一种治疗或预防过敏性疾病的有效成分的制作方法 [0002] 过敏性疾病，例如过敏性湿疹、荨麻疹、反复发作的过敏性鼻炎、过敏性气喘及异 位性皮肤炎，在台湾及其他已开发国家已成为严重的社会问题，广为人知的卫生假说为：婴 幼儿接触免疫刺激病原体的机会愈少，愈容易引发过敏相关疾病的产生。相关研究指出，过 敏性疾病发生时，人体内的免疫反应会使Thl细胞数量下降，连续产生多种细胞激素促使 免疫反应朝向Th2途径，形成体液免疫反应，例如IgE的产生及嗜伊红血球过多等，经由刺 激Thl型免疫反应以调节、平衡过敏所引发Th2型免疫反应，将可达到改善过敏体质的效 果。 [0003] 但针对气喘的治疗，目前仍以药物治疗为主：如类固醇和抑制肥大细胞释放发炎 物质的药物、气管扩张剂和免疫疗法等。然而，包括抗发炎药物和气管扩张剂在内的药物治 疗仍无法真正的改变过敏免疫反应，仅为一种治标的方法。 [0004] 于异位性皮肤炎治疗上，目前为局部涂抹类固醇（topical corticosteroids, TCS)(Lowenberg et al.，2008)或是局部免疫抑制剂（topical calcineurin inhibitors, TCI) (Hultsch et al.，2005;Kim et al·，2010)为最快速有效的 方式。但是，仍有一些副作用的疑虑如长期使用类固醇会有皮肤萎缩、皮肤色素改变、皮肤 出现血丝、甚至造成像妊娠纹般的扩张纹，且类固醇于人体吸收后可能影响贺尔蒙分泌。而 免疫抑制剂也会造成皮肤灼热与刺激感等的副作用。因此，异位性皮肤炎的治疗仍需以有 效改善皮肤发炎反应并且没有副作用为目标。 [0005] 另一方面，减敏疗法虽能改变过敏免疫体质，但是通常需要较长的一段时间，且有 时会出现一些副作用，并非所有的病人都能够使用。 [0006] 因此，仍需开发具抗过敏活性的活性成分，以刺激免疫细胞、调节Thl/Th2免疫反 应为作用机制。


[0007] 本发明基于发现甘油醒-3-磷酸脱氢酶（Glyceraldehyde3_phosphate Dehydrogenase, G3FOH)具有抗过敏活性，可降低个体过敏反应，因而可开发为治疗或预防 过敏性疾病的药剂，进一步验证其亦可开发为治疗或预防气喘或异位性皮肤炎的药剂。
[0008] 因此，本发明一方面提供一种甘油醛-3-磷酸脱氢酶 (Glyceraldehyde3_phosphate Dehydrogenase,63Η)Η)或其具相同功能的变异体或片段在 制备降低个体过敏反应的药剂中的用途。
[0009] 在一方面，本发明提供一种甘油醛-3-磷酸脱氢酶或其具相同功能的变异体或片 段在制备治疗或预防过敏性疾病的药剂中的用途。其中该过敏性疾病可为气喘或异位性皮 肤炎。
[0010] 另一方面，本发明所提供的甘油醛-3-磷酸脱氢酶具有SEQ ID NO: 1所示的氨基 酸序列。
[0011] 此外，本发明所提供的甘油醛-3-磷酸脱氢酶是选自由加氏乳酸杆菌 (Lactobacillus gasseri)PM_A0005菌株（简称「PM-A0005菌株」）及其萃取物、区分物、次 区分物或有效成分所组成的群组；其中该PM-A0005菌株保藏在中国典型培养物保藏中心， 其菌种保藏编号为CCTCC NO :M207039。该PM-A0005菌株已于2007年1月5日申请专利， 并记载在台湾专利第1356680号中。
[0012] 在一方面。本发明所提供的PM-A0005菌株的萃取物、区分物及次区分物可与生理 上可接受的赋形剂或稀释剂制成一医药组合物或食品组合物。
[0013] 在另一方面，本发明所提供的甘油醛-3-磷酸脱氢酶或其具相同功能的变异体或 片段可与生理上可接受的赋形剂或稀释剂制成一医药组合物或食品组合物。
[0014] 除此之外，本发明提供一种加氏乳酸杆菌（Lactobacillus gasseri)PM_A0005菌 株在制备治疗或预防异位性皮肤炎的药剂中的用途，其中该PM-A0005菌株保藏在中国典 型培养物保藏中心，其菌种保藏编号为CCTCC NO :M207039。
[0015] 根据本发明的实施例，该PM-A0005菌株的萃取物为溶菌酶分解该PM-A0005菌株 菌体后再以硫酸铵沉淀胞质蛋白质而获得。在本发明一具体实施例中，该萃取物为以浓度 为大于0且小于等于25% (w/w)或浓度为50-75% (w/w)的硫酸铵沉淀胞质蛋白质而获得， 其萃取物编号分别为AS_0-25%或AS_50-75%。
[0016] 根据本发明的实施例，该PM-A0005菌株萃取物的区分物为溶菌酶分解该 PM-A0005菌株菌体后再以硫酸铵沉淀胞质蛋白质而获得萃取物后，其再经离子交换层析 (ion-exchange chromatography)分离而得。在本发明一具体实施例中，该区分物编号分别 为 IE1-2、IE1-3、IE3-2 及 IE3-3。
[0017] 根据本发明另一实施例，该PM-A0005菌株萃取物的次区分物为溶菌酶分解该 PM-A0005菌株菌体后再以硫酸铵沉淀胞质蛋白质而获得的萃取物，其再经离子交换层析分 离获得区分物后，再以胶体过滤层析法分离而得。在本发明一具体实施例中，该次区分物 IE3-3G1的有效成分为甘油醛-3-磷酸脱氢酶。
[0018] 本发明的各种具体实施例于下文详述。本发明的其他特征将可由下文有关该等各 种具体实施例的详细叙述、图式及申请专利范围而清楚呈现。




[0019] 在本发明中所呈现的较佳具体实施例图式为阐述本发明为目的。应被理解的是， 本发明并不局限于所示的较佳具体实施例。数据以平均值土SD表示。其中*:P< 0.05、 **:P < 0· 01、***:P < 0· 001，成对 t 检定（paired t-test)。
[0020] 图1A-1C显示该PM-A0005菌株的萃取物经离子交换层析进一步分离活性物质的 结果；图1A为离子交换层析的条件设定；图1B为萃取物AS_0-25%所分离出3个区分物 (fractions);及图1C为萃取物AS_50-75%所分离出3个区分物；
[0021] 图2A-2E显示将区分物IE1-2、IE1-3、IE3-2和IE3-3利用胶体过滤层析进一步 分离活性物质的结果；图2A为胶体过滤层析的条件设定；图2B为区分物IE1-2所分离出 1个次区分物（subfraction) IE1-2G1 ;图2C为IE1-3所分离出2个次区分物IE1-3G1和 IE1-3G2 ;图2D为IE3-2所分离出3个次区分物IE3-2G1、IE3-2G2和IE3-2G3 ;及图2E为 IE3-3 所分离出 5 个次区分物 IE3-3G1、IE3-3G2、IE3-3G3、IE3-3G4 和 IE3-3G5 ;
[0022] 图3为在给予小鼠萃取物AS_50-75% (尘螨致敏-AS)及次区分物IE3-3G1 (尘螨 致敏-IE)后，以甲基胆碱诱发气管收缩并测量小鼠呼吸道阻力的结果，其中呼吸道阻力是 以Penh表示；
[0023] 图4A-4C为尘螨致敏小鼠的肺部组织变化评估，显示投予萃取物AS_50_75%和次 区分物IE3-3G1可显着降低肺脏的发炎与细胞浸润现象；图4A为肺部细胞冲洗液的细胞计 数结果；图4B为肺部细胞冲洗液的细胞分类；及图4C为肺部细胞冲洗液中胸腺活化调节 趋化因子（thymus and activation-regulated chemokine，TARC)浓度，其中尘螨致敏-AS 组投予萃取物AS_50-75% ;尘螨致敏-IE组投予次区分物IE3-3G1 ;
[0024] 图5为尘螨致敏小鼠的肺部组织H&E染色结果，发现经投予萃取物AS_50_75% 和次区分物IE3-3G1分别可有效地降低小鼠气管壁增厚及改善免疫细胞大量浸润等现 象；其中对照组为正常小鼠；尘螨致敏组以以尘螨致敏；而尘螨致敏-AS组投予萃取物 AS_50-75% ;尘螨致敏-IE组则投予次区分物IE3-3G1 ;
[0025] 图6A-6D为剂量107CFU或109CFU的PM-A0005 口服治疗异位性皮肤炎小鼠的生理 特征。图6A为小鼠皮肤外观；图6B为Cutometer ?MPA 580测量皮肤含水量的结果；图 6C为Cutometer ?MPA 580所测量的pH值；及图6D为利用Tewameter TM210仪器测量表 皮水分经皮肤蒸发量（Trans-epidermal water loss, TEWL)的结果；
[0026] 图 7A-7D 为 IE3-3G1 或PBS 以腹腔（intraperitoneal，i. ρ·)注射治疗以尘螨（Der P)或卵白蛋白（Ovalbumin, OVA)致敏的异位性皮肤炎小鼠生理特征；图7A为小鼠皮肤外 观；图7B为以Cutometer ?MPA 580测量皮肤含水量的结果；图7C为Cutometer ?MPA 580所测量的pH值；及图7D为利用Tewameter TM210仪器测量表皮水分经皮肤蒸发量 (Trans-epidermal water loss, TEWL)的结果；
[0027] 图8A-8C为剂量107CFU或109CFU的PM-A0005 口服治疗异位性皮肤炎小鼠 后其皮肤厚度及嗜酸性粒细胞浸润结果。图8A为致敏皮肤位置的苏木精-伊红染色 (hematoxylin-eosin stain，H&E stain)切片结果；图8B为以H&E染色切片所测量的皮肤 厚度；及图8C为每切片视图的嗜酸性粒细胞数目；
[0028] 图9A-9C为IE3-3G1或PBS以腹腔（i. p.)注射治疗以尘螨（Der p)或卵白蛋白 (0VA)致敏的异位性皮肤炎小鼠其皮肤厚度及嗜酸性粒细胞浸润结果。图9A为致敏皮肤 位置的苏木精-伊红染色（H&E stain)切片结果；图9B为由H&E染色切片所测量的皮肤厚 度；及图9C为每切片视图的嗜酸性粒细胞数目；
[0029] 图10为剂量107CFU或109CFU的PM-A0005 口服治疗异位性皮肤炎小鼠后其胸腺 基质淋巴细胞生成素 （thymic stromal lymphopoietin，TSLP)的表达结果；
[0030] 图11A-11B为剂量107CFU或109CFU鹅PM-A0005 口服治疗异位性皮肤炎小鼠后其 兰格罕细胞（langerhans cells)的数目变化。图11A为致敏皮肤位置染色切片结果；图 11B为每切片视图于表皮层或真皮层的兰格罕细胞细胞数目；
[0031] 图12为IE3-3G1或PBS以腹腔（i.p.)注射治疗以尘螨（Der p)或卵白蛋白（0VA) 致敏的异位性皮肤炎小鼠其TSLP表达结果；
[0032] 图13A-13B为IE3-3G1或PBS以腹腔（i. p.)注射治疗以尘螨（Der p)或卵白蛋 白（0VA)致敏的异位性皮肤炎小鼠其兰格罕细胞（langerhans cells)的数目变化。图13A 为致敏皮肤位置染色切片结果；图13B为每切片视图于表皮层或真皮层的兰格罕细胞细胞 数目；
[0033] 图14A-14B为剂量107CFU或109CFU的PM-A0005 口服治疗异位性皮肤炎小鼠后其 总IgE (图14A)及0VA-特异性IgE (图14B)的变化。
[0034] 图15A-15B为IE3-3G1或PBS以腹腔（i. p.)注射治疗以尘螨（Der p)或卵白蛋 白（0VA)致敏的异位性皮肤炎小鼠其总IgE (图15A)及0VA-特异性IgE (图15B)的变化；
[0035] 图16为剂量107CFU或109CFU的PM-A0005 口服治疗异位性皮肤炎小鼠其以白血 球凝集素（leuc〇agglutinin，PHA-L)或不同浓度0VA刺激脾脏细胞后，该脾脏细胞的增生 能力变化结果；
[0036] 图17A-17B为IE3-3G1或PBS以腹腔（i. p.)注射治疗以尘螨（Der p)或卵白蛋 白（0VA)致敏的异位性皮肤炎小鼠其以PHA-L、不同浓度0VA (图17A)或Derp (图17B)刺 激脾脏细胞后，该脾脏细胞的增生能力变化结果；
[0037] 图18A-18C为剂量107CFU或109CFU的PM-A0005 口服治疗异位性皮肤炎小鼠其 以PHA-L、不同浓度0VA刺激脾脏细胞后，其细胞激素 IFN- γ (Interferon- γ )(图18A)、 IL-17(图18B)及IL-10 (图18C)的变化结果；
[0038] 图19A-19C为IE3-3G1或PBS以腹腔（i. p.)注射治疗以尘螨（Der p)或卵白蛋 白（0VA)致敏的异位性皮肤炎小鼠其以PHA-L、不同浓度Der p或0VA刺激脾脏细胞后，其 细胞激素 IFN-γ (图19A)、IL-17 (图19B)及IL-10 (图19C)的变化结果。
[0039] 图20为剂量107CFU或109CFU的PM-A0005 口服治疗异位性皮肤炎小鼠其IL-17 表达情形的染色切片结果；
[0040] 图21为IE3-3G1或PBS以腹腔（i. P.)注射治疗以尘螨（Der P)或卵白蛋白（0VA) 致敏的异位性皮肤炎小鼠其IL-17表达情形的染色切片结果；
[0041] 图22为次区分物IE3-3G1的蛋白质二维电泳分析结果。编号1-编号5为甘油 醛-3-磷酸脱氢酶；编号6为果糖二磷酸醛缩酶；
[0042] 图23以考马斯蓝染色及使用抗组胺酸（Histidine)抗体进行Western blot分析 鉴定G3PDH重组蛋白质；其中Μ :蛋白质分子标记；1 :次区分物IE3-3G1 ;2 :G3roH-His重组 蛋白；
[0043] 图24为G3PDH重组蛋白刺激小鼠树突细胞产生细胞激素 IL-12 (IL12p40)以评 估对于免疫调节的功效的结果；其中以添加脂多醣（lip〇P〇lysaccharide，LPS)或PHA为正 对照组，仅有细胞而未额外添加刺激物组为对照组；
[0044] 图25为G3PDH重组蛋白刺激小鼠脾脏细胞产生细胞激素 Interferon- γ (IFN- γ ) 以评估对于免疫调节的功效的结果；其中以添加 LPS或PHA为正对照组，仅有细胞而未额外 添加刺激物组为对照组。


[0045] 除非另有定义，此处所始有使用的技术及科学名词具有与本发明所属【技术领域】技 术人员一般所了解的相同含义。此处所使用，如有矛盾的情形，以本文件(包括定义）为准。
[0046] 本文所使用的「一」一词，如未特别指明，是指该冠词的文法上受词为一个或一个 以上（即至少为一个)。例如「一成份」是指一成份或多于一成份。
[0047] 本文所使用的「过敏性疾病」一词，是指过敏原、过敏原特异性的免疫球蛋白 E(IgE)以及肥大细胞等的共同作用所引发的疾病。首先是过敏原与附在肥大细胞固定区 (fragment constant, Fc)受体的免疫球蛋白E结合后，促使肥胖细胞进行去颗粒作用。而 由颗粒释出一些介质如组织胺，白三烯素及趋化因子等，这些介质进而造成血管的通透性 增加及气管的收缩而导致症状，同时也会吸引一些其他的细胞如中性白血球，嗜伊红性白 血球等，导致相当程度的发炎反应，造成更进一步皮肤、黏膜组织或是血管的慢性发炎。过 敏疾病包括但不限于异位性皮肤炎、过敏性鼻炎与气喘、以及一些特定的食物与昆虫叮咬 引起的过敏。这些疾病会导致相当程度的发炎反应，造成皮肤、黏膜组织或是血管的慢性发 炎。
[0048] 本文所使用的「气喘」一词，是指因吸入具有诱发性的过敏原引起无法控制的气道 过度反应，并伴随呼吸道结构的改变，包括但不限于上皮的增生、黏膜组织的变形、呼吸道 平滑肌的增生、以及细胞外基质的增生。
[0049] 本文所使用的「异位性皮肤炎」一词，是指一种皮肤炎的形式，其为一种复发性 但不具有传染性的皮肤发炎及皮肤搔痒症状，包括但不限于神经性皮肤炎、内源性湿疹、 屈部湿疹及婴儿湿疹。
[0050] 本文所使用的「具相同功能的变异体」一词，是指一使用例如重组基因技术而得， 藉由一或若干个氨基酸插入、缺失或取代不同于已知蛋白质氨基酸序列但不影响其功能的 多肽。例如，氨基酸取代是以另一具有相似结构及/或化学性质的氨基酸置换一氨基酸的 结果(意即保守氨基酸置换)。而保守氨基酸取代可基于涉及残基的极性、电荷、溶解性、疏 水性、亲水性及/或两亲性质的相似性而进行。氨基酸插入或氨基酸缺失则较佳在约1至 20个氨基酸范围内，更佳为1至10个氨基酸。允许的变化可通过使用重组基因技术在多肽 分子中系统地使氨基酸插入、缺失或取代及鉴定所得重组变异体的活性及功能实验而找出 具相同功能的变异体。本文所使用的「具相同功能的片段」一词，是指已知蛋白质或具相同 功能变异体中提供相同功能的部位的氨基酸片段。例如，抗原决定部位的氨基酸序列。
[0051] 本文所使用的「可接受」一词，是指该载剂必需与组合物的活性成分兼容(较佳为 能稳定该活性成分）且对被治疗个体无害。
[0052] 本文所使用的「有效量」一词，是指相较于未接受此量的对应个体，药物或药剂的 用量造成所欲的药理或生理上的结果，或疾病、异常或副作用的治疗、治愈、预防、或改善， 或减少疾病或异常的发生。服用的有效量或有效剂量可根据所使用的特定有效成分、服用 模式、年龄、体型、以及所欲治疗个体的条件而改变。药剂的精确服用量则系依医师的判断 进行投药且依个体差异而异。
[0053] 根据本发明，发现甘油醒-3-磷酸脱氢酶（Glyceraldehyde3_phosphate Dehydrogenase, G3FOH)具有非可预期的抗过敏活性。在本发明一具体实施例中，针对甘油 醛-3-磷酸脱氢酶（G3PDH)进行小鼠树突细胞共培养实验，显示G3PDH可有效诱发小鼠树 突细胞表达IL-12及刺激脾脏细胞表达IFN- γ，显示其具有刺激免疫细胞、调节免疫反应 的功效。因此，本发明提供甘油醛-3-磷酸脱氢酶或其具相同功能的变异体或片段在制备 降低个体过敏反应的药剂中的用途。
[0054] 因此，本发明提供甘油醛-3-磷酸脱氢酶或其具相同功能的变异体或片段在制备 降低过敏性疾病以及气喘或异位性皮肤炎的药剂中的用途。
[0055] 本发明的一实施例中，甘油醛-3-磷酸脱氢酶具有如SEQ ID NO: 1所示的氨基酸 序列。但本发明所使用的甘油醛-3-磷酸脱氢酶当包含不同来源以及制程的甘油醛-3-磷 酸脱氢酶，或其具相同功能的变异体或片段。
[0056] 根据本发明，以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（G3PDH)为活性成分可进一步与生理上可 接受的赋形剂或稀释剂制成一医药组合物，或一食品组合物。
[0057] 根据本发明，包含以甘油醛-3-磷酸脱氢酶为活性成分的组合物、萃取物、区分 物、次区分物（subfraction)亦可用于制备治疗或预防气喘或异位性皮肤炎药剂。
[0058] 根据本发明，该甘油醛-3-磷酸脱氢酶是分离自加氏乳酸杆菌（Lactobacillus gasseri) PM-A0005菌株，该PM-A0005菌株由东宇生物科技股份有限公司开发，于2007年 4月6日寄存于中国典型培养物保藏中心，寄存编号CCTCC NO :M207039。并于2007年1月 5日申请专利并于2012年1月21日取得台湾专利第1356680号。但于该已获准的专利中 并未曾公开其具有预防或治疗过敏性气喘或异位性皮肤炎的功效，亦未公开其有效成分。
[0059] 根据本发明，该PM-A0005菌株的萃取物可经由本【技术领域】所熟知的标准方法，例 如利用溶菌酶分解菌体并以硫酸铵沉淀胞质蛋白质而获得。在本发明的一具体实施例中， 是将该PM-A0005菌株以溶菌酶处理而释出细胞质内容物，接续以浓度递增的硫酸铵沉淀 蛋白质以获得不同硫酸铵浓度的萃取物，根据不同的硫酸铵浓度可获得4个不同蛋白质萃 取物，分别命名为AS_0-25%、AS_25-50%、AS_50-75%、AS_75-100%。将此4种蛋白质萃取物 与小鼠树突细胞共同培养，发现AS_0-25%和AS_50-75%具有诱发小鼠树突细胞产生高于 对照组(仅有细胞)3倍以上的IL-12表达量，显示其具有刺激免疫细胞、调节免疫反应的功 效；进而将AS_50-75%经腹腔注射投予小鼠，可显着降低尘螨致敏小鼠呼吸道阻力，并显着 抑制肺脏的细胞浸润与发炎现象。因此证实该PM-A0005菌株的萃取物具有预防或治疗过 敏性气喘的功效。
[0060] 根据本发明，该PM-A0005菌株的区分物（fraction),可经由本技 术领域所熟知的标准方法，自上述方法所获的萃取物，接续经离子交换层析 (ion-exchangechromatography)分离而得。在本发明的一具体实施例中，进一步将萃取物 AS_0-25%和AS_50-75%利用HiTrap?DEAE-FF管柱以离子交换层析法分离活性物质。经由 离子交换层析法，AS_0-25%可以分离出3个区分物IE1-UIE1-2和IE1-3 ;AS_50-75%可以 分离出3个区分物IE3-UIE3-2和IE3-3。将此6种蛋白质区分物与小鼠树突细胞共同培 养，发现该等区分物可诱发小鼠树突细胞产生高于对照组(仅有细胞)IL-12表达量，显示其 具有刺激免疫细胞、调节免疫反应的功效。其中IE1-2、IE1-3、IE3-2和IE3-3的IL-12表 达量更高于对照组3倍以上。
[0061 ] 根据本发明，该PM-A0005菌株的次区分物（subfraction)，可经由本技术领 域所熟知的标准方法，自上述方法所获的区分物以胶体过滤层析法（Ge 1 -fi 1 trat i on chromatography)的方式进行更进一步的分离活性物质而得。在本发明的一具体实施例中， 进一步将区分物IE1-2、IE1-3、IE3-2和IE3-3利用S印hacryl?S-300HR管柱给以胶体过 滤层析分离，IE1-2可以分离出1个次区分物（subfraction) IE1-2G1 ;ΙΕ1-3可以分离出 2个次区分物和IE1-3G2 ;IE3-2可以分离出3个次区分物IE3-2G1、IE3-2G2和 IE3-2G3 ;IE3-3可以分离出5个次区分物比3-361、比3-362、比3-363、比3-364和比3-365。 将此11种蛋白质次区分物与小鼠树突细胞共同培养，发现次区分物可诱发小鼠树突细胞 产生高于对照组(仅有细胞)的IL-12表达量，显示其具有刺激免疫细胞、调节免疫反应的功 效，尤以IE3-3G1的IL-12表达量较对照组高出约7. 3倍以上为最佳；其中将IE3-3G1经腹 腔注射投予小鼠，可显着降低尘螨致敏小鼠呼吸道阻力，并显着抑制肺脏的细胞浸润与发 炎现象，证实本发明的次区分物具有降低过敏反应，特别是预防或治疗过敏性气喘的功效。 此外，在OVA或是Der p经皮致敏的小鼠以腹腔注射IE3-3G1后，显着减缓皮肤发炎现象， 亦证明本发明次区分物具有降低预防或治疗异位性皮肤炎的功效。
[0062] 本发明该PM-A0005菌株的萃取物、区分物及次区分物可进一步与生理上可接受 的赋形剂或稀释剂制成一医药组合物，或一食品组合物。因其具有刺激免疫细胞IL-12表 达的功效，可降低尘螨致敏小鼠的呼吸道阻力及抑制肺脏的细胞浸润与发炎现象；亦可刺 激抑制发炎的IL-10细胞激素，以降低经0VA或是Der p经皮致敏所造成的皮肤发炎反应， 故可用于治疗或预防过敏性气喘或异位性皮肤炎。另外，该PM-A0005菌株本身亦具有治疗 或预防异位性皮肤炎的功效。
[0063] 根据本发明，可依本领域技术人员熟知或标准的方法，依需要选用适当的饮食用 材料制成口服药物、食品或饮品。该食品或饮品包括但不限于乳品、发酵乳制品、饮料、运动 饮料、营养添加物或保健食品、糖果或是胶质。
[0064] 一些适当赋形剂的实施例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖、甘露糖、淀粉、阿拉伯 胶、磷酸钙、褐藻酸盐、黄蓍树胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯啶酮、纤维素、灭菌 水、糖浆和甲基纤维素其中一种或几种。该组合物可另外包括润滑剂，湿润剂，乳化剂，悬浮 齐IJ，保存剂，甜味剂或调味剂其中一种或几种，其中润滑剂包括滑石粉、硬脂酸镁或矿物油 其中一种或几种；保存剂包括羟基苯甲酸甲酯或丙酯其中一种或几种。
[0065] 本发明进一步以下列实施例说明，其是提供示范的目的而非用以限制本发明。
[0066] 实施例1PM-A0005菌株的制备
[0067] 加氏乳酸杆菌PM-A0005菌株以MRS培养基于37°C培养24小时，挑选单一菌落于 5ml的无菌培养基(表1)于37°C培养20小时。第3天以无菌方式制作种子罐，取出菌液以 50倍稀释于培养基中以37°C培养16小时。第4天将100ml菌液接种于含有3. 5公升培养 基的桌上型微处理控制发酵槽(型号：Major ScienCe，MS-Fl)中进行发酵，于37°C、pH6. 0 条件下培养5. 5小时。当发酵结束后，取出发酵菌液并使用高速离心机去除上清液留下菌 泥，计数菌数达到l〇9CFU。
[0068] 表 1
[0069]