一种消灭核酸污染的方法

陈 光

2003年5月7日

2002年9月26日

2002年9月26日

陈 光

A61L2/20GK1415381SQ0213304

核酸 污染 消灭

1.一种消灭核酸污染的方法其特征是利用挥发性酸(盐酸、硝酸、醋酸等)熏蒸实验仪器、器皿、耗材、实验场地等，彻底消灭污染的DNA和RNA2.根据权利要求1所述熏蒸之后利用洁净空气或氮气将挥发性酸带走3.根据权利要求2所述的带有挥发性酸的空气或氮气经除酸处理后循环使用或经彻底除酸后放空

本发明涉及分子生物学领域，具体是一种核酸污染的防范措施PCR(polymerase chain reaction，聚合酶链反应)及其衍生的RT-PCR(reverse transcription-PCR，逆转录聚合酶链反应)是极其灵敏的分子生物学实验手段理论上可以检测到单个的核酸分子，而且成本低廉，其优越性不言而寓但与此同时，仪器、器皿、耗材、实验场地等存在的极微小的核酸污染都可能造成假阳性结果而PCR、RT-PCR等本身又依赖于对目的核酸片段进行数十亿倍扩增，这进一步增加了污染的可能性现有消除核酸污染的方法主要是紫外线照射法、酸浸泡法和大量清水无限稀释法紫外线照射法的缺点是紫外线直线传播注定了会留下大量死角酸浸泡法的缺点是对金属腐蚀严重；结束时必须辅以水洗，而水洗可能带来新的核酸污染；废水排放后会污染环境；整个过程难以实现自动化大量清水无限稀释法的缺点是浪费水资源；且难以保证彻底清除核酸污染目前，我国禁止将PCR方法用于临床诊断，污染问题难以解决是主要原因之一本发明的目的在于有效消灭核酸污染，从而保证PCR、RT-PCR、原位杂交等分子生物学实验方法的可靠性，为将来批准PCR的临床应用打下基础本发明的目的是采用下述技术方案来实现的首先，利用挥发性酸(盐酸、硝酸、醋酸等)的蒸气在常压、室温或稍加热(≤100℃)条件下熏蒸实验仪器、器皿、耗材、实验场地等，彻底消灭污染的DNA和RNA本人通过实验发现常压、室温下37.5％盐酸的饱合蒸气作用15秒或65％硝酸的饱合蒸气作用30秒或冰醋酸的饱和蒸气作用4小时即可彻底消灭污染的DNA和RNA然后，吹入经紫外线照射并过滤获得的洁净空气或氮气彻底带走酸熏蒸后实验仪器、器皿、耗材、实验场地残留的挥发性酸及其蒸气本步骤亦可在常压、室温或稍加热(≤100℃)条件下进行最后，利用水吸收法或碱吸收法(碱石灰等)处理带酸的空气，使其重复利用，或多次除酸，保证无酸后放空经以上处理后的实验仪器、器皿、耗材、实验场地等可直接投入使用，无须进一步水洗如有必要水洗时，可先进行水洗然后利用本发明的步骤消灭核酸污染本发明的优点在于1.酸可以到达每一个角落，不留死角2.消灭核酸污染效率高3.适用范围广，对于被熏蒸的物品耐高温性、耐腐蚀性等要求不高4.适用于大型仪器、器皿、耗材、房间等核酸污染的清除，也适用于微型的生物芯片5.步骤简单、避免二次核酸污染6.易于实现自动化7.成本低廉