专利名称：抗癌体内植入剂的制作方法实体肿瘤的治疗主要包括手术、放疗及化疗等方法。在所用的各种化疗药物中，亚硝脲类抗癌药物的作用效果较为明显，已广泛应用于多种恶性肿瘤。然而，进一步研究发现，许多肿瘤细胞内的DNA修复功能在治疗之后明显增加。后者常导致肿瘤细胞对亚硝脲类抗癌药物的耐受性的增强，其结果是治疗失败。最近发现，许多药物可以增加肿瘤细胞对亚硝脲类抗癌药物的敏感性，参见多兰等“O6-苄基鸟嘌呤类似物对人肿瘤细胞对烷化剂的细胞毒敏感性的作用”《癌症研究》51期3367-3372页(1991年)(Dolan et al.，Cancer Res.，51，3367-3372，1991)。然而，肿瘤间质中的血管、结缔组织、基质蛋白、纤微蛋白及胶原蛋白等不仅为肿瘤细胞的生长提供了支架及必不可少的营养物质，还影响了化疗药物在肿瘤周围及肿瘤组织内的渗透和扩散，参见尼提等“细胞外间质的状况对实体肿瘤内药物运转的影响”《癌症研究》60期2497-503页(2000年)(Netti PA，Cancer Res.2000，60(9)2497-503)。由于实体肿瘤过度膨胀性增生，其间质压力、组织弹性压力、流体压力及间质的粘稠度均较其周围正常组织为高，因此，常规化疗，难于肿瘤局部形成有效药物浓度，单纯提高给药剂量又受到全身反应的限制。参见孔庆忠等“瘤内放置顺铂加系统卡莫司汀治疗大鼠脑肿瘤”《外科肿瘤杂志》69期76-82页(1998年)(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2)76-82)。除此之外，低剂量的抗癌药物治疗不仅能够增加癌细胞的药物耐受性，而且还可促进其侵润性生长”，参见梁等“抗癌药物脉冲筛选后增加了人肺癌细胞的药物耐受性及体外侵润能力并伴有基因表达的改变”《国际癌症杂志》111期484-93页(2004年)(Liang Y，etal.，Int J Cancer.2004；111(4)484-93)。由于决定治疗效果的主要因素是肿瘤局部的药物浓度以及肿瘤细胞对药物的敏感程度。而肿瘤间质中的血管、结缔组织、基质蛋白、纤微蛋白及胶原蛋白等不仅为肿瘤细胞的生长提供了支架及必不可少的营养物质，还影响了化疗药物在肿瘤周围及肿瘤组织内的渗透和扩散。
本发明抗癌体内植入剂含亚硝脲类抗癌药物及其增效剂，后者可有效地抑制及破坏肿瘤细胞内的DNA修复功能，进而增加亚硝脲类抗癌药物的治疗效果。本发明抗癌体内植入剂，包括抗癌有效量的抗癌有效成分和药用辅料，其中抗癌有效成分为亚硝脲类抗癌药物和亚硝脲类抗癌药物增效剂。亚硝脲类药物增效剂包括双氯乙胺类烷化剂、抗肿瘤抗生素或激素类抗癌药的一种或多种。亚硝脲类药物选自下列的一种或多种，阿雌莫司汀(Alestramustine)、链佐星(streptozotocin，STZ)、阿莫司汀(Atrimustine)、氨莫司汀(Ambamustine)、尼莫司汀(ACNU，Nimustine)、苯达莫司汀(Bendamustine)、二硫莫司汀(Ditiomustine)、波呋莫司汀(Bofumustine)、卡莫司汀(卡氮芥、BCNU、carmustine)、依莫司汀(Elmustine)、依考莫司汀(Ecomustine)、加莫司汀(Galamustine，GCNU)、福莫司汀(Fotemustine)、雌莫司汀(Estramustine，81)、合莫司汀(hemustine，heCNU)、奈莫司汀(Pentamustine，Neptamustine)、甘露莫司汀(Mannomustine，MCNU)、洛莫司汀(lomustine，CCNU，环己亚硝脲，罗氮芥)、甲基洛莫司汀(methyl-CCNU)、司莫司汀(Semustine、甲环亚硝脲、Me-CCNU)、雷莫司汀(Ranimustine)、泼尼莫司汀(Prednimustine)、乌拉莫司汀(Uramustine，Uracil Mustard)、萨莫司汀(SarCNU)、牛磺莫司汀(Tauromustine)、他莫司汀(Tallimustine)及螺莫司汀(Spiromustine)等。以上亚硝脲类药物还包括其盐，如，但不限于，硫酸盐、磷酸盐、盐酸盐、乳糖酸盐、醋酸盐、天冬酸盐、硝酸盐、枸橼酸盐、嘌呤或嘧啶盐、琥珀酸盐及马来酸盐等。上述亚硝脲类药物优选链佐星(STZ)、雌莫司汀、尼莫司汀、洛莫司汀或卡莫司汀。
上述双氯乙胺(bischloroethylamines)类药物选自下列的一种或多种瘤可宁(苯丁酸氮芥，chlorambucil)、环磷酰胺(Cyclophosphamide)、异环磷酰胺(Ifosfamide，匹服平)、4H-过氧环磷酰胺、三芥环磷酰胺、磺磷酰胺(Sufosfamide)、地磷酰胺(Defosfamide)、马磷酰胺[Mafosfamide]、培磷酰胺(Perfosfamide)、曲磷胺[Trofosfamide]、卡唑硫酰胺、美法仑(Melphalan)、美他法仑(Metamelfalan)、甲氧芳芥(Methoxymerphalan)和氮甲(Formylmerphalan)。双氯乙胺类药物还包括具有类似结构或功能的药物，如，但不限于，六甲嘧胺(hexamethylmelamine)、阿美坦醌、胸腺五肽、氯米芬、来曲唑、斑蝥酸钠、斑蝥素(cantharidine)、斑蝥素钠、甲基斑蝥胺、羟基斑蝥素、去甲斑蝥素(Norcantharidin)、硫秋水仙、消旋苯丙氨酸氮芥、美才斯坤、二安三唑、甘露舒凡(Mannosulfan)、曲奥舒凡(Treosulfan)、利曲舒凡(Ritrosulfan)、英丙舒凡(Improsulfan)、麦磺磷芥、螺溴丙酰胺、甘露醇二磺酯、三嗪咪唑胺、恩普氨酯、依匹哌啶、丁烯醇亚胺、乙双吗啉、乙羟脲、乙亚胺、依托格鲁(乙环氧啶，Ethoglucid，Etoglucid)、益毛磷铵、双丙氧亚胺醌、哌泊溴烷(双溴丙基哌嗪，Pipobroman)、哌泊舒凡(哌酰硫烷，Piposulfan)、匹利垂克辛、必散特隆、必散特隆、瑞卓苏芳、琥钠环己酯、罗非昔布、落羽松二酮、三羟甲胺三嗪、乌拉坦、盐酸正定苯酰肼、正定苯酰肼、癌宁(triethylenemelamine)、环氧哌嗪(epoxypiperazine)、苯佐替派(Benzodepa)、嘌嘧替派(Pumitepa)、美妥替哌(Meturedepa)、阿扎替派(Aza-TEPA)或乌瑞替哌(Uredepa)。
以上双氯乙胺类药物还包括它们的盐，如，但不限于，硫酸盐、磷酸盐、盐酸盐、乳糖酸盐、醋酸盐、天冬酸盐、硝酸盐、枸橼酸盐、嘌呤或嘧啶盐、琥珀酸盐及马来酸盐等。
以上双氯乙胺类药物优选以瘤可宁、环磷酰胺、异环磷酰胺、美法仑、4H-过氧环磷酰胺、甲氧芳芥、六甲嘧胺、来曲唑、斑蝥素、去甲斑蝥素或阿扎替派。
抗肿瘤抗生素通过与DNA结合而抑制RNA合成而用于治疗各种癌症，抗肿瘤抗生素选自选自下列的一种或多种癌霉素、博来霉素(Bleomycin，平阳霉素、博来霉素A5)、(盐酸)博来霉素、佐尔博霉素、派来霉素、硫酸派来霉素、抗生素1588、波外定、克拉霉素(Clarithromycin)、阿克拉霉素(Aclacinomycin A、阿柔比星)、阿克拉霉素-B、盐酸阿可达佐、阿可达佐、克大霉素、乙酰克大霉素(乙酰贵田霉素)、阿佐霉素(含氮霉素)、道诺霉素(正定霉素，柔红霉素，daunomycin)、蛇形菌素(Diacetoxysciroenol)、盐酸阿霉素(多柔比星，doxorubicin，adriamycin)、三铁阿霉素、表阿霉素(epiadriamycin)或表柔比星(Epirubicin)、奥柔比星(valrubicin)、吡柔比星、7-O-甲基诺加-4’-表阿霉素(7-o-methylnogallol-4’-epiadriamycin)、二乙氧醋酰阿霉素、环霉素，丝裂霉素(Mitomycin)、丝裂霉素C(mitomycin C)、丝林霉素、放线菌素D(Dactinomycin)、放线菌素C、环孢菌素A、消癌菌素(carzinocidin)、嗜癌素(carzinophylin)、嗜癌霉素、瘤菌素、治癌菌素(carzinostatin，制癌菌素)、新制癌菌素(neocarzinostain)、重氮霉素(diazamycine)、大菌素(macrocin)、大菌霉素(macrocinomycin)、更生霉素、丙氨菌素、丙氨肽霉素、阿乐盖、新丝菌素(neothricin，neothramycin)、大分子霉素(macromomycin或macromycin)、新塞那霉素、诺卡菌素(nocardin)、诺卡菌红素(nocardorubin)、诺卡型霉素(noformicin)、诺加霉素(诺加拉霉素，nogalamycin or nogaromycin)、丝裂红素(mitochromine or mitocromine)、多粘菌素E(PolymyxinE)、吡利霉素(Pirlimycin)、地红霉素(Dirithromycin)、安曲霉素、恶溶菌素、达佐霉素、橄榄霉素、链黑霉素、链黑霉素甲酯、链脲霉素、培洛霉素、嘌罗霉素、司帕霉素、他利霉素、洛撒蒽醌、洛索蒽醌[Losoxantrone]、米托蒽醌(Mitoxantrone)、吡罗蒽醌[Piroxantrone]、替洛蒽醌[Teloxantrone]、羟硝氨糖环素、蒽霉素(氨茴霉素，安拉霉素)、甲基蒽霉素、艾菲地可宁、曲林菌素、(盐酸)卡米诺霉素、他利霉素、巨毛霉素、去甲柔毛霉素、氯脲霉素、色霉素A3、氯佐星(chlorozotocin)、去甲利福平、蒽环霉素-A、黑他七霉素、脱氧助间型霉素、嘌呤霉素、盐酸嘌呤霉素、雷查霉素、瑞必克霉素、桑霉素、抗癌霉素、西伯利亚霉素、他利霉素、米托佐罗、硒唑呋喃、斯潘格宁、盐酸锗螺胺、锗螺胺、螺妙斯定或抗癌锑。
上述抗肿瘤抗生素优选博来霉素、道诺霉素、阿霉素、表柔比星、吡柔比星、丝裂霉素C、洛索蒽醌、米托蒽醌、吡罗蒽醌、替洛蒽醌或氯佐星。
激素类抗癌药为类固醇激素和激素劫抗剂，用于调节某些激素依赖的肿瘤的增生。此类药物多据其功能分类，如，但不限于，肾上腺皮质激素、雌激素、孕激素、抗雌激素、抗雄激素。本发明中激素类抗癌药选自下列的一种或多种阿那曲唑(anastrozole)、艾多昔芬(idoxifene)、米泼昔芬(Miproxifene)、他莫昔芬(tamoxifen、三苯氧胺)、4-单羟基他莫昔芬(trans-4-monohydroxytamoxifen，OH-TAM)、可莫昔芬(keoxifene，LY156758)、甾抗雌(ICI164384，雌二醇的7-α-烷基酰胺类似物)、7-α-[9-(4，4，5，5，5-五氟戊基亚硫酰基)壬基]雌甾-1，3，5(10)-三烯-3，17β二酚(抗癌甾烯酚，fulvestrant，7alpha-[9-(4，4，5，5，5-pentafluoropentyl sulfinyl)nonyl]estra-1，3，5(10)-triene-3，17 beta-diol，ICI 182780)、4-羟基他莫昔芬(4-hydroxytamoxifen)、γ-亚麻油酸(gamma-linolenic acid)、2-甲氧雌二醇(2-methoxyestradiol)、甲氧基降孕三烯炔二醇(moxestrol)、4-羟基他莫昔芬(4-hydroxytamoxifen)、滴滴涕(二氯二苯三氯乙烷，o，p′-dichlorodiphenyltrichloroethane，o，p′-DDT)、六氯环己烷(六氯化苯，六六六，beta-hexachlorocyclohexane，beta-HCH)、雷莫昔芬(raloxifene)、已烯雌酚(diethylstilbestrol)、雌二醇(estradiol)、玉米赤霉烯酮(zearalenone)、雌酮(estrone)、17α-雌二醇(17alpha-estradiol)、雌二醇(estriol)、2-羟雌酮(2-hydroxyestrone)、5，7，4三羟基异黄酮(genistein)、黄体酮、美雄烷(Mepitiostane)、雄激素、吡鲁米特、鲁比特康，涛瑞米芬、氟他米特(Flutamide、氟他胺)、夸单硅蓝、比卡鲁胺(Casodex)、氨鲁米特(Aminoglutethimide，氨基导眠能)、苯甲酸倍他米松、卡鲁睾酮、甲地孕酮、达提斯可苷、环硫雄醇、溴醋乙烷雌芬、海斯芬或睾内酯。
以上激素类抗癌药优选阿那曲唑、艾多昔芬、米泼昔芬、他莫昔芬、4-单羟基他莫昔芬(OH-TAM)、可莫昔芬、甾抗雌、抗癌甾烯酚、4-羟基他莫昔芬、氟他米特、甲地孕酮或比卡鲁胺。
以上激素类抗癌药可用于各种激素依赖的肿瘤，但不同药物具有相对肿瘤选择性，如，他莫昔芬、吡鲁米特、鲁比特康，涛瑞米芬等主要用以治疗依赖雌激素的肿瘤，如乳腺癌及子宫内膜癌；氟他米特、夸单硅蓝、和比卡鲁胺主要用以治疗依赖雄激素的肿瘤，如前列腺癌；而氨鲁米特则用以治疗乳腺癌、前列腺癌及子宫内膜癌。
亚硝脲类抗癌药物在抗癌体内植入剂的重量百分比含量可从0.01％-99.99％，以1％-50％为佳，以2％-30％为最佳。亚硝脲类抗癌药物增效剂在抗癌体内植入剂的含量因具体情况而定，重量百分比可从0.01％-99.99％，以1％-30％为佳，以5％-25％为最佳。
常用的药用辅料在《药用辅料大全》(第123页，四川科学技术出版社1993年出版，罗明生和高天惠主编)中已有详细描述。另外，中国专利(申请号96115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美国发明专利(专利号5,651,986)也列举了某些药用辅料。包括充填剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂、制(或致)孔剂、赋型剂或阻止剂。以上药用辅料有的具有多重作用，因此有的同种物质被列为不同的类别。本发明可选用的药用辅料中并不完全根据其分类或定义来限制植入剂的技术特征，药用辅料可为上述任何一种或多种物质。
药用辅料主要选自生物相容性多聚物，包括生物可降解的或生物不可降解的多聚物。
生物可降解的多聚物包括天然的和/或合成的多聚物。合成的多聚物如，但不限于，聚酐类、聚羟基酸、聚酯(polyesters)、聚酰胺(polyamides)、聚原酸酯(polyorthoesters)、聚磷酯(polyphosphazenes)、对羧苯基丙烷(p-CPP)、葵二酸(sebacic acid，SA)等；天然的多聚物如，但不限于，蛋白质及多糖，包括透明质酸、胶原蛋白、明胶、白蛋白等。
聚酐类可选用，但不限于，芳香聚酐、脂肪族聚酐；其中芳香聚酐将解较慢，熔点高，有机溶剂中溶解度低，然而，芳香聚酐与脂肪族聚酐的共聚物却较为理想(美国专利4757128)。其中的代表物是对羧苯基丙烷(p-CPP)与葵二酸的共聚物，如polifeprosan 20，而对羧苯基丙烷为芳香聚酐，葵二酸则是一个芳香二酸与一个脂肪二酸的共聚物。可选用的其它芳香或脂肪族聚酐的共聚物在其它美国专利中已有详细描述(US4857311；4888176；4789724)。
聚羟基酸可选用，但不限于，聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚乳酸(PLA)与聚乙醇酸的混合物、乳酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)；当PLA和PLGA混合时，其含量分别为0.1-99.9％和99.9-0.1％。聚乳酸的分子量可为，但不限于，5000-100,000，但以10,000-50000为优选，以10,000-20000为最优选；聚乙醇酸的分子量可为，但不限于，5000-100,000，但以10,000-50000为优选，以10,000-20000为最优选；以上聚羟基酸可单选或多选。当单选时，以聚乳酸(PLA)或乳酸和乙醇酸共聚物(PLGA)为优选，共聚物的分子量可为，但不限于，1000-100,000，但以10,000-50,000为优选；以10,000-20,000为最优选；当多选时，以高分子多聚物或不同高分子多聚物组成的复合多聚物或共聚物为优选，以含不同分子量聚乳酸或葵二酸的复合多聚物或共聚物为最优选，如，但不限于，分子量为5,000到10,000的聚乳酸与分子量为20,000到50,000的聚乳酸混合、分子量为10,000到20,000的聚乳酸与分子量为30,000到80,000的PLGA混合、分子量为5,000到10,000的聚乳酸与葵二酸混合、分子量为30,000到80,000的PLGA与葵二酸混合。所指分子量均为由GPC测得的分子量峰值范围。
生物不可降解的多聚物包括，但不限于有机硅聚合物、乙烯乙酸乙烯酯(Ethelene-vinyl acetate copolymer，EVAc)、聚丙烯腈(polyacrylonitriles)，聚氨酯(polyurethanes)，聚磷酯(polyphosphazenes)等。组合物可通过直接扩散的方式将有效成分释放出来。
本发明抗癌体内植入剂所用的药用辅料中以水溶性高分子聚合物为主选，在各种高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物为首选，混合物和共聚物可选自，但不限于，乳酸和乙醇酸共聚物、乳酸和乙醇酸的混合物、葵二酸与芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乳酸和乙醇酸共聚物的共混比例是10/90-90/10(重量)，以25/75-75/25(重量)为优选，50/50为最最优选。共混的方法是任意的。乳酸和乙醇酸共聚时的含量分别为10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是对羧苯基丙烷(p-CPP)，对羧苯基丙烷(p-CPP)与葵二酸共聚时的含量分别为10-90％和90-10％，共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。
抗癌体内植入剂的有效成分可均匀地包装于整个载体支持物中，也可包装于载体支持物中心或其表面；可通过直接扩散或经多聚物降解的方式或如此两种方式将有效成分释放。除此之外，抗实体肿瘤组合物的有效成分也可均匀地包装于脂质体中，或以现成的任意方法制成微球。
为调节药物释放速度或改变本发明抗癌体内植入剂的其它特性，可以改变聚合物的单体成分或分子量、添加或调节药用辅料的组成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各种糖和盐等。其中糖可为但不限于，木糖醇、低聚糖及甲壳素等，其中盐可为但不限于，钾盐和钠盐等。
该技术特征的特点在于所用的药用载体支持物除高分子聚合物外，还含有上述任意一种(或个)或多种(或多个)其它药用辅料。添加的药用辅料统称为添加剂。添加剂可根据其功能分为充填剂、致孔剂、赋型剂、分散剂、等渗剂、保存剂、阻止剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂等。
药用辅料还可为流质，如，但不限于芝麻油、混悬液、蒸馏水、生理冲液、以及半固态物质，如(但不限于)果冻、糊剂、软膏等，上述药用辅料适用于含或不含添加剂的组合物。
本发明抗癌体内植入剂可制成多种剂型。如，但不限于，针剂、浑悬液、软膏、胶囊及缓释剂等；呈各种形状，如，但不限于，颗粒样、片状、球形、块状、针状、棒状及膜状。在各种剂型中，以体内缓慢释放剂为主。上述剂型和形状适用于含或不含添加剂的组合物。
本发明抗癌组合物的又一个技术特征是该组合物包括有效成分、载体支持物和添加剂。
其中有效成分可单独包装或联合包装，载体支持物除可为生物相容性多聚物，包括一种或数种上述生物可降解的或生物不可降解的多聚物。
本发明抗癌体内植入剂可与常规化疗、免疫治疗、高热治疗、光化学治疗、电疗、生物治疗、激素治疗、磁疗、超声治疗、放疗及基因治疗等非手术疗法同时或于非手术疗法几天前应用。
给药途径本发明抗癌体内植入剂可经各种途径应用，如动脉、皮下、肌肉、皮内、腔内、瘤内、瘤周等。给药途径取决于多种因素，如肿瘤所在部位、是否手术或转移、肿瘤体积大小、肿瘤类别、病人年龄、身体状况、生育状况及要求等。为于肿瘤所在部位获得有效药物浓度，可选择性地动脉灌注，腔内灌注(intracavitary)，腹腔(intraperitoneal)或胸腔(intrapleural)及椎管内(intraspinal)给药，也可脏器内放置，如肠腔内、膀胱内、宫腔内、阴道内、胃内及食道内等。在多种途径中，以局部给药，如以选择性动脉、瘤内、瘤周注射为主，以瘤内、瘤周或瘤腔缓慢释放的形式为优选，如可选用可种缓释泵、缓释胶囊、缓释剂、植入剂及缓释植入剂。
给药剂量抗癌药物的用量取决于很多因素，如，但不限于，肿瘤体积、病人体重、给药方式、病情进展情况及治疗反应。但其原则是在能够降低肿瘤细胞的修复能力，增加化疗作用效果的同时并不明显增加药物的毒性反应。
亚硝脲类抗癌药物的有效剂量为0.01-200毫克/公斤体重，以1-30毫克/公斤体重为理想，以2-20毫克/公斤体重为最理想；亚硝脲类抗癌药物增效剂在抗癌体内植入剂的的有效剂量因具体情况而定，可从0.01-200毫克/公斤体重，以1-30毫克/公斤体重为理想，以2-20毫克/公斤体重为最理想。
本发明抗癌体内植入剂可以用于治疗人、宠物及各种动物的各种癌、肉瘤或癌肉瘤等实体肿瘤，包括起源于大脑、中枢神经系统、肾脏、肝、胆囊、头颈部、口腔、甲状腺、皮肤、黏膜、腺体、血管、骨组织、淋巴结、肺脏、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻烟部、子宫、卵巢、子宫内膜、子宫颈、前列腺、膀胱、结肠、直肠的原发或转移的癌或肉瘤或癌肉瘤。因此，本发明抗癌体内植入剂的应用是用于制造治疗上述肿瘤的上述各种制剂。
该抗癌体内植入剂中还可加入其它药用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼药、抗凝药、止血药等。以上药用成分可单选或多选，可加入到含或不含添加剂的组合物，其含量因具体需要而定。
抗癌体内植入剂的剂型本发明抗癌体内植入剂可制成各种形状，其中有效成份的含量因不同需要而定。可制成各种剂型，如，但不限于，针剂、浑悬液、软膏、胶囊、植入剂、缓释剂及植入缓释剂等；呈各种形状，如，但不限于，颗粒样、片状、球形、块状、针状、棒状及膜样；可经各种途径给药，以动脉途径为佳，肿瘤体内直接放置为最佳。最佳剂型为生物可容性、可降解吸收的植入缓释剂，可因不同临床需要而制成各种形状。可用任意的方法制备。其主要成份的包装方法和步骤在美国专利中(US5651986)已有详细描述，包括若干种制备缓释制剂的方法如，但不限于，(i)把载体支持物粉末与药物混合然后压制成植入剂，即所谓的混合法；(ii)把载体支持物熔化，与待包装的药物相混合，然后固体冷却，即所谓的熔融法；(iii)把载体支持物溶解于溶剂中，把待包装的药物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸发溶剂，乾燥，即所谓的溶解法；(iv)喷雾干燥法；及(v)冷冻干燥法等。其中溶解法可用于微球的制造，抗癌药物组合物也可包装于脂质体中。
本发明抗癌体内植入剂制备技术的特点在于将各类抗癌药物单独或联合包装于载体支持物中，按照一定比例将有效成份和载体支持物溶解(或混匀)，抽气干燥(或压片)，成形并消毒分装。同时包装时可通过分层包装等技术控制其释放时间。其原则是在尽可能减轻药物毒性的同时，最有效地增强各种药物间的作用效果。
本发明抗癌体内植入剂可通过许多方案予以应用。可将上述有效成分包装于药用辅料中，然后局部应用。该组合物可经各种途径给药，以局部给药，如选择性动脉注射和直接瘤体内注射为佳，其中又以局部缓慢释放为最佳。当局部应用时，组合物可直接置于原发或转移的实体肿瘤周围或瘤体内，也可直接置于原发或转移的实体肿瘤全部或部分切除后所形成的腔内。
本发明抗癌体内植入剂主要成份以生物可容性物质为支持物，故不引起异物反应。支持物体内放置后可降解吸收，故不再手术取出。因在肿瘤局部释放所含药物，从而选择性地提高并延长局部药物浓度，同时可降低由常规途径给药所造成的全身毒性反应。
试验一、亚硝脲类抗癌药物及其增效剂对体外肿瘤细胞生长的抑制作用。
为验证亚硝脲类抗癌药物及其增效剂的相互增效所用，本试验用多种体外培养的肿瘤细胞，包括CNS-1、C6、胃腺上皮癌(SA)、骨肿瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲状腺乳头状腺癌(PAT)、肝癌等。将不同类抗癌药物按表1所示之组合，抗癌药物按10ug/ml的浓度加到体外培养24小时的各种肿瘤细胞中，继续培养48小时后计数细胞总数并计算其对肿瘤细胞生长的抑制率(％)。
表1
注解BCNU为亚硝脲类抗癌药物；Mel为美法仑，属双氯乙胺类烷化剂；Dox-阿霉素，Epi-表柔比星，均为抗癌抗生素；Tam他莫昔芬，为激素类抗癌药。
试验二、按照试验一所述方法比较亚硝脲类抗癌药物及其增效剂对体外肿瘤细胞生长的抑制作用。结果见表2。
表2
注解(A)为ACNU，属亚硝脲类抗癌药物；(B)环磷酰胺，为双氯乙胺类烷化剂；(C)吡柔比星，抗癌抗生素；(D)抗癌甾烯酚，和(E)氟他米特，均为激素类抗癌药。
试验三、按照试验一所述方法比较亚硝脲类抗癌药物及其增效剂对体外肿瘤细胞生长的抑制作用。结果见表3。
表3
注解(A)CCNU，为亚硝脲类抗癌药物；(B)4H-过氧环磷酰胺，为双氯乙胺类烷化剂；(C)丝裂霉素C，(D)米托蒽醌，和(E)吡罗蒽醌，均为抗癌抗生素。
试验四、按照试验一所述方法比较亚硝脲类抗癌药物及其增效剂对体外肿瘤细胞生长的抑制作用。结果见表4。
表4
注解(A)卡莫司汀，为亚硝脲类抗癌药物；(B)4H-过氧环磷酰胺，为双氯乙胺类烷化剂；(C)表阿霉素，(D)米托蒽醌，和(E)吡罗蒽醌，均为抗癌抗生素。
试验五、按照试验一所述方法比较亚硝脲类抗癌药物及其增效剂对体外肿瘤细胞生长的抑制作用。结果见表5。
表5
注解(A)SarCNU，为亚硝脲类抗癌药物；(B)来曲唑，为双氯乙胺类烷化剂；(C)表阿霉素，(D)米托蒽醌，和(E)吡罗蒽醌，均为抗癌抗生素。
在试验1到5中，选用了尼莫司汀(ACNU)、卡莫司汀(BCNU)、司莫司汀(CCNU)和萨莫司汀(SarCNU)等为代表的亚硝脲类抗癌药物；环磷酰胺、4H-过氧环磷酰胺、美法仑和来曲唑等双氯乙胺类烷化剂；他莫昔芬和抗癌甾烯酚等激素类抗癌药；和阿霉素、表柔比星、吡柔比星、丝裂霉素C、表阿霉素、米托蒽醌、吡罗蒽醌等为代表的抗癌抗生素。用CNS-1、C6、胃腺上皮癌(SA)、骨肿瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲状腺乳头状腺癌(PAT)、肝癌等细胞检验其对肿瘤生长的抑制作用。结果表明，所用的抗癌药物在5-10ul/ml浓度时对体外培养肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，但二者合用时具有明显的增效作用。
试验六、比较亚硝脲类抗癌药物及其增效剂对体内肿瘤细胞生长的抑制作用。
以大白鼠为试验对象，将2×105个肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其随机分为以下10组(见表6)。所有药物均经瘤内放置，剂量为5mg/kg。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表6)。
表6
注解(A)卡莫司汀，为亚硝脲类抗癌药物；(B)美法仑，为双氯乙胺类烷化剂；(C)阿霉素和(D)表阿霉素均为抗癌抗生素；和(E)他莫昔芬，为激素类抗癌药。
试验七、不同类抗癌药物组合对体内肿瘤细胞生长的抑制作用。
表1
注TMZ替莫唑胺，属四嗪类药物；O6-BGO6-苄基鸟嘌呤，O6-bGO6-丁基鸟嘌呤，O6-MGO6-甲基鸟嘌呤(O6-MG)、O6-AGO6-烷基鸟嘌呤，均属鸟嘌呤衍生物。
试验二、四嗪类药物及鸟嘌呤衍生物的体外抑瘤作用。
用试验一中所用的肿瘤细胞，将以下四嗪类药物及鸟嘌呤衍生物按10ug/ml浓度加到体外培养24小时的各种肿瘤细胞中，继续培养48小时后计数细胞总数。其肿瘤生长抑制效果见表2所示。
表2
注MTZ米托唑胺，属四嗪类药物；O6-BGO6-苄基鸟嘌呤，O6-bGO6-丁基鸟嘌呤，O6-MGO6-甲基鸟嘌呤、O6-AGO6-烷基鸟嘌呤，均属鸟嘌呤衍生物。
试验三、四嗪类药物及鸟嘌呤衍生物的体外抑瘤作用。
用试验一中所用的肿瘤细胞，将以下四嗪类药物及鸟嘌呤衍生物按10ug/ml浓度加到体外培养24小时的各种肿瘤细胞中，继续培养48小时后计数细胞总数。其肿瘤生长抑制效果见表3所示。
表3
本发明抗癌体内植入剂的制备方法如下1.将称重的药用辅料放入容器中，加一定量的有机溶剂溶解均匀，有机溶剂的量不严格限定，以充分溶解为宜。
2.加入称重之抗癌有效成份重新摇匀。抗癌有效成份与药用辅料的用量比例因具体要求而定。
3.去除有机溶剂。真空干燥或低温干燥法均可。
4.将干燥后的固体组合物根据需要制成各种形状。
5.分装后射线灭菌(射线剂量因体积而异)备用。也可用其它方法灭菌。

实施例一将称重(80mg)的药用辅料(分子量为10000的聚乳酸(PLA))放入容器中，加一定量的有机溶剂溶解混匀(以充分溶解为准)后，加入10毫克卡莫司汀和10mg美法仑，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到抗癌体内植入剂含10％卡莫司汀和10％美法仑。以上为重量百分比。
实施例二如实施例一所述，所不同的是抗癌有效成分为a)5-25％的阿雌莫司汀、链佐星、阿莫司汀、氨莫司汀、尼莫司汀、苯达莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、卡莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀、雷莫司汀、萨莫司汀、泼尼莫司汀、乌拉莫司汀、牛磺莫司汀、他莫司汀或螺莫司汀与5-25％瘤可宁、环磷酰胺、异环磷酰胺、美法仑、4H-过氧环磷酰胺、甲氧芳芥、六甲嘧胺、来曲唑、斑蝥素、去甲斑蝥素或阿扎替派的组合；或b)5-25％的阿雌莫司汀、链佐星、阿莫司汀、氨莫司汀、尼莫司汀、苯达莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、卡莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀、雷莫司汀、萨莫司汀、泼尼莫司汀、乌拉莫司汀、牛磺莫司汀、他莫司汀或螺莫司汀与5-25％的博来霉素、道诺霉素、阿霉素、表柔比星、吡柔比星、丝裂霉素C、放线菌素D、洛索蒽醌、米托蒽醌、吡罗蒽醌、替洛蒽醌或氯佐星的组合；或c)5-25％的阿雌莫司汀、链佐星、阿莫司汀、氨莫司汀、尼莫司汀、苯达莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、卡莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀、雷莫司汀、萨莫司汀、泼尼莫司汀、乌拉莫司汀、牛磺莫司汀、他莫司汀或螺莫司汀与5-25％的阿那曲唑、抗癌甾烯酚、他莫昔芬、氟他米特、比卡鲁胺或氨鲁米特的组合。
以上均为重量百分比。
实施例三将称重85mg的药用辅料，分子量为15000的聚乳酸(PLGA)放入容器中，加一定量的有机溶剂溶解混匀，以充分溶解为准，然后，加入10mg尼莫司汀和5mg阿霉素，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到抗癌体内植入剂含10％尼莫司汀和5％阿霉素。均为重量百分比。
实施例四如实施例三所述，所不同的是，所不同的是所含之抗癌有效成分为a)5-25％的尼莫司汀、卡莫司汀、萨莫司汀、链佐星或司莫司汀与5-25％美法仑、瘤可宁、环磷酰胺、异环磷酰胺或4H-过氧环磷酰胺的组合；或b)5-25％的尼莫司汀、卡莫司汀、萨莫司汀、链佐星或司莫司汀与5-25％的阿霉素、表柔比星、吡柔比星、丝裂霉素C、洛索蒽醌、米托蒽醌、吡罗蒽醌或替洛蒽醌的组合；或c)5-25％的尼莫司汀、卡莫司汀、萨莫司汀、链佐星或司莫司汀与5-25％的阿那曲唑、抗癌甾烯酚或他莫昔芬的组合。
以上均为重量百分比。
实施例五将80mg的药用辅料分子量为15000的EVAc放入容器中，加有机溶剂溶解混匀，以充分溶解为准，然后加入10mg卡莫司汀和10毫克他莫昔芬，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到抗癌体内植入剂含10％卡莫司汀和10％他莫昔芬。均为重量百分比。
实施例六按实施例五所述方法制成抗癌体内植入剂，所不同的是抗癌有效成分为a)5-25％的尼莫司汀、卡莫司汀、萨莫司汀、链佐星或司莫司汀与5-25％美法仑、瘤可宁、环磷酰胺、异环磷酰胺或4H-过氧环磷酰胺的组合；或b)5-25％的尼莫司汀、卡莫司汀、萨莫司汀、链佐星或司莫司汀与5-25％的阿霉素、表柔比星、吡柔比星、丝裂霉素C、洛索蒽醌、米托蒽醌、吡罗蒽醌或替洛蒽醌的组合；或c)5-25％的尼莫司汀、卡莫司汀、萨莫司汀、链佐星或司莫司汀与5-25％的阿那曲唑、抗癌甾烯酚或他莫昔芬的组合。
以上均为重量百分比。
实施例七将80mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)为20∶80)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混匀后，加入15mg卡莫司汀和5mg米托蒽醌，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得含重量百分比15％卡莫司汀和5％米托蒽醌体内植入剂。该体内植入剂在体外生理盐水中的释药时间为15-25天，在小鼠皮下的释药时间为25-40天。均为重量百分比。
实施例八如实施例七所述，但所不同的是抗癌有效成分为a)5-25％的尼莫司汀、卡莫司汀、萨莫司汀、链佐星或司莫司汀与5-25％美法仑、瘤可宁、环磷酰胺、异环磷酰胺或4H-过氧环磷酰胺的组合；或b)5-25％的尼莫司汀、卡莫司汀、萨莫司汀、链佐星或司莫司汀与5-25％的阿霉素、表柔比星、吡柔比星、丝裂霉素C、洛索蒽醌、米托蒽醌、吡罗蒽醌或替洛蒽醌的组合；或c)5-25％的尼莫司汀、卡莫司汀、萨莫司汀、链佐星或司莫司汀与5-25％的阿那曲唑、抗癌甾烯酚或他莫昔芬的组合。
以上均为重量百分比。
实施例九将80mg的药用辅料分子量为10000的EVAc放入容器中，加的有机溶剂溶解混匀，以充分溶解为准，然后加入10mg尼莫司汀和10毫克他莫昔芬，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到抗癌体内植入剂含10％尼莫司汀和10％他莫昔芬。均为重量百分比。
实施例十如实施例九所述，但所不同的是抗癌有效成分为a)5-25％的尼莫司汀、卡莫司汀、萨莫司汀、链佐星或司莫司汀与5-25％美法仑、瘤可宁、环磷酰胺、异环磷酰胺或4H-过氧环磷酰胺的组合；或b)5-25％的尼莫司汀、卡莫司汀、萨莫司汀、链佐星或司莫司汀与5-25％的阿霉素、表柔比星、吡柔比星、丝裂霉素C、洛索蒽醌、米托蒽醌、吡罗蒽醌或替洛蒽醌的组合；或c)5-25％的尼莫司汀、卡莫司汀、萨莫司汀、链佐星或司莫司汀与5-25％的阿那曲唑、抗癌甾烯酚或他莫昔芬的组合。
以上均为重量百分比。
实施例十一将称重70mg的药用辅料分子量为20000的聚乳酸(PLGA)放入容器中，加有机溶剂溶解混匀，以充分溶解为准，然后加入15mg卡莫司汀和15毫克他莫昔芬，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得到抗癌体内植入剂含15％卡莫司汀和15％他莫昔芬。均为重量百分比。
实施例十二如实施例十一所述，所不同的是抗癌有效成分为(a)10％卡莫司汀和10％美法仑；或(b)10％卡莫司汀和10％阿霉素；或(c)10％卡莫司汀和10％表柔比星；或(d)10％卡莫司汀和10％吡柔比星；或(e)10％卡莫司汀和10％丝裂霉素C；或(f)10％卡莫司汀和10％米托蒽醌；或(g)10％卡莫司汀和10％他莫昔芬；或(h)10％卡莫司汀和10％吡柔比星的组合。
以上均为重量百分比。
实施例十三按实施例一到十三所述方法制成抗癌体内植入剂，所不同的是所用药用辅料选自下列之一或其组合a)分子量为5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乳酸(PLA)；
b)分子量为5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)；c)乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)；d)聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)共聚物)，对羧苯基丙烷(p-CPP)与葵二酸(SA)的重量百分比为10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；e)木糖醇、低聚糖、甲壳素、钾盐、钠盐、透明质酸、胶原蛋白、明胶或白蛋白。
实施例十四不同实施例药物体外释放特性比较。
将实施例十二中的抗癌体内植入剂放在室温生理盐水中浸泡，测不同时间药物(尼莫司汀)的释放量，并计算累计释放百分数(％)。见表9所示。
表9
实施例十五不同实施例药物体内释放特性比较。
将实施例十二中的抗癌体内植入剂放于小白鼠皮下，定时取出测定药物含量，根据剩余药物量，并计算累计释放百分数(％)。见表10所示。
表10
由表9可以看出，所试不同药物体外释放无明显差异，第一天释放20％左右，第14天释放85-90。
由10上表可以看出，所试不同药物体内释放也无明显差异，第一天释放10％左右，第28天释放95％以上。但体内外释放却有明显差异，体外释放较体内释放为快。在体内可维持一个月，而体外则15天左右。
如上所述，抗癌体内植入剂可用现有的方法制成各种剂型，因此，以上实施例仅用于说明，而并非局限本发明的应用。


一种抗癌体内植入剂，属于抗癌药物技术领域。由药用辅料以及包于其中的抗癌药物组成。其中抗癌有效成分为亚硝脲类抗癌药物和抗癌增效剂。抗癌增效剂为双氯乙胺类烷化剂和/或抗癌抗生素和/或激素类抗癌药。以上组合可更有效地抑制肿瘤细胞内的生长，并能降低肿瘤细胞对抗癌药物的耐受性，而药用辅料主要为生物可容性可降解吸收的高分子多聚物，在其降解吸收的过程中能将抗癌药物缓慢释放于肿瘤局部，因此在明显降低其全身毒性反应的同时还可于肿瘤局部维持有效药物浓度。肿瘤局部放置该抗癌体内植入剂不仅能够降低抗癌药物的全身毒性反应，同时还能选择性地提高肿瘤局部的药物浓度，增强化疗药物及放射治疗等非手术疗法的治疗效果。