专利名称：一种研究黄芩组织培养快速繁殖的方法黄芩具有清热泻火、消炎镇痛等药理作用，在临床上疗效确切，作为常用的药材品种，应用历史悠久，需求数量较大。目前，黄芩产业已经形成具有一定规模、结构较为完整的产业体系，特别是近年来呈现出快速增长态势，成为医药经济产业中重要的组成部分。近几年来，市场上对黄芩供不应求的矛盾日益突出，这是由于临床上对黄芩药材的需求量逐年上升，而现实是有限的黄芩野生资源遭到掠夺性挖掘后的日益匮乏，同时该植物繁殖速度慢，加之少有栽培，并且缺乏可行的组织培养技术对黄芩进行繁殖，尚未获得黄芩愈伤组织诱导的最佳外植体及培养基配方。
本发明提供了一种研究黄芩组织培养快速繁殖的方法，旨在解决目前黄芩的野生资源日益匮乏，繁殖速度慢，加之少有栽培，市场上供不应求的矛盾日益突出，并且缺乏可行的组织培养技术对黄芩进行繁殖，尚未获得黄芩愈伤组织诱导的最佳外植体及培养基配方的问题。本发明的目的在于提供一种研究黄芩组织培养快速繁殖的方法，所述方法包括以下步骤对黄芩的种子进行处理，获得接种外植体；对外植体进行消毒处理；对培养基配方进行筛选；对黄芩的愈伤组织进行诱导；筛选出最佳外植体和最佳激素组合。本发明提供的研究黄芩组织培养快速繁殖的方法，首先对黄芩的种子进行处理， 获得接种外植体，其次对外植体进行消毒处理，同时设计培养基配方，在无菌条件下对黄芩的愈伤组织进行诱导，筛选出最佳外植体和最佳激素组合，为利用组织培养技术对黄芩进行快速、大规模繁殖提供了可能，有效地解决了目前黄芩的野生资源日益匮乏，繁殖速度慢，市场供不应求等日益突出的矛盾，同时也解决尚未获得黄芩愈伤组织诱导的最佳外植体及培养基配方等问题，方法简单可行，操作性强，为建立黄芩组培再生体系奠定了基础。图1示出了本发明实施例提供的研究黄芩组织培养快速繁殖的方法的实现流程图；图2示出了本发明实施例提供的对外植体进行消毒处理的实现方法的流程图3示出了本发明实施例提供的对培养基配方进行筛选实现方法的流程图；图4示出了本发明实施例提供的对黄芩的愈伤组织进行诱导的实现方法的流程图。如图4所示，在本发明实施例中，对黄芩的愈伤组织进行诱导的实现方法为在步骤S401中，选取黄芩无菌外植体，即取根、茎、叶各部分，分别将茎和根切成 2cm左右长的小段，叶片切成0. 5cmX0. 5cm小块，并在上划上创伤口 ；在步骤S402中，将处理好的材料分别接种在6个不同配方的培养基上，每个配方的培养基接种根、茎、叶各15瓶，每瓶接种外植体约6 8个；在步骤S403中，诱导愈伤组织的条件为25°C培养箱中采用暗培养；在步骤S404中，暗培养30天后，统计各处理的愈伤组织诱导率。在本发明实施例中，诱导率的计算方法为诱导率％ =(形成愈伤组织外植体块数/种外植体块数)X 100在本发明实施例中，筛选最佳激素组合的浓度的实现方法为
将最适激素组合设置4个不同的浓度梯度进行试验；采用根、茎、叶中诱导率较高者做外植体，在以上4个不同浓度激素组合的培养基上接种；暗培养30天后，统计并计算黄芩愈伤组织诱导率。在本发明实施例中，4个不同的浓度梯度如下1)MS+NAA 0. 25mg/L+X 0. 25mg/L ；2)MS+NAA 0. 25mg/L+X 0. 5mg/L ；3)MS+NAA0. 5mg/L+X lmg/L ；4)MS+NAA 0. 25mg/L+X lmg/L ；其中X为 6_BA、KT、TDZ 中的一者。下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。本发明实施例提供的研究黄芩组织培养快速繁殖的方法，首先对黄芩的种子进行处理，获得接种外植体，其次对外植体进行消毒处理，同时设计培养基配方，在无菌条件下对黄芩的愈伤组织进行诱导，筛选出最佳外植体和最佳激素组合，为利用组织培养技术对黄芩进行快速、大规模繁殖提供了可能，有效地解决了目前黄芩的野生资源日益匮乏，繁殖速度慢，市场供不应求等日益突出的矛盾，同时也解决尚未获得黄芩愈伤组织诱导的最佳外植体及培养基配方等问题，方法简单可行，操作性强，为建立黄芩组培再生体系奠定了基石出。以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。


本发明属于植物组织培养领域，提供了一种研究黄芩组织培养快速繁殖的方法，首先对黄芩的种子进行处理，获得接种外植体，其次对外植体进行消毒处理，同时设计培养基配方，在无菌条件下对黄芩的愈伤组织进行诱导，筛选出最佳外植体和最佳激素组合，为利用组织培养技术对黄芩进行快速、大规模繁殖提供了可能，有效地解决了目前黄芩的野生资源日益匮乏，繁殖速度慢，市场供不应求等日益突出的矛盾，同时也解决尚未获得黄芩愈伤组织诱导的最佳外植体及培养基配方等问题，方法简单可行，操作性强，为建立黄芩组培再生体系奠定了基础。