专利名称：具有止血和缓释粒细胞集落刺激因子双重作用的制剂及其制备方法虽然有很多方法可以解决止血问题，但是难以解决血液的再生，往往靠输血，同时输血容易被污染，带来严重的感染。在在肿瘤治疗领域，尤其是实体肿瘤的手术治疗和化疗，造成失血较多，严重影响病人的生命。在肿瘤化疗造成中性粒细胞减少，往往需要频繁的注射给粒细胞集落刺激因子。为了解决化疗和手术切除带来的止血和增加中性粒细胞， 往往先用止血钳等止血，然后再注射给粒细胞集落刺激因子。可降解控释粒细胞集落刺激因子系统，存在很多技术性问题，诸如释放动力学、药物稳定性、药物的包封率、药物的释放动力学、高分子毒性及代谢、以及生产工艺的简化，尚待更好地解决。由于存在这些问题，这就为进一步改良技术提供了很大发展空间。经对现有技术的文献检索发现，Seung Ho Choi，等人在《International Journal ofPharmaceutics))(《国际药剂学杂志》2006年第311期第223-2 页)上发表的 ("G-CSFloadedbiodegradable PLGA nanoparticles prepared by a single oil-in-water emulsion method")( “用水包油乳化法制备粒细胞集落刺激因子生物降解纳米粒”)，该技术中提出用一种可生物降解和生物相容性的高分子材料聚乳酸/羟基乙酸(PLGA)制备了粒细胞集落刺激因子植入纳米粒，具有一定的缓释作用，具体方法为把粒细胞集落刺激因子水溶液和聚乳酸/羟基乙酸(PLGA)充分混勻，用水包油乳化法制备纳米粒。其不足在于粒细胞集落刺激因子药物严重突释和释放不完全、由于水包油法存在油水界面，导致蛋白变性失活。课题组不久前开发了一种利用先保护粒细胞集落刺激因子，然后再通过水包油-油包固(S/0/W)的方法制备微球，突释已吸引了众多研究者的兴趣，但仍然未解决。然而，生物大分子，如蛋白质类药物，疫苗，抗体，或基因，在制备过程中还是面临着技术障碍。 其他剂型在治疗过程中也存在可能包括突释、稳定性差、失活和载药效率低等其他问题。美国专禾Ij 号 5，466，462,记载了一种"Heteromorphic sponges containing active agents,( “含有活性成分的异形海绵)，该技术提出有些浸渍活性成分的手术植入剂，可以减少疤痕的形成。其不足是不能达到延长缓释的效果。在手术中，医生通常采用止血材料，如速即纱(Surgicel)和明胶海绵，用于手术后伤口止血和抗感染康复。这些材料都被证明安全无毒，生物相容性和生物可吸收性佳。 利用这些现有的手术材料作为支架发展术后治疗长效药物治疗剂型，可提供便利且非常简单的方法来解决上述问题。本发明揭示了一个独特新方法，可将手术用止血材料作为骨架， 通过粒细胞集落刺激因子的葡聚糖颗粒和可降解缓控释材料涂层的方式构建成有效的具有止血功能和释放有效的粒细胞集落刺激因子给药系统。
本发明针对现有技术存在的上述不足，提供一种具有止血和缓释粒细胞集落刺激因子双重作用的制剂及其制备方法，将手术止血纱布与粒细胞集落刺激因子的葡聚糖颗粒和可降解缓控释材料涂层的药物缓释体系相结合，在制备工艺上在止血纱布的生产工艺上添加了载药工序，提供一种构建新型的粒细胞集落刺激因子药物缓释植入系统的简便易行、同时对各类药物均适用的方法。本发明是通过以下技术方案实现的本发明涉及一种具有止血和缓释粒细胞集落刺激因子双重作用的制剂，由含有粒细胞集落刺激因子的葡聚糖颗粒、可降解缓控释材料和止血材料骨架组成，其中含有粒细胞集落刺激因子的葡聚糖颗粒和可降解缓控释材料分别占止血材料骨架的单位面积重量分别为 0. 004-400mg/cm2 以及 0. 001mg-4mg/cm2。所述的含有粒细胞集落刺激因子的和所述的可降解缓控释材料在止血材料骨架的单位面积Icm2优选的重量分别为0. 04-300mg/cm2和0. 01mg-;3mg/cm2。所述的含有粒细胞集落刺激因子的葡聚糖颗粒的粒径为0. 01 μ m-20 μ m,该葡聚糖颗粒分散于可降解缓控释材料中，经喷雾涂层法、涂抹法或浸渍法应用于止血纱布表面。所述的可降解缓控释材料为聚乳酸(PLA)、聚乙酸(PGA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚己内酯(PCL)、聚(酯)、聚(乳酸-羟基乙酸)及其衍生物或其它可生物降解缓控释放材料及其组合。所述的止血材料骨架为可吸收氧化纤维素速即纱、可吸收明胶海绵或胶原蛋白。本发明涉及上述制剂的制备方法，通过向液态的可降解缓控释材料或溶解于有机溶剂的可降解缓控释材料中混悬入含有粒细胞集落刺激因子的葡聚糖颗粒制成混悬液，最后用喷涂、涂刷或浸渍方法将混悬液涂布于生物降解纤维或多孔材料上。所述的溶解是指把可降解缓控释材料通过加热让其充分熔解得到可降解缓控释材料液体并与有机溶剂混合；所述的有机溶剂为二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯或其组合；所述的含有粒细胞集落刺激因子的葡聚糖颗粒通过以下任一方式制备得到1)葡聚糖水相/聚乙二醇水相乳液方式；2)相分离法制备方式；3)喷雾干燥法制备方式；4)超临界法制备方式。所述的混悬是指通过旋涡、超声或勻浆方式将含有粒细胞集落刺激因子的葡聚糖颗粒与液态的可降解缓控释材料或溶解于有机溶剂的可降解缓控释材料均勻混合得到。本发明可降解纤维或多孔材料采用了表面积大且富含多孔结构的临床止血材料， 用于可降解缓控释放材料层或结构，利于其中粒细胞集落刺激因子的释放。该止血材料不仅充当支持物或支架，简化缓释体系制备过程的，同时也提供了粒细胞集落刺激因子释放机制。作为可降解缓控释放的支持物，其高度亲水性及快速降解性，有效地避免了一般可降解缓控释放为基质的药物缓释种常见的不完全释放问题，并在不延长整体释放期的情况下，利用分子量大或疏水性高的高分子制备的给药植入剂获得线性释放。在制备工艺上，由于避免了繁杂的微囊化程序，载药可降解缓控释放材料的有机溶液(形成药物溶液或混悬液)可被很简单地涂布到止血材料上，同时也避免了微囊化工艺药物包封率低(一般40-60%)、溶剂使用量大(因需用于微球的洗涤和回收)等弱点。这些优点致使本发明与以前的报道植入剂相比，其药物释放线性情况佳、给药便利和生产简易可行。图1 具有止血和缓释粒细胞集落刺激因子(G-CSF)双重作用的制剂制备及方法的示意图；图2.为实施例扫描电镜图；图中(A)为空白可吸收氧化纤维素扫描电镜图，(B)为涂有粒细胞集落刺激因子的多糖颗粒的可吸收氧化纤维素制剂扫描电镜图；图3实施例1的释放动力学曲线示意图图4实施例2的释放动力学曲线示意图图5实施例3的释放动力学曲线示意图
图6实施例4的释放动力学曲线示意图
图7实施例5的释放动力学曲线示意图
图8实施例6的释放动力学曲线示意图。图9实施例7的释放动力学曲线示意图。



一种药物制备技术领域的具有止血和缓释粒细胞集落刺激因子双重作用的制剂及其制备方法，该制剂由含有粒细胞集落刺激因子的葡聚糖颗粒、可降解缓控释材料和止血材料骨架组成，本发明通过将手术止血纱布与粒细胞集落刺激因子的葡聚糖颗粒和可降解缓控释材料涂层的药物缓释体系相结合，在制备工艺上在止血纱布的生产工艺上添加了载药工序；该方法简便易行并对各类药物均适用。