尿频或尿失禁的治疗或预防剂制作方法

田中利明, 长濑博, 远藤孝, 川村邦昭, 藤村森广, 驹形俊和

2002年10月16日

2000年7月19日

1999年7月19日

东丽株式会社

A61K31/485GK1374963SQ00813069

预防剂 尿失禁 尿频 制作 治疗

1.含有通式(I)所示的喹啉并吗啉喃衍生物或其药理上可接受的酸加成盐作为有效成分的尿频或尿失禁的治疗或预防剂 式中，R1表示氢，碳原子数1～5的烷基，碳原子数4～7的环烷基烷基，碳原子数5～7的环烯基烷基，碳原子数6～12的芳基，碳原子数7～13的芳烷基，碳原子数2～7的链烯基，碳原子数1～5的烷酰基，呋喃-2-基烷基、条件是，烷基部分的碳原子数为1～5，或噻吩-2-基烷基、条件是，烷基部分的碳原子数为1～5，R2和R3独立地代表氢，羟基，碳原子数1～5的烷氧基，碳原子数1～5的烷酰氧基，碳原子数7～13的芳烷氧基，或碳原子数7～13的芳基羰氧基，m表示0～4的整数，R5是苯环上的取代基，分别表示R18，或相邻两个碳原子上分别取代的2个R5一起表示稠合环结构A、条件是，剩余的0～2个R5分别表示R18或再表示1组稠合环结构A，稠合环结构A表示被0～4个取代基R9取代的苯并，茚并，萘并，吡啶并，或碳原子数5～7的环烯并，或无取代的二氧戊环并，R9和R18，(1)分别表示氟、氯、溴、碘、硝基、羟基、碳原子数1～5的烷基，碳原子数1～5的烷氧基，异硫氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，氰基，苯基，碳原子数1～3的羟基烷基，SR6，SOR6，SO2R6，(CH2)kCO2R7，SO2NR7R8，CONR7R8，(CH2)kNR7R8，或(CH2)kN(R7)COR8、其中，k表示0～5的整数，R6表示碳原子数1～5的烷基，R7和R8分别表示氢，碳原子数1～5的烷基，碳原子数4～6的环烷基烷基，和/或(2)隔着环稠合部分相邻碳原子上的取代基R9和R18一起形成R9-R18形成桥亚乙基，桥亚丙基或桥(邻亚苯基)苯并的任一桥结构，R4表示氢，碳原子数1～5的烷基，碳原子数1～5的羟基烷基，碳原子数6～12的芳基、条件是，可被1种以上的取代基R17取代，NR10R11，OR12，COOR13，或CONR14R15，或与迫位取代的R5一起形成R4-R5，表示N(R16)CO，N(R16)C(＝NH)，N(R16)CH2，桥(邻亚苯基)，桥亚乙基，桥亚丙基，或桥亚丁基的任一桥结构，R17分别表示氟、氯、溴、碘、硝基、氨基、羟基、碳原子数1～5的烷基，碳原子数1～5的烷氧基，碳原子数1～5的烷酰氧基，三氟甲基，三氟甲氧基，或氰基，R10、R11、R12和R16分别表示氢，碳原子数1～5的烷基，碳原子数4～7的环烷基烷基，碳原子数7～13的芳烷基，或碳原子数1～5的烷酰基，R13、R14和R15分别表示氢，碳原子数1～5的烷基，碳原子数6～12的芳基，或碳原子数7～13的芳烷基2.权利要求1记载的尿频或尿失禁的治疗或预防剂，其中，在通式(I)中，R4表示氢、碳原子数1～5的烷基，NR10R11，或与迫位取代的R5一起形成R4-R5，表示N(R16)CO的桥结构，其中R10、R11和R16定义同权利要求13.权利要求2记载的尿频或尿失禁的治疗或预防剂，其中，在通式(I)中，R1表示碳原子数1～5的烷基，碳原子数4～7的环烷基烷基，碳原子数7～13的芳烷基，呋喃-2-基烷基、条件是，烷基部分的碳原子数是1～5，或噻吩-2-基烷基、条件是，烷基部分的碳原子数为1～5

本发明涉及尿频或尿失禁的治疗或预防剂但是，这些现存的药物经常副作用，如发生口渴、便秘等消化器官症状，起立性低血压等循环器官症状，或尿闭、残留尿等排尿障碍脑血管障碍或痴呆症被认为是高龄者排尿障碍的最大原因近年来，由于在伴随这些脑疾病的尿频或尿失禁的治疗中使用具有抗胆碱作用的现有药物，脑内的乙酰胆碱作用被抑制，令人遗憾的是脑疾病本身不断发展这些现有药物具有的副作用不能满足患者的生活质量(QOL)，人们强烈需要开发无副作用的尿频或尿失禁治疗或预防剂另一方面，作为喹啉并吗啡喃衍生物的现有技术，有美国专利4,816,586号，国际专利公开94/14445号，国际专利公开98/43977号这些专利中，公开了镇痛、止咳或脑障碍治疗剂等作用，但是没有公开关于尿频或尿失禁的治疗或预防剂的作用前述目的是通过下述本发明达到的即，本发明提供了含有下面通式(I)所示的喹啉并吗啉喃衍生物或其药理上可接受的酸加成盐作为有效成分的尿频或尿失禁的治疗或预防剂 (式中，R1表示氢，碳原子数1～5的烷基，碳原子数4～7的环烷基烷基，碳原子数5～7的环烯基烷基，碳原子数6～12的芳基，碳原子数7～13的芳烷基，碳原子数2～7的链烯基，碳原子数1～5的烷酰基，呋喃-2-基烷基(条件是，烷基部分的碳原子数为1～5)，或噻吩-2-基烷基(条件是，烷基部分的碳原子数为1～5)，R2和R3独立地代表氢，羟基，碳原子数1～5的烷氧基，碳原子数1～5的烷酰氧基，碳原子数7～13的芳烷氧基，或碳原子数7～13的芳基羰氧基，m表示0～4的整数，R5是苯环上的取代基，分别表示R18，或相邻两个碳原子上分别取代的2个R5一起表示稠合环结构A(条件是，剩余的0～2个R5分别表示R18或再表示1组稠合环结构A)，稠合环结构A表示被0～4个取代基R9取代的苯并，茚并，萘并，吡啶并，或碳原子数5～7的环烯并，或无取代的二氧戊环并(ジオキソレノ)，R9和R18，(1)分别表示氟、氯、溴、碘、硝基、羟基、碳原子数1～5的烷基，碳原子数1～5的烷氧基，异硫氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，氰基，苯基，碳原子数1～3的羟基烷基，SR6，SOR6，SO2R6，(CH2)kCO2R7，SO2NR7R8，CONR7R8，(CH2)kNR7R8，或(CH2)kN(R7)COR8(这里，k表示0～5的整数，R6表示碳原子数1～5的烷基，R7和R8分别表示氢，碳原子数1～5的烷基，碳原子数4～6的环烷基烷基)，和/或(2)夹着环稠合部分相邻碳原子上的取代基R9和R18一起形成R9-R18形成桥亚乙基，桥亚丙基或桥(邻亚苯基)(o-ベンゼノ)的任一桥结构，R4表示氢，碳原子数1～5的烷基，碳原子数1～5的羟基烷基，碳原子数6～12的芳基(条件是，可被1种以上的取代基R17取代)，NR10R11，OR12，COOR13，或CONR14R15，或与迫位取代的R5一起形成R4-R5，表示N(R16)CO，N(R16)C(＝NH)，N(R16)CH2，桥(邻亚苯基)，桥亚乙基，桥亚丙基，或桥亚丁基的任一桥结构，R17分别表示氟、氯、溴、碘、硝基、氨基、羟基、碳原子数1～5的烷基，碳原子数1～5的烷氧基，碳原子数1～5的烷酰氧基，三氟甲基，三氟甲氧基，或氰基，R10、R11、R12和R16分别表示氢，碳原子数1～5的烷基，碳原子数4～7的环烷基烷基，碳原子数7～13的芳烷基，或碳原子数1～5的烷酰基，R13、R14和R15分别表示氢，碳原子数1～5的烷基，碳原子数6～12的芳基，或碳原子数7～13的芳烷基)本发明提供了副作用减轻的新的尿频或尿失禁治疗或预防剂通式(I)所示的喹啉并吗啉喃衍生物中，优选R1、R2、R3、R5、m定义同前，R4表示氢，碳原子数1～5的烷基，NR10R11，或与迫位取代的R5一起形成R4-R5，而形成的N(R16)CO桥结构(R10、R11、和R16定义同前)的化合物，其中优选，R1是碳原子数1～5的烷基，碳原子数4～7的环烷基烷基，碳原子数7～13的芳烷基，呋喃-2-基烷基(条件是，烷基部分的碳原子数是1～5)，或噻吩-2-基烷基(条件是，烷基部分的碳原子数是1～5)的化合物下面对通式(I)的喹啉并吗啉喃衍生物的各取代基进行更具体地说明作为R1，优选表示氢，碳原子数1～5的烷基，碳原子数4～7的环烷基甲基，碳原子数5～7的环烯基甲基，苯基，萘基，碳原子数7～13的苯基烷基，碳原子数2～7的链烯基，碳原子数1～5的烷酰基，碳原子数1～5的呋喃-2-基烷基(条件是，这里的碳原子数表示呋喃-2-基烷基的烷基部分的碳原子数)，碳原子数1～5的噻吩-2-基烷基(条件是，这里的碳原子数表示噻吩-2-基烷基的烷基部分的碳原子数)，特别优选氢，甲基，乙基，丙基，丁基，环丙基甲基，环丁基甲基，环戊基甲基，苄基，苯乙基，苯基丙基，烯丙基，2-丁烯基，3-丁烯基，2-甲基-2-丁烯基，3-甲基-2-丁烯基，3-甲基-3-丁烯基，乙酰基，呋喃-2-基甲基，呋喃-2-基乙基，呋喃-2-基丙基，噻吩-2-基甲基，噻吩-2-基乙基，噻吩-2-基丙基其中特别优选氢，甲基，乙基，丙基，环丙基甲基，苯乙基，呋喃-2-基乙基，噻吩-2-基乙基作为R2和R3优选代表氢，羟基，甲氧基，乙氧基，丙氧基，乙酰氧基，苄氧基，苯甲酰氧基其中作为R2，特别优选羟基，甲氧基，乙酰氧基，作为R3，特别优选氢，羟基，甲氧基R5在不形成稠合环结构时表示R18，此时作为R18优选氟、氯、溴、碘、硝基、羟基、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、异硫氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，氰基，苯基，羟基甲基，SR6，SOR6，SO2R6，CO2R7，CH2CO2Rn，(CH2)2CO2R7，SO2NR7R8，CONR7R8，NR7R8，CH2NR7R8，(CH2)2NR7R8，N(R7)COR8，CH2N(R7)COR8或(CH2)2N(R7)COR8，此时，作为R6分别优选甲基，乙基，R7优选氢，甲基，R8优选氢，甲基，乙基，丙基，丁基，环丙基甲基，环丙基丁基另外，R5中，2个R5一起形成稠合环结构A时，残留的0～2个R5表示前述R18，或2个R5进一步一起形成稠合环结构A作为该稠合环结构A，优选被0～2个R9取代的苯并，茚并，萘并，吡啶并，或环己烯并，或无取代的二氧戊环并，特别优选被0～1个R9取代的苯并，茚并，环己烯并，无取代的二氧戊环并例如，2个R5一起形成1个稠合环结构A，该稠合环结构A是苯并时，通式(I)的化合物可用下述具体的通式(IIa)、(IIb)、(IIc)、(IId)表示，但并不用于限定通式(I) 作为R9，在不与R18一起形成R9-R18的桥结构时，优选氟、氯、溴、碘、硝基、羟基、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、异硫氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，氰基，苯基，羟甲基，SR6，SOR6，SO2R6，CO2R7，CH2CO2R7，(CH2)2CO2R7，SO2NR7R8，CONR7R8，NR7R8，CH2NR7R8，(CH2)2NR7R8，N(R7)COR8，CH2N(R7)COR8或(CH2)2N(R7)COR8，此时作为R6优选甲基、乙基，作为R7优选氢，甲基，作为R8优选氢，甲基、乙基、丙基、丁基、环丙基甲基、环丙基丁基另外，R9和R18一起形成R9-R18，可形成桥结构，此时，作为该桥结构优选桥亚乙基，或桥(邻亚苯基)例如，该桥结构是桥亚乙基，且前述稠合环结构A是苯并时，通式(I)的化合物可用下述具体的通式(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(IIId)表示，但并不用于限定通式(I) 作为R4，在不与迫位取代的R5一起形成R4-R5的桥结构时，优选氢，甲基、乙基、丙基、异丙基，碳原子数1～3的羟基烷基，碳原子数6～12的芳基(条件是，可被1种以上的取代基R17取代)，NR10R11，OR12，COOR13，或CONR14R15，此时，作为R10，优选氢，甲基，乙基，丙基，苄基，作为R11，优选氢，碳原子数1～5的烷基，碳原子数4～7的环烷基烷基，苄基，苯乙基，碳原子数1～5的烷酰基，作为R12，优选氢，甲基，乙酰基，作为R13，优选氢，甲基，乙基，苯基，苄基，作为R14，优选氢，甲基，乙基，苯基，苄基，作为R15，优选氢，甲基，乙基，苯基，苄基，作为R17，优选氟、氯、溴、氨基、甲基、乙基这些R4中，优选氢，甲基，乙基，异丙基，羟甲基，羟乙基，苯基，萘基，氨基，甲基氨基，二甲基氨基，(环己基甲基)氨基，苄基氨基，苯基乙氨基，甲酰基氨基，乙酰基氨基，丙酰氨基，羟基，甲氧基，乙酰氧基，羧基，甲氧羰基，乙氧羰基，苯氧羰基，苄氧羰基，氨基甲酰基，甲基氨基甲酰基，苯基氨基甲酰基，苄基氨基甲酰基，二甲基氨基甲酰基，其中特别优选，氢，甲基，乙基，异丙基，羟甲基，苯基，氨基，甲基氨基，二甲基氨基，(环己基甲基)氨基，苄基氨基，甲酰基氨基，乙酰基氨基，羟基，甲氧基，羧基，甲氧羰基，氨基甲酰基，甲基氨基甲酰基，二甲基氨基甲酰基另外，R4中，在与迫位取代的R5一起形成R4-R5的桥结构时，该R4-R5桥结构优选N(R16)CO，N(R16)C(＝NH)，N(R16)CH2，桥(邻亚苯基)，桥亚丙基，其中，特别优选N(R16)CO，N(R16)C(＝NH)，N(R16)CH2此时，作为R16，优选氢，甲基，乙基，苄基，乙酰基例如，R4与迫位取代的R5一起形成R4-R5的桥结构，该R4-R5桥结构是N(R16)CO时，通式(I)的化合物可用下述具体的通式(IV)表示，但并不用于限定通式(I) 作为药理学上可接受的酸加成盐，可列举盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、磷酸盐等无机酸盐，乙酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、戊二酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、扁桃酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐等有机羧酸盐，甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、樟脑磺酸盐等有机磺酸盐，其中，优选盐酸盐、磷酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐等，但并不限于这些本发明的通式(I)化合物可通过美国专利4,816,586号或国际专利公开WO98/43977号中公开的方法制备通式(I)所示的喹啉并吗啉喃衍生物在尿频或尿失禁的治疗或预防中有效是指，可确认其显示抑制动物的节律膀胱收缩运动或延长排尿反射的作用对动物节律膀胱收缩运动的抑制作用或延长排尿反射作用的评价可按照已报道的文献[Brain.Res.，vol.297，191(1984)或J.Pharmcol.Exp.Ther.，vol.240，978(1987)]的方法进行，但是不一定限于此本发明的化合物，可作为治疗或预防尿频或尿失禁有用的药物使用特别是，可用于神经因性膀胱障碍，夜间尿频，过活动型膀胱，不稳定膀胱，神经性尿频，心因性尿频，夜尿症，膀胱痉挛，慢性膀胱炎，慢性前列腺炎，前列腺肥大，前列腺癌等引起的尿频或尿失禁等排尿障碍的治疗或预防这里所说的神经因性膀胱障碍是指支配膀胱、尿道、外尿道括约肌形成的下尿路的神经受到任何障碍的结果，下尿路的畜尿、排尿机能异常的状态作为对神经引起障碍的疾病，有脑血管障碍，脑瘤，脑外伤，脑炎，正常压脑积水，痴呆，帕金森氏病，纹状体黑质变性病，进行性核上性麻痹，橄榄体小脑脑桥萎缩症，Shy-Drager综合征，脊髓损伤，脊髓血管障碍，脊髓肿瘤，脊髓炎，颈髓压迫性疾病，脊髓空洞症，多发性硬化症，脊柱裂，脊髓髓膜瘤，Tethered cord综合征，脊髓病等但是，本发明的尿频或尿失禁的治疗或预防剂的应用，并不只限于这些疾病例将本发明的尿频或尿失禁治疗或预防剂作为药物在临床使用时，药物可以是游离碱或其盐本身，也可以与赋形剂、稳定剂、防腐剂、缓冲剂、溶解助剂、乳化剂、稀释剂、等渗剂等添加剂适当混合作为给药形式，可使用非口服给药或口服给药作为非口服给药，可列举，静脉注射、皮下注射、肌肉注射、直肠给药等作为给药剂型可列举注射剂、片剂、液剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂等这些剂型可用公知的制剂技术制造给药量可根据患者的症状或年龄、体重、给药方法等适当选择，对于成人，有效成分的量是1天0.0001mg～10g，优选0.001mg～1g，可分1次至多次给药将按照参考例4记载的方法制备的17-甲基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-3，14β-羟基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃200mg(0.39mmol)溶解于吡啶5ml，加入乙酸酐10ml(1.10mmol)，在室温搅拌16小时将反应溶液减压浓缩，向所得残渣中加入饱和碳酸氢钠水溶液，用氯仿萃取合并有机层，用无水硫酸镁干燥后，将浓缩得到的粗产物用硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物的游离体250mg(收率98％)将其转化为酒石酸盐，得到标题化合物16参考例1517-甲基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-3-羟基-14β-乙酰氧-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃·酒石酸盐(化合物17)的合成将用参考例14记载的方法制备的17-甲基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-3，14β-二乙酰氧基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃156mg(0.33mmol)溶解于甲醇10ml和氯仿2ml的混合溶液，加入碳酸钾68.1mg(0.49mmol)，在室温搅拌1小时向反应溶液中加入饱和碳酸氢钠水溶液，将减压浓缩得到的反应粗产物用氯仿萃取合并有机层用无水硫酸镁干燥后，将浓缩得到的粗产物用硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物的游离体104mg(收率73％)将其转化为酒石酸盐，得到标题化合物17参考例1617-甲基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-3-乙酰氧-14β-羟基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃·酒石酸盐(化合物18)的合成将用参考例14记载的方法制备的17-甲基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-3，14β-二羟基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃150mg(0.39mmol)，乙酸酐109μL(1.16mmol)溶解于吡啶5ml中，在室温搅拌3小时将反应液用甲苯共沸2，3次，除去吡啶，将浓缩得到的粗产物用硅胶柱色谱纯化，得到17-甲基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-3-乙酰氧-14β-羟基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃110mg(收率66％)将其转化为酒石酸盐，得到标题化合物18参考例17 17-甲基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-3-甲氧-14β-羟基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃·酒石酸盐(化合物19)的合成将用参考例4记载的方法制备的17-甲基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-14β-羟基-3-甲氧-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃转化为酒石酸盐，得到标题化合物19参考例1817-甲基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-14β-羟基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃·酒石酸盐(化合物20)的合成将17-甲基-6-氧代-4，5α-桥氧-14β-羟基-吗啉喃112mg(0.39mmol)，O-氨基苯甲醛143mg(1.18mmol)，甲磺酸77μl(1.18mmol)溶解于乙醇10ml，加热回流3小时进行喹啉的合成将反应溶液减压浓缩，向所得残渣中加入饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取合并有机层，用无水硫酸钠干燥后，将浓缩得到的粗产物用硅胶柱色谱纯化，得到17-甲基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-14β-羟基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃114mg(收率79％)将其转化为酒石酸盐，得到标题化合物20参考例1917-环丙基甲基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-3，14β-二羟基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃·甲磺酸盐(化合物21)的合成按照美国专利4,816,586号中记载的方法合成参考例2017-烯丙基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-3，14β-二羟基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃·甲磺酸盐(化合物22)的合成按照美国专利4,816,586号中记载的方法合成参考例2117-(4-甲基苯基)乙基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-3，14β-二羟基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃·甲磺酸盐(化合物23)的合成将按照参考例1记载的方法制备的17-氢-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-14β-羟基-3-甲氧-6，7，2’，3’-吗啉喃95mg(0.25mmol)溶解于苯8ml中，加入(4-甲基苯基)乙基甲苯磺酸酯335mg(1.15mmol)，三乙胺0.30mL(2.15mmol)，加热回流搅拌一夜将反应液放冷后，加入饱和碳酸氢钠水溶液，用氯仿萃取合并有机层，用无水硫酸钠干燥后，将浓缩得到的粗产物用硅胶柱色谱纯化，得到17-(4-甲基苯基)乙基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-14β-羟基-3-甲氧-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃90mg(收率73％)将该纯化产物溶解于二氯甲烷5ml中，冷却至0℃后，加入1当量三溴化硼溶液1.30mL(1.30mmol)，之后在室温搅拌30分钟向该反应液中滴加入氨水6mL，再搅拌1小时向该反应混合液中加入饱和碳酸氢钠水溶液，用氯仿萃取合并有机层，用饱和食盐水洗净，硫酸镁干燥后，减压浓缩将浓缩得到的粗产物用硅胶柱色谱纯化，得到17-(4-甲基苯基)乙基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-3，14β-二羟基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃83mg(收率95％)将其转化为甲磺酸盐，得到标题化合物23参考例2217-(4-氟苯基)乙基-6，7-脱氢-4，5α-桥氧-3，14β-二羟基-6，7，2’，3’-喹啉并吗啉喃·甲磺酸盐(化合物24)的合成按照参考例21记载的方法，使用(4-氟苯基)乙基甲磺酸酯代替(4-甲基苯基)乙基甲磺酸酯，得到标题化合物24上述化合物1～24的结构式，酸加成盐，各种谱的数据如下表所示表1 表2 表3 表4 表5 表6 表7 表8 实施例1对大鼠节律性膀胱收缩运动的作用用乌拉坦(1.0g/kg)腹腔给药将SD系雌性大鼠麻醉从动物的尿道口插入聚乙烯管达到膀胱，结扎固定后，从同一管适当注入生理盐水(注入速度；约0.2ml/分，，最大约1.5ml/只)，使膀胱表现出节律性收缩运动另外，对于膀胱的节律性收缩运动，通过插入膀胱内的聚乙烯管测定膀胱内压来监测至少确认10次稳定的节律性收缩运动后，将被检测化合物以1ml/kg的用量静脉给药将被检测化合物给药后10分钟内，膀胱内压显示给药后立即显示的膀胱内压的50％以下时判定为有膀胱收缩，到再次显示50％以上的膀胱内压的时间作为节律性膀胱收缩抑制时间作为被检测化合物的给药溶剂，被检测化合物1、2、3、4、5、11、12、21、23、24使用5％木糖醇(キシリト一ル)溶液，被检测化合物6、9、10、13、14、15、16、17、18、19、20、22使用生理盐水，被检测化合物7使用10％乙醇溶液，被检测化合物8使用10％DMSO溶液另外，分别用1ml/kg的用量，对节律性膀胱收缩抑制时间可能有少量影响的5％木糖醇溶液，10％乙醇溶液和10％DMSO溶液的各种溶剂进行研究该结果如表9所示每一种化合物中也确认了单独使用的溶剂的比较节律性膀胱收缩作用表9被检测化合物给药量例数 平均节律性膀胱收缩抑制时间(分)5％木糖醇 1mg/kg 41.3化合物1 30mg/kg46.2化合物2 10mg/kg44.5化合物3 20mg/kg45.0化合物4 10mg/kg413.9化合物5 30mg/kg45.7化合物1110mg/kg412.4化合物120.3mg/kg 514.6化合物21 10mg/kg 4 10.0化合物23 10mg/kg 4 9.2化合物24 10mg/kg 4 2.3生理盐水化合物63mg/kg6 24.1化合物91mg/kg6 7.3化合物10 10mg/kg 4 7.4化合物13 1mg/kg4 6.5化合物14 3mg/kg4 12.3化合物15 1mg/kg6 10.7化合物16 0.3mg/kg 4 15.0化合物17 1mg/kg5 7.4化合物18 1mg/kg4 6.6化合物19 1mg/kg4 7.7化合物20 1mg/kg4 11.1化合物22 10mg/kg 3 1.410％乙醇 1mg/kg5 1.5化合物75mg/kg5 17.110％DMSO 1mg/kg4 3.5化合物810mg/kg 4 19.