专利名称：：用于鉴定胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的方法：单胃动物消费的饲料(包括任何饲料添加物)在胃中经受极酸性(pH2-3)环境以及酶降解。在这种严苛的低PH环境之后是小肠中更中性的环境(pH6-7)以及另外的消化酶(胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶)的降解。家禽和猪是杂食性的，从而可能通过消费一系列种子、根、无机材料和昆虫来满足它们的营养需求。然而，为了满足消费者对‘素食动物生产’的偏好，以及使与农场动物的工业生产相关的饲料成本降到最低，给予这些动物的饲料对消化系统(尤其是新生儿中)而言很少是最佳的。例如，一些谷类例如小麦和大麦的非淀粉多糖(NSP)级分可增加肠中的粘度，这可损害营养物的扩散。这种抗营养效应可以通过添加木聚糖酶和/或β-葡聚糖酶来降低，所述木聚糖酶和/或β_葡聚糖酶分别使半纤维素聚合物、木聚糖和β_葡聚糖成为片段。改善营养物的可利用率的另一个实例是植酸(植物磷酸盐储备)的降解，植酸不容易被动物所产生的酶水解。向饲料添加植酸酶可确保从植酸释放磷酸盐，从而可以部分或全部满足动物对磷酸盐的需要。因此，在一些情况下，外源酶可以弥补饲料的性质与动物自身的消化酶之间的差距。然而，研究已显示，尽管家禽和猪二者均能够有大量的内源性淀粉酶和蛋白酶合成，但仍可有机会通过使用外源酶增强动物消化且从而改善动物性能的机会。将在其他添加物中的α淀粉酶加入饲料中以改善饲料的淀粉利用。历史上，添加至饲料的具体淀粉酶的量已使用标准淀粉酶测定例如片剂测定和最近的KoneLab测定进行测定。WO2008/006881只涉及牛饲料且公开了细菌淀粉酶的使用。然而，牛胃肠道中的条件与单胃动物的明显不同，用于牛的饲料的组成与用于单胃动物的明显不同。例如，喂给反刍动物的大多数淀粉由通常具有5.0至5.5的pH的瘤胃中的微生物代谢，而在单胃动物中，内源性α淀粉酶将淀粉分解为葡萄糖。此外，负责蛋白质分解的胃蛋白酶首先在牛胃的第四个和最后一个区室中的皱胃中释放。US2008-0206401公开了包含热稳定性α淀粉酶的非常特定的干宠物食品。因此，有需要鉴定用于饲料中的α淀粉酶，其可提供改善的动物性能和/或允许α淀粉酶以减少的量使用，而对动物性能无有害影响。
本发明基于本发明人令人惊讶的发现:具有胃蛋白酶耐受性的α淀粉酶在饲料中例如在用于单胃动物的饲料中是特别有用的，因为它们可导致改善的动物性能和/或允许α淀粉酶以减少的量使用。胃蛋白酶是由动物在消化系统的第一个部分中分泌的消化率蛋白酶。胃蛋白酶可降解蛋白质，这使得蛋白质可用作动物的营养物。外源酶(即添加至饲料中的酶)也是蛋白质，并且如果它们易于受胃蛋白酶降解，则它们会被降解。这在大多数情况下会破坏酶活性。不希望受任何理论束缚，本发明人假定胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可导致该酶在回肠中具有增加的活性，这使得淀粉代谢产物的摄取改善。此外，胃蛋白酶耐受性酶的活性增加可导致内源性α淀粉酶产生减少，从而增加饲料功效。根据本发明的广泛方面，提供鉴定用于饲料添加物的胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的方法，其包括:i)提供α淀粉酶；ii)将所述α淀粉酶与玉米基饲料和胃蛋白酶掺混，在pH3下温育，并与对照样品相比较分析所述α淀粉酶的α淀粉酶活性；其中所述对照样品的不同之处在于在PH3下温育过程中不存在胃蛋白酶；并且iii)选择在测定条件下基本上维持α淀粉酶活性的α淀粉酶。所谓“基本上维持α淀粉酶活性”，其意指当与在不存在胃蛋白酶的情况下的酶活性相比较时，接受本文详述的胃蛋白酶耐受性测定的α淀粉酶保留至少约75%酶活性，例如约75%-125%酶活性。因此，“基本上维持α淀粉酶活性”的α淀粉酶在玉米基饲料的存在下与至少9000U/ml胃蛋白酶一起在pH3下温育2小时后，与相同酶与玉米基饲料一起在相同PH(即pH3)下温育相同时间(即至少2小时)后相比较，保留至少约75%(例如75至125%)活性。所谓“胃蛋白酶耐受性α淀粉酶”，其意指当接受本文所详述的胃蛋白酶耐受性测定时，保留至少约75%(例如约75至125%)活性的α淀粉酶。不希望受理论束缚，本发明人已惊讶地发现，α淀粉酶的胃蛋白酶耐受性是获得在经过动物的胃肠道过程中基本上维持活性的α淀粉酶的关键。因此，与常规α淀粉酶相比胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可以更低的剂量使用，并且可以增加饲料的淀粉利用。在本发明的另一方面，提供制备单胃动物的饲料添加物的方法，其包括将胃蛋白酶耐受性α淀粉酶与至少一种选自如下的生理上可接受的载体掺混:麦芽糖糊精、石灰石(碳酸钙)、环糊精、小麦或小麦组分、蔗糖、淀粉、Na2SO4、滑石粉、PVA、山梨糖醇、苯甲酸盐、山梨酸盐、甘油、蔗糖、丙二醇、1，3-丙二醇、葡萄糖、对羟基苯甲酸酯、氯化钠、柠檬酸盐、乙酸盐、磷酸盐、钙、偏亚硫酸氢盐、甲酸盐以及它们的混合物。在本发明的另一个方面，提供单胃动物的饲料添加物，其包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶和至少一种选自如下的生理上可接受的载体:麦芽糖糊精、石灰石(碳酸钙)、环糊精、小麦或小麦组分、蔗糖、淀粉、Na2SO4、滑石粉、PVA、山梨糖醇、苯甲酸盐、山梨酸盐、甘油、蔗糖、丙二醇、1，3-丙二醇、葡萄糖、对羟基苯甲酸酯、氯化钠、柠檬酸盐、乙酸盐、磷酸盐、钙、偏亚硫酸氢盐、甲酸盐以及它们的混合物。在本发明的另一方面，提供包含胃蛋白酶耐受性木霉属(Trichoderma)(例如里氏木霉(Trichodermareesei))α淀粉酶的饲料添加物和/或饲料。本发明人已惊讶地发现，来自木霉属(例如里氏木霉)的α淀粉酶对于在饲料中使用是特别有效的，并且令人惊讶地是胃蛋白酶耐受性的。在进一步方面，本发明提供包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的家禽饲料添加物和/或饲料。根据本发明的另一个方面，提供:1)制备单胃动物的饲料的方法，其包括将本发明的饲料添加物与一种或多种饲料材料混合；和2)通过所述方法制备的饲料。本发明进一步提供包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的单胃动物饲料，其中所述饲料包含少于3000个单位的α淀粉酶/千克饲料，优选少于2800，或少于2600，或少于2400或少于2200或少于2100或少于2000个单位的α淀粉酶/千克饲料。应当理解，一淀粉酶单位是在pH6.5和37°C下每分钟从水不溶性交联淀粉聚合物底物释放Immol的糖苷键的酶量。在另一方面，本发明提供用于饲料添加物和/或饲料中的α淀粉酶，其中在100000U/ml胃蛋白酶的存在下温育后，所述α淀粉酶基本上维持α淀粉酶活性。胃蛋白酶单位在下面的文实施例中定义。本发明进一步提供:用于单胃动物的饲料添加物和/或饲料，其中所述饲料添加物和/或饲料包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶以改善动物性能和/或增加能量吸收/饲料功效；增加家禽和/或猪的增重的方法(其包括给所述家禽和/或猪饲喂养包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的饲料)和胃蛋白酶耐受性α淀粉酶减少动物中的内源性α淀粉酶的表达的用途，以及基本上如本文描述的方法、饲料添加物、饲料和用于饲料中的淀粉酶。在本发明的另一方面，提供包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的饲料添加物用于改善动物性能和/或增加能量吸收和/或饲料功效和/或用于改善饲料中的原材料消化率(例如营养物消化率，如淀粉消化率)和/或用于改善饲料转化率(FCR)和/或用于改善动物中的增重的用途。在本发明的又一个方面，提供包含饲料添加物组合物的预混物，其包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶和至少一种矿物质和/或至少一种维生素(或基本上由它们组成或由它们组成)。具体实施例方式在一个方面，本发明涉及鉴定用于饲料添加物中的胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的方法，其包括:i)提供α淀粉酶；ii)将所述α淀粉酶与玉米基饲料掺混，在pH3下温育，并与对照样品相比较分析所述α淀粉酶的α淀粉酶活性；其中所述对照样品的不同之处在于在PH3下温育过程中不存在胃蛋白酶；并且iii)选择在测定条件下基本上维持α淀粉酶活性的α淀粉酶。合适的是，步骤ii)中的胃蛋白酶水平是至少约9000U/ml、至少约10000U/ml、至少10500U/ml、至少11000U/ml、至少12000U/ml、至少13000U/ml、至少14000U/ml、至少15000U/ml、至少16000U/ml、至少17000U/ml、至少18000U/ml、至少19000U/ml、至少20000U/ml、至少21000U/ml、至少22000U/ml或至少23000U/ml胃蛋白酶。α淀粉酶可以与胃蛋白酶一起温育至少2小时、至少2.5小时、至少3小时或至少3.5小时。优选地，将淀粉酶与胃蛋白酶一起温育少于6小时。在一个实施方案中，将淀粉酶与胃蛋白酶一起温育约2至约6小时，优选约2至约4小时或约2小时。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以保留至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约97%、至少约98%、至少约99%的活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，α淀粉酶可以具有约80-120%、约85-115%、约90_110%、约95_105%、约96_104%、约97_103%、约98-102%或约99-101%的活性。与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以具有相同活性。在下文列出的本发明的实施方案中，合适的是α淀粉酶可以是如SEQIDNO:1中所示的α淀粉酶。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，如SEQIDNO:1中所示的α淀粉酶可以保留至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约97%、至少约98%、至少约99%活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，如SEQIDNO:1中所示的α淀粉酶可以具有约80_120%、约85_115%、约90-110%、约95-105%、约96-104%、约97-103%、约98-102%或约99-101%活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，如SEQIDNO:1中所示的α淀粉酶可以具有相同活性。在下文阐述的本发明的进一步实施方案中，α淀粉酶可以适当地是如SEQIDNO:3中所示的α淀粉酶。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，SEQIDNO:3中所示的α淀粉酶可保留至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约97%、至少约98%、至少约99%的活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，SEQIDNO:3中所示的α淀粉酶可以具有约80_120%、约85_115%、约90-110%、约95-105%、约96-104%、约97-103%、约98-102%或约99-101%的活性。与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，SEQIDNO:3中所示的α淀粉酶可具有相同活性。所谓“不存在胃蛋白酶”，其意指无特别加入的胃蛋白酶(即未将外源胃蛋白酶添加至对照样品中)。然而，将容易理解痕量胃蛋白酶可以存在于所添加的其他组成成分如玉米基饲料中。饲料添加物可以用于单胃动物，例如家禽、猪、驯养宠物或鱼。在一些方面，单胃动物优选是家禽。本文所用的术语“饲料添加物”和“饲料添加剂”是可互换的。本发明提供制备单胃动物的饲料添加物的方法，其包括将胃蛋白酶耐受性α淀粉酶与至少一种选自如下的生理上可接受的载体混合:麦芽糖糊精、石灰石(碳酸钙)、环糊精、小麦或小麦组分、蔗糖、淀粉、Na2SO4、滑石粉、PVA、山梨糖醇、苯甲酸盐、山梨酸盐、甘油、蔗糖、丙二醇、1，3-丙二醇、葡萄糖、对羟基苯甲酸酯、氯化钠、柠檬酸盐、乙酸盐、磷酸盐、钙、偏亚硫酸氢盐、甲酸盐以及它们的混合物。在一个实施方案中，根据本发明的饲料添加物可以配制为预混物。仅作为例子，预混物可包含一种或多种饲料组分，例如一种或多种矿物质和/或一种或多种维生素。胃蛋白酶耐受性淀粉酶可以通过使用本发明用于鉴定胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的方法进行鉴定。优选地，胃蛋白酶耐受性淀粉酶具有如下氨基酸序列:i)SEQIDN0.1或SEQIDN0.3中所示的氨基酸序列；ii)除一个或数个氨基酸添加/插入、缺失或置换外的SEQIDN0.1或SEQIDN0.3中所示的氨基酸序列；iii)与SEQIDN0.1具有至少85%(优选至少90%、95%、97%、98%或99%)同一性或与SEQIDN0.3具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的氨基酸序列；iv)由包含SEQIDN0.2或SEQIDN0.4的序列的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；V)由由于遗传密码的简并性而不同于SEQIDN0.2或SEQIDN0.4的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；vi)由与SEQIDN0.2或SEQIDN0.4相差一个或数个核苷酸添加/插入、缺失或置换的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；或vii)由与SEQIDN0.2或SEQIDN0.4具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列。胃蛋白酶耐受性α淀粉酶还可以由在严格或高度严格条件下与SEQIDN0.2或SEQIDN0.4杂交的核苷酸序列编码。在与SEQIDN0.1进行缺口比对(gapalignment)时，本发明的胃蛋白酶耐受性α淀粉酶优选包含选自如下的氨基酸中的任一者或多者:Κ88；Ι103；Η133；Υ175；Υ290；F292；R442和H450，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1。合适的是，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可以包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7)；ii)DVVINH(SEQIDNO:8)；iii)SGEHLI(SEQIDNO:9)；iv)NRIYKF(SEQIDNO:10)；v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11)；vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);和vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)或可包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%或85%或90%同一性的氨基酸序列。此外，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7);位置85-90ii)DVVINH(SEQIDNO:8);位置100-105iii)SGEHLI(SEQIDNO:9);位置130-135iv)NRIYKF(SEQIDNO:10);位置172-177v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11);位置287-295vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);位置439-444vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)位置447-452或可以包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%或85%或90%同一性的氨基酸序列，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1。应当理解，本发明涵盖i)至vii)中的任何组合和/或特别叙述的氨基酸的任何组合。本发明提供用于单胃动物的饲料添加物，其包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶和至少一种选自如下的生理上可接受的载体:麦芽糖糊精、石灰石(碳酸钙)、环糊精、小麦或小麦组分、蔗糖、淀粉、Na2SO4、滑石粉、PVA、山梨糖醇、苯甲酸盐、山梨酸盐、甘油、蔗糖、丙二醇、I，3-丙二醇、葡萄糖、对羟基苯甲酸酯、氯化钠、柠檬酸盐、乙酸盐、磷酸盐、钙、偏亚硫酸氢盐、甲酸盐以及它们的混合物。合适的是，可以使用本文公开的任何胃蛋白酶耐受性α淀粉酶。合适的是，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可以使用本文公开的鉴定胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的方法进行鉴定。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以保留至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约97%、至少约98%、至少约99%的活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，α淀粉酶可以具有约80-120%、约85-115%、约90_110%、约95_105%、约96_104%、约97_103%、约98-102%或约99-101%的活性。与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以具有相同活性。合适的是，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可以具有如下氨基酸序列:i)SEQIDN0.1中所示的氨基酸序列；ii)除一个或数个氨基酸添加/插入、缺失或置换外的SEQIDN0.1中所示的氨基酸序列；iii)与SEQIDN0.1具有至少85%(优选至少90%、95%、97%、98%或99%)同一性的氨基酸序列；或iv)由包含SEQIDN0.2的序列的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；V)由由于遗传密码的简并性而不同于SEQIDN0.2的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；vi)由与SEQIDN0.2相差一个或数个核苷酸添加/插入、缺失或置换的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；或vii)由与SEQIDN0.2具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列。在与SEQIDN0.1进行缺口比对时，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含选自如下的氨基酸中的任一者或多者:K88；I103；H133；Y175；Y290；F292;R442和H450，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1，和/或可以包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7)；ii)DVVINH(SEQIDNO:8)；iii)SGEHLI(SEQIDNO:9)；iv)NRIYKF(SEQIDNO:10)；v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11)；vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);和vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)或可包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%、85%或90%同一性的氨基酸序列。此外，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7);位置85-90ii)DVVINH(SEQIDNO:8);位置100-105iii)SGEHLI(SEQIDNO:9);位置130-135iv)NRIYKF(SEQIDNO:10);位置172-177v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11);位置287-295vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);位置439-444vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)位置447-452或可包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%或85%或90%同一性的氨基酸序列，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1。应当理解，本发明涵盖i)至vii)中的任何组合和/或特别叙述的氨基酸的任何组合。当单胃动物是家禽时，在消费包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的饲料后，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶基本上维持胃蛋白酶耐受性至少2-4小时是有利的。当单胃动物是猪时，在消费包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的饲料后，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶基本上维持胃蛋白酶耐受性至少2-6小时是有利的。本发明还提供制备单胃动物的饲料的方法，其包括将本发明的饲料添加物或通过本发明的方法鉴定的胃蛋白酶耐受性α淀粉酶与一种或多种饲料材料混合。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以保留至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约97%、至少约98%、至少约99%的活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，α淀粉酶可以具有约80-120%、约85-115%、约90_110%、约95_105%、约96_104%、约97_103%、约98-102%或约99-101%的活性。与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以具有相同活性。合适的是，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可以具有如下氨基酸序列:i)SEQIDN0.1中所示的氨基酸序列；ii)除一个或数个氨基酸添加/插入、缺失或置换外的SEQIDN0.1中所示的氨基酸序列；iii)与SEQIDN0.1具有至少85%(优选至少90%、95%、97%、98%或99%)同一性的氨基酸序列；或iv)由包含SEQIDN0.2的序列的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；V)由由于遗传密码的简并性而不同于SEQIDN0.2的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；vi)由与SEQIDN0.2相差一个或数个核苷酸添加/插入、缺失或置换的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；或Vii)由与SEQIDN0.2具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列。在与SEQIDN0.1进行缺口比对时，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含选自如下的氨基酸中的任一者或多者:K88；I103；H133；Y175；Y290；F292;R442和H450，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1，和/或可以包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7)；ii)DVVINH(SEQIDNO:8)；iii)SGEHLI(SEQIDNO:9)；iv)NRIYKF(SEQIDNO:10)；v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11)；vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);和vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)或可包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%、85%或90%同一性的氨基酸序列。此外，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7);位置85-90ii)DVVINH(SEQIDNO:8);位置100-105iii)SGEHLI(SEQIDNO:9);位置130-135iv)NRIYKF(SEQIDNO:10);位置172-177v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11);位置287-295vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);位置439-444vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)位置447-452或可包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%或85%或90%同一性的氨基酸序列，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1。应当理解，本发明涵盖i)至vii)中的任何组合和/或特别叙述的氨基酸的任何组合。在一些实施方案中，所述饲料添加物/胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可改善动物性能和/或增加能量吸收/饲料功效和/或提供更低的饲料转化率和/或提供动物的增重和/或饲料中的营养物消化率(例如淀粉消化率)和/或饲料中的可消化能量或可代谢能量。可以使用任何饲料材料。合适的是，可以使用如下饲料材料中的任何一种或多种:a)谷类，例如小粒谷物(例如小麦、大麦、裸麦、燕麦以及它们的组合)和/或大粒谷物例如玉蜀黍或高粱；b)来自谷类的副产物，例如玉米蛋白粉、干酒糟可溶物(DDGS)、麦麸、小麦粗粉、小麦次粉、米糠、稻壳、燕麦壳、棕榈仁和柑橘渣；c)得自如下来源的蛋白质:例如大豆、向日葵、花生、羽扇豆、豌豆、蚕豆、棉花、卡诺拉、鱼粉、干血浆蛋白质、肉和骨粉、马铃薯蛋白质、乳清、干椰肉、芝麻；d)得自植物和动物来源的油和脂肪；e)矿物质和维生素；f)a)至d)中任一者或多者的预混物。合适的是，如本文提及的预混物可以是由微量成分构成的组合物，所述微量成分为例如维生素、矿物质、化学防腐剂、抗生素、发酵产物及其他必需成分。预混物通常是适合于掺和进商业口粮内的组合物。在优选的实施方案中，饲料可包含少于4000、少于3000、少于2000、少于1900、少于1800、少于1700、少于1600、少于1500、少于1400、少于1300、少于1200、少于1100、少于1000、少于900、少于800、少于700、少于600、少于500或少于约400个单位的α淀粉酶/千克饲料。本发明还提供通过包括如下步骤的方法制备的单胃动物的饲料:将本发明的饲料添加物或通过本发明的方法鉴定的胃蛋白酶耐受性α淀粉酶与一种或多种饲料材料混八口ο合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以保留至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约97%、至少约98%、至少约99%的活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，α淀粉酶可以具有约80-120%、约85-115%、约90_110%、约95_105%、约96_104%、约97_103%、约98-102%或约99-101%的活性。与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以具有相同活性。合适的是，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可以具有如下氨基酸序列:i)SEQIDN0.1中所示的氨基酸序列；ii)除一个或数个氨基酸添加/插入、缺失或置换外的SEQIDN0.1中所示的氨基酸序列；iii)与SEQIDN0.1具有至少85%(优选至少90%、95%、97%、98%或99%)同一性的氨基酸序列；或iv)由包含SEQIDN0.2的序列的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；V)由由于遗传密码的简并性而不同于SEQIDN0.2的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；vi)由与SEQIDN0.2相差一个或数个核苷酸添加/插入、缺失或置换的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；或vii)由与SEQIDN0.2具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列。在与SEQIDN0.1进行缺口比对时，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含选自如下的氨基酸中的任一者或多者:K88；I103；H133；Y175；Y290；F292;R442和H450，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1，和/或可以包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7)；ii)DVVINH(SEQIDNO:8)；iii)SGEHLI(SEQIDNO:9)；iv)NRIYKF(SEQIDNO:10)；v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11)；vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);和vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)或可包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%、85%或90%同一性的氨基酸序列。此外，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7);位置85-90ii)DVVINH(SEQIDNO:8);位置100-105iii)SGEHLI(SEQIDNO:9);位置130-135iv)NRIYKF(SEQIDNO:10);位置172-177v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11);位置287-295vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);位置439-444vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)位置447-452或可以包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%或85%或90%同一性的氨基酸序列，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1。应当理解，本发明涵盖i)至vii)中的任何组合和/或特别叙述的氨基酸的任何组合。在优选的实施方案中，饲料可包含少于4000、少于3000、少于2000、少于1900、少于1800、少于1700、少于1600、少于1500、少于1400、少于1300、少于1200、少于1100、少于1000、少于900、少于800、少于700、少于600、少于500或少于约400个单位的α淀粉酶/千克饲料。在一些实施方案中，所述饲料添加物可改善动物性能和/或增加能量吸收/饲料功效和/或提供更低的饲料转化率和/或提供动物的增重和/或饲料中的营养物消化率(例如淀粉消化率)和/或饲料中的可消化能量或可代谢能量。本发明还提供包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的家禽饲料添加物和/或饲料。可以使用任何胃蛋白酶耐受性α淀粉酶，例如任何本文所公开的胃蛋白酶耐受性α淀粉酶。合适的是，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可以具有如下氨基酸序列:i)SEQIDN0.1中所示的氨基酸序列；ii)除一个或数个氨基酸添加/插入、缺失或置换外的SEQIDN0.1中所示的氨基酸序列；iii)与SEQIDN0.1具有至少85%(优选至少90%、95%、97%、98%或99%)同一性的氨基酸序列；或iv)由包含SEQIDN0.2的序列的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；V)由由于遗传密码的简并性而不同于SEQIDN0.2的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；vi)由与SEQIDN0.2相差一个或数个核苷酸添加/插入、缺失或置换的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；或vii)由与SEQIDN0.2具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列。在与SEQIDN0.1进行缺口比对时，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含选自如下的氨基酸中的任一者或多者:K88；I103；H133；Y175；Y290；F292;R442和H450，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1，和/或可以包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7)；ii)DVVINH(SEQIDNO:8)；iii)SGEHLI(SEQIDNO:9)；iv)NRIYKF(SEQIDNO:10)；v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11)；vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);和vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)或可包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%、85%或90%同一性的氨基酸序列。此外，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7);位置85-90ii)DVVINH(SEQIDNO:8);位置100-105iii)SGEHLI(SEQIDNO:9);位置130-135iv)NRIYKF(SEQIDNO:10);位置172-177v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11);位置287-295vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);位置439-444vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)位置447-452或可以包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%或85%或90%同一性的氨基酸序列，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1。应当理解，本发明涵盖i)至vii)中的任何组合和/或特别叙述的氨基酸的任何组合。不希望受理论束缚，所述氨基酸和上文序列中的一者或多者可在给α淀粉酶赋予胃蛋白酶耐受性中起作用。在优选的实施方案中，饲料可包含少于4000、少于3000、少于2000、少于1900、少于1800、少于1700、少于1600、少于1500、少于1400、少于1300、少于1200、少于1100、少于1000、少于900、少于800、少于700、少于600、少于500或少于约400个单位的α淀粉酶/千克饲料。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以保留至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约97%、至少约98%、至少约99%的活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，α淀粉酶可以具有约80-120%、约85-115%、约90_110%、约95_105%、约96_104%、约97_103%、约98-102%或约99-101%的活性。与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以具有相同活性。在一些实施方案中，所述饲料添加物可改善动物性能和/或增加能量吸收/饲料功效和/或提供更低的饲料转化率和/或提供动物的增重和/或饲料中的营养物消化率(例如淀粉消化率)和/或饲料中的可消化能量或可代谢能量。本发明提供包含木霉属α淀粉酶的饲料添加物和/或饲料。本发明还提供包含胃蛋白酶耐受性木霉属α淀粉酶的饲料添加物和/或饲料。可以使用任何木霉属α淀粉酶。合适的是，α淀粉酶可以来自里氏木霉。α淀粉酶可具有如下氨基酸序列:i)SEQIDN0.3中所示的氨基酸序列；ii)除一个或数个氨基酸添加/插入、缺失或置换外的SEQIDN0.3中所示的氨基酸序列；ii)与SEQIDN0.3具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的氨基酸序列；或iv)由包含SEQIDN0.4的序列的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；V)由由于遗传密码的简并性而不同于SEQIDN0.4的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；vi)由与SEQIDN0.4相差一个或数个核苷酸添加/插入、缺失或置换的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；或vii)由与SEQIDN0.4具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列。在优选的实施方案中，饲料可包含少于4000、少于3000、少于2000、少于1900、少于1800、少于1700、少于1600、少于1500、少于1400、少于1300、少于1200、少于1100、少于1000、少于900、少于800、少于700、少于600、少于500或少于约400个单位的α淀粉酶/千克饲料。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以保留至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约97%、至少约98%、至少约99%的活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，α淀粉酶可以具有约80-120%、约85-115%、约90_110%、约95_105%、约96_104%、约97_103%、约98-102%或约99-101%的活性。与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以具有相同活性。在一些实施方案中，所述饲料添加物可改善动物性能和/或增加能量吸收/饲料功效和/或提供更低的饲料转化率和/或提供动物的增重和/或饲料中的营养物消化率(例如淀粉消化率)和/或饲料中的可消化能量或可代谢能量。本发明还提供根据本发明的饲料添加物用于改善动物性能和/或增加能量吸收和/或饲料功效和/或用于改善饲料中的原材料消化率(例如营养物消化率，如淀粉消化率)和/或用于改善饲料转化率(FCR)和/或用于改善动物中的增重的用途。在本发明的另一个方面，提供包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的用于单胃动物的饲料，其中所述饲料包含少于3000个单位的α淀粉酶/千克饲料。合适的是，饲料可包含少于2500、少于2000、少于1900、少于1800、少于1700、少于1600、少于1500、少于1400、少于1300、少于1200、少于1100、少于1000、少于900、少于800、少于700、少于600、少于500或少于约400个单位的α淀粉酶/千克饲料。在一些实施方案中，饲料可改善动物性能和/或增加能量吸收/饲料功效和/或提供更低的饲料转化率。可使用任何胃蛋白酶耐受性α淀粉酶。合适的是，可使用本文公开的或通过本发明方法鉴定的任何胃蛋白酶耐受性α淀粉酶，包括具有如下氨基酸序列的胃蛋白酶耐受性α淀粉酶:i)SEQIDN0.1或SEQIDN0.3中所示的氨基酸序列；ii)除一个或数个氨基酸添加/插入、缺失或置换外的SEQIDN0.1或SEQIDN0.3中所示的氨基酸序列；iii)与SEQIDN0.1具有至少85%(优选至少90%、95%、97%、98%或99%)同一性的氨基酸序列；或与SEQIDN0.3具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的氨基酸序列；iv)由包含SEQIDN0.2或SEQIDN0.4的序列的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；V)由由于遗传密码的简并性而不同于SEQIDN0.2或SEQIDN0.4的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；vi)由与SEQIDN0.2或SEQIDN0.4相差一个或数个核苷酸添加/插入、缺失或置换的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；或vii)由与SEQIDN0.2或SEQIDN0.4具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以保留至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约97%、至少约98%、至少约99%的活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，α淀粉酶可以具有约80-120%、约85-115%、约90_110%、约95_105%、约96_104%、约97_103%、约98-102%或约99-101%的活性。与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以具有相同活性。根据本发明的饲料和/或饲料添加物可包含至少一种另外的饲料酶。例如，饲料和/或饲料添加物可包含参与淀粉代谢、纤维降解、脂质代谢的酶类、参与糖原代谢的蛋白质或酶类、乙酰酯酶类、氨肽酶类、淀粉酶类、阿拉伯糖酶类、阿拉伯呋喃糖苷酶类、羧肽酶类、过氧化氢酶类、纤维素酶类、几丁质酶类、凝乳酶、角质酶、脱氧核糖核酸酶类、表异构酶类、酯酶类、α-半乳糖苷酶类、葡聚糖酶类、葡聚糖裂解酶类、内切葡聚糖酶类、葡糖淀粉酶类、葡萄糖氧化酶类、葡糖苷酶类(包括葡糖苷酶)、葡糖醛酸酶类、半纤维素酶类、己糖氧化酶类、水解酶类、转化酶类、异构酶类、漆酶类、裂解酶类、甘露糖苷酶类、氧化酶类、氧化还原酶类、果胶酸裂解酶类、果胶乙酰酯酶类、果胶解聚酶类、果胶甲基酯酶类、果胶分解酶类、过氧化物酶类、酚氧化酶类、多聚半乳糖醛酸酶类、蛋白酶类、鼠李糖-半乳糖醛酸酶类、核糖核酸酶类、奇异果甜蛋白、转移酶类、转运蛋白、转谷氨酰胺酶类、木聚糖酶类(包括内切-1，4-β-木聚糖酶(EC3.2.1.8))、己糖氧化酶(D-己糖:02-氧化还原酶，EC1.1.3.5)、β-葡聚糖酶、α-淀粉酶、果胶酶、纤维二糖水解酶、酸性磷酸酶类、植酸酶类(包括3-植酸酶(EC3.1.3.8)或6-植酸酶(EC3.1.3.26))、脂解酶类、甘露聚糖酶或它们的组合。这些包括例如可调节饲料的粘度的酶类。合适的是，本发明的饲料和/或饲料添加物可包含至少一种木聚糖酶和/或至少一种植酸酶和/或至少一种蛋白酶和/或至少一种脂解酶。这些可以来自任何来源。合适的是，木聚糖酶可以来自芽孢杆菌属(Bacillus)或木霉属；植酸酶可以来自大肠杆菌或布丘氏菌属(Buttiauxella);蛋白酶可以来自枯草芽孢杆菌(B.subtilis),并且脂解酶可以来自曲霉菌属物种(Aspergillussp)。术语‘脂解酶’指能够作用于脂肪底物以释放游离脂肪酸分子的酶。优选地，脂解酶是能够水解脂质底物(特别是但非仅仅是甘油三酯、糖脂和/或磷脂)中的酯键以释放游离脂肪酸分子的酶。合适的是，用于本发明中的脂解酶可具有一种或多种选自如下的活性:磷脂酶活性(例如磷脂酶Al活性(E.C.3.1.1.32)或磷脂酶A2活性(E.C.3.1.1.4);糖酯酶活性(E.C.3.1.1.26)、三酰基甘油水解活性(E.C.3.1.1.3)、月旨质酰基转移酶活性(通常依照国际生物化学和分子生物学联盟命名委员会的酶命名法建议(1992年)(EnzymeNomenclatureRecommendations(1992)oftheNomenclatureCommitteeoftheInternationalUnionofBiochemistryandMolecularBiology)分类为E.C.2.3.1.x)，以及它们的任何组合。合适的是，本发明的饲料和/或饲料添加物可包含来自任何来源(例如地衣芽孢杆菌(B.1icheniformis)或里氏木霉)的胃蛋白酶耐受性α淀粉酶、来自芽孢杆菌属或木霉属的木聚糖酶；来自大肠杆菌或布丘氏菌属的植酸酶；来自枯草芽孢杆菌的蛋白酶和来自曲霉菌属物种的脂解酶。本发明的任何饲料可包含一种或多种选自如下的饲料材料:a)谷类，例如小粒谷物(例如小麦、大麦、裸麦、燕麦以及它们的组合)和/或大粒谷物例如玉蜀黍或高粱；b)来自谷类的副产物，例如玉米蛋白粉、干酒糟可溶物(DDGS)、麦麸、小麦粗粉(wheatmiddlings)、小麦次粉(wheatshorts)、米糠、稻壳、燕麦壳、棕榈仁和柑橘洛；c)得自如下来源的蛋白质:例如大豆、向日葵、花生、羽扇豆、豌豆、蚕豆、棉花、卡诺拉、鱼粉、干血浆蛋白质、肉和骨粉、马铃薯蛋白质、乳清、干椰肉、芝麻；d)得自植物和动物来源的油和脂肪；e)矿物质和维生素。合适的是，本发明的任何饲料可包含至少一种低纤维饲料材料和/或所述至少一种低纤维饲料材料的至少一种副产物以提供低纤维饲料，所述低纤维饲料材料选自玉米、小麦、动物副产物粉或大豆。本发明的任何饲料可含有至少30重量％、至少40重量％、至少50重量％或至少60重量％的玉米和大豆粉或玉米和全脂大豆。此外或备选地，本发明的任何饲料可包含至少一种高纤维饲料材料和/或所述至少一种高纤维饲料材料的至少一种副产物以提供高纤维饲料。高纤维饲料材料的实例包括:小麦、大麦、裸麦、燕麦，来自谷类的副产物，例如玉米蛋白粉、干酒糟可溶物(DDGS)、麦麸、小麦粗粉、小麦次粉、米糠、稻壳、燕麦壳、棕榈仁和柑橘洛。一些蛋白质来源也可以视为高纤维的:从诸如向日葵、羽扇豆、蚕豆和棉花之类的来源获得的蛋白质。本发明还提供用于饲料添加物和/或饲料中的α淀粉酶，其中在100000U/ml胃蛋白酶的存在下温育后，所述α淀粉酶基本上维持α淀粉酶活性。合适的是，α淀粉酶可包含如下氨基酸序列:i)SEQIDN0.3中所示的氨基酸序列，或ii)除一个或数个氨基酸添加/插入、缺失或置换外的SEQIDN0.3中所示的氨基酸序列；iii)与SEQIDN0.3具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的氨基酸序列；或iv)由包含SEQIDN0.4的序列的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；V)由由于遗传密码的简并性而不同于SEQIDN0.4的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；或vi)由与SEQIDN0.4相差一个或数个核苷酸添加/插入、缺失或置换的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；或vii)由与SEQIDN0.4具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以保留至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约97%、至少约98%、至少约99%的活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，α淀粉酶可以具有约80-120%、约85-115%、约90_110%、约95_105%、约96_104%、约97_103%、约98-102%或约99-101%的活性。与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以具有相同活性。本发明还提供用于单胃动物的饲料，其中所述饲料包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶以改善动物性能和/或增加能量吸收/饲料功效和/或提供更低的饲料转化率和/或提供动物的增重和/或饲料中的营养物消化率(例如淀粉消化率)和/或饲料中的可消化能量或可代谢能量。本文所用的，“动物性能”可通过饲料功效和/或动物的生长速率和/或通过饲料转化率和/或动物的增重和/或通过饲料中的营养物消化率(例如淀粉消化率)和/或饲料中的可消化能量或可代谢能进行测定。优选地，“动物性能”通过饲料功效和/或动物的增重和/或饲料转化率进行测定。所谓“改善的动物性能”，其意指与不包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的饲料相比较，存在着由饲料中使用胃蛋白酶耐受性α淀粉酶所导致的、增加的饲料功效，和/或增加的生长速率和/或减少的饲料转化率和/或增加的动物的增重和/或饲料中的营养物消化率(例如淀粉消化率)和/或饲料中的可消化能量或可代谢能。在优选的实施方案中，当与饲喂不包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的饲料的动物相比较时，在饲喂包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的饲料的动物中，饲料功效和/或生长速率和/或饲料转化率和/或提供动物的增重和/或饲料中的营养物消化率(例如淀粉消化率)和/或饲料中的可消化能量或可代谢能中的至少一者改善至少I%，如1.5%、如2.0%、如2.5%、如3.0%、如4%、如5%。如本文所用，术语“饲料功效”指当动物饲喂规定量的食物时，动物中出现的增重的量。所谓“增加的饲料功效”，其意指与饲喂相同量的不存在胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的饲料的动物相比较，在饲料中使用胃蛋白酶耐受性α淀粉酶导致在饲喂动物时增重增加。如本文所用，术语“饲料转化率”指饲喂给动物以使动物的重量增加规定量的饲料量。所谓“更低的饲料转化率”，其意指与在饲料不含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶时使动物重量增加规定量所需的饲料量相比较，在饲料中使用胃蛋白酶耐受性α淀粉酶导致饲喂给动物以使动物重量增加相同量所需的饲料量更低。本文所用的营养物消化率意指从胃肠道或胃肠道的指定区段(例如小肠)消失的营养物的级分。营养物消化率可测量为所施用给受试者的与从受试者粪便中出来的之间的差异，或所施用给受试者的与保留在胃肠道指定区段(例如回肠)的消化物中的之间的差巳本文所用的营养物消化率可借助于在一段时间中总排泄物的收集，或使用不被动物吸收的惰性标记，通过营养物摄取与排泄的营养物之间的差值进行测量，并且允许研究者计算在整个胃肠道或胃肠道的区段中消失的营养物量。这种惰性标记可以是二氧化钛、氧化铬或酸不溶性灰分。消化率可表示为营养物在饲料中的百分比，或表示为可消化的营养物的质量单位/饲料中的营养物的质量单位。如本文所用，营养物消化率包含淀粉消化率。本文所用的能量消化率意指消耗的饲料总能量减去粪便的总能量，或消耗的饲料总能量减去动物胃肠道指定区段(例如回肠)上的剩余消化物的总能量。本文所用的可代谢能量指表观可代谢能量，且意指消耗的饲料总能量减去粪便、尿和消化的气体产物中含有的总能量。能量消化率和可代谢能量可测量为总能量的摄取与粪便中排泄的或胃肠道指定区段中存在的消化物中的总能量之间的差值，其使用与测量营养物的消化率相同的方法，针对氮排泄进行适当校正以计算饲料的可代谢能量。如本文所用的术语存活率意指仍活着的受试者的数目。术语“改善的存活率”可以是“减少的死亡率”的另一种说法。本文所用的术语胴体产率意指在商业或实验的屠宰过程后，作为活体重量的比例的胴体量。术语胴体意指已因食物而屠宰的动物身体，其中头、内脏、四肢的部分和羽毛或皮肤被去除。本文所用的术语肉产率意指作为活体重量的比例的食用肉的量，或作为活体重量的比例的切割的指定肉的量。本发明还提供增加受试者(例如家禽或猪)中的增重的方法，其包括给所述受试者饲喂包含根据本发明的饲料添加剂组合物的饲料。“增加的增重”指与饲喂不存在饲料添加剂组合物的饲料的动物相比较，在饲喂包含所述饲料添加剂组合物的饲料时动物具有增加的体重。合适的是，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可以具有如下氨基酸序列:i)SEQIDN0.1中所示的氨基酸序列；ii)除一个或数个氨基酸添加/插入、缺失或置换外的SEQIDN0.1中所示的氨基酸序列；iii)与SEQIDN0.1具有至少85%(优选至少90%、95%、97%、98%或99%)同一性的氨基酸序列；或iv)由包含SEQIDN0.2的序列的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；V)由由于遗传密码的简并性而不同于SEQIDN0.2的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；vi)由与SEQIDN0.2相差一个或数个核苷酸添加/插入、缺失或置换的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；或vii)由与SEQIDN0.2具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列。在与SEQIDN0.1进行缺口比对时，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含选自如下的氨基酸中的任一者或多者:K88；I103；H133；Y175；Y290；F292;R442和H450，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1，和/或可以包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7)；ii)DVVINH(SEQIDNO:8)；iii)SGEHLI(SEQIDNO:9)；iv)NRIYKF(SEQIDNO:10)；v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11)；vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);和vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)或可包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%、85%或90%同一性的氨基酸序列。此外，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7);位置85-90ii)DVVINH(SEQIDNO:8);位置100-105iii)SGEHLI(SEQIDNO:9);位置130-135iv)NRIYKF(SEQIDNO:10);位置172-177v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11);位置287-295vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);位置439-444vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)位置447-452或可以包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%或85%或90%同一性的氨基酸序列，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1。应当理解，本发明涵盖i)至vii)中的任何组合和/或特别叙述的氨基酸的任何组合。在优选的实施方案中，饲料可包含少于4000、少于3000、少于2000、少于1900、少于1800、少于1700、少于1600、少于1500、少于1400、少于1300、少于1200、少于1100、少于1000、少于900、少于800、少于700、少于600、少于500或少于约400个单位的α淀粉酶/千克饲料。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以保留至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约97%、至少约98%、至少约99%的活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，α淀粉酶可以具有约80-120%、约85-115%、约90_110%、约95_105%、约96_104%、约97_103%、约98-102%或约99-101%的活性。与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以具有相同活性。本发明还提供增加家禽或猪中的增重的方法，其包括给所述家禽或猪饲饲喂包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的饲料。“增加的增重”指与饲喂不存在胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的饲料的动物相比较，在饲喂包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的饲料时动物具有增加的体重。合适的是，饲料可导致内源性α淀粉酶mRNA表达减少(优选显著减少(P<0.05))。因此，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的使用可增加饲料功效和/或降低饲料转化率，因为动物需要较少的能量来利用饲料。合适的是，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可以具有如下氨基酸序列:i)SEQIDN0.1中所示的氨基酸序列；ii)除一个或数个氨基酸添加/插入、缺失或置换外的SEQIDN0.1中所示的氨基酸序列；iii)与SEQIDN0.1具有至少85%(优选至少90%、95%、97%、98%或99%)同一性的氨基酸序列；或iv)由包含SEQIDN0.2的序列的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；V)由由于遗传密码的简并性而不同于SEQIDN0.2的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；vi)由与SEQIDN0.2相差一个或数个核苷酸添加/插入、缺失或置换的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列；或vii)由与SEQIDN0.2具有至少70%(优选至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的核苷酸序列表达而产生的氨基酸序列。在与SEQIDN0.1进行缺口比对时，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含选自如下的氨基酸中的任一者或多者:K88；I103；H133；Y175；Y290；F292;R442和H450，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1，和/或可以包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7)；ii)DVVINH(SEQIDNO:8)；iii)SGEHLI(SEQIDNO:9)；iv)NRIYKF(SEQIDNO:10)；v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11)；vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);和vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)或可包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%、85%或90%同一性的氨基酸序列。此外，胃蛋白酶耐受性α淀粉酶可包含如下氨基酸序列中的一者或多者:i)SAIKSL(SEQIDNO:7);位置85-90ii)DVVINH(SEQIDNO:8);位置100-105iii)SGEHLI(SEQIDNO:9);位置130-135iv)NRIYKF(SEQIDNO:10);位置172-177v)PLHYQFHA(SEQIDNO:11);位置287-295vi)YVGRQN(SEQIDNO:12);位置439-444vii)ETffHDI(SEQIDNO:13)位置447-452或可包含与i)至vii)中的任一者具有至少80%或85%或90%同一性的氨基酸序列，其中氨基酸编号方式涉及SEQIDN0.1。应当理解，本发明涵盖i)至vii)中的任何组合和/或特别叙述的氨基酸的任何组合。在优选的实施方案中，饲料可包含少于4000、少于3000、少于2000、少于1900、少于1800、少于1700、少于1600、少于1500、少于1400、少于1300、少于1200、少于1100、少于1000、少于900、少于800、少于700、少于600、少于500或少于约400个单位的α淀粉酶/千克饲料。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以保留至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约97%、至少约98%、至少约99%的活性。合适的是，与其在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，α淀粉酶可以具有约80-120%、约85-115%、约90_110%、约95_105%、约96_104%、约97_103%、约98-102%或约99-101%的活性。与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可以具有相同活性。本发明还提供包含胃蛋白酶耐受性α淀粉酶和至少一种矿物质和/或至少一种维生素的预混物。优选地，预混物包含根据本发明的饲料添加物。本发明还提供胃蛋白酶耐受性α淀粉酶减少动物中的内源性α淀粉酶表达的用途。应当理解，这将会导致通过编码淀粉酶的基因的转录和翻译产生内源酶所需的能量较少，从而潜在地导致更高的饲料功效和降低的饲料转化率。应当理解，本文公开的优选特征中的任一者都被认为同等适用于上文所述方面中的任一者，除非另有明确说明。任何优选的特征也被认为与本文公开的任何其他优选特征相组合进行公开。胃蛋白酶耐受性测定本发明的α淀粉酶通过胃蛋白酶耐受性测定进行限定。该测定包括如下方案:将α淀粉酶(例如100μI酶溶液)与玉米基饲料(例如IOOmg)和胃蛋白酶(例如以9000U/ml的浓度，可将其加入900μI的体积中)掺混，并在pH3下温育(例如至少约120分钟)。此外，在不存在胃蛋白酶的情况下在相同的条件下，将所述α淀粉酶与相同的玉米基饲料掺混作为对照。随后，测定样品和对照的α淀粉酶活性。不希望受理论束缚，本发明人认为玉米基饲料的存在可影响α淀粉酶的胃蛋白酶耐受性。在胃蛋白酶测定中使用的条件已制定用于模拟单胃动物的胃肠道中使用的条件。胃蛋白酶水平和温育时间:在本发明的一个实施方案中，使用的胃蛋白酶水平为约9000U/ml，并且温育时间为约120分钟。在这种条件下基本上维持α淀粉酶活性的淀粉酶可视为根据本发明的胃蛋白酶耐受性α淀粉酶。然而，应当理解该测定是温育时间和胃蛋白酶水平的平衡。因此，通过增加温育时间，更低的胃蛋白酶水平可以用于鉴定胃蛋白酶耐受性的α淀粉酶。同样，通过减少温育时间，更高的胃蛋白酶水平可以用于鉴定胃蛋白酶耐受性的α淀粉酶。因此，应当理解本发明可涵盖等价于本文详细描述的规定的温育时间和胃蛋白酶水平的选择标准。温度:应当理解可以使用其中胃蛋白酶耐受性α淀粉酶和胃蛋白酶二者都是活性的任何温度。例如，可使用30-50°C，优选400C的温度。缓冲液:在该测定中，可以使用缓冲溶液(例如900μI)。例如，可以使用包含胃蛋白酶的缓冲溶液，不含胃蛋白酶的缓冲溶液可以用于对照。应当理解可使用提供所需pH的任何合适的缓冲液。这种缓冲液的组成是本领域技术人员的一般常识。合适的胃蛋白酶温育缓冲液的实例是0.1M甘氨酸-HClpH3.0、3mg/mlBSA、2.9mg无水氯化钠/ml、0.73mg氯化钙/ml。对于具有胃蛋白酶的溶液，将温育缓冲液制备为含有至少9000U/ml，优选至少10000U/ml，优选至少10500U/ml，优选至少11000U/ml。合适的是，温育缓冲液可含有9000或9250U/ml。以实例说明，可制备包含25mg/ml(9250U/ml)的胃蛋白酶的缓冲液(例如西格玛公司(Sigma)P-7000)。一胃蛋白酶单位定义为在pH2.0在37°C下每分钟将产生0.001的ΛOD28tl的酶量，其使用血红蛋白作为底物以TCA可溶性产物测量(如例如美国食品化学法典(FoodChemicalCodex)中所述的)。还可以通过将相同的玉米基饲料和pH5.6的缓冲溶液掺混来制备阳性对照，其中所述缓冲溶液不含胃蛋白酶且另外包含BSA。例如，用于阳性对照的合适测定缓冲液可以是具有BSA的淀粉酶测定缓冲液:磷酸盐-柠檬酸盐缓冲液0，1M，pH5.6,3mg/mlBSA。此外，可以制备不添加α淀粉酶的另外的样品，以检查来自所使用的化学物的背景吸收。合适的是，样品和对照样品二者均可一式两份地制备。因此，在一个实施方案中，制备样品且如下温育。称取IOOmg玉米基饲料进每个l，5ml微量离心管(Eppendorf)中。加入不含或含有所需水平的胃蛋白酶(即，至少9000U/ml)的体积900μI的温育缓冲液或900μI测定缓冲液(即，用于阳性对照)，并在Eppendorf恒温混勻器(Thermomixer)5436中以500rpm预温育5分钟。将体积100μI的酶溶液(或100μIH2O)加入每个管中，盖上盖子,并将管在40°C在Eppendorf恒温混匀器5436中以500rpm温育所需时间长度(即，至少120分钟，例如确切地120分钟)。然后分析样品的α淀粉酶活性。当与对照样品(S卩，不存在胃蛋白酶)中的淀粉酶活性相比较时，如果包含胃蛋白酶的样品中的淀粉酶活性在至少约75%(例如至少约80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)至约125%(或约120%、115%、110%、105%、103%、102%或101%)的范围中，则α淀粉酶视为是“胃蛋白酶耐受性的”或“基本上维持α淀粉酶活性”。因此，在有用的实施方案中，当与对照样品(即，不存在胃蛋白酶)中的所述淀粉酶活性相比较时，包含胃蛋白酶的样品中SEQIDNO:1中所示的淀粉酶的活性在至少约75%(例如至少约80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)至约125%(或约120%、115%、110%、105%、103%、102%或101%)的范围中。在进一步有用的实施方案中，当与对照样品(即，不存在胃蛋白酶)中的所述淀粉酶活性相比较时，包含胃蛋白酶的样品中SEQIDNO:3中所示的淀粉酶的活性在至少约75%(例如至少约80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%)至约125%(或约120%、115%、110%、105%、103%、102%或101%)的范围中。本发明可涵盖在至少约75%至约125%之间的上限和下限的任何组合。因此，例如，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，视为“基本上维持”其活性的“胃蛋白酶耐受性α淀粉酶”或α淀粉酶可具有至少约80-120%、85-115%、90-110%、95-105%,96-104%,97-103%,98-102%或99-101%。因此，在有用的实施方案中，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，包含胃蛋白酶的样品中SEQIDΝ0:1中所示的淀粉酶的活性在75%至约125%之间，例如至少约80-120%,85-115%,90-110%、95-105%,96-104%,97-103%,98-102%或99-101%。因此，在有用的实施方案中，与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，包含胃蛋白酶的样品中SEQIDΝ0:3中所示的淀粉酶活性在75%至约125%之间，例如至少约80-120%、85-115%、90-110%、95-105%、96-104%、97-103%、98-102%或99-101%。与其在不存在胃蛋白酶的情况下温育后的活性相比较，α淀粉酶可具有相同活性。在测定中使用的胃蛋白酶水平是至少9000U/ml。合适的是，所用的胃蛋白酶的水平可以是至少约10000U/ml、至少10500U/ml、至少11000U/ml、至少12000U/ml、至少13000U/ml、至少14000U/ml、至少15000U/ml、至少16000U/ml、至少17000U/ml、至少18000U/ml、至少19000U/ml、至少·20000U/ml、至少21000U/ml、至少22000U/ml或至少23000U/ml胃蛋白酶。α淀粉酶可以与胃蛋白酶一起温育至少约2.5小时、至少约3小时或至少约3.5小时。对样品中的α淀粉酶活性的分析可通过本领域已知的任何方法进行测定。在一个实施方案中，α淀粉酶的活性可使用KoneLab测定测量。将管在Eppendorf台式离心机中离心2分钟，抽取100μI并且与900μI测定缓冲液(例如淀粉酶测定缓冲液:磷酸盐-柠檬酸盐缓冲液0.ΙΜ,ρΗ5.6)混合。立即在KoneLabArena20XT(来自美国热电公司(ThermoElectronCorporation))中分析样品的活性。因此，在该实施方案中，在给定胃蛋白酶浓度时的胃蛋白酶耐受性定义为:相对于如上文方案中所述在PH3下不含胃蛋白酶时温育至少两个小时后通过KoneLab测定测量的活性所测量的，如上文方案中所述在给定胃蛋白酶浓度在PH3下温育相同时间后通过KoneLab测定测量的淀粉酶活性。备选地，α淀粉酶活性可使用下文所述的片剂测定(tabletassay)进行测量。K0NELAB测定KoneLab测定是使用KoneLab机器人(KoneLabArena20XT)用于测定液体和固体产品中的细菌α淀粉酶活性的比色法。应用和原理将产物提取物的等分试样与Ceralpha-底物混合物一起在确定条件下温育。通过加入Tris-溶液(Trizma碱)终止反·应,并显现黄色。测量在405nm处的吸光度,这与所分析样品中的α淀粉酶水平直接相关。通过将该吸光度测量值与具有充分确定活性的校准酶的吸光度测量值相关联来定量测定样品的酶活性。底物内的键仅可被α淀粉酶裂解。非封闭的反应产物被过量的葡糖淀粉酶和α-葡糖苷酶(它们为底物混合物的部分)裂解为葡萄糖和游离的对硝基苯基。该反应释放游离的对硝基苯基，并在添加Trizma-碱时显现黄色。Ceralpha-底物是封闭的对硝基苯基麦芽庚糖苷BPNPG7，其无法在真菌和细菌α淀粉酶之间区分。由于淀粉葡糖苷酶和α-葡糖苷酶的pH和温度敏感性，该测定仅可在pH-范围5.0-6.0和在40°C或更低温度下使用。装置玻璃过滤器，AdvantecToyoGA55,IlOmm磁力搅拌器多种吸管多种试管多种容量瓶试管摇动器KonelabArena20XT机器人化学品一水朽1檬酸(默克公司(Merck))磷酸氢二钠(默克公司)二水氯化钙(默克公司)无水氯化钠(默克公司)来自牛血清的白蛋白(BSA，西格玛公司A7906)半胱氨酸(默克公司2838)三(羟甲基)氨基甲烷(默克公司)试查HL稳定试剂将如下物质溶解于IOmL去离子水中:0.20g来自牛血清的白蛋白(BSA)，0.05g半胱氨酸，2.0g无水氯化钠。保持冷藏或冷冻。贮存期限:冷藏:5+/_3°C下I周，冷冻:_18°C下I年(在融化后可以再冷冻)。2.测定缓冲液:柠檬酸-磷酸盐缓冲液，0.1M,pH=5.60将如下物质溶解于大约800mL去离子水:4.41g一水柠檬酸，10.3g二水磷酸氢二钠，2.90g无水氯化钠，0.73g二水氯化钙。加入1.0OmL稳定试剂⑴，同时在磁力搅拌器上搅拌。当溶解时，将pH调节至5.60(HCl或NaOH)，并将溶液转移至IOOOmL容量瓶，用蒸馏水调节至1000mL。3.终丨h溶液:1%(w/v)TRIS(Trizma碱)将IOgTRIS(三(羟甲基)氨基甲烷)在容量瓶中溶解于去离子水中，并调节至IOOOmL04.底物(来自美格兹密公司(Megazyme)的冻干Ceralpha(BPNPG7))将褐色瓶的谷类α淀粉酶测定试剂(BPNPG7)溶解于10.0ml蒸馏水中(2)。将溶液保持-18°C冷冻于褐色瓶中(IOml批料)在使用前，将溶液用蒸馏水进一步1:1稀释。I瓶Ceralpha含有54.5mgBPNPG7和125U(pH=6.0)α-葡糖苷酶。5.对照/标准样品淀粉酶(LAT)标准:例如485TAU/g(批号102-05208-001)此外，例如具有7957-8162TAU/g范围的LAT对照样品(批号102-01128-lab)。程序淀粉酶标准曲线的制备对于LAT，将淀粉酶标准(5)稀释至约1.9U/g的浓度。所有稀释都在测定缓冲液(2)中进行。进一步的稀释在Konelab中按程序进行:权利要求1.鉴定用于饲料添加物中的胃蛋白酶耐受性α淀粉酶的方法，所述方法包括:i)提供α淀粉酶；)将所述α淀粉酶与玉米基饲料和胃蛋白酶混合，在PH3下温育，并与对照样品相比较分析所述α淀粉酶的α淀粉酶活性；其中所述对照样品的不同之处在于在PH3下温育的过程中不存在胃蛋白酶；以及iii)选择在所述测定条件下基本上维持α淀粉酶活性的α淀粉酶。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤ii)中的胃蛋白酶水平是至少9000U/ml、至少10500U/ml、至少11000U/ml、至少12000U/ml、至少13000U/ml、至少14000U/ml、至少15000U/ml、至少16000U/ml、至少17000U/ml、至少18000U/ml、至少19000U/ml、至少20000U/ml、至少21000U/ml、至少22000U/ml或至少23000U/ml胃蛋白酶。3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中将所述α淀粉酶与胃蛋白酶一起温育至少2小时、至少2.5小时、至少3小时或至少3.5小时。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中与所述α淀粉酶在不存在胃蛋白酶的情况下的活性相比较，在所述步骤ii)的测定后，所述α淀粉酶维持至少约80%活性。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述饲料添加物用于单胃动物。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述单胃动物选自家禽、猪或鱼。7.根据权利要求5或权利要求6所述的方法，其中所述饲料添加物用于家禽。8.制备用于单胃动物的饲料添加物的方法，所述方