可拆卸式细胞爬片培养板的制作方法 [0002] 细胞爬片是指贴壁细胞贴附在一定的固相表面上生长，细胞爬片的制备是免疫细 胞化学实验、细胞免疫荧光实验和TUNEL细胞凋亡等细胞学实验的首要步骤。细胞爬片一 般使用盖玻片进行手工制作，也可选在24孔板中使用的已切割好的专用玻璃爬片。虽然这 两种玻璃爬片在工作中使用较为广泛，但也存在许多问题，如： [0003] (1)操作繁琐、易污染：盖玻片使用前需要裁剪成一定规格，在裁剪过程中容易碎 裂，而且需要经过后续的泡酸、刷洗、灭菌、烘干等处理后才能使用。 [0004] (2)不易用镊子夹取：盖玻片使用过程中没有弧度，使夹取非常困难，而且用力夹 取会导致碎裂。虽然专用玻璃爬片有一定的弧度，但在培养板中由于其紧密的粘贴在培养 板底部，而且专用玻璃爬片表面积更小，更不易夹取。 [0005] (3)细胞爬片效果较差：细胞在生长过程中，有时只在玻璃片背面生长，而不能爬 到玻璃片上，导致实验失败。 [0006] (4)同一性差：由于不能控制细胞在玻璃爬片上的数目，导致各玻璃爬片组间差 异较大，影响实验数据分析。 [0007] (5)不利于后续实验：由于玻璃爬片不易取出，后续实验只能一直在细胞培养孔 板中操作，这就对各组细胞平行处理造成影响，而且免疫化学的HE染色或梯度酒精脱水也 无法同时控制，造成各组处理时间上存在差异。而且在使用二甲苯对玻璃爬片进行透明后 瞭干时，二甲苯会对聚苯乙烯制作的培养板产生一定的溶解作用，使玻璃爬片无法取出。 实用新型内容
[0008] 本实用新型的目的是针对现有技术中存在的技术缺陷，而提供一种可拆卸式细胞 爬片培养板。
[0009] 为实现本实用新型的目的所采用的技术方案是：
[0010] 一种可拆卸式细胞爬片培养板，包括载玻片和多个与所述的载玻片可分离地固定 连接的阵列筒，所述的阵列筒为聚苯乙烯材质且两端均为开口，所述的玻璃片设置有包被 层。
[0011] 所述的阵列筒与载玻片采用不干型压敏胶粘剂粘接。
[0012] 所述的载玻片分为标记区和培养区，所述的培养区两相邻侧边上蚀刻有字符标 记，所述的阵列筒固定连接在由所述的字符标记限定的坐标处。
[0013] 所述的载玻片为矩形，其长100mm，宽26mm，厚1. 2mm，所述的载玻片从长轴方向上 分为两个区域，其中标记区宽度为20mm，培养区宽度为80mm。
[0014] 所述阵列筒高10mm，外径8. 5mm,内径6mm。
[0015] 与现有技术相比，本实用新型的有益效果是：
[0016] 本实用新型的可拆卸式细胞爬片培养板，通过将高纯度聚苯乙烯制作的细胞培 养阵列筒和具有包被层的载玻片相结合，以载玻片为细胞种植和生长底面，聚苯乙烯材料 制作的阵列筒容纳细胞生长培养基，实现细胞爬片的批量实验，经多聚赖氨酸包被的载玻 片，可适用于各种类型细胞的贴附。




[0017] 图1所示为本实用新型的细胞爬片培养板俯视结构示意图。
[0018] 附图标记说明
[0019] 1.载玻片；2.阵列筒；11.培养区；12.标记区。


[0020] 以下结合附图和具体实施例对本实用新型作进一步详细说明。应当理解，此处所 描述的具体实施例仅仅用以解释本实用新型，并不用于限定本实用新型。
[0021] 如图1所示，本实用新型的可拆卸式细胞爬片培养板包括载玻片1和多个与所述 的载玻片可分离地固定连接的阵列筒2,所述的阵列筒为聚苯乙烯材质，以底面和顶面同为 开口的圆筒形为宜，所述的载玻片1设置有包被层，其中，阵列筒2由高纯度聚苯乙烯材料 一次性塑形制成，为了使细胞更易于贴附于载玻片上，使载玻片适于多种细胞的生长，所述 的载玻片在多聚赖氨酸溶液中进行包被处理，具体来说将泡酸后冲洗干净的标记载玻片浸 入0. 01 %的多聚赖氨酸溶液中，室温下进行包被6小时，包被完成后冲洗晾干。
[0022] 阵列筒和载玻片固定后，每个阵列筒分别和载玻片构成系统培养小室，每个细胞 培养小室呈无底面空心圆柱形，其规格为外径8. 5_，内径6_，高度10_。
[0023] 所述的阵列筒与载玻片采用不干型压敏胶粘剂粘接，如可选择3M公司的75喷胶 用于阵列筒与载玻片的粘接，75喷胶是一种可重新定位的，透明清澈的不干型压敏胶粘剂， 胶性强度适中，胶性持久，可反复粘贴，揭后无残胶。在阵列筒的一侧空心底面均匀涂布75 喷胶，然后将其按压在已包被的载玻片上即可完成对接，对接时将阵列筒与载玻片的横纵 向标记对齐，细胞爬片培养板粘接完成后，可应用射线或环氧乙烷灭菌，单个封装，便于实 验的使用。
[0024] 为了在同一张载玻片上增加细胞爬片的数量，同时兼顾载玻片可以在普通培养板 和免疫化学实验器具中的使用，设计的载玻片长100mm，宽26mm，厚1. 2mm。将载玻片从长轴 方向上分为两个区域：一个是标记区12宽度为20mm ;另一个是培养区11宽度为80mm。标 记区进行磨砂制作，便于使用后的文字书写。细胞培养区进行阵列筒的标记和粘贴定位。
[0025] 为了能将阵列筒安置在载玻片的指定位置并加以区分，培养区的标记采用纵向和 横向联合标记，即，培养区两相邻侧边上蚀刻有字符标记，所述的阵列筒固定连接在由所述 的字符标记限定的坐标处。如，以英文大写字母A、B标记纵向，阿拉伯数字1、2、3、4、5、6、 7、8标记横向，每个数字间隔距离为9mm。
[0026] 具体来说，应用数控刻字机根据标记规格、数字和字母打印刻字胶膜，然后将胶膜 粘贴在载玻片上，撕掉字母数字部分的胶膜，露出标记字母和数字的玻璃，喷涂氢氟酸蚀刻 露出的载玻片部分30分钟，充分冲洗后，撕去胶膜，即可得到永久的标记载玻片。使用时在 已消毒的通风橱内打开培养板，然后将培养板放入130mm的平底培养板（市场有售）中即 可使用。
[0027] 本实用新型的优点有：
[0028] 1、操作简单、不易污染：工厂化生产该产品后，使用者可直接将细胞爬片培养板放 入130mm的平底培养板（市场有售）中即可使用，省去了诸多繁琐预处理步骤。而且载玻 片较厚，便于从平底培养皿中取出进行后续实验。
[0029] 2、细胞爬片效果好：由于细胞生长底面采用多聚赖氨酸处理，这种方式的处理更 利于多种细胞的贴壁生长，尤其适用于不易贴壁的细胞爬片。
[0030] 3、后期实验方便、省时省力：细胞爬片培养板的阵列筒在细胞爬片完成后可直接 拆卸，载玻片上不留残余胶，拆卸后的载玻片可置入免疫组化相关实验器材中进行操作，实 现对不同阵列筒细胞的同时处理。
[0031] 4、同一性好：细胞计数后可分别向每个孔中加入相同的细胞数目，从而保证了贴 附的细胞数量在阵列筒中是相同的，而且在后续的免疫细胞化学等实验操作中，整个细胞 爬片培养板上的细胞结合化学试剂的时间是统一的。
[0032] 5、集成化程度高：一张细胞爬片培养板可实现16个孔细胞爬片，便于批量实验， 若需要更多的细胞爬片，通过增加细胞爬片培养板的数量便可轻松实现。
[0033] 以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出的是，对于本【技术领域】的普 通技术人员来说，在不脱离本实用新型原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改 进和润饰也应视为本实用新型的保护范围。