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来自于稀脉萍的新的脂加氧酶制作方法

  • 专利名称
    来自于稀脉萍的新的脂加氧酶制作方法
  • 发明者
    横山峰幸, 高木一辉, 上地沙理
  • 公开日
    2012年12月5日
  • 申请日期
    2011年3月11日
  • 优先权日
    2010年3月11日
  • 申请人
    株式会社资生堂
  • 文档编号
    C12N1/15GK102812125SQ20118001336
  • 关键字
  • 权利要求
    1.一种基因,其包含选自以下的(a) (e)的DNA (a)包含序列号I所不的喊基序列的DNA; (b)编码包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质的DNA; (c)编码包含与序列号2所示的氨基酸序列具有至少99%的同一性的序列,且具有9位生成物特异性脂加氧酶活性的蛋白质的DNA ; (d)编码包含在序列号2所示的氨基酸序列中缺失、取代或添加了I或数个氨基酸的氨基酸序列,且具有9位生成物特异性脂加氧酶活性的蛋白质的DNA ;及 (e)与含有包含序列号I所不的喊基序列的DNA的互补喊基序列的DNA在闻严格的条件下杂交,且编码具有9位生成物特异性脂加氧酶活性的蛋白质的DNA2.一种表达载体,其是使权利要求I所述的DNA与载体片段结合而成的3.一种转化体,其是将权利要求2所述的表达载体导入成为宿主的微生物、动物细胞或植物细胞而成的4.一种9位生成物特异性脂加氧酶的制造方法,其特征在于,培养权利要求3所述的转化体5.一种蛋白质,其是选自以下的(a) ⑷的蛋白质 (a)包含序列号2所不的氣基酸序列的蛋白质; (b)包含在序列号2所示的氨基酸序列中缺失、取代或添加了I或数个氨基酸的氨基酸序列,且具有9位生成物特异性脂加氧酶活性的蛋白质; (c)包含与序列号2所示的氨基酸序列具有至少99%的同一性的序列,且具有9位生成物特异性脂加氧酶活性的蛋白质;及 (d)由与含有包含序列号I所示的碱基序列的DNA的互补碱基序列的DNA在高严格的条件下杂交的多核苷酸编码,且具有9位生成物特异性脂加氧酶活性的蛋白质
  • 技术领域
    本发明涉及来自于稀脉萍的新的高活性型9位生成物特异性脂加氧酶基因、使用该脂加氧酶基因的高活性型9位生成物特异性脂加氧酶的制造方法、以及该脂加氧酶基因的表达产物
  • 背景技术
  • 专利详情
  • 全文pdf
  • 权力要求
  • 说明书
  • 法律状态
专利名称:来自于稀脉萍的新的脂加氧酶的制作方法脂加氧酶是具有在亚油酸、亚麻酸(碳数18)或花生四烯酸(碳数20)等的具有1,4-戊二烯结构的不饱和脂肪酸中直接导入分子状氧,生成氢过氧基(-00H)的活性的酶,已知存在于植物以及动物、霉菌、酵母等真核微生物等中(内山充等,過酸化脂質i生体(过氧化脂质与生物体),23-26,1985,学会出版力> 夕一)。在动物中,该酶参与由花生四烯酸生成前列腺素的过程,因此研究进展最多(山本尚三,蛋白質核酸酵素(蛋白质核酸酶),44,1132-1138,1999)。对于植物的脂加氧酶,以α -亚麻酸、亚油酸等的碳数18的不 饱和脂肪酸为底物,已知可分类为在9位与13位的2个部位显示特异性的酶(例如,内山充等,過酸化脂質i生体(过氧化脂质与生物体),23-26,1985,学会出版七 > 夕一 ;Grechkin等,Eur. J. Biochem. , 199,451-457,1991)。9位及13位特异的脂加氧酶,已知存在于马铃薯、大豆、西红柿、豌豆、大麦、小麦、玉米、黄瓜等中,还分离出了几种cDNA。但是,主要研究的是与作为植物激素受到关注的茉莉酸的代谢途径相关的13位生成物特异性脂加氧酶,对于9位生成物特异性脂加氧酶的研究比较少。作为试剂,来自于大豆的13位生成物特异性脂加氧酶由 I社市售( I社,制品号L7395),9位生成物特异性脂加氧酶没有市隹口 ο本发明者们,在本申请前,发现具有花芽形成促进作用、植物激活作用及包含它们的植物生长调节作用的具有以下的结构的α-酮醇不饱和脂肪酸(以下,称为K0DA),/WWYYVWxc00HOOH已知KODA是通过9位生成物特异性脂加氧酶及丙二烯氧化物合酶由α-亚麻酸衍生的(日本特开平9-295908号公报、日本特开平11-29410号公报、日本特开2001-131006号公报及日本特开2009-17829号公报)。本发明提供来自于稀脉萍SH株及稀脉萍441株的具有9位生成物特异性的高活性型的新的脂加氧酶cDNA,以及由该cDNA编码的蛋白质。



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