专利名称：从植物肥荚红豆中提取的活性成分及其应用的制作方法金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)隶属于葡萄球菌属(Staphylococcus)，是人类的一种重要病原菌，会引起多种严重感染。金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常 见的病原菌，会引起局部化脓感染，也会引起肺炎、甚至败血症、脓毒症的全身感染。 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，因而，食品受其污染的机会很多。近年来，由该 菌产生的肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的比例一直在上升，因此不断 开发抑制金黄色葡萄球菌的新抗生素受到重视。肥荚红豆(Ormosiafordiana)为豆科植物，又名鸡冠果、青竹蛇、鸡胆豆。具有 清热解毒，消肿止痛的功效，主治急性热病，急性肝炎，风火牙痛，跌打肿痛等，目前 未有该植物对金黄色葡萄球菌(S.aureus)有抑制活性的报道。
本发明的目的是从植物肥荚红豆代谢产物中，筛选出对人体病原细菌金黄色葡 萄球菌(S.aureus)具有强抑制作用的活性成分，作为制备医用抗生素的应用。本发明是这样实现的1活性成分的制备a.将肥荚红豆的枝或叶用水洗干净后放入烘箱，在60°C温度下烘烤12小时；b.将烘干后的肥荚红豆的枝或叶切碎，放入三角瓶内，用100%甲醇浸泡，在 40°C的水浴锅上提取，第一次浸泡提取的时间为2小时，第二次和第三次的时间分别为4 和8小时；c.将三次浸提的提取液合并后，在60°C温度下浓缩后得浸膏；d.将浸膏用甲醇溶解，定容至lOmg/ml，置于冰箱中4°C保存备用。2、制备试验用的病原细菌金黄色葡萄球菌(S.aureus)将金黄色葡萄球菌接种于LB液体培养基(牛肉 膏3克，蛋白胨10克，氯化钠5克，自来水1000ml，pH 7.0-7.2)中，于37°C下培 养24小时，冻于4°C冰箱中备用。做活性时将LB固体培养基(牛肉膏3克，蛋白胨 10克，氯化钠5克，琼脂18克，自来水1000ml，pH 7.0-7.2)倒入9cm的平板中， 待培养基凝固后，取200 μ L金黄色葡萄球菌菌液用涂布棒涂布均勻备用。3、试验方法滤纸片扩散法在无菌操作台上用微量注射器将样品注入纸片(做三个剂量， lmg/disc，0.5mg/disc，O.lmg/disc)，用电吹风将纸片吹干待溶剂挥发后，置于涂布好病 原菌的LB平板上，37°C下培养24小时后，观察抑菌结果，测量抑菌圈的大小(含纸片的直径0.6cm)。同时在纸片上加入提取过程中使用过的溶剂甲醇作为对照，同时还做空白 纸片对照。整个实验重复3次，取3次实验结果的平均值。将试验获得的活性浸膏在100°C沸水中加热30分钟后，用甲醇溶解制备成浓度 为lOmg/ml的活性成分，用同样的方法做抑菌试验。本发明提取的活性成分对人体病原菌金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用，能 作为制备抑制人体病原细菌金黄色葡萄球菌制剂的应用，能开发为新的医用抗生素。本发明涉及一种从植物肥荚红豆中提取的活性成分及其应用，属生物医药技术领域。从植物肥荚红豆中提取的活性成分经如下步骤得到a.将肥荚红豆的枝或叶用水洗干净后放入烘箱，在60℃温度下烘烤12小时；b.将烘干后的肥荚红豆的枝或叶切碎，放入三角瓶内，用100％的甲醇浸泡，在40℃的水浴锅上提取，第一次浸泡提取的时间为2小时，第二次和第三次的时间分别为4和8小时；c.将三次浸提的提取液合并后，在60℃温度下浓缩后得浸膏；d.将浸膏用甲醇溶解，定容至10mg/ml，置于冰箱中4℃保存备用。本发明提取的活性成分对人体病原菌金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用，能作为制备抑制人体病原细菌金黄色葡萄球菌制剂的应用，能开发为新的医用抗生素。