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一种乙酰甲喹人工抗原及其制备的抗体制作方法

  • 专利名称
    一种乙酰甲喹人工抗原及其制备的抗体制作方法
  • 发明者
    丁双阳, 史为民, 吴聪明, 夏曦, 张素霞, 江海洋, 沈建忠, 王战辉
  • 公开日
    2012年8月1日
  • 申请日期
    2012年2月22日
  • 优先权日
    2012年2月22日
  • 申请人
    中国农业大学
  • 文档编号
    C12R1/91GK102617493SQ20121004221
  • 关键字
  • 权利要求
    1.式⑴所示化合物;2.权利要求I所述化合物的制备方法,包括如下步骤将乙酰甲喹和羧甲基羟胺反应,获得所述化合物3.权利要求I所述化合物与载体蛋白的偶联物4.如权利要求3所述的偶联物,其特征在于所述载体蛋白为牛血清白蛋白或卵清白蛋白5.权利要求3或4所述偶联物在制备喹噁啉类化合物特异性抗体中的应用6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述抗体为单克隆抗体或多克隆抗体7.以权利要求3或4所述偶联物为免疫原制备得到的单克隆抗体8.抗乙酰甲喹单克隆抗体杂交瘤细胞1A10,它的保藏编号为CGMCCNo. 57809.权利要求8所述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体10.权利要求3或4所述偶联物,或,权利要求7或9所述单克隆抗体在检测喹噁啉类化合物中的应用
  • 技术领域
    本发明涉及一种乙酰甲喹人工抗原及其制备的抗体
  • 背景技术
  • 专利详情
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  • 权力要求
  • 说明书
  • 法律状态
专利名称:一种乙酰甲喹人工抗原及其制备的抗体的制作方法喹噁啉类化合物是一类分子中均有喹噁啉-1,4- 二氧化物母核结构人工合成的抗菌药,主要成员有喹乙醇(olaquindox, OLA)、卡巴氧(cabadox, CBX)、乙酰甲喹(mequindox,MEQ)和喹烯酮(quinocetone,QCT)等。由于能够抑制多种革兰 氏阳性菌和阴性菌,并且对畜、禽、鱼类等具有明显的促生长作用,喹噁啉类化合物被广泛作为饲料添加剂应用。随着研究的深入,发现喹噁啉类化合物有明显的毒副作用,卡巴氧具有遗传毒性和致癌嫌疑,喹乙醇有强的蓄积毒性和致突变性,因此国际上有关喹噁啉类化合物的最高残留限量也有着非常严格的规定,我国出台了相应法规来规范化喹噁啉类化合物的使用。我国禁止将卡巴氧作为饲料添加剂,喹乙醇只能用于仔猪的药物饲料添加剂、严禁用于养禽生产。另外,国内外学者的研究及生产实践表明乙酰甲喹毒性偏大、也不适于用作禽药物饲料添加剂,喹烯酮虽然防病做生长效果好、无毒副作用,但是一种基因毒剂和生殖诱变齐U,有致突变、致畸和致癌性。目前,对于饲料中喹噁啉类化合物残留的检测方法研究较少。因此建立一个灵敏、快速、操作简单,适合大量样本筛查的喹噁啉类化合物检测方法是具有重要的经济意义和社会意义。
本发明的目的是提供一种乙酰甲喹人工抗原及其制备的抗体。本发明提供了一种化合物,即式(I)所示化合物。式(I)所示化合物为将乙酰甲喹进行结构改造得到的化合物,既最大程度保留了乙酰甲喹的特征结构,又具有可以与载体蛋白发生偶联的活性基团。本发明还保护式(I)所示化合物的制备方法,包括如下步骤将乙酰甲喹和羧甲基羟胺反应,获得所述化合物。所述反应具体可在无水丙酮与N,N_ 二甲基甲酰胺的混合溶剂(无水丙酮与N,N-二甲基甲酰胺的体积比具体可为I : I)中进行。所述乙酰甲喹和所述羧甲基羟胺的摩尔比具体可为I : 1.5。本发明还保护一种乙酰甲喹人工抗原,为将式(I)所示化合物与载体蛋白偶联得到的偶联物。所述载体蛋白为牛血清白蛋白或卵清白蛋白。式(I)所示化合物与载体蛋白的偶联比具体可为(8-10) I。所述偶联比指的是摩尔比。式(I)所示化合物与所述载体蛋白具体可通过活性酯法偶联。所述乙酰甲喹人工抗原如式(II)所示。所述乙酰甲喹人工抗原可以作为免疫原也可以作为包被原。将所述乙酰甲喹人工抗原免疫动物,可获得高特异性的单克隆抗体和多克隆抗体,方法简便、易行。将所述乙酰甲喹人工抗原包被酶标板,也可以用于喹噁啉类化合物抗血清的检测。包被原与免疫原结构上的差异可以进一步提高检测的灵敏度和特异性。本发明公开了一种乙酰甲喹人工抗原及其制备的抗体。本发明提供了一种化合物,即式(I)所示化合物。式(I)所示化合物为将乙酰甲喹进行结构改造得到的化合物,既最大程度保留了乙酰甲喹的特征结构,又具有可以与载体蛋白发生偶联的活性基团。本发明还保护一种乙酰甲喹人工抗原,为将式(I)所示化合物与载体蛋白欧联得到的偶联物。将所述乙酰甲喹人工抗原免疫动物,可获得高特异性的单克隆抗体和多克隆抗体,方法简便、易行。所述人工抗原可用于检测喹噁啉类化合物。所述抗体可用于检测喹噁啉类化合物。式(I)

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