人血白蛋白在制备治疗蛛网膜下腔出血的药物中的应用的制作方法【技术领域】[0001]本发明属于药物新用途【技术领域】，具体涉及人血白蛋白在制备治疗蛛网膜下腔出血的药物中的应用。[0002]蛛网膜下腔出血(SAH)是指脑底部或脑表面血管破裂后，血液流入蛛网膜下腔引起相应临床症状的一种脑卒中，又称原发性蛛网膜下腔出血。SAH约占全部脑卒中的5%-10%，年发病率约6-20/10万人。[0003]SAH的常见原因有先天性动脉瘤、脑血管畸形、脑底异常血管网病(moyamoya病)以及夹层动脉瘤、血管炎、高血压动脉硬化等。血液进入蛛网膜下腔，通过围绕在脑和脊髓周围的脑脊液迅速播散，刺激脑膜引起脑膜刺激征。颅内容量增加引起颅内压升高，甚至脑疝。在脑室和脑底凝固的血液可阻塞脑脊液循环通路，使其吸收和回流受阻引起梗阻性脑积水，或引起蛛网膜粘连，后交通动脉瘤的扩张或破裂出血可压迫邻近的动眼神经，产生不同程度的动眼神经麻痹。血细胞释放的血管活性物质可引起血管痉挛，严重者发生脑梗死。血液刺激下丘脑可引起血糖升高、发热等内分泌和自主神经紊乱。SAH在30天内病死率约为25%或更高。再出血 的病死率为50%，2周内再出血率为20%-25%。影响SAH患者预后的的主要因素是早期脑损伤和血管痉挛导致的迟发型脑损伤等并发症。目前临床上SAH的治疗手段十分有限，仅有一般处理和对症治疗、降低颅内压、防治再出血。对于早期脑损伤，尚缺乏有效的治疗策略。[0004]人血白蛋白是由健康人血中提取的白蛋白。一般人体的白蛋白正常值在每100mL血液中含有3.8-4.8克。人血白蛋白可增加血容量和维持血浆胶体渗透压:白蛋白占血浆胶体渗透压的80%，主要调节组织与血管之间水分的动态平衡。由于白蛋白分子量较高，与盐类及水分相比，透过膜内速度较慢，使白蛋白的胶体渗透压与毛细管的静力压抗衡，以此维持正常与恒定的血容量；同时在血循环中，Ig白蛋白可保留18ml水，每5g白蛋白保留循环内水分的能力约相当于100mL血衆或200ml全血的功能,从而起到增加循环血容量和维持血浆胶体渗透压的作用。[0005]基于这一药理作用，人血白蛋白一方面有助于维持SAH后的血容量和脑灌注压，但是，也可能增加心脏负荷、升高颅内压诱发动脉瘤破裂或肺水肿。其真实药效情况如何，既往并无研究证据。
[0006]本发明的目的在于提供人血白蛋白的一种新应用。
[0007]本发明的目的可通过以下技术方案实现:
[0008]人血白蛋白在制备治疗蛛网膜下腔出血的药物中的应用，优选在制备治疗蛛网膜下腔出血后神经损伤的药物中的应用。
[0009]所述的药物包括药理学有效剂量的人血白蛋白以及药理学可接受的载体。所述的载体描述了对有机体不造成明显刺激并且不消弱人血白蛋白生物活性和性能的物质。载体必须有足够的纯度和足够低的毒性，以使其适合施用至正在治疗的对象。载体可以是惰性的，或它可以具有药学益处。
[0010]人血白蛋白和所述的载体可被制备成脂质体、纳米材料、微乳液、微球、凝胶或囊泡等剂型。这些剂型的制备方法和所用的辅料均为现有技术。
[0011]有益效果:
[0012]本发明通过实验证实，一定浓度的人血白蛋白能够改善蛛网膜下腔出血后的早期脑损伤，包括减轻脑水肿，降低神经元的死亡和凋亡，改善血脑屏障的破坏，进而对脑组织起到保护作用，可用于制备治疗蛛网膜下腔出血的药物，特别是制备治疗蛛网膜下腔出血后神经损伤的药物。
[0013]说明书附图
[0014]图1为在出血量严重程度评分时对脑底基底池的具体分区。
[0015]图2为假手术组(Sham)、SAH组、低剂量白蛋白组(Alb0.63)和高剂量白蛋白组(Albl.25)建模后脑基底池出血量严重程度评分的比较。
[0016]图3为假手术组(Sham)、SAH组、低剂量白蛋白组(Alb0.63)和高剂量白蛋白组(Albl.25)在建模后1，3，7，14天的死亡率比较。
[0017]图4为假手术组(Sham)、SAH组、低剂量白蛋白组(Alb0.63)和高剂量白蛋白组(Albl.25)建模后24h脑左右半球脑水肿程度比较结果。
[0018]图5为假手术组(Sham)、SAH组、低剂量白蛋白组(Alb0.63)和高剂量白蛋白组(Albl.25)建模后24h脑左右半球血脑屏障破坏程度比较结果。
[0019]图6为假手术组(Sham)、SAH组、低剂量白蛋白组(Alb0.63)和高剂量白蛋白组(Albl.25)建模后1，3，7，14，28天运动感觉神经功能评分比较。

[0020]实施例1
[0021]I材料与方法
[0022]1.1试剂与仪器
[0023]20% 人血白蛋白(德国 Biotest)、10% 水合氯醒、Evans blue (Sigma-aldrich)、甲酰胺、水浴箱、烘箱、酶标仪(Biotech)等。
[0024]1.2实验动物
[0025]成年健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠300_350g，由南京军区南京总医院动物实验中心提供，术前单笼饲养3天，以避免非特异性因素的影响，饲养于室温20±2°C，12小时光照/12小时黑暗环境中，保证自由饮食饮水。
[0026]1.3实验方法
[0027]1.3.1动物分组
[0028]将SD大鼠随机分为假手术组，SAH组，低剂量白蛋白组(0.63g/kg)、高剂量白蛋白组(1.25g/kg)。
[0029](I)假手术组:线栓插入颅内，但并不刺破血管；
[0030] (2) SAH组:线栓经颈总-颈内入颅，将大脑中-前动脉分叉处刺破；[0031 ] (3 )低剂量白蛋白组:SAH建模之后，按照0.63g/kg经尾静脉即刻给予20%人血白蛋白；
[0032](4)高剂量白蛋白组:SAH建模之后，按照1.25g/kg经尾静脉即刻给予20%人血白蛋白。
[0033]1.3.2SAH 模型制备
[0034]用10%水合氯醛将大鼠麻醉达适宜状态后，仰卧位固定于鼠板，以颅内血管穿刺法建立大鼠SAH模型。大鼠颈部备皮并消毒,解剖并充分暴露出右侧颈总、颈内、颈外动脉，结扎颈外动脉和颈总近心端，并在颈内动脉起始处预留一根线，在两个结之间的颈总动脉上用显微手术剪剪一个小口，用手术镊持带有尖端的4-0线栓通过颈总上的小口缓慢插入，经颈内动脉入颅，直到感觉到阻力后再将将线栓向前3mm以刺破大脑前和中动脉的分支处。刺破后立即将线栓抽出，将颈内动脉结扎，即成功建造大鼠SAH模型。假手术组的大鼠，在线栓缓慢入颅后感觉到阻力即撤出，并不刺破血管。术中、术后都注意大鼠的保温以及随后能自由饮食饮水，直到取脑安乐死。
[0035]1.4SAH严重程度评分测定和1，3，7，14天死亡率
[0036]根据 Sugawara T, Ayer R, Jadhav V, Zhang JH.A new grading system evaluatingbleeding scale in filament perforation subarachnoid hemorrhage rat model.Journal of Neuroscience M ethods, 2008，167(2):327-334 中的评分标准,各组大鼠造模后24h取脑，将脑底拍照，在照片中，将基底池分为6个部分(图1)，然后按照表1的评分标准进行评分。
[0037]表1SAH后出血严重程度评分标准