专利名称：治疗皮肤病的药物及其制备方法 昆明山海棠(triterygium hypoglaucum hutch，THH)是盛产于云南省的一种药用植物，资源丰富，价格便宜。许多医学专家对该药进行过深入研究，明确了THH具有抗炎、免疫调节、抗肿瘤、抗病毒作用，但也存在较多的副作用，如明显的消化道症状、肝肾毒性、生殖系统影响等。从20世纪60年代开始，昆医附一院老专家舒涟、舒尚义及王正文等老专家将此药进行过深入研究，发现THH对类风湿性关节炎、红斑狼疮、白塞氏病等有较好疗效，有效率达70％以上，其成果获云南省首届科学技术奖。昆医附一院皮肤科对昆明山海棠又进行了深入研究，将昆明山海棠用于临床，治疗多种与免疫有关的皮肤病，对光线性皮肤病及无菌性脓疱病疗效尤佳。1997“昆明山海棠对无菌性脓疱致炎因子水平影响的研究”获得云南省科技厅应用基础研究资助(97C031Q)，历经三年研究，总结了昆明山海棠治疗无菌性脓疱病的经验及阐明其作用机理，其成果于2002年获云南省科技进步三等奖。其结果表明THH治疗无菌性脓疱病有效率达96.8％，为世界难治性无菌性脓疱病提供了一种有效的治疗手段。虽然THH具有较好的抗炎、免疫调节作用，但有较强的胃肠道刺激反应，有一定的肝肾毒性，有月经减少、闭经及对人精子有致畸等副作用，影响它在临床上的广泛应用。
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种既对治疗皮肤疾病具有较好的疗效、又能降低昆明山海棠的毒性、增强其抗炎、免疫调节作用、从而有更好的临床使用价值的皮肤病治疗剂。本发明的另一目的是提供该皮肤病治疗剂的制备方法。本发明的解决方案是根据中医“主、辅、佐、使”理论及现代中药理论在THH的基础上，辅以黄芩、甘草等九味药组成复方制剂。可以治疗与免疫有关的诸多疾病，对治疗12种皮肤病具有较好的疗效，其中对光线性皮肤病及无菌性脓疱病疗效尤佳，有效率在前82％以上。研究结果表明复方昆明山海棠比昆明山海棠单剂毒性更低，有更大的安全性。其作用机理可以通过是抑制IFN-γ的分泌，从而下调ICAM-1的表达，抑制T淋巴细胞的活化和降低T淋巴细胞趋化及炎性因子的产生，减少局部单一核细胞的浸润而起到抗炎、免疫调节的作用。复方昆明山海棠比昆明山海棠单剂有更强的抗小鼠光变态反应作用。本发明的药物是由下列组分制成的(用量为重量份)昆明山海棠15～30 青蒿6～12 黄芩3～9 白藓皮4.5～9丹参9～15 元胡3～9 法夏3～9 菟丝子6～12 甘草1.5～9制备本发明药物的配方优选重量(份)配比范围是昆明山海棠12～25 青蒿8～10 黄芩5～7 白藓皮5.5～7丹参10～12 元胡5～7 法夏5～7 菟丝子8～10 甘草3.5～7将上述各组分制成本发明药物的生产方法是(1)将上述药原料按比例混合后粉碎至粗颗粒；(2)浸泡10～12小时；(3)多功能提取器中60℃、文火煎煮30分钟左右，提取二次；(4)得挥发油及过滤液，合并二次滤液；(5)将滤液浓缩；(6)加挥发油、防腐剂、矫味剂；(7)质量控制、分装、灭菌，即可得到治疗皮肤病的合剂。
本发明的药物还可制成颗粒剂或胶囊剂，其制备方法是(1)至(5)步骤与上述合剂相同；(6)浓缩后喷雾干燥，得浸膏粉；(7)加挥发油、蔗糖糊精，制粒，干燥；(8)整粒、总混，颗粒分装，包装，质量检查，得成品。
本发明药物的特点是以昆明山海棠为主药，辅以清热祛湿、消炎解毒、抗过敏的青蒿、黄芩、白藓皮增强抗炎、免疫调节作用，佐以镇静、止痛、抑制胃酸分泌、保护胃粘膜的元胡、法夏以减轻其胃肠道反应，佐以补肾益精的菟丝子降低其对生殖系统的毒副作用，以甘草为使药，益气和中，调合诸药组成了复方昆明山海棠合剂。
对THH从单剂到复方制剂、从临床到实验均做了系列研究，其结果表明本发明的药物(复方昆明山海棠)，以光线性皮肤病及无菌性脓疱病疗效尤佳，其作用优于昆明山海棠单剂，并有了成熟的合剂制备工艺，为今后开发复方昆明山海棠颗粒剂奠定了坚实的基础。
以下以临床观察来表明本发明药物对皮肤病的治疗效果本发明药物的临床观察本发明药物治疗10余种皮肤病的临床疗效评价用本发明药物(合剂)口服，每日一剂，10-14岁儿童服上述剂量的2/3，10岁以下儿童服上述剂量的1/2，持续治疗1-3个月。疗效见下表[例/(％)]病名 例数 痊愈 显效 有效无效 显效率 有效率多形性日光疹61 24(39.34)18(29.50) 9(14.75) 10(16.39) 68.85 83.61慢性光化性皮50922 10 9 62.00 82.00炎 (18.00) (44.00)(20.00) (18.00)角层下脓疱病22 2(9.09) 9(40.91) 8(36.36)3(13.64) 50.00 86.36疱疹样脓疱 14 3(21.34) 6(42.86) 3(21.42)2(14.29) 64.29 87.51掌跖脓疱病 32 12(37.50)14(43.75) 5(15.62) 1(3.31) 81.52 96.87湿疹 36 12(33.33)14(38.89) 8(22.22) 2(5.56) 72.22 94.44慢性荨麻疹 32 6(18.75) 12(37.50) 10(31.25)4(12.50) 56.25 87.50过敏性紫癜 35 10(28.57)15(42.86) 7(20.00) 3(8.57) 71.43 91.43色素性紫癜性皮 14 2 4 4 4 42.85 71.43(14.29) (28.57)(28.57) (28.57)银屑病 38 8(21.05)14(36.84) 8(21.05)8(21.05) 57.89 78.94本发明药物及昆明山海棠水提和醇提取物的毒性试验(1)水提THH的急毒试验先进行预试验，测得Dn(LD0)为45g/kg，Dm(LD100)为119g/kg，在此期间，测LD50，将上述小鼠随机分为6组，每组10只，分别为水提THH的5个剂量组47.52g/kg，59.40g/kg 74.25g/kg，92.81g/kg，116.02g/kg，组间距为0.8，一个生理盐水对照组。灌胃给药32min后开始有小鼠活动减少，嗜睡，乏力，反应迟钝，呼吸逐渐减弱；56min后出现唇、肢、尾发绀，呼吸困难；72min后开始有小鼠死亡，部分小鼠死亡前出现四肢抽搐。大多数小鼠在24h内死亡，最迟死亡时间不超过72h。肉眼观察尸解各脏器未见改变。用Bliss法测得半数致死量(LD50)为78.02g/kg，其95％的可信限为67.51～90.17g/kg，详见表1。对照组无一例死亡。
表1水提THH一次灌胃的急性毒性试验(LD50)(Bliss法)剂量 对数剂量动物数 死亡动物数死亡率机率单位 LD50及95％的可(g/kg) (X)(只) (只)(％)(Y) 信限(g/kg)47.52 1.676910 1 10％(0.1)0.869459.40 1.773810 2 20％(0.2)2.2728 78.0274.25 1.870710 5 50％(0.5)4.4598 (67.51～90.17)92.81 1.967610 6 60％(0.6)6.830116.022.064510 9 90％(0.9)8.6177(2)醇提THH的急毒试验同上，先进行预试验，测得Dn(LD0)为20.8g/kg，Dm(LD100)为58.4g/kg，在此期间，测LD50，将上述小鼠随机分为6组，每组10只，分别为醇提THH的5个剂量组灌胃给药，详见表2。对照组无一例死亡。
表2醇提THH一次灌胃的急毒(LD50)(Bliss法)剂量对数剂量 动物数 死亡动物数 死亡率 机率单位 LD50及95％的可(g/kg)(X) (只) (只) (％)(Y) 信限(g/kg)21.651.3355 10 1 10％(0.1)1.025727.061.4323 10 3 30％(0.3)2.4265 35.5733.831.5293 10 4 40％(0.4)4.4911 (30.5～41.46)42.291.6262 10 6 60％(0.6)6.706652.861.7231 10 9 90％(0.9)8.4402
(3)复方THH(本发明药物)的最大耐受量预试验，用复方THH最大浓度5.49g/ml，最大体积0.4ml/10g灌胃一次，观察一周，未见小鼠死亡，则改作最大耐受量试验。取上述小鼠40只，随机分为2组(1)复方THH组；(2)空白对照组。每组20只，试验前小鼠禁食6h，用复方THH最大浓度5.49gml，0.4ml/10g灌胃2次，间隔4h，空白对照组给等量的生理盐水(0.4ml/10g)。观察2周，记录小鼠表现、摄食量、粪便和死亡等，未死亡小鼠2周后进行尸检。按复方THH439.20g/kg(生药量)给药的20支小鼠，当日及以后见小鼠活动、行为无异常，摄食量、体重与空白对照组无明显差异，2周内无死亡及其它异常情况发生。第14天2组小鼠同时处死进行尸检，主要脏器(心、肺、肝、肾、脾、胃)经肉眼未见差异。因此，复方水提THH小鼠经口给药的最大耐受量为439.20g/kg(生药量)，其中含THH生药量86.97g/kg。相当于临床用量的217倍。
(4)无THH复方合剂的最大耐受量同样，测得无THH复方合剂经口给药的最大耐受量为380.95g/kg(生药量)。相当于临床用量的209倍。
以前的实验证明，THH的醇提取物LD50为35.9g/kg(生药量)，与醇提取物的LD50为35.57g/kg(生药量)结果相似，经实验得出THH水提取物的LD50为78.02g/kg(生药量)，95％的可信限为67.51g/kg～90.17g/kg，，与醇提取物相比(95％的可信限为30.52g/kg～41.46g/kg)，可信期间没有交叉，可见THH水提取物的急性毒性比醇提取物要小。而复方合剂(本发明药物)中未测出LD50，复方合剂最大耐受量为439.20g/kg(生药量)，其中含THH生药量86.97g/kg，大于THH水提取物的LD50，可见复方合剂的急性毒性要小于THH水提取物，更小于醇提取物，说明复方合剂具有更小的急性毒性，更大的安全性。
复方昆明山海棠(本发明药物)抗小鼠光变态反应的实验研究(1)实验分组将70只Balb/c纯系雌性小鼠随机分为①～⑦组四组药物实验组(①组～④组)①复方昆明山海棠合剂组昆明山海棠20g、黄芩、甘草等九味药共101g②昆明山海棠单剂组(水提取)昆明山海棠20g③无昆明山海棠复方合剂组即去除昆明山海棠的合剂(即黄芩、甘草等八味药共81g)
④昆明山海棠单剂组(醇提取)昆明山海棠浸膏20g以上药物中昆明山海棠单剂为临床常用剂量，各组相同体积内有同等的昆明山海棠剂量，其余各药为国家药典人体用量，浓度都经校正，按上述浓度给小鼠0.2ml/10g时，相当于人体公斤体重用量的10倍。
两组阳性对照(⑤组～⑥组)⑤组氢化可的松(剂量为24mg·kg-1·d-1，用生理盐水0.2ml/10g给小鼠，相当于人体公斤体重用量的10倍)⑥组羟基氯喹(剂量为80mg·kg-1·d-1，用生理盐水溶解为0.2ml/10g给小鼠，相当于人体公斤体重用量的10倍)一组阴性对照⑦组生理盐水(2)给药用Balb/c纯系雌性小鼠70只建立PACD动物模型做药效学、药理学实验，按上述随机分为7组，每组10只小鼠，PACD动物模型基本按前述方法建立，不同点是诱导后第8天在左耳外涂0.1％CPZ-乙醇液，右耳不涂，而后照射UVA。从光敏前4天开始灌胃给药，每次0.2ml/10g，每天一次，在每次照UVA前30分钟给当日药量，给药至诱导后第8天(即激发当日)。
(3)各实验组及对照组抗光变态反应的影响①对小鼠耳厚度及重量差的影响见表4、图2及图3。各给药组与生理盐水组相比较有统计学意义(P＜0.01)，中药各组中以复方昆明山海棠合剂组作用最强。复方昆明山海棠合剂与昆明山海棠单剂和无昆明山海棠的合剂比较，有统计学意义(P＜0.05)，和氢化可的松及羟基氯喹比较无统计学意义(P＞0.05)表4各组药物对小鼠耳厚度及重量差的影响(X±s，n＝10)组别n S1S2S3生理盐水 107.80±2.396.40±1.831.24±0.21氢化可的松102.80±1.39**2.00±1.33**0.42±0.18**羟基氯喹 104.00±1.63**2.80±1.39**0.57±0.19**复方昆明山海棠103.80±1.47**2.40±0.84**0.51±0.16**水提昆明山海棠105.60±1.57**Δ4.00±1.33**ΔΔ0.71±0.18**Δ无昆明山海棠复方 106.00±1.63*ΔΔ4.40±1.26**ΔΔ0.76±0.20**ΔΔ醇提昆明山海棠105.40±1.35**Δ3.60±1.27*Δ0.70±0.23**Δ
注s1诱导前及激发后48h左耳厚度差，单位10μm。s2激发后48h左右耳厚度差，单位10μm。s3激发后48h左右耳重量差，单位mg。与阴性对照(生理盐水组)相比*P＜0.05，**P＜0.01；与复方昆明山海棠相比ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01。
②对激发后小鼠单一核细胞浸润的影响，见表5及图3，各给药组和生理盐水组相比都有统计学意义(P＜0.01)，实验组中复方昆明山海棠效果最好，与其它三组相比，均有显著性差异(P＜0.01)。
表5各组激发后小鼠小鼠左右耳单一核细胞差值比较(X±s，n＝10)(个/mm2)组别 n 单一核细胞 P值生理盐水10 954.10±128.27氢化可的松 10 97.10±39.77 ＜0.01*羟基氯喹10 254.80±66.31＜0.01*复方昆明山海棠 10 184.90±67.95＜0.01*水提昆明山海棠 10 396.60±107.67 ＜0.01*Δ无昆明山海棠复方10 447.50±131.25 ＜0.01*Δ醇提昆明山海棠 10 363.50±102.62 ＜0.01*Δ注*示与阴性对照(生理盐水组)相比；Δ示与复方昆明山海棠相比③对激发后小鼠耳部ICAM-1和血清IFN-γ的影响，见表6，各组与生理盐水相比较，血清IFN-γ值降低，ICAM-1表达减少，有统计学意义，复方THH与水提取THH单剂比较有统计学意义。
表6激发后小鼠耳部ICAM-1和血清IFN-γ的影响(X±s，n＝10)组 别n ICAM-1 血清IFN-γ生理盐水 10 4.40±0.69 937.90±76.36氢化可的松10 2.10±0.73**810.00±20.61**复方昆明山海棠10 2.80±0.73**822.60±25.62**水提昆明山海棠10 3.50±0.70**Δ856.50±17.57*注各组与生理盐水相比较*为(P＜0.05，**为P＜0.01)；复方昆明山海棠与水提昆明山海棠相比较Δ为(P＜0.05)ΔΔ为(P＜0.01)。
(4)讨论经复方昆明山海棠抗小鼠光变态反应的实验研究结果得出四方中药在左耳激发前后的厚度差、激发后左右耳的厚度差及组织块的重量差、局部浸润的单一核细胞等多个观察指标均有显著效果，其中复方昆明山海棠合剂组无论在四个客观指标上还是在组织病理改变上都明显优于昆明山海棠单剂组(水提取和醇提取)及无昆明山海棠的合剂组，与具有抗过敏、免疫抑制的氢化可的松及具有抗炎、抗光敏的羟基氯喹阳性对照组相比无显著性差异。说明复方昆明山海棠合剂中的黄芩等起协同作用，确实增强了昆明山海棠的抗炎、免疫调节作用，从而使之具有更强的抗光变态反应的作用。且复方昆明山海棠抗光变态反应的的作用机理之一是抑制IFN-γ的分泌，从而下调ICAM-1的表达，抑制T淋巴细胞的活化和降低T淋巴细胞趋化及炎性因子的产生，减少局部单一核细胞的浸润而起到抗炎、免疫调节的作用，且比昆明山海棠单剂的作用强。
从上述临床研究表明(1)复方THH(昆明山海棠)治疗多种与免疫有关的皮肤病有较好的疗效。
(2)复方THH合剂急性毒性小于THH水提取物和醇提取物。
(3)复方THH实验组有显著的抗光变态反应作用，其作用比THH单剂的水提取物和醇提取物以及无复方THH的复方合剂强。
(4)复方THH抗PACD的作用机理部份是抑制干扰素-γ(IFN-γ)的分泌和抑制表皮、真皮内ICAM-1的表达，从而减少局部单一核细胞的浸润，减轻变态反应。
(5)复方THH比THH单剂有更好的临床应用价值。


图1为本发明的药物对小鼠耳厚差影响实验图；图2为本发明的药物激发后对小鼠左右耳重量差影响实验图；图3为本发明的药物激发后各组小鼠左右耳淋巴细胞计数差实验图。

实施例1按下述配比称取原料(千克)昆明山海棠15 青蒿6 黄芩3 白藓皮4.5丹参9 元胡3 法夏3 菟丝子6 甘草1.5生产方法如下
将上述各组分制成本发明药物的生产方法是(1)将上述药原料按比例混合后粉碎至粗颗粒；(2)浸泡10～12小时；(3)多功能提取器中60℃、加7倍量水、文火煎煮30分钟左右，提取二次；(4)得挥发油及过滤液，合并二次滤液；(5)将滤液浓缩至含生药量3.37g/ml(相对密度1.2)；(6)加挥发油、防腐剂、矫味剂(防腐剂和矫味剂按中药常规方法加入)；(7)质量控制、分装、灭菌，即可得到治疗皮肤病的合剂。
实施例2按下述配比称取原料(千克)昆明山海棠20 青蒿9 黄芩6 白藓皮6丹参12 元胡6 法夏6 菟丝子9 甘草6生产方法如下(1)至(5)步骤与实施例1相同；(6)浓缩后喷雾干燥，得浸膏粉；(7)加挥发油、蔗糖糊精(蔗糖糊精按中药常规方法加入)，制粒，干燥；(8)整粒、总混，颗粒分装(每袋含总生药量26.67克)，包装，质量检查，得成品颗粒剂。
实施例3按下述配比称取原料(千克)昆明山海棠30 青蒿12 黄芩9 白藓皮9丹参15 元胡9 法夏9 菟丝子12 甘草9生产方法如下(1)至(5)步骤与实施例1相同；(6)浓缩后喷雾干燥，得浸膏粉；(7)加挥发油、蔗糖糊精(蔗糖糊精按中药常规方法加入)，制粒，干燥；(8)整粒、总混，分装胶囊(每粒胶囊含总生药量6.67克)，包装，质量检查，得成品胶囊剂。


本发明是一种治疗皮肤病的药物及其制备方法。其特征在于它是由下述重量配比的原料制成的药剂昆明山海棠、青蒿、黄芩、白藓皮、丹参、元胡、法夏、菟丝子、甘草。本发明的药物治疗多种与免疫有关的皮肤病有较好的疗效，其中对光线性皮肤病及无菌性脓疱病疗效尤佳，有效率在前82％以上。本发明的复方昆明山海棠比昆明山海棠单剂毒性更低，有更大的安全性。其作用机理可以通过是抑制IFN－γ的分泌，从而下调ICAM－1的表达，抑制T淋巴细胞的活化和降低T淋巴细胞趋化及炎性因子的产生，减少局部单一核细胞的浸润而起到抗炎、免疫调节的作用。复方昆明山海棠比昆明山海棠单剂有更强的抗小鼠光变态反应作用。本发明既对治疗皮肤疾病具有较好的疗效、又能降低昆明山海棠的毒性、增强其抗炎、免疫调节作用、因而具有更好的临床使用价值。