专利名称：一种复合乳酸菌发酵果茶的制备方法随着现代生活节奏的加快、工作压力的加大，人类免疫系统功能显著降低，导致各类疾病的发病率呈上升趋势。通过提高机体免疫力来降低疾病的发病率，是预防和治疗疾病的有效途径之一。乳酸菌胞外多糖是乳酸菌在生长代谢过程中分泌到细胞壁外常渗于培养基的一类糖类化合物，有的依附于微生物细胞壁形成荚膜，称为荚膜多糖；有的进入培养基形成粘液，称为粘液多糖，它们都是微生物适应环境的产物。果茶是人们日常经常饮用的饮料之一，大都以各种蔬菜水果为原料，经过合理配伍、打浆、稳定剂调整状态、酸味剂和甜味剂调整口味后而制成，虽然具有一定的营养价值但缺乏保健功能。国内外的科技工作者对乳酸菌的保健作用的研究表明，乳酸菌的代谢产物可以调节胃肠道菌群平衡，增强机体免疫力，抑制肿瘤，降低血清胆固醇，促进人体消化等多项生理功能，这些研究成果为如何充分利用乳酸菌的保健功能提供了理论依据。本发明提供了一种以苹果、山楂、胡萝卜混合浆料为发酵底物，接种直投式复合乳酸菌发酵剂，制备复合乳酸菌发酵果茶的制备方法。
本发明目的在于提供一种以苹果、山楂、胡萝卜为原料，采用复合乳酸菌发酵技术，制备复合乳酸菌发酵果茶的制备方法。本发明的目的是这样实现的本发明中所涉及的百分比除另有注明之外为质量比，本发明的产品采用这样的方法来制备的1.发酵菌株的选择及培养基的制备A 菌-乳酸乳球菌乳月旨亚种 CICC 20408，Lactococcus lactis subsp.cremoriso培养基为酵母浸膏7. 5克，蛋白胨7. 5克，葡萄糖10克，磷酸二氢钾2克，番茄汁 100毫升，吐温80 0. 5毫升，水900毫升，ρΗ7· 0。B 菌-副干酪乳杆菌 CICC 20246，Lactobacillus paracasei。C 菌-短乳杆菌 CICC 6239，Lactobacillus brevis。D 菌-嗜酸乳杆菌 CICC 22150，Lactobacillus acidophilus。B菌、C菌、D菌培养基均为酪蛋白胨10. 0g，牛肉膏10. 0g，酵母粉5. Og,葡萄糖 5. 0g，乙酸钠 5.0g，柠檬酸二胺 2.0g，Tween 80 1.0g,K2HP04 2. 0g，MgS04. 7H20 0. 2g, MnSO4. H2O 0. 05g, CaCO3 20. Og,蒸馏水 1. 0L, ρΗ6· 8。2.发酵菌种的制备过程2.1冻干菌粉末的活化分别量取0. 9%的生理盐水IOml于4只试管内，经121 °C灭菌20分钟冷却至30°C， 将4株乳酸菌安瓶内的冻干菌粉末在无菌状态下全部倒入0. 9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在30°C恒温箱中静止活化30分钟，备用。2. 2发酵菌种扩大培养2. 2. 1 一级发酵种子的制备分别量取4株发酵菌培养基各200ml于4只500ml三角瓶内，121°C灭菌20分钟冷却至30°C，按培养基体积的10%接种2. 1步骤中已经活化的菌种，在30°C静止培养18小时，作为一级发酵种子。2. 2. 2生产发酵剂的制备分别向4株发酵菌培养基中加入3%的液态甘油、2%低聚果糖、3%蔗糖，121°C灭菌20分钟冷却至30°C，分别按5%体积比例接种一级发酵种子，30°C静止培养18小时，分别检测活菌数，各生产发酵剂活菌数> IO9个/ml，视同为发酵成熟，如果活菌数< IO9个/ ml，继续培养，直至达到IO9个/ml。2. 3粉末冻干菌种的制备将成熟的生产发酵剂直投菌种在无菌条件下导入玻璃安瓶中，液面高度低于lcm， 加盖瓶塞后放入-30°C冰柜速冻，冻结后将玻璃安瓶用托盘乘装，放入冻干机进行冷冻干O2. 4直投式发酵剂的复配按冻干菌粉末重量，取A菌粉末3-5份，B菌粉末1_3份，C菌粉末2_4份，D菌粉末2-4份充分混勻后真空包装即可用于苹果、山楂、胡萝卜果茶的发酵，加菌量按投料重量的0. 012%添加。需要进一步说明的是本发明中选用的乳酸菌购于中国工业微生物菌种保存中心，这些乳酸菌的活化、冻干方法不仅仅限于本发明所述的具体方法，培养基的成分也不限于此，其它常规技术和方法都是可以的，只要可以提高菌种的活力、并将其制备成冻干粉状而方便使用即可。3.苹果、山楂、胡萝卜果茶的制备过程3. 1 配料苹果果肉7%、山楂果肉10%、胡萝卜8%、白砂糖6.5%、低聚果糖2.5%、饮用水 66%。3. 2工艺流程配料一胶体磨粉浆一高温灭菌一冷却一接种一保温静止发酵一均质一无菌灌装 —成品3. 3操作要点(1)配料选择新鲜的苹果、山楂、胡萝卜，将苹果、山楂去核；(2)胶体磨粉浆将低聚果糖和蔗糖混于配料水中，边加水边将物料投入胶体磨回流研磨成浆；(3)高温灭菌121°C、20分钟灭菌，然后冷却至30°C ；(4)接种按投料量重量的0. 012%接种直投式发酵剂；(5)保温静止发酵30°C静止发酵6小时；(6)均质15-20Mpa条件下均质；(7)灌装采用无菌冷灌装。4.同类产品质量分析对比本发明专利产品与市售同类产品进行对比分析，结果如下表

本发明提供了一种复合乳酸菌发酵果茶的制备方法。首先制备乳酸乳球菌乳脂亚种、副干酪乳杆菌、短乳杆菌和嗜酸乳杆菌的冻干菌粉，将4株菌冻干粉按比例混合后作为生产发酵剂直投菌。将苹果果肉、山楂果肉、胡萝卜、饮用水、蔗糖和低聚果糖混合后用胶体磨研磨，然后接种生产发酵剂直投菌，保温发酵6小时，进行无菌冷灌装，制得复合乳酸菌发酵果茶。