专利名称：一种克服葡萄糖及乳酸抑制的透明质酸发酵方法透明质酸(Hyaluronic Acid，简称HA)，又名玻璃酸，其分子量在几十万到几百万之间，由于结构上的特点，决定它具有比较特殊的物理化学性质，其水溶液有着良好的粘弹性和流变性，在食品，化妆和医用方面都有应用。不同用途的HA对分子量有不同要求，小分子量的HA多用于保健品中，中等分子量的HA主要应用于化妆品，而高分子量的HA可用于眼科粘性手术、治疗关节病、软组织修复和作为药物载体等，特別是在预防和减少外科手术后组织粘连中具有很高的应用价值。因此HA的生产中，高分子量和高产率依然是研究的主要目标。近年来我国HA组织提取法研究已趋于成熟。但原料紧缺，エ艺复杂，成本高，无法满足国内市场需要。目前透明质酸已由传统的动物器官提取法转为微生物发酵法生产，微生物发酵法是制备HA的主要方法，国外对发酵法研究较早，技术也日见成熟，但因生产厂家少，世界需求仍然缺口大；近年来我国不少学者虽积极进行这方面的研究，但由于在菌种选育、发酵エ艺和提取纯化等方面的难题，使我国在这方面的研究进展缓慢。我国应加快发酵法生产透明质酸的步伐，关键是在提高产率，提高产品分子量和分离纯化的技术方面进行攻关，赶上世界先进水平，以减少进ロ量。在兽疫链球菌发酵过程中，透明质酸的产量在一定范围内随着底物浓度的增加而増加，若底物浓度过高，对透明质酸的生产有抑制作用，得到的透明质酸相对分子质量也较小。而且在产生HA的同时还会有乳酸生成，对菌体的生长和HA的产生都有抑制作用，在此发明中，针对发酵底物的不同和生成产物的多少，研究底物和产物对透明质酸生产的抑制作用，井指出解除抑制的方法。
本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供ー种克服葡萄糖及乳酸抑制的透明质酸发酵方法。为达到上述目的，本发明的方案为透明质酸的发酵エ艺，以兽疫链球菌为种子，包括ー级种培养，ニ级种培养及发酵培养，各过程培养基重量配方如下表一种克服葡萄糖及乳酸抑制的透明质酸发酵方法，以兽疫链球菌为种子，发酵工艺过程包括一级种培养，二级种培养及发酵培养。一级种培养是从斜面试管转种到锥形瓶中进行，培养温度33℃～37℃，培养时间18～24小时；二级种培养的步骤为首先配制二级种子培养基，按照8％～12％的接种量接入一级种子进行培养，培养温度33℃～37℃，培养时间20～24小时，OD660值增加到0.8～1.2时接入发酵液中；发酵培养的步骤为首先配制发酵培养基，按照5％～10％的接种量接入二级种子进行培养，发酵温度33℃～37℃，发酵周期30～35小时。