专利名称：增殖性疾病状态的治疗或预防的制作方法增殖性疾病状态的治疗或预防MM本发明涉及用于治疗或预防癌症和例如特征在于表达细胞色素P450 IBl (CYPlBl)及其等位基因变体的细胞的其它增殖性疾病状态的新化合物。本发明还提供了用于药物治疗例如用于预防癌症或其它增殖性疾病状态的治疗的包含一种或多种这类化合物的药物组合物以及用于治疗人类或非人类动物患者中的癌症或其它疾病状态的方法。本发明还提供了用于识别在预防癌症和例如特征在于表达CYPlBl及其等位基因变体的细胞的其它增殖性疾病状态的治疗中使用的新化合物的方法。本发明还提供了用于测定本发明化合物对治疗癌症的功效的方法。背景如Sutter 等人(J Biol. Chem.，5 月 6 日；269 (18) 13092-9，1994)描述的，CYPlBl 是还包括CYPlAl和CYP1A2的二恶英可诱导的CYPl基因家族中的成员。CYPlBl是能够代谢和激活包括留体药物、异型生物质、药物和/或前药在内的多种物质的血红素硫醇盐单加氧酶。CYPlBl蛋白质在大量不同组织学类型的原发性和转移性人类癌症中高频率表达并在正常组织中不表达或以微量水平表达(参见例如，Mci^adyen MC, Melvin WT和Murray Gl, “Cytochrome P450 Enzymes :Novel Options for Cancer Therapeutics (细胞色素 P450 酶癌症治疗的新选择)，，，Mol Cancer Ther. , 3 (3) :363-71,2004 ；McFadyen MC 和 Murray Gl, "Cytochrome P450 1 Bl :a Novel Anticancer Therapeutic Target ( ^1^^ P450 1 Bl 新型抗癌治疗靶点)”，Future Oncol. ,1 (2) :259-63,2005 ；Sissung TM, Price DK, Sparreboom A 禾口 Figg WD, "Pharmacogenetics and Regulation of Human Cytochrome P450 IBl implications in Hormone-Mediated Tumor Metabolism and a Novel Target for Therapeutic Intervention (人细胞色素P450 IBl的药物遗传学和调节激素介导的肿瘤代谢和治疗干预的新靶点的影响)”，MoI. Cancer Res. ,4(3) : 135-50，2006)。更具体地，已表明CYPlBl在膀胱癌、脑癌、乳腺癌、结肠癌、头颈癌、肾癌、肺癌、 肝癌、卵巢癌、前列腺癌和皮肤癌中进行表达，而不在相应的正常组织中进行表达。例如， Barnett 等人在 Clin. Cancer Res.，13 (12) :3559-67,2007 中报道了 CYPlBl 在包括恶性胶质瘤、间变性星形胶质瘤、少突胶质细胞瘤和间变性少突胶质细胞瘤在内的神经胶质瘤中过度表达，但并非不影响脑组织；Carne 11等人在Int. J. Radial Oncol. Biol. Phys.， 58(2) :500-9,2004中报道了 CYPlBl在前列腺癌中过度表达，而不在匹配的正常前列腺组织中过度表达；Carnell等人，2004(同上)还证实CYPlBl在(η = 22，100%)的膀胱癌中表达；Downie 等人在 Clin. Cancer Res. ,11(20) :7369_75，2005 且 McFadyen 等人在 Br. J. Cancer. ,85(2) =242-6,2001中报道了 CYPlBl在原发性和转移性卵巢癌而不在正常的卵巢组织中增加的表达；且Gibson等人在Mol. Cancer Ther. ,2(6) =527-34,2003以及 Kumarakulasingham 等人在 Clin. Cancer Res.，11 (10) :3758-65,2005 中报道了与匹配的正常组织相比，CYPlBl在结肠癌中过度表达。若干研究已证实与匹配的正常组织相比，CYPlBl在乳腺癌中过度表达(参见例如Murray Gl, Taylor MC, McFadyen MC, McKay JA, Greenlee WF, Burke MD 禾口 MelvinWT, "Tumor-Specific Expression of Cytochrome P450 CYPlBl (细胞色素 P450 CYPlBl 的肿瘤特异性表达)”，Cancer Res. ,57(14) :3026-31,1997 ；Haas S, Pierl C, Harth V, Pesch B, Rabstein S, Bruning Τ, Ko Y, Hamann U, Justenhoven C, Brauch H 禾口 Fischer HP,"Expression of Xenobiotic and Steroid Hormone Metabolizing Enzymes in Human Breast Carcinomas (异型生物质和甾体药物激素代谢酶在人类乳腺癌中的表达)”，Int. J.Cancer,119(8) :1785-91,2006 ；McKay JA, Murray Gl，Ah-See AK,Greenlee WF, Marcus CB, Burke MD 禾口 Melvin WT 的"Differential Expression of CYPl Al and CYPl Bl in Human Breast Cancer (CYP1A1 和 CYPlBl 在人类乳腺癌中的不同表达)”，Biochem. Soc. Trans. ,24(2) :327S，1996)。Everett 等人在 J. Clin. Oncology, 25 :18S，2007 中报道了 CYPlBl 在恶性黑素瘤中过度表达并散布疾病而不在正常的皮肤中过度表达。Chang等人在Toxicol, sci，71(1) 11-9,2003中报道在正常的肝中不存在CYPlBl蛋白质但Everett等人，2007 (同上)证实 CYPlBl在转移至肝的黑素瘤阶段IV中而不在邻近的正常肝组织中过度表达。Greer 等人在 Proc. Am. Assoc. Cancer Res. ,45 :3701，2004 中报道 CYPlBl 在头和颈鳞状细胞癌的恶性发展过程中而不在正常的上皮细胞中过度表达。McFadyen 等人在 Br. J. Cancer, 91 (5) 966-71，2004 中检测到 CYPlBl 在肾癌中而不在相应的正常组织中。Murray等人，2004(同上)使用免疫组织化学以证实与正常的肺组织相比CYPlBl 在肺癌细胞中的过度表达。Su等人在Anti-Cnacer Res.，2，509-15，2009中使用免疫组织化学以证实与疾病的早期阶段相比CYPlBl在晚期阶段IV非小细胞肺癌中的过度表达。从上述引用的大量公开可以看出，CYPlBl表达是一系列不同的癌症和其它增殖性疾病状态的特征，且CYPlBl表达可用于定义这类癌症和其它疾病状态。由于正常的(非癌症的)细胞不表达显著水平的CYP1B1，因此也可以合理地预测在表达CYPlBl的细胞中表现出细胞毒性但在正常细胞中基本上是非细胞毒素的化合物能用作特征在于CYPlBl表达的癌症的靶向抗癌药物。“靶向”是指能够全身递送这类化合物并且其仅在表达CYPlBl的癌症细胞的存在下被激活，对身体的其余部分基本上保持无毒。此外，已知大量的细胞色素P450酶能代谢和解毒多种抗癌药物。Mci^dyen等人， η (Biochem Pharmacol. 2001，Jul 15 ；62 (2) :207-12)证实与非 CYPlBl 表达的细胞相比，表达CYPlBl的细胞中的多西他赛的敏感性显著降低。该发现表明细胞中CYPlBl的存在可降低其对一些细胞毒性药物的敏感性。因此，CYPlBl-激活的前药可用于耐药性由CYPlBl介导的癌症的治疗。此外，CYPIB1基因在癌症和改变编码蛋白质的表达和/或活性的已识别的CYPIB1 基因中包含的若干单核苷酸多态性中是高度多态的。如由Sissung等人在Mol Cancer Ther. ,7(1) 19-26，2008及其中引用的参考文献中描述的，在这些之中，CYP1B1*3 (4326C > G ；L432V)等位基因的特征在于CYPlBl对若干底物的增加的表达和酶动力二者。该发现表明不仅CYPlBl而且酶的等位基因变体也可有助于前药激活和癌症靶向。研究了作为降低药物不期望的毒性或一些其它负面性质而不损失功效的手段的前药。前药是化学修饰的药物以使其无活性但在给药之后，在体内代谢或另外转化为药物的活性形式。如由Mci^adyen等人的Mol Cancer Ther.，3 (3)，363-71，2004评论的，与正常组织相比，原发性肿瘤和转移性疾病中CYPlBl的过度表达提供了用于靶向癌症治疗的 CYPlBl-激活前药开发的巨大机会。实际上，如由Patterson LH和Murray Gl在Curr Pharm Des.，8 (15) =1335-47,2002中评论的，用于靶向癌症治疗的CYPlBl-激活前药的发现和开发可能提供比临床使用的现有非靶向细胞色素P450-激活前药显著的药理学优点，所述细胞色素P450-激活前药例如由正常组织中表达的细胞色素P450激活的前药烷基化剂环磷酰胺、异环磷酰胺、达卡巴嗪、甲基苄胼。人类细胞色素P450家族包含57个活性同工酶，其在正常的代谢中发挥作用，影响药物代谢动力学并通过药物-药物相互作用而在患者中产生负面效果。如在Ortiz de Montellano, PR(编辑)Cytochrome P450 !structure, mechanism, and biochemistry (细胞色素 P450 结构、机理和生物化学)，Kluwer Academic/Plenum Publishers, New York, 2005中描述的，在人类中细胞色素P450同工酶代谢大约三分之二的已知药物，其80%归因于五种同工酶，即 CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6 和 CYP3A4。如由 Ingelman-Sundberg, M.，Toxicol. Appl. Pharmacol.，207，52—6，2005 评论的，在人类基因组计划中首创发现的基因是CYP2R1、CYP2W1、CYP2S1、CYP2S1、CYP2U1， 但这些基因的功能、多态性和调节仍有待充分阐述。除CYPlBl之外，大量的这些细胞色素P450氧化还原酶为肝外的并在癌症中过度表达。如由Downie等人的Clin. Cancer Res. ,11 (20) :7369-75, 2005描述的，如通过免疫组织化学和光学显微镜学测定的，包括 CYPlBl、CYP2A/2B、CYP2F1、CYP2R1、CYP2U1、CYP3A5、CYP3A7、CYP4Z1、CYP26A1 和 CYP 51在内的若干细胞色素P450以比在正常的卵巢中显著高的强度水平存在。此外，如由 Kumarakulasingham 等人在 Clin. Cancer Res.，11 (10) :3758-65,2005 中描述的，在原发性结肠直肠癌中使用相似检测方法，包括CYP1B1、CYP2S1、CYP2U1、CYP3A5和CYP51在内的若干细胞色素P450与正常结肠相比频繁地过度表达。在相同的研究中，包括CYP1B1、 CYP2A/2B、CYP2F1、CYP4V2和CYP39的若干细胞色素P450与其在原发性肿瘤中的存在相关。 根据Elder等人的Eur. J. Cancer, 45 (4) =705-12,还证实CYP2W1在结肠直肠癌中过度表达。如分另U 由 Reiger 等人的 Cancer Res.，64 (7) :2357-64, 2004 和 Bankovic 等人的 Lung Cancer, 67 (2) 151-9，2010描述的，在乳腺癌中过度表达的CYP4Z1是与非小细胞肺癌的发生和发展相关的基因。如由 Strak K 禾口 Guengerich FP 在 Drug Metab. Rev. ,39(2-3) :627-37,2007 ψ 评论的，所述领域的主要挑战是说明所谓的“孤儿”状态的人类细胞色素Ρ450与未知的特异性底物的功能。如由 Chang TK 和 Waxman DJ 在 Method Mol. Biol.，320，85-90，2006 中描述的，大量基质被认为是用于CYP1B1，其少数通过酶特异性代谢，例如当由包括CYP1A1、 CYP1A2和CYPlBl在内的CYPl家族的所有成员激活时，7-乙氧基试卤灵经历氧化脱乙基作用。大量荧光和发光探针底物可用于评价具有高敏感性的细胞色素P450活性但它们表现出显著的特异性且因此通过CYP1、CYP2和CYP3家族中的一系列细胞色素P450酶代谢。 例如，Cali 等人的 Expert Opin. Drug Toxicol. ,2(4) :62_45，2006 描述了与萤火虫荧光素酶发光结合的发光基质在称为P450-Glo的技术中的用途。如Waxman DJ和Change TKH 在"The use of 7-ethoxycoumarin to minitor multiple enzymes in the human CYP1, CYP2，CYP3 families (使用7-乙氧基香豆素以监控人类CYP1、CYP2、CYP3家族中的多种酶)，，，Method in Molecular Biology，vol. 320，细胞色素 P450 协议，第二版，Phillips IR和Si印hard编辑，EA，2006中描述的，另一实例是经历细胞色素P450-催化的7-乙氧基香豆素邻位脱乙基以释放高度荧光的阴离子的7-乙氧基香豆素。Everett 等人，Biochem. Pharmacol.，63，1拟9-39，2OO2 描述了缺氧症中通过细胞色素P450还原酶(不与细胞色素P450混合)的模型吲哚醌前药的还原分裂来释放7-羟基-4-甲基香豆素阴离子。所述模型前药在预选的发射波长下没有荧光并能通过使用动力学荧光分光光度法监控香豆素阴离子的产生(λ ex = 380nm/ Aem = 450nm)来精确检测还原分裂。已经描述有限量的化合物(通常< 100)和细胞色素P450同工酶之间的相互作用但来自这些研究的结果因为技术、检验条件和数据分析方法的差异而难于比较，如由 Rendic,S.的"Summary of information on human CYP enzymes human P450 metabolism data (人类 CYP 酶信息的总结人 P450 代谢数据)”，Drug Metab. Rev.，34，83-448，2002 描述的。许多计算策略已经发展到生成预测性的细胞色素P450同工酶底物活性模型，但这些受缺乏细胞色素P450同工酶活性的单一大量、多样的数据组的限制，如由Veith等人， Nature Biotechnology，27，1050-55，2009描述的。该作者描述了使用具有生物发光酶底物抑制检验的定量高通量筛选(HTQ建造细胞色素P450生物活性数据库以对在主要为肝脏并负责所谓的药物1期代谢的正常组织中表达的五种细胞色素P450同工酶(CYP1A2、2C9、 2C19、2D6和3A4)筛选17’ 143种化合物。结果表明，所述数据库应帮助构建和测试用于细胞色素P450活性的新预测的模型以帮助早期的药物发现工作。Jensen等人，J. Med. Chem.，50，501-11，2007描述了基于对扩展连接性指纹的 Tanimoto相似性检索，基于新的高斯核加权k-最邻近(k_NN)运算法则的用于计算机(in silico)预测CYP2D6和CYP3A4抑制的方法。数据组包括测试用于人类肝微粒体中CYP2D6 和CYP3A4抑制的1153和1182种药物候选者的模拟。对于CYP2D6，将82%的分类测试化合物预测为正确分类且对于CYP3A4，将88%的分类测试化合物正确分类。理论上，能使用细胞色素P450 HTS以建立大量肿瘤和正常组织细胞色素P450的生物活性数据库，然后开发底物预测模型作为用于设计和合成选择性CYPlBl-激活的前药的基础，同时筛选出用于与通过正常组织细胞色素P450的1期代谢有关的药理学责任。然而，从现有技术来看实践的减少不明显且必须对当由肿瘤-表达的细胞色素P450激活时转化为活性药物的前药结构和机制合理说明。前药设计中所谓的“触发子-连接子-效应子”化学的使用需要激活触发子以开始连接子的断裂从而释放效应子(通常为活性药物)，其生物活性掩盖在前药形式中。靶向诸如CYPlBl的肿瘤-表达的细胞色素P450的选择性前药的模块设计需要(1)选择性触发子部分的识别，( 触发子激活(通常通过芳香羟基化)之后有效断裂的生物稳定的连接子的使用，以及C3)不干扰触发过程的效率的合适的效应子或药物。CYPlBl mRNA在所有正常的肝外人类组织中组成性表达，尽管蛋白质通常为不可检测的。相比之下，CYPlBl蛋白质在肿瘤中以高水平表达。应当理解，对于源自人类的大量已建立或永生化的肿瘤细胞系(例如MCF-7乳腺癌细胞)，其经历显著的体外通路但不组成性表达活性CYPlBl蛋白质。尽管CYPlBl在MCF-7乳腺肿瘤细胞中不组成性表达，通过使用诸如二恶英TCDD的芳基烃类激动剂的治疗能以mRNA和蛋白质两种水平诱导CYPl酶表达。WO 99/40944描述了包含束缚于载体框架的药物部分的前药，所描述的前药好像由CYPlBl羟基化而被激活以释放药物部分。鍵我们意外地发现与在WO 99/40944中描述的那些不同，本文描述的化合物在某些细胞特别是表达细胞色素P450 1B1(下文为CYP1B1)的那些细胞中但不在正常的细胞中分解，这是化合物在羟基化时(例如由CYPlBl-表达的细胞产生)且特别通过癌细胞分解的结果。因此，根据第一方面，本发明提供了通式(I)化合物或其药物可接受的盐、酯、酰胺或溶剂化物本发明涉及用于治疗或预防癌症和例如特征在于表达细胞色素P450 1B1(CYP1B1)及其等位基因变体的细胞的其它增殖性疾病状态的新化合物。本发明还提供了用于药物治疗例如用于预防癌症或其它增殖性疾病状态的治疗的包含一种或多种这类化合物的药物组合物以及用于治疗人类或非人类动物患者中的癌症或其它疾病状态的方法。本发明还提供了用于识别在预防癌症和例如特征在于表达CYP1B1及其等位基因变体的细胞的其它增殖性疾病状态的治疗中使用的新化合物的方法。本发明还提供了用于测定本发明化合物对治疗癌症的功效的方法。