专利名称：桩蛋白刺激组合物及其化妆品用途的制作方法消费者不断寻求改善其皮肤的外观且特别是减少皮肤老化的可见体征。不希望有的体征包括线(lines)和皱纹、皮肤下垂或萎缩、和柔软度的丧失，并且还存在关于对抗老化的此类体征，和更一般地提供抗老化和/或抗皱纹效应的产品的需要。近期研究已揭示皮肤成纤维细胞在长期和光老化的皮肤中经历形态变化和细胞体對塌。参见例如，Varani 等人,2004.J.1nvest.Dermatol.122:1471-9 ;和 Varani 等人，2006.Am.J.Pathol.168:1861_8。此类改变可以导致粗糙、不光滑和皱纹外观，其是老化皮肤的特征。进一步研究暗示随同改变的整联蛋白和局灶粘附分子一起的胶原降解是促成功能性皮肤胶原基质的丧失的因素，伴随由于在成纤维细胞和基质之间的机械张力丧失的细胞体對塌的后果。参见例如，Fisher等人,2008.Arch Dermatol.144:666_72。桩蛋白是介导跨膜整联蛋白和生长因子信号传导的重要衔接蛋白。它转导来自细胞外基质的信息，召募其他局灶粘附分子以形成复合物，且激活细胞内细胞支架装配。Brown等人,2004.Physiol Rev.84:1315_39。这个过程对于细胞粘附和迁移以及肌肉收缩是重要的。桩蛋白介导的信号传导也影响基因表达、细胞增殖和细胞外基质组构中的长期变化，这对于创伤修复和组织再生是重要的。桩蛋白在高等真核生物中作为3种同种型存在。桩蛋白α是主要、遍在表达的同种型，在除脑外的大多数成人组织中表达；桩蛋白β和Y同种型是局限地表达的。第四种同种型桩蛋白S主要在上皮细胞中发现。桩蛋白蛋白质由多个蛋白质结合基序组成，对应于多个蛋白质-蛋白质相 互作用和蛋白质识别位点，其中许多磷酸化位点分散遍布分子。桩蛋白结合配偶体范围从结构肌动蛋白结合蛋白质例如纽蛋白到信号传导分子例如局灶粘附激酶(FAK)和整联蛋白连接的激酶(ILK)。桩蛋白在响应例如细胞粘附和/或多种可溶性生长因子和细胞因子中在多个酪氨酸、丝氨酸和苏氨酸位点上是磷酸化的，且认为在正常条件下处于细胞粘附和生长因子调节的信号传导十字路口(crossroads)。在暴露于氧化性应激后，已在培养的细胞中在桩蛋白磷酸化和细胞支架组构方面观察到异常。Hao 等人，2006.Free radical Biol Med.41:302-10 ;和 Zhou 等人，1999.JCell Physiol.180:182_9。此外，多种局灶粘附蛋白的改变水平和改变的局部化已在体外衰老细胞中观察到。Nishio等人,2005.Histochem cell biol.123:263_73。然而，在桩蛋白表达和人皮肤中老化的可见体征之间未牵涉直接关联。因此，本发明的目的是提供通过桩蛋白介导的途径用于对抗皮肤老化的体征的新方法。本发明的进一步目的是提供针对其的新组合物和方法。本发明的再进一步目的是使用包含有效量的影响桩蛋白生产的一种或多种化合物的化妆品组合物改善皮肤的总体外观，包括治疗、逆转和/或预防老化的体征。前述讨论仅呈现用于提供本领域面临问题的性质的更好理解，并且不应以任何方式解释为关于现有技术的承认，本文任何参考文献的引用也不应解释为此类参考文献构成本申请的“现有技术”的承认。发明概述依照前述目的及其他，已令人惊讶地发现在人皮肤成纤维细胞中正常桩蛋白生产的破坏直接导致细胞形状的变化，指示桩蛋白在维持最佳细胞形态和最佳细胞健康中的必需作用。进一步已令人惊讶地发现在人皮肤细胞中的桩蛋白水平可以通过包含一种或多种桩蛋白刺激物的组合物的局部应用得到刺激，指示对抗皮肤老化的体征的新方法。在本发明的一个方面，提供了包含在化妆品可接受的媒介物中的有效量的至少一种桩蛋白刺激物，用于改善皮肤的美容外观的化妆品组合物。桩蛋白刺激物可以选自具有式IV或V的结构的卩比唳酮稠合的氮杂双环化合物；双瓣茉莉(Jasminum sambac)提取物；红瓜(Coccinia grandis)提取物；鳢肠 Giliptica prostrata Linn.)提取物；蝶豆(Clitoria terna tea Linn.)提取物；0zothamnus obcordatus 提取物；刺桐(Erythrina fIabelliformis)提取物；Lonchocarpus capassa 提取物；绒毛槐(Sophora tomentosa)提取物；杂种车轴草(Trifolium hybridum)提取物；米歇尔爱沙木(Eremophila mitchellii)提取物；Kunzea ambigua提取物；丹参酮IIA;粉防己碱；香疗酹；顺式-6-壬烯醇；视黄醇石槽酸酯(retingl punicate);视黄醇油酸酯；雌马酹；MycoFusions Coriolus黑玉米生物质；MycoFusions Maitake糯性裸大麦生物质；两面针(Zanthoxylumnitidium)提取物；麦冬(Ophiopogon Thunb.P.E.)提取物；桔梗(Radixplatycodonis)提取物；揽仁木(Terminalia belerica)提取物；Cocculus glaucescens提取物；千金藤(Stephania)固体提取物；和迷迭香提取物。在某些实施方案中，化妆品组合物包含一种或多种桩蛋白刺激物，并且在其他实施方案中，化妆品组合物包含2种或更多种粧蛋白刺激物。在某些实施方案中，化妆品组合物包含以有效改善皮肤的美容外观(例如以对皮肤赋予抗老化利益)量的作为桩蛋白刺激物的顺式-6-壬烯醇。在另一个实施方案中，化妆品组合物包含作为第一种桩蛋白刺激物的顺式-6-壬烯醇，和至少一种其他桩蛋白刺激物，顺式-6-壬烯醇和其他桩 蛋白刺激物，以对皮肤赋予抗老化利益有效的聚集量存在于组合物中。在某些实施方案中，该组的一种或多种物质从化妆品组合物中排除。例如，在某些实施方案中，组合物不包括杂种车轴草提取物和/或不包括视黄醇油酸酯和/或不包括雌马酌.。在某些实施方案中，化妆品组合物进一步包含至少一种其他皮肤活性物，所述皮肤活性物选自植物性药材、角质溶解剂、脱屑剂(desquamating agents)、角化细胞增殖增强剂、弹性蛋白酶抑制剂、脱色剂、抗炎剂、类固醇、抗粉刺剂、抗氧化剂、水杨酸或水杨酸酯、硫代二丙酸或其酯、晚期糖化终产物(AGE)抑制剂、和α-羟酸。在某些实施方案中，化妆品组合物进一步包含胶原刺激物，例如TDPA。在另一个方面，本发明涉及包含将化妆品组合物局部应用于皮肤的方法，所述化妆品组合物包含一种或多种桩蛋白刺激物。化妆品组合物将包含有效量的至少一种桩蛋白刺激物，以对人皮肤提供抗老化利益，例如以治疗、逆转和/或预防皮肤老化的体征。抗老化利益包括但不限于下述:(a)细线或皱纹的治疗、减少和/或预防，(b)皮肤毛孔孔径的减少，(c)皮肤厚度、丰满度和/或紧固度中的改善；(d)皮肤柔软度和/或柔软性中的改善；(e)皮肤色调、光亮度和/或透明度中的改善；(f)前胶原和/或胶原生产中的改善；(g)皮肤纹理中的改善和/或再纹理化的促进；(h)皮肤屏障修复和/或功能中的改善；(i)皮肤下垂或萎缩的治疗和/或预防；和/或(j)皮肤轮廓外观中的改善；(k)皮肤光泽和/或亮度的恢复；(I)皮肤中的必需营养素和/或组成成分的补充；(m)由绝经降低的皮肤外观的改善；(η)皮肤保湿和/或水合中的改善；和(ο)皮肤弹性和/或回弹力的改善。还提供的是用于对人皮肤赋予抗老化利益的方法，其包括对有此需要的皮肤局部应用包含至少一种桩蛋白刺激物的组合物，所述组合物以有效增加皮肤成纤维细胞中的桩蛋白水平的量，例如通过上调桩蛋白表达。有此需要的皮肤可以是光老化和/或由UV辐射损害的皮肤。在本发明的另一个方面，提供了治疗、逆转、改善和/或预防人皮肤中的细线或皱纹或下垂的方法，其包括对有此需要的皮肤局部应用，包括对皱纹或细线直接应用包含至少一种桩蛋白刺激物的组合物，所述组合物以有效增加皮肤成纤维细胞中的桩蛋白水平的量。在另外一个方面，本发明涉及用于测定候选材料是否是桩蛋白刺激物的方法和组合物。筛选方法可以包括使人皮肤细胞与候选材料接触且测定桩蛋白mRNA的上调。用于桩蛋白mRNA上调的测定可以包括使用特别设计为鉴定桩蛋白mRNA的标记探针的分支DNA技术。在某些实施方案中，探针包含一起覆盖桩蛋白mRNA序列的核苷酸序列。在某些实施方案中，例如，探针包含根据本文公开的SEQ ID NOS:1、2和/或3的核苷酸序列，和/或其变异。本发明的另外其他方面涉及使用本文描述的一种或多种探针、组合物和/或方法，鉴定为桩蛋白刺激物的候选材料，例如鉴定为上调桩蛋白mRNA的候选材料。在另外一个方面，本发明涉及用于配制用于对人皮肤赋予抗老化利益的化妆品组合物的方法，其包括测定以确定候选材料是否是桩蛋白刺激物；并且如果如此，那么将材料掺入化妆品可接受的媒介物内。在某些实施方案中，候选材料是植物提取物。本发明的这些和其他方面通过参考下述详述将得到更好理解。附图简述图1举例说明在用(A)对照媒介物；和(B)候选桩蛋白刺激物局部治疗后，显示桩蛋白蛋白质水平的人皮肤活组织检查。详述 已令人惊讶地发现包含刺激桩蛋白的一种或多种物质的组合物可以局部应用于人皮肤，以改善皮肤的美容外观，特别是治疗、逆转和/或预防老化的可见体征。已令人惊讶地发现新物质以及先前在化妆品领域中已知的许多物质刺激桩蛋白，且因此将在具有抗老化利益的局部化妆品组合物中有用。考虑到这些发现及其他，包含一种或多种桩蛋白刺激物的局部组合物考虑在对抗皮肤老化的体征中是有用的，包括减少细线和皱纹，保存皮肤柔软度和柔软性，预防皮肤下垂或萎缩，改善皮肤丰满度和/或紧固度且抵消皮肤老化和/或皮肤损害的其他体征。根据本公开内容，进一步考虑在皮肤成纤维细胞中刺激桩蛋白生产或另外促进增加的细胞内桩蛋白水平的其他物质可以在抗老化局部组合物中有用。如本文使用的，“基本上由......组成”意指组合物或组分可以包括另外成分，但仅在另外成分不会实质上改变请求保护的组合物或方法的基本和新型特征时。桩蛋白刺激化合物和组合物本发明的一个方面涉及用于局部应用的组合物，其包含一种或多种桩蛋白刺激物，以对皮肤赋予抗老化利益，例如治疗、逆转、改善、延迟和/或预防皮肤老化的体征。对抗皮肤老化的体征可以包括但不限于下述:(a)细线或皱纹的治疗、减少和/或预防，(b)皮肤毛孔孔径的减少，(c)皮肤厚度、丰满度和/或紧固度中的改善；(d)皮肤柔软度和/或柔软性中的改善；(e)皮肤色调、光亮度和/或透明度中的改善；(f)前胶原和/或胶原生产中的改善；(g)皮肤纹理中的改善和/或再纹理化的促进；(h)皮肤屏障修复和/或功能中的改善；(i)皮肤下垂或萎缩的治疗和/或预防；和/或(j)皮肤轮廓外观中的改善；(k)皮肤光泽和/或亮度的恢复；(I)皮肤中的必需营养素和/或组成成分的补充；(m)由绝经降低的皮肤外观的改善；(η)皮肤保湿和/或水合中的改善；和(ο)皮肤弹性和/或回弹力的改善。在实践中，本发明的组合物应用于需要治疗的皮肤，即患有前述皮肤属性的任何中的缺陷或丧失或否则将获益于前述皮肤属性的任何的改善的皮肤。“桩蛋白刺激物”指可以增加人皮肤成纤维细胞中的桩蛋白水平的任何试剂。桩蛋白水平中的增加可以指在体外或在体内转录的桩蛋白mRNA中的增加和/或在成纤维细胞中表达的桩蛋白蛋白质中的增加，并且可以通过本领域已知的任何方法或如本文描述的进行测量。例如，桩蛋白刺激物可以充当在皮肤成纤维细胞内的桩蛋白表达的正调节物。参见例如，下文实施例1。在某些实施方案中，与在不存在桩蛋白刺激物的情况下的桩蛋白水平相比较,桩蛋白水平增加至少约10%、至少约20%、至少约60%、至少约80%、至少约100%、至少约150%、至少约200%、至少约250%或至少约300%。“桩蛋白刺激物”还可以包括通过例如增加桩蛋白RNA和/或蛋白质的稳定性，和/或增加桩蛋白至作用部位的局部化，造成桩蛋白水平中的有效增加的试剂。桩蛋白刺激物可以是任何有机或无机化合物、小分子、大分子、大分子复合物、细胞裂解物、亚细胞区室、生物来源的提取物、或其组合。在某些实施方案中，桩蛋白刺激物包含有机分子。在某些实施方案中，桩蛋白刺激物包含吡啶酮稠合的氮杂双环化合物，或其药学或化妆品可接受的盐和/或药物前体。吡啶酮稠合的氮杂双环化合物包括但不限于根据式(I)的桩蛋白刺激化合物:

本发明公开了包含一种或多种桩蛋白刺激物的化妆品组合物和使用此类组合物对皮肤提供抗老化利益的方法。桩蛋白刺激物及其组合被认为具有针对在皮肤老化中牵涉的至少一个生物化学途径的调节活性。