专利名称：一种天然食品添加剂的制作方法食品添加剂是食品生产中具有创造力的因素，正是因为有了食品添加剂，才有了色香味俱全的食品，才满足了越来越挑剔的消费者的需求。在食品生产日益社会化和规模化的今天，食品添加剂对食品工业而言已不可缺少，“没有食品添加剂就没有现代食品工业”。目前，国际上使用的食品添加剂已达1万种以上，我国许可使用的有20多种类型、2000 多个品种，包括防腐剂、抗氧化剂、增稠剂、乳化剂、甜味剂、疏松剂、营养剂、着色剂等。食品添加剂是指为有效改善食品的品质质量和色、香、味，以及为延长食品的贮存期而加入食品中的化学合成物质或天然物质。随着食品工业的迅速发展，现在有些食品添加剂有了保健、营养的功能。比如含有对人体有益的维生素C、矿物质元素、微量元素、氨基酸等以及其他种类的食品添加剂，具有很好的保健、抗氧化、防腐等功能，极大地提高了食品的附加值和经济效益。随着人们饮食水平的不断提高和我国食品工业的迅速发展，食品添加剂正在逐步走进我们的生活，并被人们所了解和接受，特别是饮食结构由解决温饱转向追求保健营养的变化，使消费者更加关注自己的饮食卫生和健康。因此，关于食品添加剂的种种问题，也自然成了人们近年来在饮食方面普遍关注的热点。我国使用食品添加剂的历史悠久，人们一日三餐的主食和副食品几乎都在使用食品添加剂，人们在生活中拒绝食品添加剂是不现实也是不可能的。人们食用的食品品种越来越多，追求的色、香、味、形，感官质量以及保健价值也越来越高，随着食品进入人体的食品添加剂的数量和种类也越来越多，因此，食品添加剂的安全使用极为重要。食品添加剂按照其来源的不同可以分为天然食品添加剂和化学合成食品添加剂两大类。目前使用的大多属于化学合成食品添加剂。化学合成的食品添加剂在达到一定浓度或剂量水平时，会产生一定的毒副作用。食品添加剂的毒性除与物质本身的化学结构和理化性质有关外，还与其有效浓度、作用时间、接触途径和部位、物质的相互作用与机体的机能状态等条件有关。一段时间以来发生的一些食品安全事件都与合成的食品添加剂有着一定的联系。因此，在崇尚自然的今天，消费者将会不断追求纯天然的、食用安全、无毒副作用的的食品添加剂。食品在一定的环境条件下，因微生物的作用会使食品失去原有的营养价值、组织性状以及色、香、味，而转变成不符合卫生要求的食品。造成食品腐败变质的原因主要是微生物的繁殖引起的食品腐败变质；空气中氧的作用也会引起食品成分的氧化变质；食品内部所含各种酶等的作用，会促进食品的代谢，致使食品变质；昆虫的侵蚀繁殖和有害物质间接与直接污染，也能致使食品腐败。食品防腐剂能防止食品因微生物繁殖引起的腐败变质，使食品在一般的自然环境中具有一定的保存期。正确、合理地使用食品防腐剂，能有效地抑制微生物的生长，防止食品腐败，延长食品的保质期。所以，食品都必须使用适当的防腐技术。长期以来，人们为了保鲜和防止氧化，在食品行业一直使用合成抗氧化剂如BHTBHATBHQ和PG 等。近年来，人们对于这些人工合成抗氧化剂的安全性问题进行了广泛的研究，表明合成抗氧化剂具有诸多副作用，如对人体的肝、脾、肺均有不良影响，会诱发恶性肿瘤等。人们因对人工合成抗氧化剂存在不放心心理而转向研发高效、无毒、安全的天然抗氧化剂。因此，近年来从自然界寻求天然抗氧化剂的研究已引起各国科学家的高度重视。目前，世界各国开发了大量天然抗氧化剂产品，受到人们的普遍欢迎。目前已经研发或正在研发的天然抗氧化剂有多酚类、天然黄酮类、维生素类、蛋白质和酶类、类胡萝卜素、植酸、中草药提取物等几类物质。在“崇尚绿色、回归自然”的当今， 随着工业的迅速发展，人们安全意识的不断加强，天然抗氧化剂的使用会日趋普遍。随着天然抗氧化剂的品种增多以及生产成本的进一步减低，天然抗氧化剂将逐步替代合成抗氧化剂。随着科技的进步，微量元素硒对人类健康的作用也越来越被重视。国内外专家呼吁人们要象重视补碘一样重视补充有机硒制品。有机硒元素可广泛应用于生产富硒食品， 它对人类抗衰老、延年益寿，用于防治癌症、近视眼、白内障、心脑血管病、地方病等疾病都发挥了一定的作用。在食品和生产中，已广泛使用有机硒制品作为微量元素硒的补充剂。目前一些发达国家生产和应用硒等微量元素制剂已经达到相当的规模。有机硒制品的营养保健价值是同行业产品中难以替代的。现有的天然食品添加剂，仅具有抗氧化或防腐作用，很少有在具有很强的抗氧化及防腐杀菌作用的同时还具有很好的营养保健价值及一定的辅助治疗作用的天然食品添加剂的问世。
针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种食用安全、无毒副作用的天然食品添加剂的技术方案，其不仅具有很强的抗氧化及防腐杀菌作用，同时还具有很好的营养保健价值及一定的辅助治疗作用。所述的一种天然食品添加剂，其特征在于含有重量百分含量的以下物质黄秋葵提取物20-50%，瓯柑果皮提取物20 40%、茶多酚9 20% ；所述的黄秋葵提取物采用以下方法制备将黄秋葵嫩果实以横段面切片后晒干或风干，将晒干或风干的黄秋葵果实置于电机功率为800 1800 W的破碎提取器中，加入 30% 70%含水乙醇，启动开关，以6000-10000 r/min的转速破碎提取1 2次，将原料打碎成20 100目的粒度，若黄秋葵果实干物重量为1公斤则含水乙醇用量为8 12升，提取时间为1 4分钟，将提取液抽滤或甩滤，弃去滤渣，得到的提取液在50°C 80°C、真空度为0. 085 0. 095 Mpa条件下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩，调节待浓缩液的进液速度，以100 观0 mL · HiirT1的流量反复浓缩至原体积的1/6 1/10，将浓缩液进行喷雾干燥或进行真空干燥成干粉，得到黄秋葵提取物干粉；所述的瓯柑果皮提取物采用以下方法制备将瓯柑果实的鲜果皮进行低温烘干或自然风干，取干燥的瓯柑果皮置于电机功率为800 1800 W的破碎提取器中，加入50% 80% 含水乙醇，启动开关，以6000-10000 r/min的转速破碎提取1 3次，将原料打碎成20 100目的粒度，若瓯柑果皮干物重量为Ikg则含水乙醇用量为8 12升，提取时间为1 4分钟，将提取液抽滤或甩滤，弃去滤渣，得到的提取液在50°C 80°C、真空度为0. 085 0. 095 Mpa条件下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩，调节待浓缩液的进液速度，以 100 观0 mL · HIirT1的流量反复浓缩至原体积的1/6 1/10，将浓缩液进行真空干燥成干粉，得到瓯柑提取物干粉。所述的一种天然食品添加剂，其特征在于还含有总重量9 20%蜂花粉，9 20% 螺旋藻，0. 0003 0. 0005%硒酵母。所述的一种天然食品添加剂，其特征在于所述黄秋葵提取物的重量百分含量为 25-40%，优选30-35% ；所述瓯柑果皮提取物的重量百分含量为25_35%，优选30-3 ；所述茶多酚的重量百分含量为10 18%，优选12 15%。所述的一种天然食品添加剂，其特征在于所述黄秋葵提取物的制备方法中含水乙醇的浓度为40 65%，优选50 60% ；破碎提取时间为2 3分钟；提取液闪蒸温度为 55°C 70°C，优选 60°C 65°C。所述的一种天然食品添加剂，其特征在于所述瓯柑果皮提取物的制备方法中含水乙醇的浓度为55 70%，优选60 65% ；破碎提取时间为2 3分钟；提取液闪蒸温度为 55°C 70°C，优选 60°C 65°C。所述的一种天然食品添加剂，其特征在于所述蜂花粉的重量百分含量为10 18%，优选12 15% ；所述螺旋藻的重量百分含量为10 18%，优选12 15% ；所述硒酵母的重量百分含量为.00035 0. 0004%ο所述的破碎提取器可以从市场上直接购得，真空薄膜浓缩装置(闪蒸浓缩装置)为自行设计组装，也可从市场上直接购得。所述的黄秋葵提取物从黄秋葵嫩果实中提取，黄秋葵为锦葵科秋葵属一年生草本植物，黄秋葵嫩果实中含有黄酮、多糖、果胶、微量元素、氨基酸等多种功效成分，具有抗疲劳、增强人体耐力与机体的免疫力，保肝强肾，抗衰老、降低血糖、帮助消化、清火明目、健胃润肠等方面的作用，是一种优良的食疗保健蔬菜。所述的瓯柑果皮提取物从瓯柑果实的鲜果皮中提取，瓯柑为芸香科柑桔属植物， 营养价值极高。据报道，瓯柑果实及果皮中含有丰富的黄酮、维生素等，具有很好的抗氧化、 降压、耐缺氧和增加冠脉流量等作用。所述的茶多酚具有较强的抗脂质过氧化、抗衰老、清除自由基、降血脂及血胆固醇、抗菌消炎、抗病毒、增强机体免疫功能等作用。所述的蜂花粉主要成分为维生素类、生育酚、矿物质、氨基酸、活性酶。具有改善抗衰老、降血糖，抗疲劳、增强免疫功能、调解内分泌等方面的作用。所述的螺旋藻主要成分为维生素类、微量元素与氨基酸、蛋白质、Y -亚麻酸、 β -胡萝卜素等，具有抗癌、抗辐射，降血脂、降低胆固醇、提高机体免疫功能等作用。所述的硒酵母含有机元素硒。具有抗衰老、延年益寿的作用，用于防治肿瘤、肝病、近视眼、白内障、心脑血管疾病、地方性疾病等。上述黄秋葵嫩果实、瓯柑果实的鲜果皮、茶多酚、蜂花粉、螺旋藻、硒酵母这些原料均可从市场上直接购得。上述一种天然食品添加剂，以纯天然的黄秋葵提取物、瓯柑提取物、茶多酚、蜂胶、 螺旋藻和有机微量元素硒酵母为原料制成。该天然食品添加剂与现有食品添加剂比较，具有如下优点1、本发明中对黄秋葵果实及瓯柑果皮采用破碎提取，将破碎与提取过程同时完成。主要原理是将被提取的原料与一定浓度的含水乙醇置提取器内，利用高速旋转的特殊刀具将原料打碎成勻浆状，同时将植物组织中的成分快速转移至溶剂中，通过过滤即可得到提取液。该提取方法具有提取速度快、提取一次只需几分钟，且提取完全；不加热，有利于热敏性成分不受破坏；节省时间、溶剂和能源的特点。采用该方法提取能将黄秋葵果实及瓯柑果皮中的大部分黄酮、果胶、多糖、维生素等功效成分提取完全，经测定黄秋葵果实提取物的收率达观.6 % 34. 3 %，瓯柑果皮提取物的收率达20. 6 % 观.1 %，提高了功效成分的提取率。2、本发明中对黄秋葵果实及瓯柑果皮采用破碎提取，能避免功效成分及热敏性成分受热破坏，提取效率高、溶剂用量小；进行闪蒸浓缩受热时间短，效率高。3、本发明制备的食品添加剂具有很强的抗氧化、抗菌、防腐的作用，同时还具有抗衰老，抗疲劳、增强人体耐力与免疫力；保肝强肾，降血压、降血脂等辅助作用。该食品添加剂的保健营养价值高、安全、无毒，生产工艺简单，生产成本低，使用方便，易于长期贮存和运输，可用作功能性食品添加剂或保健食品添加剂。本申请文件中涉及的百分含量除另有说明外，均指重量百分含量。
所述的瓯柑果皮提取物采用以下方法制备将瓯柑果实的鲜果皮进行低温烘干或自然风干，取干燥的瓯柑果皮置于电机功率为840 W的破碎提取器中，加入65%含水乙醇，启动开关，以10000 r/min的转速破碎提取1次，将原料打碎成60目的粒度。若瓯柑果皮干物重量为1公斤则含水乙醇用量为10升，提取时间为4分钟，将提取液抽滤或甩滤，弃去滤渣， 得到的提取液在60°C条件下采用真空度为0. 095 Mpa条件下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩，调节待浓缩液的进液速度，以180 mL · HiirT1的流量反复浓缩至原体积的1/8， 将浓缩液进行真空干燥成干粉，得到瓯柑提取物干粉。实施例2 每100 g天然食品添加剂由黄秋葵提取物30 g、瓯柑果皮提取物30 g、 茶多酚12 g、蜂花粉12 g、硒酵母400 mg及余量螺旋藻组成，按照以上重量比混合均勻后得到的食品添加剂。黄秋葵提取物的制备方法中含水乙醇的浓度为30%，破碎提取器电机功率为840 W，转速为10000 r/min，破碎提取1次，原料打碎成的粒度为60目。若黄秋葵果实干物重量为1公斤则含水乙醇用量为12升，破碎提取时间为4分钟，提取液闪蒸浓缩温度为80°C，真空度为0. 090 Mpa,以220 mL · mirT1的流量反复浓缩至原体积的1/6。 瓯柑果皮提取物的制备方法中含水乙醇的浓度为50%，破碎提取器电机功率为840 W，转速为10000 r/min，破碎提取2次，原料打碎成的粒度为80目。若黄秋葵果实干物重量为1 公斤则含水乙醇用量为12升，破碎提取时间为3分钟，提取液闪蒸浓缩温度为80°C，真空度为0.095 Mpa，以250 mL · mirT1的流量反复浓缩至原体积的1/6。黄秋葵提取物和瓯柑果皮提取物的制备方法中其它同实施例1。实施例3 每100 g天然食品添加剂由黄秋葵提取物40 g、瓯柑果皮提取物20 g、 茶多酚20 g、蜂花粉10 g、硒酵母500 mg及余量螺旋藻组成，按照以上重量比混合均勻后得到的食品添加剂。黄秋葵提取物的制备方法中含水乙醇的浓度为40%，破碎提取器电机功率为1800 W，转速为6000 r/min，破碎提取2次，若黄秋葵果实干物重量为1公斤则含水乙醇用量为11升，破碎提取时间为2分钟，提取液闪蒸浓缩温度为70°C，真空度为0. 090 Mpa,以170 mL · mirT1的流量反复浓缩至原体积的1/7。瓯柑果皮提取物的制备方法中含水乙醇的浓度为60%，破碎提取器电机功率为1800 W，转速为6000 r/min，破碎提取2次， 原料打碎成的粒度为60目。若黄秋葵果实干物重量为1公斤则含水乙醇用量为11升，破碎提取时间为2分钟，提取液闪蒸浓缩温度为80°C，真空度为0.0955 Mpa，以210 mL · mirT1 的流量反复浓缩至原体积的1/7。黄秋葵提取物和瓯柑果皮提取物的制备方法中其它同实施例1。实施例4 每100 g天然食品添加剂由黄秋葵提取物45 g、瓯柑果皮提取物25 g、 茶多酚10 g、蜂花粉10 g、硒酵母350 mg及余量螺旋藻组成，按照以上重量比混合均勻后得到的食品添加剂。黄秋葵提取物的制备方法中含水乙醇的浓度为60%，破碎提取器电机功率为840 W，转速为10000 r/min，破碎提取1次，原料打碎成的粒度为40目。若黄秋葵果实干物重量为1公斤则含水乙醇用量为9升，破碎提取时间为3分钟，提取液闪蒸浓缩温度为60°C，真空度为0. 090 Mpa,以160 mL · mirT1的流量反复浓缩至原体积的1/9。瓯柑果皮提取物的制备方法中含水乙醇的浓度为70%，破碎提取器电机功率为840 W，转速为10000 r/min，破碎提取1次，原料打碎成的粒度为40目。若黄秋葵果实干物重量为1公斤则含水乙醇用量为9升，破碎提取时间为3分钟，提取液闪蒸浓缩温度为60°C，真空度为 0.090 Mpa，以210 mL · mirT1的流量反复浓缩至原体积的1/9。黄秋葵提取物和瓯柑果皮提取物的制备方法中其它同实施例1。实施例5:每100 g天然食品添加剂由黄秋葵提取物50g、瓯柑果皮提取物20 g、 茶多酚9 g、蜂花粉9 g、硒酵母450 mg及余量螺旋藻组成，按照以上重量比混合均勻后得到的食品添加剂。黄秋葵提取物的制备方法中含水乙醇的浓度为70%，破碎提取器电机功率为840 W，转速为10000 r/min，破碎提取3次，原料打碎成的粒度为80目若黄秋葵果实干物重量为1公斤则含水乙醇用量为8升，破碎提取时间为1分钟，提取液闪蒸浓缩温度为50°C，真空度为0.095 Mpa，以190 mL · mirT1的流量反复浓缩至原体积的1/10。瓯柑果皮提取物的制备方法中含水乙醇的浓度为80%，破碎提取器电机功率为840 W，转速为 10000 r/min，破碎提取3次，原料打碎成的粒度为80目。若黄秋葵果实干物重量为2公斤则含水乙醇用量为8升，破碎提取时间为1分钟，提取液闪蒸浓缩温度为50°C，真空度为0.085 Mpa，以MOO mL · mirT1的流量反复浓缩至原体积的提取液浓缩至原体积的1/10。 黄秋葵提取物和瓯柑果皮提取物的制备方法中其它同实施例1。上述实施例1-5中的提取时间是指累计破碎提取时间，即破碎提取器的电机需要工作一段时间后停止工作几十秒，电机得到休息后再工作，以免连续操作时间过长而影响电机寿命。为进一步说明本发明的保健功效及在食品领域中的作用，下面通过部分生物活性试验结果说明。1.抑菌活性试验
抑菌活性的测定采用琼脂扩散滤纸片法，根据抑菌环直径判断抑菌能力。滤纸片直径 6.0 mm，灭菌干燥后备用。每个样品做3次重复实验，数据采用SPSS1010进行分析，组间比较采用t检验。1)样品溶液的配制分别称取20 mg采用实施例1制备的食品添加剂，平行称取 3份，加蒸馏水定容至容量瓶中，制得质量浓度为2.0 mg · mL—1的水溶液，依次稀释为400、 300、200、150、100、50 Ug · mL—1的水溶液，并以消毒蒸馏水做空白对照。供细菌实验用的培养基为牛肉膏蛋白胨培养基，配方为0.5 g牛肉膏，1.0 g蛋白胨，0.5 g NaCl, 2 g琼脂，100 mL水。真菌实验用培养基为马铃薯葡萄糖培养基。配方为 2 g葡萄糖、2 g琼脂、100 mL 20%马铃薯浸汁。2)菌种的活化与材料的灭菌处理将实验所用培养基及试验器材置120°C干燥箱中干热高压灭菌2 h;培养基及装好蒸馏水的试管置高压蒸汽灭菌锅中，湿热灭菌2 h备用。将所有供试的菌种分别接入2支营养琼脂斜面培养基活化，30°C培养M h。3)供试菌株悬液与含菌平板的制备取盛有10 mL无菌水的试管排放在试管架上，将预先进行过斜面活化的菌种各挑取2环，分别溶解于无菌水试管中，制成菌悬液，然后，稀释菌液，使其含菌体为IO7 IO8 cfu ·1、即得供试菌株悬液。再将融化的灭菌培养基倾入无菌培养皿中待凝固后滴入0. 1 mL菌悬液，用无菌涂布环将菌悬液涂布均勻即成含菌平板，待用。4)抑菌实验及抑菌圈的测定抑菌圈测量是微生物分析的经典方法。它是利用抑菌物质在涂布特定试验菌的琼脂培养基内成球形立体状扩散，抑制试验菌的繁殖，在抑菌物质的周围形成的透明圈。将无菌小滤纸片高温蒸汽灭菌干燥后备用。用无菌移液管吸取 0. 1 ml各种菌悬液加入无菌培养皿中，用镊子夹取浸透样品溶液的滤纸片，将其放在培养基表面。将放好滤纸片的含菌培养皿分别在恒温箱中培养(细菌37°C、24 h,真菌^°C、72 h)，到时取出，测量并记录形成的抑菌环的直径。每组实验重复3次，实验结果取平均值，结果见表1。5)最小抑菌浓度(MIC)测定结果MIC的测定采用二倍稀释法。将400、300、200、 150,100,50 yg · mL—1系列浓度的样品溶液分别用移液管移入各个平皿内，每个浓度重复 3个皿，倒入已经高温灭菌的培养基中充分混勻，冷却凝固后，每皿中加入菌悬液，用无菌涂布器涂布均勻进行培养。取出，观察结果，以不长菌的溶液浓度做为最低抑菌浓度MIC，结果见表1。该试验结果表明样品的水溶液对供试菌种金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及黄曲霉菌均具有较强的抑制作用，且随浓度的增加抑菌效果增强。样品对金黄色葡萄球菌的抑制作用明显大于大肠杆菌和黄曲霉菌。实施例1制备的食品添加剂具有较强的抑菌活性。以实施例2-5进行同样的试验，也能达到基本相同的有益效果。2.抗氧化活性试验 1)仪器与试剂
Infinite M 200酶标仪(瑞士 Tecan) ；UV-2102 PCS紫外可见分光光度计(上海尤尼柯仪器有限公司)；1，1-二苯基-2-苦胼基自由基(DPPH，sigma公司)。2)样品溶液的制备
分别精确称取通过实施例1制备的食品添加剂样品粉末120. 5 mg，于100 mL量瓶中， 用60 %乙醇定容，超声溶解。样品溶液置于4°C冰箱中保存待用。3) DPPH自由基清除能力测定原理
DPPH法是自由基清除能力检测的常用方法之一，可用于各种天然植物提取物抗氧化活性的评价。DPPH · (1，l-Diphenyl-2 -picryl-hydrazyl)在有机溶剂中是一种稳定的自由基，其结构中含有3个苯环，1个氮原子上有1个孤对电子，呈紫色，在517 nm有强吸收。 当存在自由基清除剂时，由于清除剂与DPPH单电子配对而使其吸收减小，其吸光度的变化与其所接受的电子数成定量关系，因而可用分光光度法进行定量分析。样品测定过程中用 Trolox作阳性对照，并以此换算出被测样品总的抗氧化能力，测定结果表示为达到一定浓度测试物质相当的抗氧化能力所需要的Trolox浓度。称该方法为TEAC法。TEAC值表示为达到半数清除率时被测样品相当于Trolox的含量。TEAC值越大，表明清除自由基能力越强。IC5tl值是一个经常用于评价抗氧化能力的参数，它是指抗氧化剂清除50%的DPPH自由基时所需的浓度。其值越小，表示达到50%清除率时，所用的自由基清除剂的浓度剂量越小，其对自由基的清除效果也就越好，对应的参试样品抗氧化活性越强。4)测定方法准确称取一定量DPPH试剂，用95%乙醇溶解，并定量转入100 mL


一种天然食品添加剂，属于食品添加剂技术领域。含有重量百分含量的以下物质黄秋葵提取物20-50%，瓯柑果皮提取物20～40%、茶多酚9～20%；还含有总重量9～20%蜂花粉，9～20%螺旋藻，0.0003～0.0005%硒酵母。该天然食品添加剂食用安全、无毒副作用，不仅具有很强的抗氧化及防腐杀菌作用，同时还具有很好的营养保健价值及一定的辅助治疗作用。且生产工艺简单、生产成本低，使用方便、易于长期贮存和运输，可用作功能性食品添加剂或保健食品添加剂。