具有抗菌活性的肽、用于动物的预防和治疗的药物组合物、用于植物的预防和治疗的组合 ...的制作方法[0002]抗生素是在生物技术产业中开发最多的微生物产品。目前，用于治疗牲畜感染和促进动物生长的技术是基于常规的抗生素。例如，引起鸡感染的细菌的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)和肠炎沙门菌(Salmonellaenteritidis)对已知的抗菌剂例如四环素、萘啶酸、氨苄青霉素和其他抗菌剂(参见Ribeiro, A.R., Kellermann, A., Santos, L.R., Nascimento V.P.2008.Resistenciaantimierobiana em Salmonella enteritidis isoladas de amostras clinicase ambientais de frangos de corte e matrizes pesadas.Arq.Bras.Med.Vet.Zootec.60(5):1259-1262)具有抗性。这种常规的抗生素还用于治疗人类感染。此覆盖(overlay)导致出现抗性菌株的大量增加，其使人类感染的治疗复杂化。因此，专用于动物的具有抗菌活性的新化学实体的分离将在屠宰用动物的饲养中提供显著的益处，所述实体用作生长促进剂以及用于治疗牲畜感染，并且这些益处将不仅引起生产者的收益增加，而且排除了人类所消耗的动物中现有抗生素的使用。[0003]在临床上使用如盘尼西林的抗菌剂不久后便出现了抗性细菌。从那时以来明显的是，对于在市场上可得的每种新抗菌剂而言，对这些新药剂具有抗性的细菌快速地出现，并且该抗性发展的快速性与新药用途的规模(size)成比例。最近发现在供给人类用的动物中使用抗菌剂已经导致出现对用于治疗人类感染的抗生素具有抗性的病原菌(对于更多细节，参见Wegener H.C.et al.“Public Health Impacts of the Use of Antimicrobialsin Food Animals，，，Proceedings of the WBC Congress，23rd World Buiatrics Congress,Quebec City, Canada,2004) 0[0004]抗菌剂可以为抑制或杀灭微生物(包括细菌)的天然或合成的物质。目前有超过15种不同类别的抗菌物质，所述抗菌物质在化学结构和作用机理上不同，使它们在治疗特定病原体中具有高度特异性。抗菌剂的出现是20世纪医药、兽药和农业领域的伟大胜利，不仅由于其治疗价值，而且还由于其在以亚治疗量(sub-therapeutic amount)使用时促进植物和动物生长的特性(参见网络http: / / www.wh0.1nt / mediacentre /factsheets / fs268 / en / 上可得的 Fact sheet N0.268, Ol / 2002, “Use ofantimicrobials outside human medicine and resultant antimicrobial resistance inhumans，，)。[0005]使用抗生素作为抗菌剂用于治疗人类和动物的问题已经呈现如此强劲的地位，使得不同国家的政府当局不仅已推进研究以使病原菌对现存抗生素的抗性影响降到最低，也展开行动以向公众宣传教育这种抗性增加的不断增加的风险，旨在减少抗生素在动物中使用、尤其是以亚治疗量使用来促进动物生长且改善肉类生产产量。这些政府举措的实例有:(I) 2004 年出版的英国报道"Overarching AMR "(参见网络 http: / / www.dardn1.gov.uk / index / publications / pubs-dard-animal-health / pubs-vet-meds.htm 上可得的 “Overview of Antimicrobial Usage and Bacterial Resistance in SelectedHuman and Animal Pathogens in the UK:2004”)，以及(2)由智利国家科学和技术发展基金资助的San Martin, B.等人进行的工作(参见San Martin, B.et al.“Evaluationof Antimicrobial Resistance Using Indicator Bacteria Isolated from Pigs andPoultry in Chile”，Intern J Appl Res Vet Med, Vol.3, N0.2,171-178,2005)。 [0006]在寻求实现该目标的过程中最有希望的途径之一是使用在动物(尤其是鸡和猪)中作为抗菌剂和生长促进剂而有效的生物材料。在2004年Dal-Soo组(参见Dal-Soo，K.et al.“Paenibacillus elgii sp.nov., with broad antimicrobial activity”，International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology54,2031-2035,2004)确认了两种被归类为新的具有广泛抗菌活性的芽孢细菌的菌株(SD17和SD18)，所述菌株由紫苏(Perillafrutescens)的根分离得到。后来,Dal-Soo,K.等人(参见Dal-Soo,K.et al.“Paenibacillus SD17as a Biocontrol Agent Against Soil-borne TurfDiseases^Plant Pathol.J.21 (4):328-333,2005)确认了在菌株 SD17 中抵抗由杂草中微生物所引起的病害的广谱抗菌活性。用类芽孢杆菌elgii SD17的发酵液制备的颗粒制剂进行的实验室试验显示出与市售杀真菌剂相似的效力，而用相同制剂的实地试验显示出低于市售杀菌剂的效力。尽管有田地上的这些结果，但作者仍考虑用类芽孢杆菌elgii SD17制备的颗粒制剂作为合适的生物防治剂。[0007]对用于治疗由微生物所引起的病害的抗菌剂的研究还得到W009045023中公开的组合物，所述组合物是基于超吸水性聚合物作为支持物用于以下的用途:(a)抑制植物中病原体生长的有益微生物以及(b)所述有益微生物的培养基。在文献W009045023的第13页第2行中，类芽孢杆菌elgii SD17作为有益微生物之一被提及。[0008]EP1788074描述了属于类芽孢杆菌属的新菌株及其用途，或用于防治植物病害的这些新菌株的培养物。这些新菌株是类芽孢杆菌属BS-0048、类芽孢杆菌属BS-0074、多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)BS-0105和类芽孢杆菌属BS-0277。该文献描述了包含使用新菌株的粗发酵提取物和/或在这些发酵物中所产生的化合物的制剂，所述化合物称作Fusaricidin A、Fusaricidin B、化合物3和化合物4,其化学式在权利要求3中定义。[0009]从上述现有技术中可以看出，没有提及由类芽孢杆菌属得到的具有保护活性且促进植物生长的蛋白质或肽的分离。也没有报道关于得到衍生自类芽孢杆菌属的在用于屠宰供人类食用的动物中具有抗菌活性和/或生长促进作用的蛋白质或肽。所述蛋白质或肽在用于减少病原菌对治疗人类微生物感染用的抗生素的不断增加的抗性的替代物的研究中带来了重要的进步。
[0010]发明概述
[0011]本发明旨在提供在用于屠宰供人类食用的动物中具有抗菌活性和/或生长促进作用的类芽孢杆菌属提取物，所述提取物包含现有技术中没有记载的具有抗菌活性的新型脂肽。更具体地，本发明提供衍生自类芽孢杆菌(优选类芽孢杆菌elgii)发酵提取物的级分的新型肽，所述新型肽具有抗菌活性且促进生物体(例如植物和动物)的生长。本发明还涉及所述提取物作为生长促进剂以及作为抗菌剂在供人类食用动物的治疗和预防的中的用途。
[0012]在第一个实施方案中，本发明包含获得含有至少一种以下所示化合物的提取物的
方法:
[0013]