甘草液体发酵物、含发酵物的化妆品及其制备方法和用途 [0002] 甘草是传统中医药学中一味补益类中草药，药用的甘草为豆科甘草属的根及根 茎。中国药典记载甘草具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛，调和诸药等功效。甘 草主要化学成分为黄酮类、次酸类、甜素类等；西医药理发现，甘草剂有抗炎和抗变态反应 的功能，因此在西医临床上主要作为缓和剂。化妆品中，甘草所含黄酮类成分具有美白和防 晒等功效。 [0003] 乳酸菌是一种存在于人类体内的益生菌，是发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽 孢、革兰氏染色阳性细菌的总称，绝大部分都是人体内必不可少且具有重要生理功能的菌 群，广泛存在于人体的肠道中。乳酸菌发酵的主要产物为乳酸，乳酸是酸性的，因此可以应 用于化妆品行业中用于Ph值的调节；同时，由于乳酸是皮肤中天然保湿因子NMF的组成部 分，因此，保湿是乳酸在化妆品中的一项重要用途。一般中和后的乳酸作为保湿成分使用。 [0004] 但甘草和乳酸菌均未见有抗炎、抗过敏、止痒等功效的报道。
[0005] 本发明所解决的技术问题是以"生物转化理论"为指导，采用甘草与乳酸菌的液体 发酵体系提供一种具有抗炎、抗过敏、止痒功效的产品。
[0006] 本发明所解决的第一个技术问题是提供甘草与乳酸菌的液体发酵所得的甘草液 体发酵物。
[0007] 本发明甘草液体发酵物，以甘草和水组成培养基，然后接种乳酸菌发酵所得的液 体发酵混合物；其中，培养基以生药重量计，甘草重量百分比为5?20% ;乳酸菌的接种量 为 I. 0 X IO4?I. 0 X 10 8cfu/ml。
[0008] 上述技术方案中，培养基以生药重量计，优选甘草重量百分比为10 %。甘草为原生 药材或甘草饮片。
[0009] 上述技术方案中，乳酸菌的接种量优选为I. OX 106cfu/ml。
[0010] 本发明所解决的第二个技术问题是提供本发明甘草液体发酵物的制备方法，包括 以下步骤：
[0011] A、以甘草和水组成培养基，以生药重量计，甘草重量百分比为5?20% ;
[0012] 8、接种乳酸菌，接种量为1.0104?1.0108。包/1111 ;
[0013] C、于30°C?40°C和0?200rpm的条件下培养1?5天，即得甘草液体发酵物。
[0014] 上述技术方案中，培养基以生药重量计，优选甘草重量百分比为10%。
[0015] 上述技术方案中，乳酸菌的接种量优选为I. 0X106cfu/ml。
[0016] 上述技术方案中，于37°C和50rpm的条件下培养5天。
[0017] 上述技术方案中，接种采用的乳酸菌菌种可以选择使用目前由各种常用方式培养 得到的菌种，如用于制造泡菜、酸奶的乳酸菌种等。
[0018] 其中，一种优选的菌种来源和培养方式为：
[0019] A、在固体培养基中培养乳酸菌菌种；
[0020] B、将步骤A培养的乳酸菌接种入乳酸菌液体培养基中；
[0021] C、在30°C?40°C和0?200rpm的条件下培养1?5天所得乳酸菌菌种。
[0022] 上述技术方案中，步骤B所述乳酸菌液体培养基中含有乳酸菌常规发酵的碳源、 氮源、微量元素和/或无机盐成分，其中：碳源成分为液体培养基总重量的〇. 5 %?10%，氮 源成分为〇. 5 %?3 %，微量元素和/或无机盐成分为0. 01 %?1 %，其余为水，灭菌即可。 其中所说的碳源、氮源都可以选择目前通用培养基中的常用成分，如葡萄糖、蔗糖、淀粉、牛 肉膏、酵母膏等常规培养基组成成分。进一步优选所述灭菌为经115?121°C灭菌15? 30min〇
[0023] 上述技术方案中，步骤A所述固体培养基是由步骤B中所述的乳酸菌液体培养基 IOOOml和琼脂10?20g组成，按同样方式作常规灭菌处理。培养条件为：在30-40°C和 0-200rpm的条件下培养1-3天；优选培养条件为：在37°C和50rpm的条件下培养1天。
[0024] 本发明所解决的第三个技术问题是提供本发明甘草液体发酵物的用途，具体表现 为本发明甘草液体发酵物具有明显的抗炎、抗过敏、止痒作用。
[0025] 本发明所解决的第四个技术问题是提供采用本发明甘草液体发酵物或其提取物 为活性成分，加入化妆品上可接受的辅料制备而成的化妆品。
[0026] 本发明制备的化妆品可为爽肤水、乳液、精华液、面霜、面膜、眼膜等常见的化妆 品。
[0027] 采用本发明甘草液体发酵物用于肌肤的护理，较单独采用甘草提取物或乳酸菌发 酵物能够明显对抗二甲苯所致小鼠耳肿胀，抑制组胺所致小鼠皮肤毛细血管扩张，具有明 显的抗炎作用；能够降低DNCB诱导的小鼠迟发型超敏反应（DTH)，具有明显的抗过敏作用； 能够明显减少4-氨基吡啶诱导的小鼠皮肤过敏性瘙痒的舔体次数，具有明显的止痒作用； 具有明确的抗炎、抗过敏、止痒功效。本发明甘草液体发酵物按常规方法制备的化妆品也具 有明确的抗炎、抗过敏、止痒功效。


[0028] 以下通过实施例形式的，对本发明的上述内容再作进一步的详细说 明，说明但不限制本发明。
[0029] 实施例1液体培养基对乳酸菌的生长适应性影响试验
[0030] (1)按L 0X105cfu/ml接种量将乳酸菌分别接种于含有5· 0%、10· 0%、15· 0%、 20. 0%甘草（均以生药重量计，以下同）的液体培养基中，于37°C和50rpm条件下培养3? 5天，采用平板涂布法检测发酵液中的乳酸菌菌落数。结果如表1所示。
[0031] 表1结果显示，当甘草含量为10. 0%时，乳酸菌的长势佳，且基本一致；当培养基 中甘草的浓度大于10%以后，乳酸菌的生长受到抑制。因此在液体发酵基中，甘草最适含量 为 10% 〇
[0032] 表1甘草含量和发酵时间对乳酸菌培养的影响
[0033]