专利名称:通过液体深层发酵制备的冬虫夏草保健品及其制备方法冬虫夏草学名Cordyceps (Ophiocordyceps) sinensis;Hirsutella sinensis]属子囊菌亚门、麦角菌科、冬虫夏草属,为我国传统名贵的中草药类真菌,素有“药王”之称,与人參、鹿茸并称为中国医学三大补品。自古以来,冬虫夏草作为滋补佳品在我国已被广泛认可和使用。现代科技表明,冬虫夏草中所含的虫草酸及虫草素等成分,具有扩张气管、镇静、抗细菌、降血压的功效,在治疗肺结核、咳嗽、衰弱、贫血虚弱、自汗盗汗、病后久虚、洛血吐血、慢性肾炎等方面均具有良好的效果。研究表明发酵产生的冬虫夏草菌丝体和天然冬虫夏草功效相同,两者均富含冬虫夏草多糖、氨基酸、甘露醇和虫草素等功能因子。 目前,国内外的相关研究主要集中在冬虫夏草功能因子的提取及药理、药效上。但是,在冬虫夏草子实体的人工栽培领域,却受到很多的技术限制,很少大規模地进行エ业化生产以及广泛地民用化使用,同时,该技术领域也难以商业化使用。十年前,自然界中冬虫夏草子实体的年保有量约有I万吨,但是目前的保有量却只有约5千吨,而且,如上所述,冬虫夏草子实体又由于技术上原因,难以大量的人工生产,因此,人们对冬虫夏草保健功效和治疗功效的渴求与冬虫夏草子实体保有量的短缺产生了显著的矛盾。
本发明的目的在干,克服上述现有技术的缺陷而提供一种能够大規模地进行エ业化生产,并且能够以较低的成本生产出效用较高的冬虫夏草子实体的通过液体深层发酵制备冬虫夏草保健品的方法。为实现上述目的,本发明采取以下设计方案本发明的一种通过液体深层发酵制备冬虫夏草保健品的方法,包括如下步骤A、将冬虫夏草菌接入培养液中,并在18 28°C的温度下以200 300次/分钟的震荡频率在摇床上震荡培养72 96小时,获得菌种液;B、将步骤A中得到的菌种液接入含重量份8 12%大麦芽、重量份3 6%大豆的液体培养基中,接种量为5 10%,并在23 27°C的温度下通气培养48 72小时,经过生物发酵,获得发酵的冬虫夏草菌丝体以及冬虫夏草菌发酵液;C、将步骤B中得到的冬虫夏草菌丝体进行细胞组织破碎后,用水提取,浸提比为0.8 1:2 5,浸提温度为90 95°C,浸提时间为2 3小吋,从而获得冬虫夏草菌丝体提取液;D、将步骤B中得到的冬虫夏草菌发酵液以及步骤C中得到的冬虫夏草菌丝体提取液相互混合后,将所得的混合液浓缩4 7倍,并使其折光糖度达到10 12%,从而得到冬虫夏草保健品。 优选地,在所述步骤D中,利用反滲透膜浓缩方法或者利用真空浓缩方法对所述混合液进行浓缩处理。更优选地,所述反渗透膜浓缩方法的膜设备操作压カ位设定在40kg/cm2以下,并于室温下操作。优选地,在所述步骤B中,发酵终止的指标为pH值达到4. 0 5. 5,折光糖度达到2. 8 3. 8%,菌丝体得率干重达到0. 65 0. 85%。更优选地,在所述步骤D中,冬虫夏草菌发酵液与冬虫夏草菌丝体提取液相互混合后的PH值为6 7,折光糖度为2 6%。优选地,所述步骤B中得到的冬虫夏草菌发酵液中,含有0. I 5mg/100g腺苷以及10 100mg/100g虫草多糖。优选地,所述步骤C中得到的冬虫夏草菌丝体提取液中,含有0. 5 10mg/100g腺 苷以及10 200mg/100g虫草多糖。本发明的另一目的在于提供一种通过液体深层发酵制备的冬虫夏草保健品,所述冬虫夏草保健品是由如下方法制备而成A、将冬虫夏草菌接入培养液中,并在18 28°C的温度下以200 300次/分钟的震荡频率在摇床上震荡培养72 96小时,获得菌种液;B、将步骤A中得到的菌种液接入含重量份8 12%大麦芽、重量份3 6%大豆的液体培养基中,接种量为5 10%,并在23 27°C的温度下通气培养48 72小时,经过生物发酵,获得发酵的冬虫夏草菌丝体以及冬虫夏草菌发酵液;C、将步骤B中得到的冬虫夏草菌丝体进行细胞组织破碎后,用水提取,浸提比为0.8 1:2 5,浸提温度为90 95°C,浸提时间为2 3小吋,从而获得冬虫夏草菌丝体提取液;D、将步骤B中得到的冬虫夏草菌发酵液以及步骤C中得到的冬虫夏草菌丝体提取液相互混合后,将所得的混合液浓缩4 7倍,并使其折光糖度达到10 12%,从而得到冬虫夏草保健品。优选地,在所述步骤D中,利用反滲透膜浓缩方法或者利用真空浓缩方法对所述混合液进行浓缩处理。优选地,在所述步骤B中,发酵终止的指标为pH值达到4. 0 5. 5,折光糖度达到2. 8 3. 8%,菌丝体得率干重达到0. 65 0. 85%。本发明的优点是本发明采用菌种原产地(青藏高原)的冬虫夏草菌进行分离、纯化和培育,采用エ业化液体深层发酵技术,使得冬虫夏草菌种能够在液体培养基中进行大量的繁殖,并且,所得的代谢产物以及菌丝体中均含有与原冬虫夏草菌效用相同的有效成分,此外,本发明还使得冬虫夏草菌的子实体能够在エ业化条件进行生产和培育,エ艺简单、成本可控,从而能够显著地降低生产成本,使得普通消费者也能使用上名贵的保健产品。2.5小吋,从而获得冬虫夏草菌丝体提取液;D、将步骤B中得到的冬虫夏草菌发酵液以及步骤C中得到的冬虫夏草菌丝体提取液相互混合后,将所得的混合液浓缩6倍,并使其折光糖度达到11%,从而得到冬虫夏草保健品。实施例4 本实施例提供一种通过液体深层发酵制备的冬虫夏草保健品,所述冬虫夏草保健品是由如下方法制备而成A、将选用食、药用冬虫夏草菌接入培养液中,并在18 28°C的温度(本实施例优选为20°C )下以200 300次/分钟(本实施例优选为260次/分钟)的震荡频率在摇床上震荡培养72 96小时(本实施例优选为82小吋),获得菌种液;B、将步骤A中得到的菌种液接入含重量份8 12% (本实施例优选为11%)大麦芽、重量份3 6%(本实施例优选为5%)大豆的液体培养基中,接种量为5 10% (本实施例优选为8%),并在23 27°C (本实施例优选为26°C)的温度下通气培养48 72小时(本实施例优选为56小时,经过生物发酵,获得发酵的冬虫夏草菌丝体以及冬虫夏草菌发酵液;C、将步骤B中得到的冬虫夏草菌丝体进行细胞组织破碎后,用水提取,浸提比为0. 8 1:2 5 (本实施例优选为1:3),浸提温度为90 95°C (本实施例优选为92°C),浸提时间为2. 5小时,从而获得冬虫夏草菌丝体提取液;D、将步骤B中得到的冬虫夏草菌发酵液以及步骤C中得到的冬虫夏草菌丝体提取液相互混合后,将所得的混合液浓缩4 7倍,并使其折光糖度达到10 12%,从而得到冬虫夏草保健品。其中,在步骤D中所采用的浓缩方法可以为反渗透膜浓缩方法或者真空浓缩方法,优选地,在本实施例中,采用反滲透膜浓缩方法对所述混合液进行浓缩处理。并且,进ー步,在本实施例采用反滲透膜浓缩方法时,反滲透膜浓缩方法的膜设备操作压カ位设定在40kg/cm2以下,并于室温下操作,由此获得的冬虫夏草保健品,其效用与直接服用冬虫夏草相当。优选地,在本实施例所述的步骤B中,发酵终止的指标为pH值达到4. 0 5. 5,折光糖度达到2. 8 3. 8%,同时菌丝体得率干重达到0. 65 0. 85%,上述三种指标(pH值、折光糖度、菌丝体得率)同时达到各自相应的指标,即可终止发酵。另外,在本实施例所述的步骤D中,冬虫夏草菌发酵液与冬虫夏草菌丝体提取液相互混合后的pH值为6 7,折光糖度为2 6%。优选地,所述步骤B中得到的冬虫夏草菌发酵液中,含有0. I 5mg/100g腺苷以及10 100mg/100g虫草多糖。优选地,所述步骤C中得到的冬虫夏草菌丝体提取液中,含有0. 5 10mg/100g腺苷以及10 200mg/100g虫草多糖。本发明ー种通过液体深层发酵制备的冬虫夏草保健品的其他实施例与上述实施例1、2和3相同或相近,在此不再赘述。对于本领域技术人员而言,不难从上述实施例1、2和3中获得相关的技术启示,并用以制备或生产冬虫夏草保健品。
显而易见,本领域的普通技术人员,可以用本发明的一种通过液体深层发酵制备的冬虫夏草保健品及其制备方法,形成各种类型的保健品及其制备方法。上述实施例仅供说明本发明之用,而并非是对本发明的限制,有关技术领域的普通技术人员,在不脱离本发明范围的情况下,还可以作出各种变化和变型,因此所有等同的技术方案也应属于本发明的范畴,本发明的专利保护范围应由各权利要求限定。
本发明涉及通过液体深层发酵制备的冬虫夏草保健品及其制备方法。其中制备方法包括A、将冬虫夏草菌接入培养液中,并在摇床上震荡培养,获得菌种液;B、将步骤A中得到的菌种液接入含大麦芽、大豆的液体培养基中,通气培养后,获得发酵的冬虫夏草菌丝体以及冬虫夏草菌发酵液;C、将步骤B中得到的冬虫夏草菌丝体进行细胞组织破碎后,用水提取,从而获得冬虫夏草菌丝体提取液;D、将步骤B中得到的冬虫夏草菌发酵液以及步骤C中得到的冬虫夏草菌丝体提取液相互混合后,将所得的混合液浓缩,从而得到冬虫夏草保健品。本发明采用工业化液体深层发酵技术,使得冬虫夏草菌种能够在液体培养基中进行工业化的大量繁殖,因此,工艺简单、成本较低。
通过液体深层发酵制备的冬虫夏草保健品及其制备方法
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