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荞麦活性物质的高效分离提纯及其抑制胚胎干细胞成脂化的新技术制作方法

  • 专利名称
    荞麦活性物质的高效分离提纯及其抑制胚胎干细胞成脂化的新技术制作方法
  • 发明者
    周中凯, 王芳, 王晓凤, 苏哲
  • 公开日
    2014年10月1日
  • 申请日期
    2014年3月19日
  • 优先权日
    2014年3月19日
  • 申请人
    周中凯, 王芳, 王晓凤, 苏哲
  • 文档编号
    A61K36/70GK104069185SQ201410108213
  • 关键字
  • 权利要求
    1.一种以荞麦及其发芽制品为原料通过高效提取方法制备抑制胚胎干细胞成脂化的活性成分的新技术,其主要特征是(I)以荞麦及其发芽制品为原料;(2)根据活性成分的结构不同,通过两次高效分离得到提取物;(3)以小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2细胞系为模型测定活性物质抑制其成脂性;(4)对活性成分中单体分布及含量进行分析测定2.根据权利I所要求的新方法,其特征是采用荞麦及其发芽制品为原料,在甲醇和乙酸的双效溶液分别进行提取,提取物经大孔径树脂柱纯化处理,真空干燥得到高活性的产品,以小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2细胞系进行抑制成脂化的效果测定3.根据权 利I所要求的新方法,其特征是培荞小鼠胚胎干细胞在细胞中加入不同浓度的提取物,同时观察脂肪细胞形成数量和抑制效果,优化提取物添加量,目前浓度为5mg/ml时,胚胎干细胞抑制效果达到100%4.根据权利I所要求的新方法,其特征是采用HPLC测定提取物中活性单体的含量,利用ABTS测试活性单体的抗氧化能力根据测试结果,对荞麦品种和发芽处理条件进行优化,以获得更高活性的提取物5.根据权利I所要求的新方法,其特征是采用HPLC和LC-MS测定活性成分及含量,利用小鼠胚胎间充质干细胞进行比较,单体活性和抑制效果相吻合
  • 技术领域
    [0001]本发明专利是利用荞麦及发芽制品为原料经提取分离纯化制备抑制胚胎干细胞成脂化活性成分的新技术本发明是一种提取高效活性成分来干预干细胞成脂化的天然生物制品该成果从原料选择、提取技术、验证方式到应用领域是一种新的发现
  • 具体实施方式
  • 专利摘要
    本发明涉及荞麦及发芽制品为原料,经过双效提取,大孔径树脂纯化。采用HPLC测定活性单体的分布及含量,采用ABTS测量单体的抗氧化活性。以小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2细胞系为模型进行细胞实验,测定提取物对干细胞成脂化的抑制作用。通过上述方案得到的生物制品,活性成分测定和动物实验的测试结果高度吻合,说明这种制品就有很好的生物活性,可起到体内脂肪合成的作用,从而达到减肥的效果。
  • 发明内容
  • 专利说明
    荞麦活性物质的高效分离提纯及其抑制胚胎干细胞成脂化的新技术
  • 专利详情
  • 全文pdf
  • 权力要求
  • 说明书
  • 法律状态
荞麦活性物质的高效分离提纯及其抑制胚胎干细胞成脂化的新技术的制作方法 所属 [0002]目前肥胖已日趋成为世界性的健康问题,这是因为肥胖是诱发糖尿病和心脑血管疾病等多种慢性疾病的危险因素。能量摄入、支出不平衡引起的慢性代谢紊乱,导致脂肪组织中的脂肪细胞的肥大与增生,脂肪异常或过量的积累。目前市面上出售的减肥产品大多是化学合成,通常是通过抑制消化酶的活性,降低营荞成分的消化吸收。长期使用这类产品易产生副作用和依赖性,因此寻找一些天然的活性成分达到抗体内脂肪合成的效果非常必要。 [0003]另外,并不是所有的天然产品都具有良好的作用,本技术从荞麦中提取的活性物质在动物实验中发现对抑制干细胞成脂化有良好的效果。这种从原料选择、提取过程及建立相关试验模型还未见报道。
[0004]本发明是从荞麦及其发芽制品中提取天然产品,通过分离(大孔径树脂柱)纯化,获得高效生物活性物质。利用小鼠胚胎间充质干细胞为模型测试这种提取物的干预效果,结果显示了良好的可行性和可重复性。采用HPLC和LC-MS测定每个单体的活性及成分,与单体对细胞培荞的干预结果相吻合。整套技术在从活性成分的测定和最终效果达到了高度的统一。 [0005]为了实现上述的目的,本发明采用以下的技术方案:(1)采用荞麦和的发芽制品为原料,研磨成过40目的粉状;(2)将样品加入提取液(先80%酸化甲醇提取,再用70%丙酮+1 %醋酸+29%水提取),搅拌离心,合并提取液,旋转蒸发至干,经提取液回溶,用大孔径树脂除杂质后,旋转蒸发至干得最终提取物;(3)以小鼠胚胎间充质干细胞为模型测定提取物对其脂质形成的抑制作用;(4)用HPLC和LC-MS分析测定活性成分分布情况及含量。



:
[0006]1.荞麦中活性成分的HPLC分布图(I绿原酸;2对香豆酸;3阿魏酸)
[0007]2.小鼠间充质干细胞(MSC)-C3H10Tl/2显微镜图
[0008]3.小鼠间充质干细胞(MSC)-C3H10Tl/2成脂化脂肪细胞显微镜图
[0009]4.小鼠间充质干细胞(MSC)-C3H10T1/2成脂化脂肪细胞显微镜图(添加荞麦活性物质)
[0010] 米用荞麦和的发芽制品为原料,取5g研磨样品,先用5011^80%浓度的酸化甲醇提取,搅拌离心,取清夜;残渣中加入70ml提取液(70%丙酮+1%醋酸+29%水)再次提取,合并提取液,旋转蒸发至干,溶于1ml甲醇中,经大孔径树脂柱精制得到纯品。以小鼠胚胎干细胞为模型,测定提取液对干细胞成脂化的抑制作用。采用HPLC和ABTS测定单体含量和抗氧化活性。经测量在5mg/mL使用量下对小鼠胚胎间充质干细胞抑制效果达到100%。

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