专利名称：一种改进的载植物多酚类化合物缓释微球的制备方法植物多酚类化合物是存在于植物中的具有多个酚羟基的化学物质，可分布于植物的表皮、根、茎、叶、花和果实中。植物多酚类化合物具有还原性、清除自由基能力以及多种生理活性，例如可对自由基诱发的脂质过氧化及生物大分子损伤起到有效的保护作用，延缓机体衰老、预防和治疗心脑血管疾病、抗炎、抗肿瘤、抗溃疡等。海藻酸盐微球因其制备过程简单，不需要高温、添加有机溶剂或其它有害化合物， 在药物缓释、细胞及酶的固定化等领域得到了广泛应用。载药海藻酸盐微球的制备过程通常是先将药物与海藻酸钠水溶液混合，然后采用针头注射法、气体剪切法或毛细管破碎法等方法以微小液滴形式加入到海藻酸钠的胶凝剂溶液(例如氯化钙溶液)中，立刻就可形成载药海藻酸钙凝胶微球。这种载药微球口服后药物会被缓慢释放，可减少血浓“峰·谷” 效应与服药次数。如果氯化钙溶液中还含有壳聚糖，凝胶微球表面就会形成壳聚糖与海藻酸钙聚电解质膜，既可提高凝胶微球的稳定性，还可进一步调节所载药物的释放速度。利用该法同样可以制备出载植物多酚类化合物的缓释微球，但是在制备过程中，植物多酚类化合物会从凝胶微球中泄露到胶凝剂溶液中，造成损失，尤其是当植物多酚类化合物分子量较小或者为水溶性时，泄露损失更大。
为解决上述技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种改进的载植物多酚类化合物缓释微球的制备方法，可以降低制备过程中植物多酚类化合物的泄露损失。为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是一种改进的载植物多酚类化合物缓释微球的制备方法，其特征是该方法包括以下步骤步骤1 将植物多酚类化合物与水溶性壳聚糖混合；步骤2 将步骤1所得混合物与海藻酸钠水溶液混合；步骤3 将步骤2所得混合液以微小液滴形式加入到胶凝剂溶液或含有壳聚糖的胶凝剂溶液中；步骤4 回收形成的球形物，清洗、干燥，即得载植物多酚类化合物的缓释微球。其中所述的植物多酚类化合物的来源没有限制，例如可以来自葡萄、柿子、苹果、 蓝莓、樱桃、李子、山楂、柑橘、越橘、豆类、花生、紫薯、银杏、大黄、肉桂皮、茶叶、桉叶、竹叶和松树皮等，可以是一种化合物，也可以是不同化合物的组合物。步骤1中所述的水溶性壳聚糖是指可以溶于水的壳聚糖。步骤3中所述的壳聚糖，通常是指酸溶性壳聚糖，即不溶于水但溶于醋酸、甲酸、 盐酸或柠檬酸等酸溶液的壳聚糖，也可以是水溶性壳聚糖。所述的胶凝剂是指可以使海藻酸钠凝胶化的物质，例如氯化钙、氯化锶、氯化钡等多价阳离子的盐类。还提供按照本发明方法制备的载植物多酚类化合物的缓释微球。按照本发明方法制备的载植物多酚类化合物的缓释微球，其特征是该微球粒径小于3mm，为单一核结构，它的材质是由植物多酚类化合物与水溶性壳聚糖和海藻酸盐组成 或者为核壳型结构，它的核材由植物多酚类化合物与水溶性壳聚糖和海藻酸盐组成，它的壳材是壳聚糖与海藻酸盐聚电解质膜。本发明的优点和积极效果是本发明利用水溶性壳聚糖既能够与植物多酚类化合物相互吸附，又能够与海藻酸钠产生静电相互作用的性质，先将植物多酚类化合物与水溶性壳聚糖混合，然后再与海藻酸钠水溶液混合后滴入胶凝剂溶液中制备凝胶微球，这样就可有效地阻止制备过程中植物多酚类化合物从凝胶微球中泄露到胶凝剂溶液中，降低损失。并且，因为使用的是水溶性壳聚糖，其分子量远低于酸溶性壳聚糖，不会与植物多酚类化合物和海藻酸钠形成大尺寸的不溶物，影响缓释微球的制备。本发明方法制备过程简单，条件温和，不需要高温、添加有机溶剂或其它有害化合物，利于保持植物多酚类化合物的活性。可以采用过滤或离心的方法从胶凝剂溶液中分离形成的凝胶微球，干燥方法可以采用真空冷冻干燥、真空干燥、喷雾干燥或其它干燥方法。按照上述方法制备的载植物多酚类化合物的微球，其粒径通常小于3mm，口服后微球内的植物多酚类化合物会被缓慢释放。当胶凝剂溶液中不含有壳聚糖时，形成的微球为单一核结构，由植物多酚类化合物与水溶性壳聚糖和海藻酸盐组成；当胶凝剂溶液中含有壳聚糖时，制备出的微球为核壳型结构，核材由植物多酚类化合物与水溶性壳聚糖和海藻酸盐组成，壳材为壳聚糖与海藻酸盐形成的聚电解质膜。在下述实施例1 实施例5中，植物多酚类化合物均以葡萄籽原花青素提取物 (低聚原花青素含量> 85%，总酚含量> 95% )为例，海藻酸钠的胶凝剂均以氯化钙为例。实施例1 常规法制备(胶凝剂溶液中不含壳聚糖)取1克葡萄籽原花青素提取物，溶于IOmL水中，然后加入到30mL、4%的海藻酸钠水溶液中，充分混勻，以6号针头将混合液滴入到3%的氯化钙溶液中，轻微搅拌30min，过滤分离所得球形物，并检测泄露到氯化钙溶液中酚类物质的总酚含量。实施例2 常规法制备(胶凝剂溶液中含有壳聚糖)以0. 5%的醋酸配制的壳聚糖溶液，然后与6%的氯化钙溶液等体积混合，制成壳聚糖-氯化钙溶液。取1克葡萄籽原花青素提取物，溶于IOmL水中，然后加入到30mL、 4%的海藻酸钠水溶液中，充分混勻，以6号针头将混合液滴入到上述壳聚糖-氯化钙溶液中，轻微搅拌30min，过滤分离所得球形物。经检测，泄露到壳聚糖-氯化钙溶液中酚类物质的总酚含量约为实施例1的48%。实施例3 改进法制备(胶凝剂溶液中不含壳聚糖)取1克葡萄籽原花青素提取物，加入到10mL、0. 1 %的市售水溶性壳聚糖溶液中， 快速混勻，然后再加入到30mL、4%的海藻酸钠水溶液中，其它步骤同实施例1，过滤分离所得球形物，水洗后50°C干燥，即得载原花青素的缓释微球。该缓释微球的平均粒径约1mm， 为单一核结构，它的材质是由葡萄籽原花青素提取物与水溶性壳聚糖和海藻酸钙组成。经检测，泄露到氯化钙溶液中酚类物质的总酚含量约为实施例1的20%。实施例4 改进法制备(胶凝剂溶液中含有壳聚糖)以0. 5%的醋酸配制的壳聚糖溶液，然后与6%的氯化钙溶液等体积混合，制成壳聚糖-氯化钙溶液。取1克葡萄籽原花青素提取物，加入到10mL、0. 的市售水溶性壳聚糖溶液中，快速混勻，然后再加入到30mL、4%的海藻酸钠水溶液中，充分混勻，以6号针头将混合液滴入到上述壳聚糖-氯化钙溶液中，轻微搅拌30min，过滤分离所得球形物， 水洗后50°C干燥，即得载原花青素的缓释微球。该缓释微球为核壳型结构，核材由葡萄籽原花青素提取物与水溶性壳聚糖和海藻酸钙组成，壳材是壳聚糖与海藻酸钙聚电解质膜。经检测，泄露到壳聚糖-氯化钙溶液中酚类物质的总酚含量约为实施例2的18%。上述微球在模拟胃液中处理1小时，酚类物质的释放率约10%，微球再次放置在模拟肠液中，酚类物质12小时的累积释放率约85%。实施例5 用自制的水溶性壳聚糖以2%的醋酸配制5%的壳聚糖溶液，调节pH5 6，加纤维素酶，50°C反应，待反应液粘度大为降低后过滤、浓缩、冷冻干燥，干燥物磨成粉末，得自制的水溶性壳聚糖。取1克葡萄籽原花青素提取物，加入到10mL、0. 2%的自制水溶性壳聚糖溶液中，快速混勻，其它步骤同实施例4。经检测，制备过程中泄露到壳聚糖-氯化钙溶液中酚类物质的总酚含量约为实施例4的80%。
本发明公开了一种改进的载植物多酚类化合物缓释微球的制备方法，包括(1)将植物多酚类化合物与水溶性壳聚糖混合，(2)将所得混合物与海藻酸钠水溶液混合，(3)将所得混合液以微小液滴形式加入到胶凝剂溶液或含有壳聚糖的胶凝剂溶液中，(4)回收形成的球形物，清洗、干燥等步骤。本发明方法可以降低制备过程中植物多酚类化合物的泄露损失，制备过程简单，条件温和，利于保持植物多酚类化合物的活性。