专利名称：一种松茸发酵茶及其制备方法松鸾[Tricholomamatsutake (Ito et lmai) Sing.]又名松口蘑、松蕈等，是世界珍稀名贵的野生食用菌，被称为“菌中之王”，具有很高的食用价值和药用价值，价格极其昂贵，素有“绿色黄金”等美誉。松茸含有蛋白质、氨基酸、多种维生素、碳水化合物和矿物质等有效成分，有多种生理功能，它可以强身、益肠胃、增强人体免疫力，生精益气，理气化痰，延缓衰老。现代医学临床试验表明，松茸具有治疗糖尿病、抑制癌细胞增殖的特殊功能，其子实体热水提取物对小白鼠肉瘤-180和艾氏癌的抑制率分别为91. 8 %和70%。据日本有关资料报道，松茸菌抗癌效果可达90%以上。目前对松茸大都采用炖的方法食用，需花费大量的时间，缺乏方便简洁的食用方法。中国是茶的故乡，喝茶在中国被誉为“国饮”。现代科学大量研究证实，茶叶确实含有与人体健康密切相关的生化成份，茶叶不仅具有提神清心、清热解暑、消食化痰、去腻减月巴、清心除烦、解毒醒酒、生津止渴、降火明目、止痢除湿等药理作用，还对现代疾病，如辐射病、心脑血管病、癌症等疾病，有一定的药理功效。可见，茶叶药理功效之多，作用之广，是其他饮料无可替代的。据现代分析表明，茶叶中含有茶多酚类、植物碱、酶类、色素等，具抗氧化、抗突然异变、抗肿瘤、降低血液中胆固醇及低密度酯蛋白含量、抑制血压上升、抑制血小板凝集、抗菌、抗产物过敏等功效。随着人们健康意识的提高，更趋向于生活化、安全化、有效化的方式来保持健康的状态，因此，期待开发对维持或改善健康发挥有效作用的新型茶。专利申请号201010567430. 3公开了一种松茸保健茶的制作方法，通过对松茸清洗，破碎，打浆，磨浆，真空冷冻干燥，破碎，装瓶，包装等工艺制备。其的缺点是工艺步骤多，生产工艺复杂，能耗大，松茸成分并未经过生物生长代谢进行有效转化，没有对茶进行深度加工，松茸资源利用不充分。现阶段对松茸进行茶产品开发的品种类型也较少，不能满足现代人们对松茸菌的消费需求。在对茶的发酵加工方式上，现有的如红茶，普洱茶等发酵茶，都是在自然的条件下自然发酵或半人工发酵，发酵茶在发酵过程中丰富了某些营养功效成分，如红茶在加工过程中发生了化学反应，茶多酚减少90%以上，产生了茶黄素、茶黄素的新的成分。香气物质从鲜叶中的50多种，增至300多种，一部分咖啡碱、儿茶素和茶黄素络合成滋味鲜美的络合物，从而形成了红茶、红汤、红叶和香甜味醇的品质特征。因此，发酵茶具有特殊的饮用和功效作用。但是这种发酵茶是在自然的条件下自然发酵或半人工发酵，使其不能定性的菌种生长发酵，没有专一的发酵菌种对茶叶进行深度发酵开发。
本发明要解决的问题就是针对以上情况，提供一种以松茸为菌种、以茶叶为基质的发酵茶，以及它的制备方法。其技术方案如下一种松茸发酵茶，按以下步骤制得(I)培养基制备①一级种子液体培养基 制备取土豆粒180-220份，麦麸45-55份，葡萄糖8-12份，蛋白胨1_2份，磷酸二氢钾O. 5-1份，磷酸氢二钠O. 5-1份，酒石酸O. 7-0. 8份，硫酸镁2_3份，维生素B1 O. 01-0. 02份，琼脂10-20份，水900-1100份，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0，120_125°C灭菌25-30分钟制备成一级种子液体培养基；②二级种子液体培养基制备取土豆粒180-220份，麦麸45-55份，葡萄糖8-12份，蛋白胨1_2份，磷酸二氢钾O. 5-1份，磷酸氢二钠O. 5-1份，酒石酸O. 7-0. 8份，硫酸镁2_3份，维生素B1O. 01-0. 02份，琼脂15-25份，茶叶煎汁20-50份，青稞粉5-20份，水900-1100份，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0，120-125°C灭菌25-30分钟制备成二级种子液体培养基；③营养液培养基制备取葡萄糖5-15份，蛋白胨1-2份，硫酸镁O. 2-0. 3份，磷酸二氢钾O. 4-0. 6份，磷酸氢二钠O. 4-0. 6份，烟酸O. 4-0. 6份，酒石酸O. 7-0. 8份，水900-1100份，按重量份混合均勻制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶35-45份、青稞粉15-25份、米粒4_6份、豆粉O. 5-1. 5份，再加入营养液培养基30-40份，按重量份混合均匀，装入瓶子后120-125°C灭菌25-30分钟制备成茶叶发酵基;⑵菌种活化①一级种子制备将松茸菌种按重量比2% -3%的接种量接种到一级液体种子培养基中，在220C -28°C条件下培养5-6天，菌丝长满试管，作为一代种子；②二级种子的扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比2% -3%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，在22°C -28°C条件下培养6-7天，作为二代种子；(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比2% -4%的接种量接种到茶叶发酵基中，然后放入温度22°C _28°C的环境下生长18-24天，湿度保持在60% -65%，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；(4)得成品将发酵完毕的发酵产物切片后放入烘箱中58°C _63°C干燥24_48小时，得松茸发酵茶片；或者将松茸发酵茶片打磨成粉状后制粒，得松茸发酵茶颗粒。与现有技术相比本发明具有的有益效果是I、本发明的发酵茶是经过生物转化后具有松茸增强人体免疫力的功能，具有松茸和茶叶的双重生理功效。在发酵结束后，将整个发酵基质切成片状制备成片状饮品，或是粉碎后制粒成冲泡品，都具有良好的实用性，发酵的整个基质都得到充分利用，避免了发酵基质浪费的情况。2、由于茶是安全性极高的食品，可以习惯性的被摄取，对人们身体健康发挥重要的保健效果。3、该方法工艺简单，能耗小，资源利用充分，达到了对茶进行深度加工的目的。4、该发酵茶食用方法简洁，不浪费时间。对松茸进行茶产品的开发，增加了品种类型，满足了现代人们对松茸菌的消费需求。为了表明本发明产品对提高免疫力的作用，对400名免疫力低下的受试者作了系统的临床观察诊断标准免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物(病毒、细菌等)；处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。免疫力低下一般症状有体质虚弱、营养不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍等表现。服用方法将400名受试者平均分成四组，第一组冲泡饮用本发明方法制得的松茸发酵茶片，每天15克，饮用次数不限；第二组服用本发明方法制得的松茸发酵茶颗粒，每天8克；第三组服用本发明方法制得的松茸发酵茶中药片，每天15克，饮用次数不限；第四组服用本发明方法制得的松茸发酵茶中药颗粒，每天8克。服用时间90天。疗效的判断标准免疫力正常标准食欲增强，神疲乏力感消除，睡得香，精神饱满，心情舒畅，双耳聪慧、须发润泽，血球蛋白增多；头脑清醒，思维活跃，体质明显增强，精力充沛有活力，学习工作有激情，效率改善。服用结果90天后，第一组受试者中，有95名免疫力正常或提高，提高免疫力有效率95%;第二组受试者中，有97名免疫力正常或提高，提高免疫力有效率97 %;第三组受试者中，有96名免疫力正常或提高，提高免疫力有效率96% ;第四组受试者中，有98名免疫力正常或提高，提高免疫力有效率98%。②二级种子液体培养基制备取土豆粒180g,麦麸55g,葡萄糖8g,蛋白胨2g,磷酸二氢钾O. 5g,磷酸氢二钠Ig,酒石酸O. 7g，硫酸镁3g，维生素B1 O. Olg,琼脂25g，茶叶煎汁20g,青稞粉20g,水900g,按重量份混合均匀，调节PH6. 0±1. 0,125°C灭菌25分钟制备成二级种子液体培养基；③营养液培养基制备取葡萄糖5g，蛋白胨2g，硫酸镁O. 2g，磷酸二氢钾O. 6g，磷酸氢二钠O. 4g，烟酸O. 6g，酒石酸O. 7g，水1100g，按重 量份混合均匀制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶35g、青稞粉25g、米粒4g、豆粉I. 5g,再加入营养液培养基30g,按重量份混合均匀，装入瓶子后125°C灭菌25分钟制备成茶叶发酵基；(2)菌种活化①一级种子制备将松茸菌种按重量比2%的接种量接种到一级液体种子培养基中，这里一级液体种子培养基15g，松茸菌种O. 3g，在28°C条件下培养5天，菌丝长满试管，作为一代种子；②二级种子的扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比2%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，这里二级液体种子培养基40g，一代松茸菌种O. Sg,在28°C条件下培养6天，作为二代种子;(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比2%的接种量接种到茶叶发酵基中，这里茶叶发酵基400g，二代松茸菌种Sg，然后放入温度28°C的环境下生长18天，湿度保持在65%，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；(4)得成品将发酵完毕的发酵产物切片后放入烘箱中58°C干燥48小时，得松茸发酵茶片。实施例二 本实施例松茸发酵茶，按以下步骤制得(I)培养基制备①一级种子液体培养基制备取土豆粒220g，麦麸45g，葡萄糖12g，蛋白胨lg，磷酸二氢钾lg，磷酸氢二钠O. 5g，酒石酸O. 8g，硫酸镁2g，维生素B1 O. 02g,琼脂IOg,水I IOOg,按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0,120°C灭菌30分钟制备成一级种子液体培养基；②二级种子液体培养基制备取土豆粒220g,麦麸45g,葡萄糖12g,蛋白胨Ig,磷酸二氢钾Ig,磷酸氢二钠O. 5g，酒石酸O. 8g，硫酸镁2g,维生素B1 O. 02g,琼脂15g，茶叶煎汁50g,青稞粉5g，水llOOg，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0,120°C灭菌30分钟制备成二级种子液体培养基;③营养液培养基制备取葡萄糖15g，蛋白胨lg，硫酸镁O. 3g，磷酸二氢钾O. 4g，磷酸氢二钠O. 6g，烟酸O. 4g，酒石酸O. 8g，水900g，按重量份混合均匀制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶45g、青稞粉15g、米粒6g、豆粉O. 5g,再加入营养液培养基40g,按重量份混合均匀，装入瓶子后120°C灭菌30分钟制备成茶叶发酵基；(2)菌种活化①一级种子制备将松茸菌种按重量比3%的接种量接种到一级液体种子培养基中，这里一级液体种子培养基18g，松茸菌种O. 54g，在22°C条件下培养6天，菌丝长满试管，作为一代种子；②二级种子的扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比3%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，这里二级液体种子培养基50g，一代松茸菌种I. 5g，在22°C条件下培养7天，作为二代种子;(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比4%的接种量接种到茶叶发酵基中，这里茶叶发酵基500g，二代松茸菌种20g，然后放入温度22°C的环境下生长24天，湿度保持在60 %，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；(4)得成品将发酵完毕的发酵产物切片后放入烘箱中63°C干燥24小时，得松茸发酵茶片。实施例三本实施例松茸发酵茶，按以下步骤制得(I)培养基制备①一级种子液体培养基制备取土豆粒200g,麦麸50g,葡萄糖IOg,蛋白胨I. 5g,磷酸二氢钾O. 8g,磷酸氢二钠O. 8g，酒石酸O. 75g，硫酸镁2. 5g，维生素B1 O. 015g,琼脂15g，水lOOOg，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0，121°C灭菌28分钟制备成一级种子液体培养基；②二级种子液体培养基制备取取土豆粒200g,麦麸50g,葡萄糖IOg,蛋白胨I. 5g,磷酸二氢钾O. 8g,磷酸氢二钠O. 8g，酒石酸O. 75g，硫酸镁2. 5g，维生素B1 O. 015g,琼脂15g，茶叶煎汁35g，青稞粉12g，水lOOOg，按重量份混合均匀，调节pH6. 0± I. 0，121°C灭菌28分钟制备成二级种子液体培养基;③营养液培养基制备取葡萄糖IOg,蛋白胨I. 5g,硫酸镁0. 25g,磷酸二氢钾0. 5g,磷酸氢二钠0. 5g,烟酸0. 5g，酒石酸0. 75g，水lOOOg，按重量份混合均匀制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶40g、青稞粉20g、米粒5g、豆粉Ig,再加入营养液培养基35g,按重量份混合均匀，装入瓶子后121°C灭菌28分钟制备成茶叶发酵基；(2)菌种活化①一级种子制备将松茸菌种 按重量比2. 5 %的接种量接种到一级液体种子培养基中，这里一级液体种子培养基20g，松茸菌种0. 5g，在25°C条件下培养5天，菌丝长满试管，作为一代种子；
②二级种子的扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比2. 5%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，这里二级液体种子培养基45g，一代松茸菌种I. 125g，在25°C条件下培养6天，作为二代种子；(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比3%的接种量接种到茶叶发酵基中，这里茶叶发酵基450g，二代松茸菌种13. 5g，然后放入温度25 V的环境下生长21天，湿度保持在62%，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；(4)得成品将发酵完毕的发酵产物切片后放入烘箱中60°C干燥36小时，得松茸发酵茶片。实施例四本实施例松茸发酵茶，按以下步骤制得(I)培养基制备①一级种子液体培养基制备取土豆粒180g,麦麸55g,葡萄糖8g,蛋白胨2g,磷酸二氢钾O. 5g,磷酸氢二钠Ig,酒石酸O. 7g，硫酸镁3g，维生素B1O. Olg,琼脂20g，水900g，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0,125°C灭菌25分钟制备成一级种子液体培养基；②二级种子液体培养基制备取土豆粒180g,麦麸55g,葡萄糖8g,蛋白胨2g,磷酸二氢钾O. 5g,磷酸氢二钠Ig,酒石酸O. 7g，硫酸镁3g，维生素B1 O. Olg,琼脂25g，茶叶煎汁20g,青稞粉20g,水900g,按重量份混合均匀，调节PH6. 0±1. 0,125°C灭菌25分钟制备成二级种子液体培养基；③营养液培养基制备取葡萄糖5g，蛋白胨2g，硫酸镁O. 2g，磷酸二氢钾O. 6g，磷酸氢二钠O. 4g，烟酸O. 6g，酒石酸O. 7g，水1100g，按重量份混合均匀制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶35g、青稞粉25g、米粒4g、豆粉I. 5g,再加入营养液培养基30g,按重量份混合均匀，装入瓶子后125°C灭菌25分钟制备成茶叶发酵基；(2)菌种活化①一级种子制备将松茸菌种按重量比2%的接种量接种到一级液体种子培养基中，这里一级液体种子培养基15g，松茸菌种O. 3g，在28°C条件下培养5天，菌丝长满试管，作为一代种子；②二级种子的扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比2%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，这里二级液体种子培养基40g，一代松茸菌种O. Sg,在28°C条件下培养6天，作为二代种子;(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比2%的接种量接种到茶叶发酵基中，这里茶叶发酵基400g，二代松茸菌种Sg，然后放入温度28°C的环境下生长18天，湿度 保持在65%，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；
(4)得成品将发酵完毕的发酵产物切片后放入烘箱中58°C干燥48小时，得松茸发酵茶片，将松茸发酵茶片打磨成粉状后制粒，得松茸发酵茶颗粒。实施例五本实施例松茸发酵茶，按以下步骤制得(I)培养基制备①一级种子液体培养基制备取土豆粒220g，麦麸45g，葡萄糖12g，蛋白胨lg，磷酸二氢钾lg，磷酸氢二钠O. 5g，酒石酸O. 8g，硫酸镁2g，维生素B1 O. 02g,琼脂IOg,水I IOOg,按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0,120°C灭菌30分钟制备成一级种子液体培养基；②二级种子液体培养基制备取土豆粒220g，麦麸45g，葡萄糖12g，蛋白胨lg，磷酸二氢钾lg，磷酸氢二钠O. 5g，酒石酸O. 8g，硫酸镁2g，维生素B1 O. 02g,琼脂15g，茶叶煎汁50g,青稞粉5g，水llOOg，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0,120°C灭菌30分钟制备成二级种子液体培养基;③营养液培养基制备取葡萄糖15g，蛋白胨lg，硫酸镁0.3g，磷酸二氢钾0.4g，磷酸氢二钠0.6g，烟酸O. 4g，酒石酸O. 8g，水900g，按重量份混合均匀制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶45g、青稞粉15g、米粒6g、豆粉O. 5g,再加入营养液培养基40g,按重量份混合均匀，装入瓶子后120°C灭菌30分钟制备成茶叶发酵基；(2)菌种活化①一级种子制备将松茸菌种按重量比3%的接种量接种到一级液体种子培养基中，这里一级液体种子培养基18g，松茸菌种O. 54g，在22°C条件下培养6天，菌丝长满试管，作为一代种子；②二级种子的扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比3%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，这里二级液体种子培养基50g，一代松茸菌种I. 5g，在22°C条件下培养7天，作为二代种子;(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比4%的接种量接种到茶叶发酵基中，这里茶叶发酵基500g，二代松茸菌种20g，然后放入温度22°C的环境下生长24天，湿度保持在60 %，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；(4)得成品将发酵完毕的发酵产物切片后放入烘箱中63°C干燥24小时，得松茸发酵茶片，将松茸发酵茶片打磨成粉状后制粒，得松茸发酵茶颗粒。实施例六本实施例松茸发酵茶，按以下步骤制得(I)培养基制备
①一级种子液体培养基制备取土豆粒200g,麦麸50g,葡萄糖IOg,蛋白胨I. 5g,磷酸二氢钾O. 8g,磷酸氢二钠O. 8g，酒石酸O. 75g，硫酸镁2. 5g，维生素B1 O. 015g,琼脂15g，水lOOOg，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0，121°C灭菌28分钟制备成一级种子液体培养基；②二级种子液体培养基制备取取土豆粒200g,麦麸50g,葡萄糖IOg,蛋白胨I. 5g,磷酸二氢钾O. 8g,磷酸氢二钠O. 8g，酒石酸O. 75g，硫酸镁2. 5g，维生素B1 O. 015g,琼脂15g，茶叶煎汁35g，青稞粉12g，水lOOOg，按重量份混合均匀，调节pH6. 0± I. 0，121°C灭菌28分钟制备成二级种子液体培
养基;③营养液培养基制备取葡萄糖IOg,蛋白胨I. 5g,硫酸镁0. 25g,磷酸二氢钾0. 5g,磷酸氢二钠0. 5g,烟酸0. 5g，酒石酸0. 75g，水lOOOg，按重量份混合均匀制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶40g、青稞粉20g、米粒5g、豆粉Ig,再加入营养液培养基35g,按重量份混合均匀，装入瓶子后121°C灭菌28分钟制备成茶叶发酵基；(2)菌种活化①一级种子制备将松茸菌种按重量比2. 5%的接种量接种到一级液体种子培养基中，这里一级液体种子培养基20g，松茸菌种0. 5g，在25°C条件下培养5天，菌丝长满试管，作为一代种子；②二级种子的扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比2. 5%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，这里二级液体种子培养基45g，一代松茸菌种I. 125g，在25°C条件下培养6天，作为二代种子；(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比3%的接种量接种到茶叶发酵基中，这里茶叶发酵基450g，二代松茸菌种13. 5g，然后放入温度25 V的环境下生长21天，湿度保持在62%，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；(4)得成品将发酵完毕的发酵产物切片后放入烘箱中60°C干燥36小时，得松茸发酵茶片，将松茸发酵茶片打磨成粉状后制粒，得松茸发酵茶颗粒。实施例七按以下重量份称取各原料红景天10g、三七20g、天麻6g、丹参10g。本实施例松茸发酵茶，按以下步骤制得(I)培养基制备①一级种子液体培养基制备 取土豆粒180g,麦麸55g,葡萄糖8g,蛋白胨2g,磷酸二氢钾0. 5g,磷酸氢二钠Ig,酒石酸0. 7g，硫酸镁3g，维生素B1 O.Olg,琼脂20g，水900g，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0,125°C灭菌25分钟制备成一级种子液体培养基；
②二级种子液体培养基制备取土豆粒180g,麦麸55g,葡萄糖8g,蛋白胨2g,磷酸二氢钾O. 5g,磷酸氢二钠Ig,酒石酸O. 7g，硫酸镁3g，维生素B1 O. Olg,琼脂25g，茶叶煎汁20g,青稞粉20g,水900g,按重量份混合均匀，调节PH6. 0±1. 0,125°C灭菌25分钟制备成二级种子液体培养基；③营养液培养基制备取葡萄糖5g，蛋白胨2g，硫酸镁O. 2g，磷酸二氢钾O. 6g，磷酸氢二钠O. 4g，烟酸O. 6g，酒石酸O. 7g，水1100g ，按重量份混合均匀制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶35g、青稞粉25g、米粒4g、豆粉I. 5g、红景天10g、三七20g、天麻6g、丹参IOg,再加入营养液培养基30g，按重量份混合均匀，装入瓶子后125°C灭菌25分钟制备成茶叶发酵基；(2)菌种活化①一级种子制备将松茸菌种按重量比2%的接种量接种到一级液体种子培养基中，这里一级液体种子培养基15g，松茸菌种O. 3g，在28°C条件下培养5天，菌丝长满试管，作为一代种子；②二级种子的扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比2%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，这里二级液体种子培养基40g，一代松茸菌种O. Sg,在28°C条件下培养6天，作为二代种子;(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比2%的接种量接种到茶叶发酵基中，这里茶叶发酵基400g，二代松茸菌种Sg，然后放入温度28°C的环境下生长18天，湿度保持在65%，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；(4)得成品将发酵完毕的发酵产物切片后放入烘箱中58°C干燥48小时，得松茸发酵茶中药片。实施例八按以下重量份称取各原料红景天15g、三七15g、天麻8g、丹参5g。本实施例松茸发酵茶，按以下步骤制得(I)培养基制备①一级种子液体培养基制备取土豆粒220g，麦麸45g，葡萄糖12g，蛋白胨lg，磷酸二氢钾lg，磷酸氢二钠O. 5g，酒石酸O. 8g，硫酸镁2g，维生素B1 O. 02g,琼脂IOg,水I IOOg,按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0,120°C灭菌30分钟制备成一级种子液体培养基；②二级种子液体培养基制备取土豆粒220g，麦麸45g，葡萄糖12g，蛋白胨lg，磷酸二氢钾lg，磷酸氢二钠O. 5g，酒石酸O. 8g，硫酸镁2g，维生素B1 O. 02g,琼脂15g，茶叶煎汁50g,青稞粉5g，水llOOg，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0,120°C灭菌30分钟制备成二级种子液体培养基;③营养液培养基制备取葡萄糖15g，蛋白胨lg，硫酸镁O. 3g，磷酸二氢钾0.4g，磷酸氢二钠0.6g，烟酸O. 4g，酒石酸O. 8g，水900g，按重量份混合均匀制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶45g、青稞粉15g、米粒6g、豆粉O. 5g、红景天15g、三七15g、天麻8g、丹参5g，再加入营养液培养基40g，按重量份混合均匀，装入瓶子后120°C灭菌30分钟制备成茶叶发酵基；(2)菌种活化①一级种子制备将松茸菌种按重量比3%的接种量接种到一级液体种子培养基中，这里一级液体种子培养基18g，松茸菌种O. 54g，在22°C条件下培养6天，菌丝长满试管，作为一代种子；②二级种子的扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比3%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，这里二级液体种子培养基50g，一代松茸菌种I. 5g，在22°C条件下培养7天，作为二代种子;(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比4%的接种量接种到茶叶发酵基中，这里茶叶发酵基500g，二代松茸菌种20g，然后放入温度22°C的环境下生长24天，湿度保持在60 %，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；(4)得成品将发酵完毕的发酵产物切片后放入烘箱中63°C干燥24小时，得松茸发酵茶中药片。实施例九按以下重量份称取各原料红景天12g、三七12g、天麻7g、丹参8g。本实施例松茸发酵茶，按以下步骤制得(I)培养基制备①一级种子液体培养基制备取土豆粒200g,麦麸50g,葡萄糖IOg,蛋白胨I. 5g,磷酸二氢钾O. 8g,磷酸氢二钠O. 8g，酒石酸O. 75g，硫酸镁2. 5g，维生素B1 O. 015g,琼脂15g，水lOOOg，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0，121°C灭菌28分钟制备成一级种子液体培养基；②二级种子液体培养基制备取取土豆粒200g,麦麸50g,葡萄糖IOg,蛋白胨I. 5g,磷酸二氢钾O. 8g,磷酸氢二钠O. 8g，酒石酸O. 75g，硫酸镁2. 5g，维生素B1 O. 015g,琼脂15g，茶叶煎汁35g，青稞粉12g，水lOOOg，按重量份混合均匀，调节pH6. 0± I. 0，121°C灭菌28分钟制备成二级种子液体培
养基;③营养液培养基制备
取葡萄糖10g，蛋白胨1.58，硫酸镁0.258，磷酸二氢钾0.58，磷酸氢二钠0.58，烟酸O. 5g，酒石酸O. 75g，水lOOOg，按重量份混合均匀制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶40g、青稞粉20g、米粒5g、豆粉Ig,再加入营养液培养基35g,按重量份混合均匀，装入瓶子后121°C灭菌28分钟制备成茶叶发酵基；(2)菌种活化①一级种子制备将松茸菌种按重量比2. 5%的接种量接种到一级液体种子培养基中，这里一级液体种子培养基20g，松茸菌种O. 5g，在25°C条件下培养5天，菌丝长满试管，作为一代种子；②二级种子的扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比2. 5%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，这里二级液体种子培养基45g，一代松茸菌种I. 125g，在25°C条件下培养6天，作为二代种子；(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比3%的接种量接种到茶叶发酵基中，这里茶叶发酵基450g，二代松茸菌种13. 5g，然后放入温度25 V的环境下生长21天，湿度保持在62%，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；(4)得成品将发酵完毕的发酵产物切片后放入烘箱中60°C干燥36小时，得松茸发酵茶中药片。实施例十按以下重量份称取各原料红景天10g、三七20g、天麻6g、丹参10g。本实施例松茸发酵茶，按以下步骤制得(I)培养基制备①一级种子液体培养基制备取土豆粒180g,麦麸55g,葡萄糖8g,蛋白胨2g,磷酸二氢钾0. 5g,磷酸氢二钠Ig,酒石酸0. 7g，硫酸镁3g，维生素B1 O.Olg,琼脂20g，水900g，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0,125°C灭菌25分钟制备成一级种子液体培养基；②二级种子液体培养基制备取土豆粒180g,麦麸55g,葡萄糖8g,蛋白胨2g,磷酸二氢钾0. 5g,磷酸氢二钠Ig,酒石酸O. 7g，硫酸镁3g，维生素B1 O. Olg,琼脂25g，茶叶煎汁20g,青稞粉20g,水900g,按重量份混合均匀，调节PH6. 0±1. 0,125°C灭菌25分钟制备成二级种子液体培养基；③营养液培养基制备取葡萄糖5g，蛋白胨2g，硫酸镁0. 2g，磷酸二氢钾0. 6g，磷酸氢二钠0. 4g，烟酸
0.6g，酒石酸0. 7g，水1100g，按重量份混合均匀制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶35g、青稞粉25g、米粒4g、豆粉I. 5g、红景天10g、三七20g、天麻6g、丹参IOg,再加入营养液培养基30g，按重量份混合均匀，装入瓶子后125°C灭菌25分钟制备成茶叶发酵基；
(2)菌种活化①一级种子 制备将松茸菌种按重量比2%的接种量接种到一级液体种子培养基中，这里一级液体种子培养基15g，松茸菌种O. 3g，在28°C条件下培养5天，菌丝长满试管，作为一代种子；②二级种子的扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比2%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，这里二级液体种子培养基40g，一代松茸菌种O. Sg,在28°C条件下培养6天，作为二代种子;(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比2 %的接种量接种到茶叶发酵基中，这里茶叶发酵基400g，二代松茸菌种Sg，然后放入温度28°C的环境下生长18天，湿度保持在65%，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；(4)得成品将发酵完毕的发酵产物切片后放入烘箱中58°C干燥48小时，得松茸发酵茶中药片，将松茸发酵茶中药片打磨成粉状后制粒，得松茸发酵茶中药颗粒。实施例i^一 按以下重量份称取各原料红景天15g、三七15g、天麻8g、丹参5g。本实施例松茸发酵茶，按以下步骤制得(I)培养基制备①一级种子液体培养基制备取土豆粒220g，麦麸45g，葡萄糖12g，蛋白胨lg，磷酸二氢钾lg，磷酸氢二钠O. 5g，酒石酸O. 8g，硫酸镁2g，维生素B1 O. 02g,琼脂IOg,水I IOOg,按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0,120°C灭菌30分钟制备成一级种子液体培养基；②二级种子液体培养基制备取土豆粒220g，麦麸45g，葡萄糖12g，蛋白胨lg，磷酸二氢钾lg，磷酸氢二钠
O.5g，酒石酸O. 8g，硫酸镁2g，维生素B1 O. 02g,琼脂15g，茶叶煎汁50g,青稞粉5g，水llOOg，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0,120°C灭菌30分钟制备成二级种子液体培养基;③营养液培养基制备取葡萄糖15g，蛋白胨lg，硫酸镁O. 3g，磷酸二氢钾0.4g，磷酸氢二钠0.6g，烟酸
O.4g，酒石酸O. 8g，水900g，按重量份混合均匀制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶45g、青稞粉15g、米粒6g、豆粉O. 5g、红景天15g、三七15g、天麻8g、丹参5g，再加入营养液培养基40g，按重量份混合均匀，装入瓶子后120°C灭菌30分钟制备成茶叶发酵基；(2)菌种活化①一级种子制备将松茸菌种按重量比3%的接种量接种到一级液体种子培养基中，这里一级液体种子培养基18g，松茸菌种O. 54g，在22°C条件下培养6天，菌丝长满试管，作为一代种子；②二级种子的扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比3%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，这里二级液体种子培养基50g，一代松茸菌种I. 5g，在22°C条件下培养7天，作为二代种子;(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比4%的接种量接种到茶叶发酵基中，这里茶叶发酵基500g，二代松茸菌种20g，然后放入温度22°C的环境下生长24天，湿度保持在60 %，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；(4)得成品将发酵完毕的发酵产物切片后放入烘箱中63°C干燥24小时，得松茸发酵茶中药片，将松茸发酵茶中药片打磨成粉状后制粒，得松茸发酵茶中药颗粒。实施例十二 按以下重量份称取各原料红景天12g、三七12g、天麻7g、丹参8g。本实施例松茸发酵茶，按以下步骤制得(I)培养基制备①一级种子液体培养基制备取土豆粒200g,麦麸50g,葡萄糖IOg,蛋白胨I. 5g,磷酸二氢钾O. 8g,磷酸氢二钠
O.8g，酒石酸O. 75g，硫酸镁2. 5g，维生素B1O. 015g，琼脂15g，水lOOOg，按重量份混合均匀，调节pH6. 0±1. 0,121°C灭菌28分钟制备成一级种子液体培养基；②二级种子液体培养基制备取取土豆粒200g,麦麸50g,葡萄糖IOg,蛋白胨I. 5g,磷酸二氢钾O. 8g,磷酸氢二钠O. 8g，酒石酸O. 75g，硫酸镁2. 5g，维生素B1 O. 015g,琼脂15g，茶叶煎汁35g，青稞粉12g，水lOOOg，按重量份混合均匀，调节pH6. 0± I. 0，121°C灭菌28分钟制备成二级种子液体培
养基;③营养液培养基制备取葡萄糖10g，蛋白胨I. 5g，硫酸镁0. 25g，磷酸二氢钾0. 5g，磷酸氢二钠0. 5g，烟酸0. 5g，酒石酸0. 75g，水lOOOg，按重量份混合均匀制备成营养液培养基；④茶叶发酵基制备取绿茶40g、青稞粉20g、米粒5g、豆粉Ig,再加入营养液培养基35g,按重量份混合均匀，装入瓶子后121°C灭菌28分钟制备成茶叶发酵基；(2)菌种活化①一级种子制备将松茸菌种按重量比2. 5 %的接种量接种到一级液体种子培养基中，这里一级液体种子培养基20g，松茸菌种0. 5g，在25°C条件下培养5天，菌丝长满试管，作为一代种子；②二级种子的 扩大培养将培养好的一代松茸种子按重量比2. 5%的接种量接入二级种子液体培养基大瓶中，这里二级液体种子培养基45g，一代松茸菌种I. 125g，在25°C条件下培养6天，作为二代种子；(3)接种发酵将制备好的二代松茸种子按重量比3%的接种量接种到茶叶发酵基中，这里茶叶发酵基450g，二代松茸菌种13. 5g，然后放入温度25 V的环境下生长21天，湿度保持在62%，使菌丝长满整个茶叶发酵基，停止发酵；(4)得成品
将发酵完毕的发酵产物 切片后放入烘箱中60°C干燥36小时，得松茸发酵茶中药片，将松茸发酵茶中药片打磨成粉状后制粒，得松茸发酵茶中药颗粒。以上原料中茶叶可用绿茶、红茶；绿茶可用第一次采摘的茶，可以是第二次采摘的茶和第三次采摘的茶，含有较多的多酚物质。茶叶煎汁取绿茶加3倍量(重量份)的水煎煮I小时，过滤而得。土豆粒取土豆加3倍量(重量份)的水蒸煮I小时，捣碎做成土豆粒。青稞粉采用青藏高海拔地区生长成熟的青稞粉碎而成。豆粉采用蛋白质含量大于35%以上的有机大豆粉碎而成。


本发明属于食品饮料发酵工程，尤其涉及用生物发酵方法进行微生物发酵茶叶的生产工艺方法，特别是利用松茸菌体发酵茶叶及生产工艺。其制备方法包括培养基制备、菌种活化、接种发酵、得成品。本发明具有的有益效果是发酵茶是经过生物转化后具有松茸增强人体免疫力的功能，具有松茸和茶叶的双重生理功效。在发酵结束后，将整个发酵基质切成片状制备成片状饮品，或是粉碎后制粒成冲泡品，都具有良好的实用性，发酵的整个基质都得到充分利用，避免了发酵基质浪费的情况。该发酵茶食用方法简洁，不浪费时间，对松茸进行茶产品的开发，增加了品种类型，满足了现代人们对松茸菌的消费需求。