专利名称：一种含间质水解剂和细胞毒药物的抗癌缓释剂的制作方法癌症的治疗主要包括手术、放疗及化疗等方法。其中手术治疗不能清除散在的瘤细胞，因此常复发或导致肿瘤细胞因手术刺激而扩散转移；放疗和传统的化疗不具选择性，难于肿瘤局部形成有效药物浓度或治疗剂量，效果差，毒性大，单纯提高药物或放射剂量又受到全身毒性反应的限制。参见孔等“瘤内放置顺铂加系统卡莫司汀治疗大鼠脑肿瘤”《外科肿瘤杂志》69期76-82页，1998年(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2)76-82)。低剂量的药物治疗不仅能够增加癌细胞的药物耐受性，而且还可促进其浸润性生长”，参见梁等“顺铂脉冲筛选后增加了人肺癌细胞的药物耐受性及体外浸润能力并伴有基因表达的改变”《国际癌症杂志》111期484-93页，2004年(Liang Y，et al.，Int J Cancer.2004；111(4)484-93)。抗肿瘤药物局部放置能够较好地克服以上缺陷，不仅能够明显提高肿瘤局部的药物浓度，而且可以显著降低全身毒性反应。大量体内外试验已显示出对实体肿瘤的治疗效果，参见孔庆忠等“瘤内放置顺铂加系统卡莫司汀治疗大鼠脑肿瘤”《外科肿瘤杂志》69期76-82页，1998年(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2)76-82)和孔庆忠等“瘤内放置顺铂治愈大鼠原发脑肿瘤”《外科肿瘤杂志》64期268-273页(1997年)(Kong Q et al.，JSurg Oncol.1997 Oct；64268-273)。还可参见中国专利(ZL00111093.4；ZL96115937.5；申请号001111264，001111272)及美国发明专利(专利号6,376,525B1；5,651,986；5,626,862)。然而，实体肿瘤由肿瘤细胞和肿瘤间质组成，其中肿瘤间质中的血管不仅为肿瘤细胞的生长提供了支架及必不可少的营养物质，还影响了化疗药物在肿瘤周围及肿瘤组织内的渗透和扩散，参见尼提等“细胞外间质的状况对实体肿瘤内药物运转的影响”《癌症研究》60期2497-503页，2000年(Netti PA，Cancer Res.2000，60(9)2497-503)。肿瘤间质中的血管及结缔组织中的纤维蛋白及胶原蛋白等成分与过度增生的肿瘤细胞导致实体肿瘤的间质压力(interstitial pressure)高、间质粘性(interstitialviscosity)大、组织张力系数(tissue tensile modulus)大、间质液导率(hydraulicconductance)低。以上诸因素大大限制了药物进入实体肿瘤以及在肿瘤内的有效扩散，因此构成肿瘤化疗的主要障碍。不仅如此，肿瘤间质中的血管对常规化疗药物并不敏感，常导致肿瘤细胞对抗癌药物的耐受性的增强，其结果是治疗失败。
除此之外，将间质水解剂和或抗癌药物制成缓释剂(主要为缓释注射剂和缓释植入剂)不仅能够极大地提高肿瘤局部的药物浓度、降低药物在循环系统中的药物浓度、降低药物对正常组织的毒性，还能够极大方便药物注射、减少手术操作的并发症、降低病人的费用。抗癌药物除能抑制肿瘤生长外，还能增加肿瘤细胞对抗癌药物的敏感性。以上意外发现构成本发明的主要内容。
本发明抗实体肿瘤缓释剂包括抗癌有效成分和药用辅料，抗癌有效成分选自抗癌药物及其衍生物和或间质水解剂。间质水解剂为血管抑制剂和/或蛋白水解酶，血管抑制剂除具有抑制肿瘤细胞生长的作用外，可有效地抑制或破坏肿瘤的血管并能抑制肿瘤的新生血管的形成，进而不仅使肿瘤细胞失去生长所需的支架及营养物质的来源，与蛋白水解酶合用或单独应用还可明显促进化疗药物进入肿瘤及在肿瘤周围及肿瘤组织内的渗透和扩散；蛋白水解酶可有效降解肿瘤间质中的血管及结缔组织中的纤维蛋白及胶原蛋白等成分，有效降低肿瘤内的张力、间质压力、间质粘性，进而提高其间质液导率，有利于药物进入实体肿瘤以及在肿瘤周围及肿瘤组织内的渗透和扩散。
本发明发现，抗癌药物和间质水解剂制成的抗癌药物缓释剂(主要为缓释注射剂和缓释植入剂)不仅能够极大地提高肿瘤局部的药物浓度、降低药物在循环系统中的药物浓度、降低药物对正常组织的毒性，还能够极大方便药物注射、减少手术操作的并发症、降低病人的费用。蛋白水解酶可有效降解肿瘤间质中的血管及结缔组织中的纤维蛋白及胶原蛋白等成分，有效降低肿瘤内的张力、间质压力、间质粘性，进而提高其间质液导率，有利于药物进入实体肿瘤以及在肿瘤周围及肿瘤组织内的渗透和扩散。以上意外发现构成本发明的主要内容。
本发明的复方药物组合物可制成任意制剂形式，如，但不限于，胶囊、缓释剂、颗粒剂、丸剂、片剂、散剂、注射剂、软膏、贴剂、植入剂、缓释剂植入剂、缓释剂注射剂等。其中以缓释剂为优选，以缓释剂植入剂和缓释剂注射剂为最优选。
本发明针对现有技术的不足，提供一种新的含间质水解剂和/或细胞毒药物的缓释剂，包括缓释注射剂和缓释植入剂。
本发明缓释注射剂，由缓释微球和溶媒组成。具体而言，该抗癌缓释注射剂由以下成分组成(A)缓释微球，包括抗癌有效成分0.5-60％缓释辅料40-99％助悬剂 0.0-30％以上为重量百分比和(B)溶媒，为普通溶媒或含助悬剂的特殊溶媒。
其中，抗癌有效成分为间质水解剂和细胞毒药物；缓释辅料粘度范围IV(dl/g)为0.1～0.8，选自聚磷酯(polyphosphoesters)、聚磷酸酯(polyphosphate)、聚亚磷酸酯(polyphosphite)、聚膦酸酯(polyphosphonate)、聚脂环磷酸酯(poly(cycloaliphatic phosphoester))、磷酸乙酯(EOP)、聚(1，4-二(羟乙酯)对苯二酸酯-co-磷酸乙酯/对苯二酸酯盐酸酯，80/20)(p(BHET-EOP/TC，80/20))、p(BHET-EOP/TC，50/50)、聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯(p(LAEG-EOP))、聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)(p(DAPG-EOP))、反(式)-1，4-二甲基环己烷(trans-1，4-cyclohexane dimethanil，CHDM)、己基二氯代磷酸酯(hexylphosphorodichloridate，HOP)、4-二甲胺基吡啶(4-dimethylaminopyridine，DMAP)、聚(1，4-二(羟乙酯)对苯二酸酯-co-4-二甲胺基吡啶-co-磷酸乙酯/对苯二酸酯盐酸盐，80/20)(p(BHDPT-EOP/TC，80/20))、p(BHDPT-EOP/TC，50/50)、聚(反(式)-1，4-二甲基环己烷-磷酸乙酯)(p(CHDM-HOP))、聚(反(式)-1，4-二甲基环己烷-己基二氯代磷酸酯(p(CHDM-EOP))、外消旋聚乳酸(D，L-PLA)、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物(D，L-PLGA)、单甲基聚乙二醇/聚乳酸(MPEG-PLA)、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物(MPEG-PLGA)、聚乙二醇/聚乳酸(PLA-PEG-PLA)、聚乙二醇/聚乳酸共聚物(PLGA-PEG-PLGA)、端羧基聚乳酸(PLA-COOH)、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA-COOH)、聚苯丙生、双脂肪酸与癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚体-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富马酸-癸二酸)[P(FA-SA)]、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)、聚对二氧环己酮(PDO)、聚三亚甲基碳酸酯(PTMC)、木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、壳聚糖、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、透明质酸、胶原蛋白、明胶、蛋白胶之一或其组合；助悬剂选自羧甲基纤维素钠、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物质、土温20、土温40和土温80之一或其组合。
抗癌药物主要经口服或静脉注射等常规途径给药，本发明的给药方式为局部缓释给药，在显著增强药物的治疗效果的同时明显降低其全身的毒性作用。已报道的经缓释途径应用的抗癌活性成分很多，并非所有均能在缓释辅料中达到有效释放的缓释效果。药用辅料有数百种以上，具有缓释作用的药用辅料，特别是能将本发明中所选的间质水解剂在人体或动物体内于一定的时间内缓慢释放比非显而易见，特定的缓释辅料与可缓释药物组合的选择需要经过大量的创造性劳动才能确定。相关数据，特别是动物体内释放特性的数据需要经过体内外大量创造性的实验才能获得，并非经过有限的实验就能确定，具有非显而易见性。
蛋白水解酶选自弹性蛋白酶、胰弹性蛋白酶、金属蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、链霉蛋白酶、分散酶、菠萝蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、木瓜酶、木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶、纤溶酶、舍雷硫代肽酶、胰酶、组织蛋白酶-G、半胱氨酸蛋白酶、硫酯酶、酰胺转移酶、转酯酶活性、纤溶酶原激活剂、胶原酶、多形核白细胞丝氨酸蛋白酶、核酸酶、脂肪酶、酯酶、链激酶、糖苷酶、透明质酸酶、神经氨酸酶、淀粉酶、松弛肽、干扰素(γ-干扰素)和纤维蛋白酶中的一种或其组合。
其中以弹性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、链霉蛋白酶、分散酶、菠萝蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纤溶酶、组织蛋白酶-G、纤溶酶原激活剂、胶原酶、链激酶、糖苷酶、透明质酸酶、溶菌酶、松弛肽、干扰素(γ-干扰素)和纤维蛋白酶为优选。
本发明中间质水解剂在组合物中所占的比例因具体情况而定，可为0.1％-50％，以1％-40％为佳，5％-30％为最佳。
血管抑制剂选自吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反应停、雷诺胺、血管抑素、内皮抑素、血管内皮抑素、甲磺酸伊马替尼、司马斯尼、达萨替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、苏尼替尼、特奥斯塔、帕尼托马、马立马司他、SU5416、SU6668、烟曲霉素、TNP-470中的一种或其组合。
以上新生血管抑制剂还包括它们的盐，如，但不限于，硫酸盐、磷酸盐、盐酸盐、乳糖酸盐、醋酸盐、天冬酸盐、硝酸盐、枸橼酸盐、嘌呤或嘧啶盐、琥珀酸盐及马来酸盐等。
上述新生血管抑制剂在缓释剂中所占的比例因具体情况而定，可为0.1％-50％，以1％-40％为佳，5％-30％为最佳。
细胞毒药物包括选自喜树硷、甲基苄肼、紫杉醇、顺铂、卡铂、瘤可宁、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、秋水仙碱、氨基三唑、丁基硫堇硫肟[DL-Buthionine-(S，R)-sulfoximine，简称BSO]、06-苄基鸟嘌呤、04-苄基叶酸(04-benzylfolic acid)。
上述细胞毒药物在缓释剂中的重量百分比从0.01％-99.99％，以1％-50％为佳，以5％-30％为最佳。
当药物缓释微球中的抗癌有效成分仅为间质水解剂或细胞毒药物时，抗癌缓释注射剂主要用于增加其它途径应用的间质水解剂或细胞毒药物的作用效果，或用于对放疗或其它疗法的增效。当药物缓释微球中的抗癌有效成分仅为间质水解剂或其增效剂(细胞毒药物)时，抗癌缓释注射剂的应用及增效方式为(1)含间质水解剂的缓释注射剂局部注射，而细胞毒药物经其他途径应用；(2)局部注射含细胞毒药物的缓释注射剂，其他途径应用间质水解剂；(3)局部注射含间质水解剂的缓释注射剂与含细胞毒药物的缓释注射剂；或(4)局部注射含间质水解剂和细胞毒药物的缓释注射剂。
局部应用的抗癌缓释注射剂还用于对放疗或其它疗法的增效。其他途径指，但不限于，动脉、静脉、腹腔、皮下、腔内给药。
抗癌有效成分间质水解剂和/或细胞毒药物在药物缓释微球中的重量百分比为0.5％-60％，以2％-40％为佳，以5％-30％为最佳。间质水解剂与细胞毒药物的重量比为1-19∶1到1∶1-19，以1-9∶1为优选。
本发明抗癌缓释注射剂微球中的抗癌有效成分优选如下，均为重量百分比2-40％的间质水解剂与2-40％的喜树硷、甲基苄肼、紫杉醇、顺铂、卡铂、瘤可宁、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、秋水仙碱、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、O6-苄基鸟嘌呤、O4-苄基叶酸的组合。
缓释辅料可为各种水溶性或非水溶性高分子多聚物，在多种缓释辅料中优选p(BHET-EOP/TC，80/20)、p(BHET-EOP/TC，50/50)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC，80/20)、p(BHDPT-EOP/TC，50/50)、p(CHDM-HOP)、p(CHDM-EOP)、外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、单甲基聚乙二醇/聚乳酸、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚苯丙生、双脂肪酸与癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚体-癸二酸)、聚(富马酸-癸二酸)、乙烯乙酸乙烯酯共聚物、聚乳酸、聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物、木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、壳聚糖、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、透明质酸、胶原蛋白、明胶和蛋白胶之一或其组合。其中損 恰熬邸钡囊馑肌本发明缓释微球中缓释辅料及其重量百分比最优选如下(1)55-90％的PLA；(2)50-90％的PLGA；(3)50-85％的聚苯丙生；(4)25-60％的PLGA与20-60％的癸二酸共聚或混合物；(5)30-90％的聚苯丙生与35-90％的PLA混合物；(6)40-95％的木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、壳聚糖、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、透明质酸、胶原蛋白、明胶或白蛋胶；或(7)40-95％的外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、单甲基聚乙二醇/聚乳酸、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物；(8)40-95％的p(BHET-EOP/TC，80/20)、p(BHET-EOP/TC，50/50)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC，80/20)、p(BHDPT-EOP/TC，50/50)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)；或(9)30-85％的p(DAPG-EOP)与40-80％的癸二酸共聚或混合物。
以上组合中，不同辅料的总量不超过98％。
分子量峰值及共聚物中单体比为a)聚乳酸分子量峰值为10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；b)聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物中，聚乙醇酸和羟基乙酸的比例为50-95∶50-50，分子量峰值为10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；c)聚苯丙生中，对羧苯基丙烷癸二酸为10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；d)p(BHET-EOP/TC)中，BHET-EOP∶TC为90-40∶10-60；e)p(BHDPT-EOP/TC)中、BHDPT-EOP∶TC为90-40∶10-60；f)p(DAPG-EOP)的分子量峰值为10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；在各种高分子聚合物中，分子量峰值因不同需要而定，可为，但不限于，5000-200，000，但以20,000-60,000为优选，以5,000-30,000为最优选；单体共混比因不同需要而定，可为，但不限于，10-90∶90-10，但以20-80∶80-20为优选，以40-60∶60-40为最优，高分子粘度范围IV(dl/g)为0.1～0.8，以0.2-0.6为优选，以0.2-0.5为最优选。
除上述缓释辅料外，还可选用其他物质见美国专利(专利号4757128；4857311；4888176；4789724；6537585 B1；71101568 B1)及《药用辅料大全》(第123页，四川科学技术出版社1993年出版，罗明生和高天惠主编)中已有详细描述。另外，中国专利(申请号96115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美国发明专利(专利号5,651,986)也列举了某些药用辅料，包括充填剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂、制(或致)孔剂、赋型剂或阻滞剂等。
为调节药物释放速度或改变本发明的其它特性，可以改变聚合物的单体成分或分子量、添加或调节药用辅料的组成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各种糖或盐等。其中糖可为，但不限于，木糖醇、低聚糖、(硫酸)软骨素及甲壳素等，其中盐可为，但不限于，钾盐和钠盐等；也可添加其它药用辅料，如，但不限于，充填剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂、制(或致)孔剂、赋型剂或阻滞剂等缓释注射剂中，药物缓释系统可制成微球、亚微球、微乳、纳米球、颗粒或球形小丸，然后与注射溶媒混合后制成注射剂使用。在各种缓释注射剂中以混悬型缓释注射剂为优选，混悬型缓释注射剂是将含抗癌成分的药物缓释系统悬浮于注射液中所得的制剂，所用的缓释辅料为上述缓释辅料中的一种或其组合，所用溶媒为普通溶媒或含助悬剂的特殊溶媒。普通溶媒为，但不限于，蒸馏水、注射用水、生理冲液、无水乙醇或各种盐配制的缓冲液。助悬剂的目的在于有效悬浮含药微球，从而利于注射之用。为方便注射，助悬剂的黏度为100cp-3000cp(20℃-30℃时)，优选1000cp-3000cp(20℃-30℃时)，最优选1500cp-3000cp(20℃-30℃时)。助悬剂选自羧甲基纤维素钠、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物质、土温20、土温40和土温80之一或其组合。
助悬剂在普通溶媒中的含量因其的特性而定，可为0.1-30％因具体情况而定。优选助悬剂的组成为A)0.5-5％羧甲基纤维素钠+0.1-0.5％土温80；或B)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土温80；或C)0.5-5％羧甲基纤维素钠+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土温80。
溶媒的制备则取决于溶媒的种类，普通溶媒有市售，也可以自制，如蒸馏水、注射用水、生理冲液、无水乙醇或各种盐配制的缓冲液，但必须严格按照有关标准。特殊溶媒需考虑到助悬剂的种类及其组成、溶媒所悬浮的药物、缓释微球(或微囊)的组成、性质及其需要量及注射剂的制备方法，如将羧甲基纤维素钠(1.5％)+甘露醇和/或山梨醇(15％)和/或吐温80(0.1％)溶于生理盐水中得相应得溶媒，黏度在10cp-650cp(20℃-30℃时)。
本发明发现影响药物和/或缓释微球悬浮和/或注射的关键因素是溶媒的黏度，黏度越大，悬浮效果越好，可注射性越强。这种意外发现构成了本发明的主要指数特征之一。溶媒的黏度取决于助悬剂的黏度，助悬剂的黏度为100cp-3000cp(20℃-30℃时)，优选1000cp-3000cp(20℃-30℃时)，最优选1500cp-3000cp(20℃-30℃时)。按照此条件所制得的溶媒的黏度为10cp-650cp(20℃-30℃时)，优选20cp-650cp(20℃-30℃时)，最优选60cp-650cp(20℃-30℃时)。
注射剂的制备有多种方法，一种是将助悬剂为“0”的缓释微粒(A)直接混于特殊溶媒中，得到相应的缓释微粒注射剂；另一种是将助悬剂不为“0”的缓释微粒(A)混于特殊溶媒或普通溶媒中，得到相应的缓释微粒注射剂；再一种是将缓释微粒(A)混于普通溶媒中，然后加入助悬剂混匀，得到相应的缓释微粒注射剂。除外，还可先将缓释微粒(A)混于特殊溶媒中制得相应的混悬液，然后用真空干燥等办法去除混悬液中的水分，之后再用特殊溶媒或普通溶媒混悬，得到相应的缓释微粒注射剂。以上方法只是用于说明而非限制本发明。值得注意的是，悬浮药物或缓释微球(或微囊)在注射剂中的浓度因具体需要而定，可为，但不限于，10-400mg/ml，但以30-300mg/ml为优选，以50-200mg/ml最优选。注射剂的黏度为50cp-1000cp(20℃-30℃时)，优选100cp-1000cp(20℃-30℃时)，最优选200cp-650cp(20℃-30℃时)。此黏度适用于18-22号注射针头和特制的内径更大的(至3毫米)注射针头。
缓释注射剂的制备方法是任意的，可用若干种方法制备如，但不限于，混合法、熔融法、溶解法、喷雾干燥法制备微球、溶解法结合冷冻(干燥)粉碎法制成微粉、脂质体包药法及乳化法等。其中以溶解法(即溶剂挥发法)、干燥法、喷雾干燥法和乳化法为优选。微球则可用于制备上述各种缓释注射剂，其方法是任意的。所用微球的粒径范围可在5-400um之间，以10-300um之间为优选，以20-200um之间为最优选。
微球还可用于制备其他缓释注射剂，如凝胶注射剂、嵌段共聚物胶束注射剂。其中，嵌段共聚物胶束由疏水-亲水嵌段共聚物在水溶液中形成，具有球形内核-外壳结构，疏水嵌段形成内核，亲水嵌段形成外壳。载药胶束注射进入体内达到控制药物释放或靶向治疗的目的。所用药物载体为上述任意一种或其组合。其中优选分子量为1000-15000的聚乙二醇(PEG)作为胶束共聚物的亲水嵌段，优选生物降解聚合物(如聚磷酯、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP))、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP))或p(CHDM-EOP)、PLA、聚丙交酯、聚己内酯及其共聚物)作为胶束共聚物的疏水嵌段。嵌段共聚物胶束的粒径范围可在10-300um之间，以20-200um之间的为优选。凝胶注射剂系将生物降解聚合物(如PLA、PLGA或DL-LA和ε-己内酯共聚物)溶于某些两亲性溶媒，再加入药物与之混溶(或混悬)后形成流动性较好的凝胶，可经瘤周或瘤内注射。一旦注入，两亲性溶媒很快扩散至体液，而体液中的水分则渗入凝胶，使聚合物固化，缓慢释放药物。
缓释微球还可用于制备缓释植入剂，所用的药用辅料可为上述药用辅料中的任何一种或多种物质，但以水溶性高分子聚合物为主选，在各种高分子聚合物中，以聚乳酸、癸二酸、含聚乳酸或癸二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物为首选，混合物和共聚物可选自，但不限于，PLA、PLGA、PLA与PLGA的混合物、癸二酸与芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物、双脂肪酸与癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚体-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富马酸-癸二酸)[P(FA-SA)]。聚乳酸(PLA)与聚乙醇酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和乳酸共聚时的含量分别为重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是对羧苯基丙烷(p-CPP)，对羧苯基丙烷(p-CPP)与癸二酸共聚时的含量分别为重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
本发明抗癌药物缓释剂的又一种形式是抗癌药物缓释剂为缓释植入剂。抗癌植入剂的有效成分可均匀地包装于整个药用辅料中，也可包装于载体支持物中心或其表面；可通过直接扩散和/或经多聚物降解的方式将有效成分释放。
缓释植入剂的特点在于所用的缓释辅料除高分子聚合物外，还含有上述任意一种或多种其它辅料。添加的药用辅料统称为添加剂。添加剂可根据其功能分为充填剂、致孔剂、赋型剂、分散剂、等渗剂、保存剂、阻滞剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂等。
缓释植入剂的主要成份可制成多种剂型。如，但不限于，胶囊、缓释剂、植入剂、缓释剂植入剂等；呈多种形状，如，但不限于，颗粒剂、丸剂、片剂、散剂、球形、块状、针状、棒状、柱状及膜状。在各种剂型中，以体内缓慢释放植入剂为优选。可为0.1-5mm(粗)×1-10mm(长)的棒状，也可为片状等其它形状。
缓释植入剂的最佳剂型为生物相容性、可降解吸收的缓释剂植入，可因不同临床需要而制成各种形状及各种剂型。其主要成份的包装方法和步骤在美国专利中(US5651986)已有详细描述，包括若干种制备缓释制剂的方法如，但不限于，(i)把载体支持物粉末与药物混合然后压制成植入剂，即所谓的混合法；(ii)把载体支持物熔化，与待包装的药物相混合，然后固体冷却，即所谓的熔融法；(iii)把载体支持物溶解于溶剂中，把待包装的药物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸发溶剂，干燥，即所谓的溶解法；(iv)喷雾干燥法；及(v)冷冻干燥法等。
缓释辅料可为各种水溶性或非水溶性高分子多聚物，本发明抗癌缓释植入剂的抗癌有效成分及重量百分比优选如下(1)2-40％的弹性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、链霉蛋白酶、分散酶、菠萝蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纤溶酶、组织蛋白酶-G、纤溶酶原激活剂、胶原酶、链激酶、糖苷酶、透明质酸酶、溶菌酶、松弛肽、γ-干扰素、纤维蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反应停、雷诺胺、血管抑素、内皮抑素、血管内皮抑素、甲磺酸伊马替尼、司马斯尼、达萨替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、苏尼替尼、特奥斯塔、帕尼托马、马立马司他、SU5416、SU6668、烟曲霉素或TNP-470；(2)2-40％的喜树硷、甲基苄肼、紫杉醇、顺铂、卡铂、瘤可宁、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、秋水仙碱、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、O6-苄基鸟嘌呤或O4-苄基叶酸；(3)2-40％的梭菌蛋白酶、胶原酶、透明质酸酶、溶菌酶、松弛肽、纤维蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反应停、雷诺胺、血管抑素、内皮抑素、血管内皮抑素、甲磺酸伊马替尼、司马斯尼、达萨替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、苏尼替尼、特奥斯塔、帕尼托马、马立马司他、SU5416、SU6668、烟曲霉素或TNP-470与2-40％的喜树硷、甲基苄肼、紫杉醇、顺铂、卡铂、瘤可宁、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、秋水仙碱、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、O6-苄基鸟嘌呤、O4-苄基叶酸的组合。
缓释微球还可用于制备缓释植入剂，所用的缓释辅料可为上述药用辅料中的任何一种或多种物质，在各种高分子聚合物中以水溶性高分子聚合物为主选。
本发明缓释植入剂中缓释辅料及其重量百分比最优选如下(1)55-90％的PLA
(2)50-90％的PLGA；(3)50-85％的聚苯丙生；(4)25-60％的PLGA与20-60％的癸二酸共聚或混合物；(5)30-90％的聚苯丙生与35-90％的PLA混合物；(6)40-95％的木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、壳聚糖、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、透明质酸、胶原蛋白、明胶或白蛋胶；或(7)40-95％的外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、单甲基聚乙二醇/聚乳酸、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物；(8)40-95％的p(BHET-EOP/TC，80/20))、p(BHET-EOP/TC，50/50)、p(LAEG-EOP))、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC，80/20)、p(BHDPT-EOP/TC，50/50)、p(CHDM-HOP))或p(CHDM-EOP)；或(9)30-85％的p(DAPG-EOP)与40-80％的癸二酸共聚或混合物。
以上组合中，不同辅料的总量不超过98％。
在各种高分子聚合物中，分子量峰值因不同需要而定，可为，但不限于，5000-200，000，但以20,000-60,000为优选，以5,000-30,000为最优选；单体共混比因不同需要而定，可为，但不限于，10-90∶90-10，但以20-80∶80-20为优选，以40-60∶60-40为最优，高分子粘度范围IV(dl/g)为0.1～0.8，以0.2-0.6为优选，以0.2-0.5为最优选。
给药途径取决于多种因素，为于原发或转移肿瘤所在部位获得有效浓度，药物可经多种途径给予，如皮下、腔内(如腹腔、胸腔及椎管内)、瘤内、瘤周注射或放置、选择性动脉注射、淋巴结内及骨髓内注射。以选择性动脉注射、腔内、瘤内、瘤周注射或放置为优选。
本发明可以用于制备治疗人及动物的各种肿瘤的药物制剂，主要为缓释注射剂或缓释植入剂，所指肿瘤包括起源于大脑、中枢神经系统、肾脏、肝、胆囊、头颈部、口腔、甲状腺、皮肤、黏膜、腺体、血管、骨组织、淋巴结、肺脏、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宫、卵巢、子宫内膜、子宫颈、前列腺、膀胱、结肠、直肠的原发或转移的癌或肉瘤或癌肉瘤。
本发明所制的缓释注射剂或缓释植入剂中还可加入其它药用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼药、抗凝药、止血药等。
通过如下试验和实施例对本发明的技术作进一步的描述试验1、不同方式应用间质水解剂(胶原酶)后的局部药物浓度比较以大白鼠为试验对象，将2×105个前列腺肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长至1厘米直径后将其分组。每组剂量均为5mg/kg胶原酶。测定不同时间肿瘤内药物含量(％)，结果表明，间质水解剂经不同方式应用后的局部药物浓度差异显著，局部给药能够明显提高并有效维持肿瘤所在部位的有效药物浓度，其中以瘤内放置缓释植入剂和瘤内注射缓释注射剂的效果最好。然而，瘤内注射缓释注射剂操作最方便、容易。这一发现构成本发明的重要特征。以下的相关抑瘤试验进一步证实了这一点。
试验2、不同方式应用间质水解剂(透明质酸酶)后的体内抑瘤作用比较以大白鼠为试验对象，将2×105个胰腺肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长至0.5厘米直径后将其分组。每组剂量均为5mg/kg透明质酸酶。治疗后第20天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果。结果表明，间质水解剂经不同方式应用后的抑瘤作用差异显著，局部给药能够明显提高并有效维持肿瘤所在部位的有效药物浓度，其中以瘤内放置缓释植入剂和瘤内注射缓释注射剂的效果最好。然而，瘤内注射缓释注射剂操作最方便、容易。不仅疗效好，毒副作用也小。
试验3、间质水解剂和细胞毒药物(缓释注射剂)的体内抑瘤作用以大白鼠为试验对象，将2×105个甲状腺肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表1)。第一组为对照，第2到10组为治疗组，药物经瘤内注射。间质水解剂的剂量为2.5mg/kg，细胞毒药物的剂量均为15mg/kg。治疗后第20天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表1)。
表1
以上结果表明，间质水解剂(胰蛋白酶)和其增效剂(紫杉醇、瘤可宁、环磷酰胺、卡莫司汀)在该浓度单独应用时对多种肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，当联合应用时可表现出显著的增效作用。这一发现构成本发明又一重要特征。
试验4、间质水解剂和细胞毒药物(缓释注射剂)的抑瘤作用所用的肿瘤细胞包括CNS-1、C6、胃腺上皮癌(SA)、骨肿瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲状腺乳头状腺癌(PAT)等。将间质水解剂和细胞毒药物按10ug/ml浓度加到体外培养24小时的各种肿瘤细胞中，继续培养48小时后计数细胞总数。其肿瘤细胞生长抑制效果见表2所示。
表2
以上结果表明，所用细胞毒药物(尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱)及间质水解剂(纤溶酶)在该浓度单独应用时对多种肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，当联合应用时可表现出显著的增效作用。
试验5、间质水解剂及细胞毒药物(缓释注射剂)的抑瘤作用以大白鼠为试验对象，将2×105个肝肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表3)。第一组为对照，第2到10组为治疗组，缓释植入剂经瘤内放置。间质水解剂的剂量为15mg/kg，细胞毒药物的剂量均为5mg/kg。治疗后第20天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表3)。
表3
以上结果表明，所用间质水解剂(糜蛋白酶)及细胞毒药物(亮丙瑞林、秋水仙碱、顺铂、丁基硫堇硫肟)在该浓度单独应用时对多种肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，当联合应用时可表现出显著的增效作用。这一发现构成本发明又一重要特征。
试验6、间质水解剂和细胞毒药物(缓释注射剂)的抑瘤作用以大白鼠为试验对象，将2×105个肺癌肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为阴性对照(空白)、单药治疗组(间质水解剂或细胞毒药物)和联合治疗组(间质水解剂和细胞毒药物)。药物经瘤内注射。间质水解剂的剂量为2.5mg/kg，细胞毒药物的剂量均为10mg/kg。治疗后第28天测量肿瘤体积大小，用肿瘤生长抑制率作指标比较治疗效果(见表4)。
表4
以上结果表明，所用间质水解剂(胃蛋白酶)及细胞毒药物(雷帕霉素、丁基硫堇硫肟、O6-苄基鸟嘌呤、O4-苄基叶酸)在该浓度单独应用时对多种肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，当联合应用时可表现出显著的增效作用。
试验7、间质水解剂和细胞毒药物(缓释注射剂)的抑瘤作用以大白鼠为试验对象，将2×105个乳腺肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为阴性对照(空白)、单药治疗组、联合治疗组。药物经瘤内注射。间质水解剂的剂量为4mg/kg，细胞毒药物的剂量均为10mg/kg。治疗后第21天测量肿瘤体积大小，用肿瘤生长抑制率作指标比较治疗效果(见表5)。
表5
以上结果表明，所用间质水解剂(胶原酶和透明质酸酶各2mg/kg)及细胞毒药物(卡莫司汀、环磷酰胺、尼莫司汀、雷帕霉素)在该浓度单独应用时对多种肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，当联合应用时可表现出显著的增效作用。这一发现构成本发明又一重要特征。
试验8、间质水解剂和细胞毒药物(缓释注射剂)的抑瘤作用以大白鼠为试验对象，将2×105个乳腺肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为阴性对照(空白)、单药治疗组、联合治疗组。缓释植入剂经瘤内放置。间质水解剂的剂量为8mg/kg，细胞毒药物的剂量均为2mg/kg。治疗后第28天测量肿瘤体积大小，用肿瘤生长抑制率作指标比较治疗效果(见表6)。
表6
以上结果表明，所用间质水解剂(菠萝蛋白酶)及细胞毒药物(依力替康、长春地辛、亮丙瑞林、秋水仙碱)在该浓度单独应用时对多种肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，当联合应用时可表现出显著的增效作用。这一发现构成本发明又一重要特征。
试验9、间质水解剂和细胞毒药物(缓释注射剂)的抑瘤作用按试验7所述方法测定细胞毒药物(缓释注射剂)的抑瘤作用，结果表明选自喜树硷、甲基苄肼、紫杉醇、顺铂、卡铂、瘤可宁、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、亮丙瑞林、秋水仙碱、长春地辛、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、O6-苄基鸟嘌呤、O4-苄基叶酸等细胞毒药物能显著增强间质水解剂对结肠及卵巢癌的抑瘤效果，增效作用在38-60％(P＜0.01)。
试验10、不同分子量聚乳酸制成的间质水解剂缓释植入剂的体内释放比较以大白鼠为试验对象，分组(3只/组)并于皮下给予含不同分子量(MW)的聚乳酸(PLA)承载的等量间质水解剂(松弛肽)缓释植入剂。然后分别于1、3、7、14、21、28和35天测药物于植入剂内的剩余量，进而得出其体内释放速度(％)。结果表明，分子量为20000的释放为1天(8％)、3(28％)、7(56％)、14(82％)、21(90)、28(94)和35(98％)。比较不同分子量聚乳酸制成的松弛肽缓释植入剂的体内释放发现，随分子量增加而变慢，以第7天为例，与全身给药组相比，肿瘤抑制率随聚乳酸分子量增加而提高，依次为68％(MW5000)、66％(MW15000)、54％(MW25000)、50％(MW40000)和48(MW60000)。
试验11、间质水解剂和细胞毒药物(缓释注射剂)的抑瘤作用以大白鼠为试验对象，将2×105个食道肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为阴性对照(空白)、单药治疗组、联合治疗组。缓释植入剂经瘤内放置。间质水解剂的剂量为4mg/kg，细胞毒药物的剂量均为12mg/kg。治疗后第28天测量肿瘤体积大小，用肿瘤生长抑制率作指标比较治疗效果(见表7)。
表7
以上结果表明，所用间质水解剂(分散酶、梭菌蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼)及细胞毒药物(卡莫司汀)在该浓度单独应用时对多种肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，当联合应用时可表现出显著的增效作用。这一发现构成本发明又一重要特征。
试验12、间质水解剂和细胞毒药物(缓释注射剂)的抑瘤作用以大白鼠为试验对象，将2×105个淋巴瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为阴性对照(空白)、单药治疗组、联合治疗组。缓释植入剂经瘤内放置。间质水解剂的剂量为12mg/kg，细胞毒药物的剂量均为6mg/kg。治疗后第28天测量肿瘤体积大小，用肿瘤生长抑制率作指标比较治疗效果(见表8)。
表8
以上结果表明，所用间质水解剂(拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、血管内皮抑素)及细胞毒药物(尼莫司汀)在该浓度单独应用时对多种肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，当联合应用时可表现出显著的增效作用。这一发现构成本发明又一重要特征。
特别注意的是，本发明的缓释剂，特别是缓释注射剂操作简单方便、重复性好。不仅疗效好，毒副作用小。
总之，所用间质水解剂和各种细胞毒药物单独应用时对多种肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，当联合应用时可表现出显著的增效作用。因此，本发明所述的有效成分为间质水解剂与任意一种细胞毒药物。含有以上有效成分的药物可制成缓释微球，进而制成缓释注射剂和植入剂，其中以与含助悬剂的特殊溶媒组合形成的混悬注射剂为优选。
缓释注射剂或缓释植入剂还可通过以下实施方式得以进一步说明。上述实施例及以下实施例只是对本发明作进一步说明，并非对其内容和使用作任何限制。

实施例1.
将80mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)为20∶80)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入10mg紫杉醇和10mg胶原酶，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含10％紫杉醇和10％胶原酶的注射用微球。然后将微球悬浮于含15％甘露醇的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂，黏度为220cp-460cp(20℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。
实施例2.
加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例1相同，但所不同的是缓释辅料聚苯丙生的对羧苯基丙烷∶癸二酸为50∶50；所含抗癌有效成分为5％喜树硷、甲基苄肼、紫杉醇、顺铂、卡铂、瘤可宁、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、秋水仙碱、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、O6-苄基鸟嘌呤或O4-苄基叶酸与15％吉非替尼的组合；缓释注射剂的黏度为360cp-600cp(20℃-30℃时)。
实施例3.
将80mg分子量峰值为40000-65000的聚乳酸(PLGA，75∶25)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入5mg透明质酸酶和15mg尼莫司汀，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的含药固体组合物冷冻粉碎制成含5％透明质酸酶和15％尼莫司汀的微粉，然后悬浮于含1.5％羧甲基纤维素钠的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂，黏度为300cp-400cp(20℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。
实施例4加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例3相同，但所不同的是所含抗癌有效成分及其重量百分比为5-30％的喜树硷、甲基苄肼、紫杉醇、顺铂、卡铂、瘤可宁、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、秋水仙碱、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、O6-苄基鸟嘌呤或O4-苄基叶酸与2-40％的透明质酸酶或厄罗替尼的组合；缓释辅料为分子量峰值为20000-40000的聚乳酸(PLGA，50∶50)；缓释注射剂的黏度为340cp-620cp(20℃-30℃时)。
实施例5.
将70mg分子量峰值为10000-25000的p(BHET-EOP/TC，80/20)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混匀后，加入20mg长春新碱和10mg吉非替尼，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含20％长春新碱和10％吉非替尼的注射用微球。然后将微球悬浮于含5-15％山梨醇的注射液中，制得相应的混悬型缓释注射剂，黏度为100cp-200cp(20℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。
实施例6.
加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例5相同，但所不同的是缓释辅料为分子量峰值为25000-45000的p(BHET-EOP/TC，50/50)，所含抗癌有效成分为15％的喜树硷、甲基苄肼、紫杉醇、顺铂、卡铂、瘤可宁、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、秋水仙碱、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、O6-苄基鸟嘌呤或O4-苄基叶酸与10％的吉非替尼、链激酶、糖苷酶、溶菌酶、松弛肽、γ-干扰素或纤维蛋白酶的组合。
实施例7.
将70mg分子量峰值为10000-25000的p(LAEG-EOP)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入20mg拉帕替尼和10mg喜树碱，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含20％拉帕替尼与10％喜树碱的注射用微球。然后将微球悬浮于含1.5％羧甲基纤维素钠和0.5％吐温80的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂，黏度为80cp-150cp(20℃-25℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。
实施例8.
加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例7相同，但所不同的是缓释辅料为分子量峰值为10000-25000的p(DAPG-EOP)，所含抗癌有效成分为15-25％的喜树硷、紫杉醇、顺铂、卡铂、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、丁基硫堇硫肟、O6-苄基鸟嘌呤或O4-苄基叶酸与15-25％的纤溶酶、舍雷硫代肽酶、胰酶、组织蛋白酶-G、半胱氨酸蛋白酶、硫酯酶、酰胺转移酶、转酯酶活性或纤溶酶原激活剂的组合。
实施例9将70mg分子量峰值为20000-45000的p(DAPG-EOP)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入20mg血管内皮抑素和10mg卡莫司汀，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含20％血管内皮抑素和10％的卡莫司汀注射用微球。然后将微球悬浮于含1.5％羧甲基纤维素钠和15％山梨醇和0.2％吐温80的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂，黏度为560cp-640cp(20℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。
实施例10加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例9相同，但所不同的是缓释辅料为分子量峰值为45000-65000的p(DAPG-EOP)，所含抗癌有效成分为10-20％的喜树硷、紫杉醇、顺铂、卡铂、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、O6-苄基鸟嘌呤或O4-苄基叶酸与10-20％的拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、血管内皮抑素、甲磺酸伊马替尼、SU6668或烟曲霉素的组合。
实施例11将70mg分子量峰值为15000-25000的p(BHDPT-EOP/TC，80/20)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入10mg卡莫司汀和20mg伏他拉尼，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含10％卡莫司汀和20％伏他拉尼的注射用微球。然后将微球经压片法制得相应的缓释植入剂。该缓释植入剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为30-40天左右。
实施例12加工成缓释植入剂的方法步骤与实施例11相同，但所不同的是缓释辅料为分子量峰值为25000-45000的p(BHDPT-EOP/TC，50/50)，是所含抗癌有效成分为10％的喜树硷、紫杉醇、顺铂、卡铂、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、O6-苄基鸟嘌呤或O4-苄基叶酸与10％的司马斯尼、达萨替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、苏尼替尼、特奥斯塔、帕尼托马、马立马司他或SU5416的组合。
实施例13将40mg分子量峰值为15000的聚乳酸(PLA)和30mg分子量峰值为15000-25000的p(CHDM-HOP)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入10mg尼莫司汀和20mg达萨替尼，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含10％尼莫司汀和20％达萨替尼的注射用微球。然后将微球经压片法制得相应的缓释植入剂。该缓释植入剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为35-50天左右。
实施例14加工成缓释植入剂的方法步骤与实施例11、13相同，但所不同的是缓释辅料为分子量峰值为10000-25000的p(CHDM-EOP)；所含抗癌有效成分为5-25％的喜树硷、甲基苄肼、紫杉醇、顺铂、卡铂、瘤可宁、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、秋水仙碱、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、O6-苄基鸟嘌呤或O4-苄基叶酸与5-25％的卡那替尼、索拉非尼、苏尼替尼、特奥斯塔、帕尼托马或马立马司他的组合。
实施例15.
将70mg分子量峰值为20000-45000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入15mg紫杉醇和15mg索拉非尼，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的含药固体组合物冷冻粉碎制成含15％紫杉醇和15％索拉非尼的微粉，然后悬浮于含1.5％羧甲基纤维素钠的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂，黏度为220cp-260cp(25℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。
实施例16加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例15相同，但所不同的是缓释辅料为分子量峰值为10000-25000的p(DAPG-EOP)和分子量峰值为10000-25000的PLGA各为35毫克，抗癌有效成分及其重量百分比为15％的喜树硷、紫杉醇、顺铂、卡铂、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、O6-苄基鸟嘌呤或O4-苄基叶酸与15％的胰蛋白酶、胃蛋白酶、链霉蛋白酶、分散酶、菠萝蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纤溶酶、组织蛋白酶-G或纤溶酶原激活剂的组合。
实施例17.
将70mg分子量峰值为30000的双脂肪酸与癸二酸(SA)共聚物(双脂肪酸∶癸二酸为20∶80)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入15mg梭菌蛋白酶和15mg雷帕霉素，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的含药固体组合物冷冻粉碎制成含15％梭菌蛋白酶和15％雷帕霉素的微粉，然后悬浮于含1.5％羧甲基纤维素钠的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂，黏度为380cp-460cp(25℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。
实施例18.
加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例17相同，但所不同的是缓释辅料为40％的聚苯丙生(50∶50)与30％的分子量峰值为10000-30000的PLA混合物，抗癌有效成分及其重量百分比为15％的喜树硷、紫杉醇、顺铂、卡铂、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、O6-苄基鸟嘌呤或O4-苄基叶酸与15％的胰蛋白酶、胃蛋白酶、链霉蛋白酶、分散酶、菠萝蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纤溶酶、组织蛋白酶-G或纤溶酶原激活剂的组合。
实施例19加工成缓释剂的方法步骤与实施例1-18相同，但所不同的是所用的缓释辅料为下列之一或其组合a)聚乳酸(PLA)，分子量峰值为10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；b)聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)，其中，聚乙醇酸和羟基乙酸的比例为50-95∶50-50，分子量峰值为10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；c)p(BHET-EOP/TC，80/20)、p(BHET-EOP/TC，50/50)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC，80/20)、p(BHDPT-EOP/TC，50/50)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)；或d)聚苯丙生，对羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)为10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；e)双脂肪酸与癸二酸共聚物(PFAD-SA)；f)聚(芥酸二聚体-癸二酸)[P(EAD-SA)]；g)聚(富马酸-癸二酸)[P(FA-SA)]；h)木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、壳聚糖、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、透明质酸、胶原蛋白、明胶或白蛋胶；i)外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、单甲基聚乙二醇/聚乳酸、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物；j)p(DAPG-EOP)与癸二酸共聚或混合物。
实施例20加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例1-19相同，但所不同的是所用的助悬剂分别为下列之一或其组合a)0.5-3.0％羧甲基纤维素(钠)；b)5-15％甘露醇；c)5-15％山梨醇；d)0.1-1.5％表面活性物质；e)0.1-0.5％吐温20。
实施例21加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例1-20相同，但所不同的是所含抗癌有效成分为2-10％的喜树硷、甲基苄肼、紫杉醇、顺铂、卡铂、瘤可宁、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、秋水仙碱、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、O6-苄基鸟嘌呤或O4-苄基叶酸与2-10％的胰蛋白酶、胃蛋白酶、链霉蛋白酶、分散酶、菠萝蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纤溶酶、组织蛋白酶-G或纤溶酶原激活剂的组合实施例22加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例1-20相同，但所不同的是所含抗癌有效成分为20-40％的喜树硷、甲基苄肼、紫杉醇、顺铂、卡铂、瘤可宁、环磷酰胺、卡莫司汀、尼莫司汀、雷帕霉素、依力替康、长春新碱、长春地辛、亮丙瑞林、秋水仙碱、氨基三唑、丁基硫堇硫肟、O6-苄基鸟嘌呤或O4-苄基叶酸与20-40％的胰蛋白酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶或纤溶酶的组合。
实施例23加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例1-12相同，但所不同的是所含抗癌有效成分制成植入剂。
实施例24加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例14-22相同，但所不同的是所含抗癌有效成分制成植入剂。
以上实施例仅用于说明，而并非局限本发明的应用。
本发明所公开和保护的内容见权利要求。


一种抗癌缓释注射剂由缓释微球和溶媒组成。其中缓释微球包括抗癌有效成分和缓释辅料，溶媒为含助悬剂的特殊溶媒。抗癌有效成分为间质水解剂和细胞毒药物；间质水解剂选自蛋白水解酶和血管抑制剂，细胞毒药物选自抗紫杉烷、烷化剂、拓扑酶抑制剂和/植物生物碱等；缓释辅料为p(BHET－EOP/TC))、p(LAEG－EOP))、p(DAPG－EOP)、p(BHDPT－EOP/TC)、p(CHDM－HOP))、p(CHDM－EOP)、p(DAPG－EOP)等；助悬剂的黏度为100cp－3000cp(25℃－30℃时)，选自羧甲基纤维素钠等。缓释微球还可制成缓释植入剂，注射剂或缓释植入剂于瘤内或瘤周注射或放置，在降低药物的全身反应的同时还能选择性地提高并维持局部浓度达约30－50天左右，因此，除单独应用于肿瘤治疗，还可增强化疗和/或放疗等非手术疗法的抑瘤效果。