专利名称：抗柯萨奇b病毒中药制剂的有效成分制备方法柯萨奇病毒是一种在自然界比较常见的病毒，可经呼吸道和消化道感染人体， 常导致呼吸道感染、肠道感染、无菌性脑膜炎、心肌炎、心包炎等疾病。同时，宫内柯 萨奇病毒感染也是诱发先天性心脏病的高危因素之一。本世纪国内外数次柯萨奇病毒大 流行中小儿和青壮年易感，尤其是婴幼儿，且多累及心脏。西医对病毒性心肌炎无特异 性治疗，一般大剂量高浓度维生素C缓慢静脉推注，促进心肌病变恢复。多年来常用的 如极化液、能量合剂及ATP等促进缺血心肌细胞的能量合成，稳定受损心肌细胞膜，改 善心肌泵功能，减少脂质过氧化物生成，改善心肌缺血，减轻心肌所致的组织损伤。但 均因难进入心肌细胞，不能充分发挥保护心肌的作用。尽管多种单味中药具有抗柯萨奇 病毒B的作用，但是现供临床使用的均为中药原药材，没有固定处方制剂，导致服用剂 量较大，药材浪费。中国发明专利ZL200310101631.4、名称“抗柯萨奇B病毒性心 肌炎胶囊及其制备方法”解决了上述问题，其中药组分重量百分比如下西洋参15— 30%、莱菔子5 —15%、王不留行4一 10%、五味子4一 15%、麦冬5 — 20%、丹皮10— 25%、黄芪30—40%。但是背景技术存在如下问题中药服用剂量大，贮存不便，储存 时间短。
本发明目的是提供一种抗柯萨奇B病毒中药制剂的有效成分制备方法，既保留 复方中各药材成分的综合作用，有利于发挥中药的多效性，又去除了组织物质和部分无 效成分，延长了储存期、提高了纯度、减小了服用量，质量控制的再现性提高，解决背 景技术存在的上述问题。本发明目的是通过下面的技术方案实现的一种抗柯萨奇B病毒中药制剂的有效成分制备方法，包括如下步骤 ①原料选择，选择中药西洋参、五味子、麦冬、黄芪、丹皮、莱菔子、王不留行， 洗净，粉碎成中药粗粉，可全部通过20目的二号药筛，但能通过65目的四号药筛的量 不超过40%;②按重量百分比配制中药粗粉，各中药组分的重量百分比如下西洋参 30-40%,五味子 4-15%、麦冬 5-20%、黄芪 30-40%、丹皮 10-25%、莱菔子 5-15%、 王不留行4-10% ；③中药粗粉加入6-10倍量的60-95%乙醇浸泡0.5_lh后，回流2_4 次，每次l_2h，6-10层纱布过滤，合并提取液浓缩成膏，干燥得到粉末，即为抗柯萨奇 B病毒中药制剂的有效成分；④上述粉末中各组分重量百分比为总多糖20-30%，总皂 苷30-45%,总黄酮15-25%,总木脂素5-10%,其他5_10%。本发明的优选方案中药粗粉加入8倍量的75-85%乙醇浸泡0.5h后，回流3次，每次1.5h，离心，8层纱布过滤，合并提取液浓缩成膏，干燥得到粉末，即为抗柯 萨奇B病毒中药制剂的有效成分。所得粉末与适宜的辅料制备成临床所需剂型使用。所说的二号药筛、四号药筛均为标准的药用筛，所说的倍量为体积比。本发明将西洋参、五味子、麦冬、黄芪、丹皮、莱菔子、王不留行配伍，可制 备成抗柯萨奇B病毒的各种剂型，使药物有效成分利用率明显提高。西洋参性寒，味甘微苦，人肺、脾经。具有补气养阴、清火除烦、养为生津之 功效。五味子味酸、甘，性温，归肺，心、肾经。具有收敛固涩，益气生津，补肾宁 心之功效，麦冬味甘微苦，性微寒，归心、肺、胃经。具有养阴生津，润肺清心之功效。黄芪味甘，性微温，归肺、脾、肝、肾经。有益气固表、敛汗固脱、托疮生 肌、利水消肿之功效。丹皮味苦、辛，性微寒，归心、肝、肾经。具有清热凉血；活血散瘀之功效。莱菔子味辛、甘，性平。归肺、脾、胃经。具有消食除胀，降气化痰之功效。王不留行味苦，性平。归肝，胃经。有活血通经，下乳消痈，利尿通淋之功 效。全方可降低心肌对病毒的敏感性，提高机体免疫力和抗病毒能力有强心、降低 氧耗、纠正心律失常等作用。本发明的有益效果是既保留复方中各药材成分的综合作用，有利于发挥中药 的多效性，又去除了组织物质和部分无效成分，延长了储存期、提高了纯度、减小了服 用量，质量控制的再现性提高，有利于工业化、标准化生产；本发明具有疗效明确、高 效低毒、服用方便等特点，抗柯萨奇B病毒效果显著。1、方法1.1实验动物健康清洁级雄性SD大鼠60只，体重240-260&购于北京实验动物有限公司动物许可证号SCXK (京)20090330。1.2实验方法大鼠随机分为4组(每组各15只)(1)正常对照组生理盐水 (NS) 30ml/kg灌胃，1日1次，共7d,于第7d灌胃2h后皮下注射NS30ml/kg ； (2)缺血模 型组:NS灌胃同正常组，于第7d灌胃2h后异丙肾上腺素皮下注射30ml/kg; (3)抗柯萨奇 B病毒中药制剂组抗柯萨奇B病毒中药制剂20mg/ ml溶于生理盐水中，，以4ml/kg连 续灌胃7d。于第7d给药2h后皮下注射异丙肾上腺素30ml/kg，2h后再灌药1次。(4) 阳性对照组硝苯地平5mg/ ml溶于生理盐水中，，以4ml/kg连续灌胃7d。于第7d给 药2h后皮下注射异丙肾上腺素30ml/kg，2h后再灌药1次。各组在给药前均描记正常心 电图，给予异丙肾上腺素或生理盐水6h小时后，重复测定心电图，然后经股动脉采血，分 离血清，4°C保存，待测CPK、LDH> SOD、MDA活性。1.3检测指标
1.3.1 心电图测定各组动物记录正常II导联(纸速50mm/s,定标ImV=IOmm),测 定皮下注射异丙肾上腺素后,ST段异常偏移总毫伏数(ZST)、ST段偏移平均值,作为判 断心肌缺血程度和评价药物疗效的指标。1.3.2 CPK、LDH> SOD、MDA的测定按试剂盒提供的方法检测。1.4统计分析所有数据以均数士标准差( 士 S)表
示,各组数据使用单因素方差分析,用t检验进行组间均数的比较。经SPSS软件处理, P<0.05表示差异有统计学意义。2、结果
2.1对大鼠心电图ST段偏移的影响与正常对照组比较,模型对照组ST段显著性 偏移(P<0.01)；与模型对照组比较，抗柯萨奇B病毒中药制剂组、硝苯地平组，均可显著 降低ISO所致的ST段的异常偏移(P<0.05)。见表1。表1抗柯萨奇B病毒中药制剂对急性心肌缺血大鼠II导联ST段偏移的影响 (η=15, χ 士s)


本发明涉及一种复方中药制剂的有效成分制备方法，特别是抗柯萨奇B病毒复方中药制剂的有效成分制备方法。技术方案是中药粗粉加入6-10倍量的60-95%乙醇浸泡0.5-1h后，回流2-4次，每次1-2h，6-10层纱布过滤，合并提取液浓缩成膏，干燥得到粉末，即为抗柯萨奇B病毒中药制剂的有效成分；上述粉末中各组分重量百分比为总多糖20-30%，总皂苷30-45%，总黄酮15-25%，总木脂素5-10%，其他5-10%。本发明的有益效果是既保留复方中各药材成分的综合作用，有利于发挥中药的多效性，又去除了组织物质和部分无效成分，延长了储存期、提高了纯度、减小了服用量，质量控制的再现性提高，有利于工业化、标准化生产；本发明具有疗效明确、高效低毒、服用方便等特点，抗柯萨奇B病毒效果显著。