专利名称：体内诱导刺参产卵的催产剂的制作方法海参做为我国和东南亚等太平洋和西印度洋沿岸国家人们餐桌上的佳肴美昧早 已闻名于世，特别是世界华人一直有吃海参“食补”的习惯，如今海参因具有丰富的营养价 值已越来越受人们的青睐。需求的增加导致采捕强度增大，造成我国自然生长的刺参资源 量和产量急剧下降，而刺参养殖产业随之迅猛发展起来。刺参增养殖业的发展导致苗种需 求量增加，然而现有刺参产卵效率却一直遏制苗种产量，直接影响了刺参养殖的经济效益。目前，海参产卵主要是通过自然产卵和人工刺激诱导产卵两个途径。自然产卵要 求亲参性腺发育充分成熟，其产卵时间和产卵量不能人为控制，常因傍晚或夜间产卵、排 精、产卵量过大、精液过多等原因而造成水质败坏，继而导致受精卵大量解体的现象。人工 刺激诱导产卵最大的优点是能够人为控制刺参的产卵时间和产卵量，避免自然产卵所存在 的水质败坏等问题，但是现有的人工刺激诱导产卵方法还是存在着不同程度的问题，仍不 能最大程度满足刺参苗种生产的需要。常用的人工刺激诱导产卵分为体外及体内诱导两种，体外诱导是通过温差法和 阴干流水等刺激的方法，但诱导效果不稳定，海参产卵量少(每只雌参产卵量一般在100 万粒以下)，约占总怀卵量的20%左右，往往需要隔天多次催产才能满足生产的需要，劳 动强度高、育苗时间长，否则只能增加种参数量，加大了育苗成本。体内诱导有单纯使用 KCl注射催产的方法，此方法不但同自然产卵一样，存在着对亲参的性腺成熟度要求高、 产卵量极少的问题，而且因注射量要求0. 5mol/L、l 2ml，很容易引起亲参排出包括性 腺在内的内脏，因此不能应用于刺参苗种的生产上。还有一种体内诱导的方法，既是文献 (Develop-mental biology, 326 (2009) 169-175)关于五肽NGIWY酰胺及其衍生物NGLWY酰 胺的报道(Asn-Gly-Leu-Trp-Tyr-NH2)。文献虽然指出体内注射NGLWY酰胺能够诱导刺参 精卵排放并公开了每个个体的注射量为0. 1% (v/w)、最佳浓度为lnmol/L，但经实验表明 单独以NGLWY作为催产剂产卵量少，如平均体重为210克的成熟亲参，平均产卵量只有43 万粒，浮游幼体期间成活率只有20 50%，稚参变态率只有15 30%。
本发明是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种可使刺参同步产卵 且卵子排放量大、质量好，可极大提高催产效率、受精率及孵化率的体内诱导刺参产卵的方 法。本发明的技术解决方案是一种体内诱导刺参产卵的催产剂，其特征在于是将 NGLWY酰胺溶于超纯水中配置成1 μ mol/L的母液，然后将母液溶于0. 5mol/L的KCl海水溶液中，制成NGLWY酰胺浓度为lnmol/L的催产剂。本发明是将NGLWY酰胺和KCl的混合溶液作为人工催产剂，NGLffY酰胺和KCl的 合理配伍、相互作用，直接作用于刺参性腺，诱导刺参卵母细胞成熟和脱滤泡，一次催产基 本保证全部个体都排放精卵，催产率达到90%以上。其用量可保证亲身不排脏且排卵率大 大提高，平均产卵量可提高到400万粒，达到了总怀卵量的70%以上，极大的提高了亲参利 用率，即避免了单独注射KCl所存在的引用量大引起亲参排脏的问题，也解决了单独使用 NGLWY酰胺所存在的产卵量小的问题。可使卵子同步排放且质量好，直接提高了受精率和孵 化率(均在98%以上)，浮游幼体期间成活率达到50 90%，稚参变态率达到40 80%， 大大提高苗种产量。本发明所使用的催产剂无毒副作用且所需剂量少，催产后的亲参仍可 正常养殖、生长，进一步降低了苗种培育成本，增加了企业的经济效益。排精产卵时间与实验例1基本一致，共有54头亲参排精，52头亲参产卵，雌参产卵 量在292万粒到600万粒之间，平均产卵量为495. 4万粒。人工受精和孵化、选育、浮游幼体培育及幼体的变态、附着及培育均同实验例1，浮 游幼体成活率为74. 6 %，幼体变态率为68 %。本发明公开一种体内诱导刺参产卵的催产剂，是将NGLWY酰胺溶于超纯水中配置成1μmol/L的母液，然后将母液溶于0.5mol/L的KCl海水溶液中，制成NGLWY酰胺浓度为1nmol/L的催产剂。NGLWY酰胺和KCl的合理配伍、相互作用，直接作用于刺参性腺，诱导刺参卵母细胞成熟和脱滤泡，一次催产基本保证全部个体都排放精卵，催产率达到90％以上。其用量可保证亲身不排脏且排卵率大大提高，平均产卵量可提高到400万粒，达到了总怀卵量的70％以上，极大的提高了亲参利用率，既避免了单独注射KCl所存在的引用量大引起亲参排脏的问题，也解决了单独使用NGLWY酰胺所存在的产卵量小的问题。