专利名称：新疆雪莲花繁育克隆试管苗的大规模生产工艺及其用途的制作方法 新疆雪莲花是新疆的中草药之一，其制剂在国内外深受欢迎。新疆雪莲花生长在天山雪线附近4000多公尺的悬崖峭壁之上，分布地域狭窄，山势险峻而难于攀登，故总的药源供给量有限。近年来国内外对雪莲花需求量与日俱增，只要人迹所能到的地方，均被一扫而光，造成野生雪莲花资源逐渐枯竭；为了保证雪莲花药源的充分供应，保护野生种植资源的繁衍恢复，必须实现雪莲花的人工栽培。因此，运用生物技术研制雪莲花的组织培养，人工培育成大量的试管苗，是目前急待解决的问题之一。
本发明的目的在于弥补现有技术中存在的不足之处，而提供一种制备简便、繁育效果好的克隆试管苗的大规模生产工艺及其用途。本发明的目的是通过如下措施来实现新疆雪莲花繁育克隆试管苗的大规模生产工艺把新疆雪莲花小头状花上的组织切去一小块，接种在MS+BA 2.5～5ml/L+NAA 0.2～0.5ml/L上，形成愈伤组织，然后，把愈伤组织转移到KT、BA、ZT的任一种培养基上，分化出幼芽，20-30天为一个周期，以此类推循环，无限增殖。本发明揭示出雪莲花的生物学性状，陈述如下1、雪莲花的抗寒性雪莲花之所以叫“雪”莲花，是因其生长在天山雪线附近，生长期中遇暴风雪也不会死。在冰峰雪原上经零下三十多度的严寒而能顺利越冬。它是天山上植物分布最高上限的唯一大型高等植物。研究证明，在五月份，当地表温度达到0℃以上时，雪莲花即开始萌发出新的幼芽，且生长很快。根据对大量野生雪莲花的全年定点观测，在5-6月份，平均每天叶片伸长1-2毫米，到7-8月份每天伸长3毫米以上，达到开花年龄的老植株，则迅速抽苔开花，这样的生长速度比较稳定，不会因高山上变幻莫测的气候而有明显的波动。即使在最热的7月份，高山上月平均气温仅3-5℃，这里雪莲花植株生长迅速，说明雪莲花有很强的利用有效积温的生理功能。试验证明，即使在低到2℃的恒温环境中，平均每5天可长出1片新叶。刚移栽到土壤中的幼嫩试管苗，在盆栽露地条件下，也能忍耐-12℃的低温达一星期之久。2、雪莲花抗紫外辐射的能力高山上紫外辐射强，但雪莲花生长不受影响。据此可以推测，雪莲花为了适应这种环境，在长期进化过程中形成了抗紫外线的生理遗传特征。为了验证这种假设，我们用组织培养试管苗作了人工紫外光照射试验。为了对比，用菊科的菊芋(Heliaothustuberosua L.)作对照材料，用的是田间块茎长出的小苗。用紫外线杀菌灯作紫外光源，波长254nm，叶面处光照强度210Lux。按理幼嫩的雪莲花试管小苗较菊芋要娇嫩得多，但试验结果表明，雪莲花试管苗更抗紫外光的杀伤力。如经紫外光照身0.5小时，雪莲花试管苗存活13天，菊芋大苗仅成活9天，照射时间延长到1.5小时后，雪莲花尚可成活8天，而菊芋仅存活5天。根据这个试验结果有理由断定，雪莲花植株中必定有某种抗紫外辐射的生化成份。这种物质可以作为研制新一代防晒化妆品和保健食品的珍贵原料。对雪莲花抗辐射机理的进一步研究，将为开发护肤保健品和食品提供理论基础。3、雪莲花耐低氧空气环境的能力在海拔高达4000公尺的冰川上，由于空气中氧分压比平原低，故汽车易熄火，打火机点不燃，大部分人有高山反应。而雪莲花却能在这种少氧状态下旺盛地生长。经过研究发现，雪莲花植株有一套适应缺氧环境的形态解剖通气结构。首先，雪莲花的茎从下到上，全部中空，这种通气孔道直达每个小头状花序的基部。其次，叶部组织结构也有利于气体交换，叶表面角质层不发达，叶片质地薄而柔软，叶肉细胞排列疏松，气孔发达，即使在强烈蒸腾缺水状态下，气孔也不关闭。上述植物组织器官上形成的适应性状，保证了雪莲花植株呼吸作用的正常进行。
4、雪莲花年龄的鉴别雪莲花为多年生植物，但它的生长周期的年限，以往无正式资料记载，经过我们对大量野生雪莲花植株的调查研究发现，在雪莲花植株基部，以每年形成一轮多层莲座状叶片的同时，其茎轴心就长成一个致密的横隔，有几层横隔就有几轮枯叶。一般在开花的植株上，基部横隔在4-6层左右，这个性状是识别雪莲花植株生长年龄的可靠指标。在已开花的植株的分枝上，有的只有2-3个横隔，由此可以判断，该分枝是从主茎上第几年长出来的。
5、雪莲花的分布下限以往一般均认为，雪莲花只能生长在雪线附近。但通过我们近几年的调查发现，在不同地区的两千多公尺(已到云杉分布地带)的山崖上，均发现有不少雪莲花旺盛地生长着，有的还成片分布。结合对群众的访问，证明历史上这些地区野生雪莲花很多。由于它艳丽的花朵和药用价值日益被人们发现，遭到大量破坏性地采挖而日益减少，最后以致绝迹。只有在人迹难到的悬崖上，得以留下少量个体而得以保留到今天。雪莲花目前这种生态分布状况，完全是历史上多年人工选择压力造成的，而且这种趋势还以更快的速度在继续着。上述发现，对于开发野生雪莲花的人工栽培很有启示，因为有可能在海拔高度更低的地带实现人工种植，从而恢复历史上曾经有过的野生雪莲花较广阔的生态分布范围及其资源。在乌鲁木齐作了小量的大田人工栽培，也成功地越冬和越夏。这一发现也改变了冰川冻土学者关于雪莲花是同冰川相伴而生的传统观念。
培养基介绍如下NAA萘乙酸KT激动素BA六苄氨基嘌呤ZT玉米素本发明的优点是雪莲花人工繁育技术是开创性工作，是前人没有的技术，一方面保护自然种质资源，同时开辟了人工栽培，源源不断供应雪莲花药源，而且本发明技术已实现了大规模生产，使产量大幅度提高。
具体实施方法下面列举1个实施例，对本发明加以进一步说明。但本发明不只限于这个实施例。
实施例1把新疆新鲜幼嫩的雪莲花植株的小头状花序剪开，接种在MS+BA2.5ml/L+NAA 0.2ml/L上，经15天，愈伤组织开始形成，诱导率达85％以上，然后，把愈伤组织转到KT、BA、ZT的任一种培养基上，20-30天，愈伤组织长满三角瓶，再进行剪切。
从1988年至今，已进行25年多的培育，若一个月一次，已有300多代克隆无性系。每代的繁殖系数为5-10。
用200毫升三角瓶为容器，经20-30天，从一百瓶繁殖成几千瓶的克隆苗，说明已是工业化生产规模。
雪莲花的药用保健价值雪莲花治病对风湿性和类风湿性关节炎的医疗效果最为明显，经几十万支雪莲花注射剂的临床应用证明，总有效率达78％，且无不良反应，病人普遍反应疗效显著。有的病人已多年不能工作，夏天还穿棉衣，甚至被诊断为不可逆转的类风湿，经注射雪莲花制剂后，关节肿胀疼痛完全消失，并恢复了工作能力。多年的医疗实践证明，目前常用的抗风湿药和激素类药物，是不能和雪莲花制剂相比的。
用雪莲花复方药外用治疗，可减轻多种妇科病引起的外阴炎症、搔痒、白带等，显效率65％，总有效率达100％，深受广大妇女患者的欢迎。
雪莲花其他奇特的医疗效果，正在探索之中，如哈萨克族牧民，处居深山草原，当妇女分娩后，如遇胎衣不下，他们就用水煎雪莲花口服来治疗，效果较好。此外，他们还将雪莲花用于治疗肺寒咳嗽和支气管炎，治雪盲、牙痛、麻疹不透、外伤出血等。
雪鸡和雪莲花为少数民族医药宝库中的“双雪”二宝，雪鸡之所以珍贵，很重要的一部分是鸡嗦子(胃)，他们将完整的鸡嗉子取出泡酒供药用，究其原因，雪鸡胃中食物的重要成份是雪莲花。
目前，以雪莲花为主要成份，已研制开发成一系列重要的中成药和保健食用品，如雪莲花注射液、雪莲花妇用保健带、雪莲花芦笋口服液、雪莲花护肤霜等，根据雪莲花所具有的许多宝贵习性，进一步开发许多环境适应型药物和保健食品，将有广阔的前景。如它的抗缺氧和抗寒特点，可研制供沙漠、高山野外工作人员的食品； 它的较强的抗紫外辐射能力，可用来开发护肤用品等。
野生雪莲花组织培养的成功，为大规模的工厂化育苗打下了基础，每年可以人工繁育出成千万株小苗，供大面积人工栽培，从而实现雪莲花野生变家养的美好愿望。此外，还可将大量小苗投放到野生雪莲花生长的大自然环境中去，恢复被严重破坏了的雪莲花生态，使原来宝贵的野生雪莲花资源得以再生。
雪莲花克隆苗和野生雪莲花的生化成分完全一致，在许多重要氨基酸含量上超过野生雪莲花。雪莲花用作保健品、化妆品和药品。


本发明涉及新疆雪莲花繁育克隆试管苗的大规模生产工艺及其用途。本发明是把新鲜幼嫩雪莲花小头状花上的组织切去一小块，接种在MS+BA2.5～5ml/L+NAA 0.2～0.5ml/L上，形成愈伤组织，然后，把愈伤组织转移到培养基上，分化出幼芽，20－30天为一个周期，以此类推循环。本发明优点是雪莲花人工繁育技术是开创性工作，前人没有的技术，一方面保护种植资源，同时开辟了人工栽培，源源不断供应雪莲花药源，本发明技术还实现了克隆苗的大规模生产，使产量大幅度提高。直接将雪莲花的克隆苗用作保健品、化妆品和药品。