专利名称：葵花籽用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用的制作方法葵花籽是向日葵的果实。向日葵(英文Sunflower,学名Helianthus annuus),是ー种可高达3米的大型一年生菊科向日 葵属植物，果实包括果皮、种皮、子叶和胚四部分。食用型种子较长，果皮黒白条纹占多数，果皮厚，约占种子重量的40%以上，千粒重10(Γ200克。油用型种子较短小，果皮多为黑色，皮薄，约为种子重量的20 30%，千粒重4(Γ110克。我国葵花籽的种植及产量近几年有了很快的发展，尤其我国北方很适宜种植葵花籽，在吉林、黑龙江两省种植面积较大，产量逐年増加(孝延文等，葵花籽组成的全分析[J]，油脂科技，1983，3 :62-64)。每100克葵花籽含热量597千卡，蛋白质23. 9克，脂肪49. 9克，碳水化合物13克，I丐293晕克，铁11. 38晕克，憐238晕克，钾864晕克，钠1924晕克，铜4. 4晕克，锋12晕克，汞O. 65毫克，锰6. 16毫克。可以看出，钠在葵花籽种含量最高，同时富含丰富的铁、锌、钾、锰等微量元素，使葵花籽具有预防贫血等疾病的作用，大量的钙有助于牙齿和骨骼的健康生长(陈伟等，葵花籽柏与葵花籽中微量元素含量的測定[J]，内蒙古民族大学学报(自然科学版)，26 (3) :271-273)。血管紧张素转化酶(angiotensinconverting enzyme,ACE,EC 3. 4. 15. I)能将血管紧张素I转化为血管紧张素II，这是肾素-血管紧张素系统中已知最強的血管收缩剂，能够升高血压。在激肽释放酶-激肽系统(简称KKS)中，血管紧张素转化酶水解舒缓激肽，分解成为非活性的多肽，舒缓激肽是降压成分，从而引起血压升高。ACE是ー种金属肽酶，含有2个结合Zn2+的位点，即所谓“必须结合位点(Obligatory Binding Site)”。Zn2+结合位点是ACE催化反应的活性基团所在部位。各种ACE抑制物的共同作用是与ACE活性部位的Zn2+结合，使之失活。降血压肽是对血管紧张素转化酶活性区域亲和カ较强的竞争性抑制剂，它们与血管紧张素转化酶的亲和カ比血管紧张素或舒缓激肽更强，而且也较不容易从血管紧张素转化酶结合区释放，从而阻碍血管紧张素转化酶催化水解血管紧张素I成为血管紧张素II以及催化水解舒缓激肽成为失活片段的两种生化反应过程，起到降血压的作用。到目前为止，未发现有关于利用葵花籽制备ACE抑制物或降血压药物的报道。
本申请的发明人在研究坚果类食品的降血压效果的过程中发现，葵花籽仁的水解产物具有明显的血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性。因此，本发明的目的在于提供ー种葵花籽用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用。根据本发明，所述葵花籽为葵花籽的果仁经模拟胃液水解、模拟胃肠消化水解、蛋白酶水解、酸性水解或碱性水解后的产物。根据本发明的优选实施例，所述模拟胃液水解包括胃蛋白酶水解。根据本发明的优选实施例，所述模拟胃肠消化水解包括胃蛋白酶和胰蛋白酶水解。根据本发明的优选实施例，所述蛋白酶选自碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶以及风味酶。根据本发明的优选实施例，所述酸性水解的pH为2飞。根据本发明的优选实施例，所述碱性水解的pH为扩11。基于葵花籽具有抑制血管紧张素转化酶活性的作用，葵花籽可进一歩用于开发具有降血压功能的食品或保健品。本发明为葵花籽的开发利用开辟了一条新的途径，具有广泛的应用前景。模拟胃液取I. Og NaClU. 6g胃蛋白酶、3. 5ml浓盐酸，用双蒸水定容至500ml。模拟肠液将6. 8gKH2P04溶于250ml双蒸水中，混匀，加入190ml O. 2mol/LNa0H和400ml双蒸水，加入胰蛋白酶(O. 2519g)，混匀，用O. 2mol/L NaOH调整pH值7. 5±0· 1，定容至 IOOOml0按表I所示，对获得的葵花籽果仁粉分别用不同的蛋白酶、模拟胃液水解、模拟胃肠消化水解、酸性溶液和碱性溶液处理，具体如下模拟胃液水解称取IOg粉末加入IOOml模拟胃液，按照表I的水解条件，在相应的温度下水浴O. 5 6h,煮沸15min灭酶,水解物离心(12000r/min, IOmin),收集上清液,稀释5倍。模拟胃肠消化水解称取2g粉末加入50ml模拟胃液，在37°C下水浴，每隔半小时左右摇晃一次。将锥形瓶从水浴中取出，在沸水中加热IOmin灭活，调pH值至7. 5，再加入20ml模拟肠液，37°C下水浴反应相应时间，终止反应，水解物离心(12000r/min, IOmin),收 集上清液，稀释5倍。蛋白酶水解称取IOg粉末加IOOml水，按照表I的蛋白酶水解条件，调pH值至相应的酶反应PH条件，加入相应的酶O. 1% (w/v)，在相应的反应温度下水浴酶解6h，搅拌，终止反应，水解物离心(12000r/min, IOmin),收集上清液,稀释5倍。酸性水解和碱性水解称取IOg粉末加IOOml去离子水，分别用IM HCl和IM NaOH调pH值至2、4、6、9、11，37°C下水浴2 6h，终止反应，水解物离心(12000r/min, IOmin),收集
上清液，稀释5倍。表I、蛋白酶、酸、碱水解条件


本发明公开了一种葵花籽用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用。优选的，所述葵花籽为葵花籽的果仁经模拟胃液水解、模拟胃肠消化水解、蛋白酶水解、酸性水解或碱性水解后的产物。本发明为葵花籽的开发利用开辟了一条新途径，具有广泛的应用前景。