一种含穿心莲和β-内酰胺类抗菌药的畜禽用复方药物的制作方法【技术领域】，尤其涉及一种含穿心莲和β -内酰胺类抗菌药的畜禽用复方药物。[0002]大肠杆菌是常见的条件致病菌，也是常发的一种疾病，它可原发引起鸡急性败血症、腹膜炎、肝炎、肺炎、肠炎等多部位严重感染，亦可继发或混发于病毒病，给养殖业造成巨大的经济损失。阿莫西林、氨苄西林、头孢噻呋、头孢曲松、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦等内酰胺环类抗生素是防治该病的常用的重要药物，随着养殖规模集约化程度愈来愈大，用药愈来愈泛滥，其耐药菌株愈来愈多，关于大肠杆菌耐药性的报道也较多。研究证实，耐药的主要机制之一是产生内酰胺酶，尤其是超广谱内酰胺酶(Extended-Spectrum^ -lactamase, ESBLs),该酶能较强和快速地水解β-内酰胺环,使这类抗生素丧失抗菌活性。ESBLs是β -内酰胺酶的最主要酶型，它不仅对头孢三代和氨曲南耐药，而且对氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类呈交叉耐药，仅对碳青霉烯类、头霉烯类药物敏感。许多文献已经报道大肠杆菌的多重耐药性与产生ESBLs有密切关系，国内外对之较为关注。发明人最近开展了食品动物源致病菌ESBLs的检测、提取、酶对抗生素的水解率及舒巴坦、他唑巴坦以及中药的抑酶保护作用等研究，对部分ESBLs大肠杆菌的药敏试验表明，其多重耐药率明显高于非ESBLs菌株。另外，结果还表明产ESBLs菌株不仅对头孢噻呋等第三代头孢菌素严重耐药，而且亦对氟喹诺酮类、氨基糖苷类和磺胺类、磷霉素等多种抗菌药耐药,呈严重的多重耐药。发明人在产ESBLs菌株中分离到耐磷霉素产fosA3耐药基因的大肠杆菌，更加强了细菌的耐药性。大肠杆菌的耐药性造成养殖户用药成本增加，治疗疗程延长,畜禽死亡率增加,给生产带来较大经济损失,并且增加畜禽药物残留风险。因此，实际生产中亟需一种对无论是否耐药的大肠杆菌都能有较好治疗作用的药物，并能缩短治疗疗程，减少死亡率，降低经济损失且降低药物残留，为养殖户创造更高的经济效益，也保障人类的健康安全。
[0003]本发明要解决的技术问题是提供一种含穿心莲和β -内酰胺类抗菌药的畜禽用复方药物，它能够较快地杀死细菌，克服抗菌药治疗由于耐药性问题造成的疗效差、用量大、残留高和成本高的缺陷，避免了单纯中药杀菌谱窄、杀菌慢的问题。[0004]为解决以上技术问题，本发明采用以下技术方案:一种含穿心莲和内酰胺类抗菌药的畜禽用复方药物，由以下重量份的原料组成:β -内酰胺类抗菌药3-30份，穿心莲5-200 份。[0005]所述的β -内酰胺类抗菌药为阿莫西林、头孢曲松钠或头孢噻呋钠。[0006]进一步地，所述的复方药物由以下重量份的原料组成:阿莫西林3-20份和穿心莲
40-180份，或头孢噻呋钠3-25份和穿心莲30-190份。[0007]所述的复方药物制备成散剂、片剂、口服液或颗粒剂。
[0008]所述的复方药物的制备方法为:将穿心莲粉碎过60目筛，再与粉末状的抗菌药混匀，按常规方法制备成散剂、片剂、口服液或颗粒剂。
[0009]针对目前畜禽大肠杆菌感染存在的耐药性问题，发明人利用广西特色中药穿心莲与抗菌药组成复方药物。研究证明，抗菌药中加入穿心莲后，能够逆转细菌对抗菌药的耐药性，从而提高抗菌药的治疗效果。按常规方法将该复方药物制成散剂、片剂、口服液或颗粒剂，按照0.l-7g主药/kg饲料的添加量添加到畜禽饲料中进行饲喂，可大幅降低用药成本和药物残留，为养殖户创造更高的经济效益，同时也确保了食品安全。

[0010]一、穿心莲对抗菌药的耐药逆转作用研究
[0011]抗菌药本身具有治疗大肠杆菌的效果，但由于产ESBLs耐药基因的大肠杆菌具有较强的耐药性，致使抗菌药在正常的使用剂量情况下并未表现出较好的治疗效果。
[0012]为了验证穿心莲对抗菌药的耐药逆转作用，在96孔板上采用微量试管二倍稀释法，先测定了抗菌药对产ESBLs和fosA3耐药基因的大肠杆菌株的最小抑菌浓度和穿心莲对产ESBLs和fosA3耐药基因大肠杆菌株的亚抑菌浓度，然后在培养基中加入亚抑菌浓度的穿心莲再次使用微量试管二倍稀释法培养测定抗菌药的最小抑菌浓度；利用连续传代法在加有同样亚抑菌浓度穿心莲和同样浓度抗菌药的培养基中对产ESBLs和fosA3耐药基因大肠杆菌株进行传代培养，直至观测到的抗菌药最小抑菌浓度与传代前相比变小4倍以上，即可判断为穿心莲对抗菌药具有耐药逆转作用。试验结果统计如表1所示:
[0013]表1亚抑菌浓度(0.25g/mL)穿心莲传代引起产ESBLs和fosA3大肠杆菌西药MIC的变化(P g/mL)。
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