专利名称：通过液体深层发酵制备的松露保健品及其制备方法松露(学名Tubermagnatum ;melanosporum ;sinensis ;indicum)是一种多生长在松树、栎树、橡树下，一年生的天然真菌类植物。因其是被猪从地下拱出，国人称“猪拱菌”、“拱菌”，亦称“无根藤果”、“隔山撬”;法国名"perigord truffle”，英国名“truffle”。属真菌门、子囊菌纲、块菌目、块菌属食用真菌。它与肥鹅肝、鱼子酱合称为“法国三大美食珍品”。松露对生长环境的要求极其苛刻，造成了它的珍稀昂贵。 松露与生俱来的独特香味更使它成为在法国菜、意大利菜中极为珍贵的调味圣品。历史上最大的白松露发现于1951年，重约4磅，当时售价为5000美元左右。在第二次世界大战结束不久的年代里，5000美元的珍贵程度可想而知。目前，国内外的相关研究主要集中在松露功能因子的提取及药理、药效上。但是，在松露子实体的人工栽培领域，却受到很多的技术限制，很少大规模地进行工业化生产以及广泛地民用化使用，同时，该技术领域也难以商业化使用。十年前，自然界中松露子实体的年保有量约有I万吨，但是目前的保有量却只有约5千吨，而且，如上所述，松露子实体又由于技术上原因，难以大量的人工生产，因此，人们对松露保健功效和治疗功效的渴求与松露子实体保有量的短缺产生了显著的矛盾。
本发明的目的在于，克服上述现有技术的缺陷而提供一种能够大规模地进行工业化生产，并且能够以较低的成本生产出效用较高的松露子实体的通过液体深层发酵制备松露保健品的方法。为实现上述目的，本发明采取以下设计方案本发明的一种通过液体深层发酵制备松露保健品的方法，包括如下步骤A、将松露菌接入培养液中，并在18 28°C的温度下以200 300次/分钟的震荡频率在摇床上震荡培养72 96小时，获得菌种液；B、将步骤A中得到的菌种液接入含重量份8 12%大麦芽、重量份3 6%大豆的液体培养基中，接种量为5 10%，并在23 27°C的温度下通气培养48 72小时，经过生物发酵，获得发酵的松露菌丝体以及松露菌发酵液；C、将步骤B中得到的松露菌丝体进行细胞组织破碎后，用水提取，浸提比为O. 8 1:2 5，浸提温度为90 95°C，浸提时间为2 3小时，从而获得松露菌丝体提取液；D、将步骤B中得到的松露菌发酵液以及步骤C中得到的松露菌丝体提取液相互混合后，将所得的混合液浓缩4 7倍，并使其折光糖度达到10 12%，从而得到松露保健品。优选地，在所述步骤D中，利用反渗透膜浓缩方法或者利用真空浓缩方法对所述混合液进行浓缩处理。更优选地，所述反渗透膜浓缩方法的膜设备操作压力位设定在40kg/cm2以下，并于室温下操作。优选地，在所述步骤B中，发酵终止的指标为pH值达到4. O 5. 5，折光糖度达到2. 8 3. 8%,菌丝体得率干重达到O. 65 O. 85%。更优选地，在所述步骤D中，松露菌发酵液与松露菌丝体提取液相互混合后的pH值为6 7，折光糖度为2 6%。本发明的另一目的在于提供一种通过液体深层发酵制备的松露保健品，所述松露保健品是由如下方法制备而成A、将松露菌接入培养液中，并在18 28°C的温度下以200 300次/分钟的震荡 频率在摇床上震荡培养72 96小时，获得菌种液；B、将步骤A中得到的菌种液接入含重量份8 12%大麦芽、重量份3 6%大豆的液体培养基中，接种量为5 10%，并在23 27°C的温度下通气培养48 72小时，经过生物发酵，获得发酵的松露菌丝体以及松露菌发酵液；C、将步骤B中得到的松露菌丝体进行细胞组织破碎后，用水提取，浸提比为O. 8 1:2 5，浸提温度为90 95°C，浸提时间为2 3小时，从而获得松露菌丝体提取液；D、将步骤B中得到的松露菌发酵液以及步骤C中得到的松露菌丝体提取液相互混合后，将所得的混合液浓缩4 7倍，并使其折光糖度达到10 12%，从而得到松露保健品。优选地，在所述步骤D中，利用反渗透膜浓缩方法或者利用真空浓缩方法对所述混合液进行浓缩处理。优选地，在所述步骤B中，发酵终止的指标为pH值达到4. O 5. 5，折光糖度达到2.8 3. 8%,菌丝体得率干重达到O. 65 O. 85%。本发明的优点是本发明采用菌种原产地的松露菌进行分离、纯化和培育，采用工业化液体深层发酵技术，使得松露菌种能够在液体培养基中进行大量的繁殖，并且，所得的代谢产物以及菌丝体中均含有与原松露菌效用相同的有效成分，此外，本发明还使得松露菌的子实体能够在工业化条件进行生产和培育，工艺简单、成本可控，从而能够显著地降低生产成本，使得普通消费者也能使用上名贵的保健产品。更优选地，在本实施例所述的步骤B中，发酵终止的指标为pH值达到4. O 5. 5，折光糖度达到2. 8 3. 8%，同时菌丝体得率干重达到O. 65 O. 85%，上述三种指标(pH值、折光糖度、菌丝体得率)优选为同时达到各自相应的参数，即可终止发酵。另外，在本实施例所述的步骤D中，松露菌发酵液与松露菌丝体提取液相互混合后的自然PH值为6 7，折光糖度为2 6%。本发明方法所得产物的功能性成分含量和质量均非常稳定，并高于现代药理学研究分析对天然蛹虫草成分含量的数值认定范围。本发明制备方法的工业化控制能力强，且其成本远低于天然原料。实施例2 如下将提供本发明制备方法的另一种优选实施例。本实施例的制备方法包括A、首先，选用食、药用菌松露，将松露菌接入培养液中，并在28°C的温度下以200次/分钟的震荡频率在摇床上震荡培养96小时，获得菌种液；B、将步骤A中得到的菌种液接入含重量份12%大麦芽、重量份3%大豆的液体培养基中，接种量为10%，并在23°C的温度下通气培养72小时，经过生物发酵，获得发酵的松露菌丝体以及松露菌发酵液；C、将步骤B中得到的松露菌丝体进行细胞组织破碎后，用水提取，浸提比为1: 2，浸提温度为90°C，浸提时间为3小时，从而获得松露菌丝体提取液；D、将步骤B中得到的松露菌发酵液以及步骤C中得到的松露菌丝体提取液相互混合后，将所得的混合液浓缩7倍，并使其折光糖度达到12%，从而得到松露保健品。实施例3 如下将提供本发明制备方法的再一种优选实施例。本实施例的制备方法包括如下步骤A、将松露菌接入培养液中，并在22°C的温度下以260次/分钟的震荡频率在摇床上震荡培养80小时，获得菌种液；B、将步骤A中得到的菌种液接入含重量份10%大麦芽、重量份5%大豆的液体培养基中，接种量为7%，并在25°C的温度下通气培养60小时，经过生物发酵，获得发酵的松露菌丝体以及松露菌发酵液；C、将步骤B中得到的松露菌丝体进行细胞组织破碎后，用水提取，浸提比为O. 9:4，浸提温度为93°C，浸提时间为2. 5小时，从而获得松露菌丝体提取液；D、将步骤B中得到的松露菌发酵液以及步骤C中得到的松露菌丝体提取液相互混合后，将所得的混合液浓缩6倍，并使其折光糖度达到11%，从而得到松露保健品O实施例4 本实施例提供一种通过液体深层发酵制备的松露保健品，所述松露保健品是由如下方法制备而成A、将选用食、药用松露菌接入培养液中，并在18 28°C的温度(本实施例优选为20°C )下以200 300次/分钟(本实施例优选为260次/分钟)的震荡频率在摇床上震荡培养72 96小时(本实施例优选为82小时)，获得菌种液；B、将步骤A中得到的菌种液接入含重量份8 12% (本实施例优选为11%)大麦芽、重量份3 6% (本实施例优选为5%)大豆的液体培养基中，接种量为5 10% (本实施例优选为8%)，并在23 27°C (本实施例优选为26°C )的温度下通气培养48 72小时(本实施例优选为56小时，经过生物发酵，获得发酵的松露菌丝体以及松露菌发酵液；C、将步骤B中得到的松露菌丝体进行细胞 组织破碎后，用水提取，浸提比为O. 8 1:2 5 (本实施例优选为1:3)，浸提温度为90 950C (本实施例优选为92°C)，浸提时间为2. 5小时，从而获得松露菌丝体提取液；D、将步骤B中得到的松露菌发酵液以及步骤C中得到的松露菌丝体提取液相互混合后，将所得的混合液浓缩4 7倍，并使其折光糖度达到10 12%，从而得到松露保健品。其中，在步骤D中所采用的浓缩方法可以为反渗透膜浓缩方法或者真空浓缩方法，优选地，在本实施例中，采用反渗透膜浓缩方法对所述混合液进行浓缩处理。并且，进一步，在本实施例采用反渗透膜浓缩方法时，反渗透膜浓缩方法的膜设备操作压力位设定在40kg/cm2以下，并于室温下操作，由此获得的松露保健品，其效用与直接服用松露相当。优选地，在本实施例所述的步骤B中，发酵终止的指标为pH值达到4. O 5. 5，折光糖度达到2. 8 3. 8%，同时菌丝体得率干重达到O. 65 O. 85%，上述三种指标(pH值、折光糖度、菌丝体得率)同时达到各自相应的指标，即可终止发酵。另外，在本实施例所述的步骤D中，松露菌发酵液与松露菌丝体提取液相互混合后的PH值为6 7，折光糖度为2 6%。本发明一种通过液体深层发酵制备的松露保健品的其他实施例与上述实施例1、2和3相同或相近，在此不再赘述。对于本领域技术人员而言，不难从上述实施例1、2和3中获得相关的技术启示，并用以制备或生产松露保健品。显而易见，本领域的普通技术人员，可以用本发明的一种通过液体深层发酵制备的松露保健品及其制备方法，形成各种类型的保健品及其制备方法。上述实施例仅供说明本发明之用，而并非是对本发明的限制，有关技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明范围的情况下，还可以作出各种变化和变型，因此所有等同的技术方案也应属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由各权利要求限定。

本发明涉及通过液体深层发酵制备的松露保健品及其制备方法。其中制备方法包括A、将松露菌接入培养液中，并在摇床上震荡培养，获得菌种液；B、将步骤A中得到的菌种液接入含大麦芽、大豆的液体培养基中，通气培养后，获得发酵的松露菌丝体以及松露菌发酵液；C、将步骤B中得到的松露菌丝体进行细胞组织破碎后，用水提取，从而获得松露菌丝体提取液；D、将步骤B中得到的松露菌发酵液以及步骤C中得到的松露菌丝体提取液相互混合后，将所得的混合液浓缩，从而得到松露保健品。本发明采用工业化液体深层发酵技术，使得松露菌种能够在液体培养基中进行工业化的大量繁殖，因此，工艺简单、成本较低。