.1258∶10 008-10.125 0.125 1接表3细菌 株数 药名MIC range Mode MIC MIC50MIC90(mg/L) (mg/L) (mg/L) (mg/L)大肠埃希菌 20CTX 16-256 256 64 256(产酶) SBT 32-512 512 512 5.121∶18-64 16 16 642∶18-64 32 16 644∶14-64 16 16 328∶116-128 32 32 128克雷伯肺炎杆菌 20CTX 64-512 256 256 512(产酶)SBT 32-512 32 64 2561∶18-1 28 32 32 642∶18-64 32 16 324∶18-256 32 16 328∶116-256 64 128 128产气肠杆菌 14CTX 128-512512 256 512(其中产酶10株) SBT 128-512256 256 5121∶132-512 128 128 2562∶132-256 128 128 2564∶18-256 32 32 2568∶132-256 128 64 256阴沟肠杆菌 14CTX 64-512 256 256 512(其中产酶8株)SBT 32-512 128 128 5121∶18-128 32 32 1282∶14-256 64 32 1284∶12-256 32 32 1288∶14-256 128 64 256粘质沙雷氏菌 19CTX 16-128 128 128 128(产酶) SBT 64-256 64 64 2561∶14-128 32 16 322∶12-32 8 8 164∶10.5-32 8 8 168∶116-64 32 32 64接表3细菌 株数 药名 MIC rangeMode MICMIC50MIC90(mg/L) (mg/L)(mg/L) (mg/L)鲍曼氏不动杆菌 14 CTX 64-512 256256 256(产酶)SBT 128-512 512256 5121∶1 16-256 32 32 2562∶1 8-25616 16 1284∶1 8-25632 16 1288∶1 32-256 32 32 256枸橼酸杆菌属 19 CTX 1-2568 8128(产酶)SBT 32-512 32 64 2561∶1 0.125-64 8 4162∶1 0.25-32 4 4164∶1 0.125-64 4 4168∶1 1-2568 864绿脓假单胞杆菌 14 CTX 128-512 512512 512(产酶)SBT 512 512512 5121∶1 64-256 256128 2562∶1 32-256 128128 1284∶1 32-256 64 64 1288∶1 32-256 256128 256窄食嗜麦芽杆菌 20 CTX 32-512 256128 256(产酶)SBT 128-512 512512 5121∶1 16-256 12864 1282∶1 4-12812864 1284∶1 4-12864 64 1288∶1 16-256 12864 256以上体内外试验结果表明，头孢曲松钠/舒巴坦钠联用对临床治疗产酶耐药菌具有较单用头孢曲松钠更强的抗菌作用，从抗菌作用强度和用药的安全性及经济方面考虑，以4∶1配比为头孢曲松钠/舒巴坦钠的最佳复合配方