专利名称：用于治疗及预防脑动脉阻塞的中药医药组成物的制作方法 至目前为止虽有些中药处方声明具有抗血小板凝集及延长凝血时间的药理活性，但没有一种中药处方在治疗脑动脉阻塞上具有显著疗效。
本发明目的之一是提出一种中药医药组成物。本发明另一目的提出一种具有抗血小板凝集活性的中药医药组成物。本发明另一目的是提出一种具有延长凝血时间活性的中药医药组成物。本发明另一目的是提出一种用于治疗及预防脑动脉阻塞的中药医药组成物。本发明另一目的同时也揭示一种使用中药材来制备用于治疗及预防脑动脉阻塞的医药的方法。依据本发明的一种中药医药组成物包含下列八种中药材中的至少六种人参、当归、黄芪、甘草、柴胡、黄连、天竹黄和黄芩。较佳的，其包含该八种中药材中的七种。更佳的，其包含该八种中药材。当该中药医药组成物包含该八种中药材中的六种时，不被包含的两种为柴胡及黄连。若只包含七种，则不被包含的为黄连。
本发明同时也揭示一种使用前述本发明的中药医药组成物来制备用于治疗及预防脑动脉阻塞的医药的方法。
依本发明的一较佳具体实施例所制备的一中药医药组成物被确定具有抗血小板凝集的药理活性，及延长凝血时间的药理活性。此中药医药组成物亦经动物实验证明对治疗及预防脑动脉阻塞具有疗效，而且安全性药理试验及亚急性毐性测试(28天)的数据也显示其无安全性的顾虑。
较佳的，该八种中药材为干燥的粉末。该八种中药材可从一般中药行取得，取得后被进一步泡制、烘焙、干燥及研磨即成为干燥的粉末。
本发明的中药医药组成物中的八种中药材的重量比，较佳的，为人参∶当归∶黄芪∶甘草∶柴胡∶黄连∶天竹黄∶黄芩＝140±10％∶166±10％∶180±10％∶67±10％∶140±10％120±10％∶120±10％∶67±10％，其中当该医药组成物包含该八种中药材中的六或七种时，不被包含于该医药组成物中的一或二种的用量为零。
适用于本发明的人参(Ginseng radix)包括(但不限于)东洋参(Panax ginseng C.A.Meyer)及西洋参(Panax quinquefoliumLinnaeus)，以前者为较佳。从中药行或贸易商取得的人参，先行以蒸笼蒸，以3斤净水配合1公斤米酒的比例，大火滚后微火蒸约1小时30分，待冷，晒干后切片。然后放入烘干机，以50度温度连续烘干13小时，再研磨成粉。1000公克东洋参于烘干后约剩930公克。
适用于本发明的当归(Angelica sinensis radix)为Angelicasinensis(Oliv.)Diels的根，从中药行或贸易商取得的未切片当归，先行快速喷洗，直到见水清澈，再以蒸馏水冲净。将20公斤当归放入蒸笼。锅内倒入3公斤的R.0.逆渗透水及米酒头1公斤和100公克香附。以大火沸腾后转小火，持续沸腾状达一小时，取出散置待冷却后切片。成片状的当归再放入自动烘干机，以摄氏55度烘烤10小时，再研磨成粉。1000公克的当归在烘干后约剩600公克。Levisticum officinale Koch及Angelica archangelica依美国专利4843067的教导应可被视为当归的替代物。
适用于本发明的黄芪(Astragali radix)包括(但不限于)膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge var.membranaceus)，蒙古黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge var.mongholicus(Bunge)Hsiao)及多序岩黄芪(Hedysarum polybotrysHand.-Mazz.)的根。从中药行或贸易商取得的黄芪洗净后切片状，置入烘干机，以50度温度连续烘干16小时，再研磨成粉。1000公克的黄芪于烘干后约剩650公克。
适用于本发明的甘草为Glycyrrhiza uralensis Fisch.，Glycyrrhiza glabra L.或Glycyrrhiza inflata Bat.的根茎，以Glycyrrhiza uralensis Fisch.为较佳。从中药行或贸易商取得的甘草洗净后切片，以50度烘干12小时，再研磨成粉。1000公克的甘草在烘干后约剩720公克。
适用于本发明的柴胡(Bupleurum radix)为竹叶柴胡(北柴胡)(Bupleurm chinensis DC)，狭叶柴胡(南柴胡)(Bupleurmscorzonerifolium Willd.)及其它同属近缘植物的根，以竹叶柴胡(北柴胡)为较佳。从中药行或贸易商取得的柴胡洗净、烘干12小时后，再研磨成粉。1000公克的柴胡在烘干后约剩710公克。
适用于本发明的黄连为家黄连(Coptis chinensis Franch.)，三角叶黄连(Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao)，云连(Coptisteetoides C.Y.Cheng)及其它同属近缘植物的根茎。从中药行或贸易商取得的黄连洗净后以50度烘干12小时，再研磨成粉。1000公克的黄连在烘干后约剩750公克。
适用于本发明的天竹黄(Bambusae concretio silicea)为禾本科植物淡竹(Phylllostachys nigra MUNRO var.henonis STAPF exRENDLE)及同属近缘植物，因病在节内生成块状物。从中药行或贸易商取得的天竹黄先洗净，浮水则良。以55度连续烘干18小时后，再研磨成粉。1000公克的天竹黄在烘干后约剩850公克。
适用于本发明的黄芩(Scutellariae radix)为Scutellariabaicalensis Georgi的根。从中药行或贸易商取得的黄芩洗净后，将10公斤黄芩放入蒸笼，锅内倒入R.O.逆渗透水3公斤及山茱萸100公克，以大火沸腾后转小火，持续沸腾状达一小时。取出放置冷却后切片。之后放入自动烘干机以50度烘烤11小时后，再研磨成粉。1000公克的黄芩在烘干后约剩700公克。

从贸易商购得的东洋参、当归、黄芪、甘草、柴胡、黄连、天竹黄和黄芩中药材，并分别经过基源鉴定所购得的东洋参为Panaxginseng C.A.Meyer、当归为Angelica sinensis(Oliv.)Diels、黄芪为Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.、甘草为Glycyrrhizauralensis Fisch.、柴胡为Bupleurum longesadiatum Turca.、黄连为Coptis chinensis Franch.、天竹黄为Bambusa textilisMcCluture；Schizostachyum chinense Rendle和黄芩为Scutellariabaicalensis Georgi。依照前述方法将此八种中药材加予泡制、烘焙、干燥及研磨成为通过网目10的粉末。
依人参∶当归∶黄耆∶甘草∶柴胡∶黄连∶天竹黄∶黄芩＝140∶166∶180∶67∶140∶120∶120∶67的重量比例混合成一粉末状医药组成物，并命名为BNG-1。
在一放大10倍立体显微镜的协助下，利用齿科钻孔器进行颅骨切除术，然后用精细的滑膜切除术骨钳扩大。中央脑动脉由内部颈动脉分支的基部处，以微剪器切断，而后将颞肌肌肉和腮腺接回。切口洒上一些康霉素后将头皮缝合，并以10％酮碘液(povidone iodinesolution)局部消毒。在手术期间，动物借助由配有直肠微变温度探针的同温加热系统保持正常体温。在此条件下，直肠的体温维持在生理学的限度范围内(37.5±1.0℃)。手术后1小时内，动物保持在婴儿保温箱(37.5±1.0℃)中，以从麻醉中恢复。在恢复之后，每5只小白鼠被收容在一个可自由摄食及饮水的笼子里，并保持在一干净的动物房中(23.0±10℃)。
BNG-1溶于作为媒介物的食盐水中，配成10毫升/公斤，控制以1000毫克/公斤(n＝5)的剂量，在MCAO之后立刻开始连续7日口服(PO)，媒介物-控制组(n＝5)处理方式相同，但仅服用食盐水。正反应控制参考药剂MK-801(RBI，Natick，MA01760-2447，美国)以食盐水溶解，配成5毫升/公斤，在MCAO之后的0、6、24、30、48和54个小时，以0.3毫克/公斤的剂量进行腹膜内注射。
在缺血伤害后的第八天，所有的动物都以断头术牺牲。他们的脑部被迅速地被取出，并立刻在-70℃的超低温冷冻库(NUAIRTM，NU-6511)里冻结。二十四小时之后， 以切片机(“SHANDON”Varistain24-4 Automatic Slide)制备完整脑冠状切片(30微米)。选择完整地包含12公厘长度栓塞区的每个第13个切片(如390微米部分)进行组织学检查。全部30个切片，用2％甲酚紫染色，以测量缺血的损害区。这部分借着影象分析仪进行定量。计算从每个动物而来的每个冠状切片的总缺血区(mm2)并以平均值±SEM表示。每个实验组的总栓塞体积(mm3)以mm2×特定长度(390微米)计算并以平均值±SEM表示。BNG-1和MK-801的处理效果为使用非成对学生氏t值试验法，与服用媒介物的控制组比较，当*P＜0.05时，被认为具显著差异。每只动物，在0分钟(给药前)和30分钟(给药后)都要纪录体温。以Tukey复变比较试验法比较给药前和给药后的体温。5.结论动物手术后连续7天服用剂量1000毫克/公斤的BNG-1，可有效减少(46.29％)小白鼠因中央脑动脉闭合造成的永久性脑局部缺血。在连续7日服药过程，测试动物没有毒性或致命性发生。体温也没有明显改变。MK-801明显减少(48.38％)脑局部缺血。
BNG-1，溶解于当作媒介物的食盐水，在MCAO之前7天和之后3天，分别给予每日1000毫克/公斤和500毫克/公斤的剂量口服(PO)。媒介物-控制组同样处理，但仅给予食盐水。正反应控制参考药剂MK-801在MCAO之后的0、6、24、30、48和54个小时，以0.3毫克/5毫升/公斤的剂量进行腹膜内注射。
在缺血伤害后的第四天，所有的动物都以断头术牺牲。依照实例2相同的步骤测定牠们脑部的总缺血面积。
依据所使用的实验条件，MCAO可具再现性的导致所影响的脑半球50％-60％的局部缺血。大体而言，损害区大都集中在不同的皮质区域(例如，前额、感觉与运动、听觉和枕骨的皮质)，且仅局限于对神经节基部成分的伤害。相对于媒介物-处理控制组，在0.3毫克/公斤IP×6的剂量，MK-801明显地减少总栓塞体积66.30±10.50％。在1000毫克/公斤PO×10的剂量，BNG-1明显地减少栓塞体积的44.09±9.01％，而500毫克/公斤×10剂量，仅不明显地减少栓塞体积14.17±19.43％。没有化合物会引起身体体温明显的改变。BNG-1的安全性药理试验结果如下所示
安全性药理试验(Safety Pharmacology?)

由结果显示，对大白鼠口服投予1公克/公斤的BNG-1，应无安全性的顾虑。BNG-1的急性毒性测试口服投予雄、雌各六只大白鼠单剂量(5公克/公斤)的BNG-1浓稠悬浮液，对照组投予不含试验物质的对照溶液(1％CMC溶液)，测定BNG-1对大白鼠之急性毒性。每只大白鼠分别给予两次(间隔2小时)之BNG-1或对照溶液后，进行临床观察十四天。结果显示大白鼠均无任何临床毒性症状显现，且解剖大白鼠后，以肉眼检查器官、组织，亦未观察到任何病变。由此可知，BNG-1在每公斤5公克的剂量下，并未造成大白鼠任何可观察到的急性毒性。因此，每公斤5公克可作为BNG-1的「不造成任何影响的剂量」(No observable effect level，NOEL)，并可归类为「实际无毒性」(practically nontoxic)的物质。
综合上述的试验结果，显示BNG-1在每公斤1公克的剂量下对小白鼠具有预防及治疗脑动胍阻塞功能；且在该剂量下，应无安全性的顾虑，且不具急性毒性。此结果证明BNG-1对人类脑动胍阻塞预防及治疗极具潜力。
同时亦发现BNG-1经由离体外给药途径在1毫克/毫升剂量下对松弛天竺鼠气管自发性的张力具有67％松弛的活性，及对天竺鼠在心房正向收缩力具有31％增强的活性。
虽然本发明已参照特定具体实施例而被描述于上，然而本发明并不受限于所示的细节。在本案的申请专利范围内仍能作出未偏离本发明精神的许多修改。


本发明是关于中药医药组成物，其具有抗血小板凝集及延长凝血时间的功效，并且可用于治疗及预防脑动脉阻塞。依据本发明的一种中药医药组成物包含下列八种中药材中的至少六种人参、当归、黄芪、甘草、柴胡、黄连、天竹黄和黄芩。